高考生物复习基础知识巩固+考点互动探究+考例考法直击+教师备用习题第11单元生物技术实践第34讲微生.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第,34,讲,PART 11,微生物培养,和利用,基础知识巩固,考点互动探究,考例考法直击,教师备用习题,第1页,第,34,讲微生物培养和利用,考试说明,1,微生物分离和培养,(,试验探究能力,),。,2,某种微生物数量测定,(,试验探究能力,),。,3,培养基对微生物选择作用,(,试验探究能力,),。,4,微生物在其它方面应用,(,试验探究能力,),。,第2页,一、微生物试验室培养,1,培养基,(1),概念：人们按照微生物对,_,不一样需求，配制出供其生长繁殖,_,。,(2),营养成份：水、,_,、无机盐四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对,_,、特殊营养物质以及,_,要求。,(3),类型,基础知识巩固,链接教材,2.,制作流程,2,无菌技术,(1),目标：取得,_,。,(2),关键：预防,_,入侵。,(3),无菌技术主要方法及适用对象,主要方法,适用对象,灭菌,_,接种环、接种针,干热灭菌,培养皿等玻璃器具,高压蒸汽灭菌,_,消毒,_,牛奶,化学消毒,_,_,无菌室,营养物质,营养基质,碳源,氮源,pH,氧气,固体,液体,纯净培养物,杂菌,灼烧灭菌,培养基,巴氏消毒,操作者双手,紫外线消毒,第3页,3,制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,(1),步骤：计算,_,溶化,_,倒平板。,2),倒平板过程,在火焰旁右手拿锥形瓶，左手,_,。,右手拿锥形瓶，使锥形瓶瓶口快速经过,_,。,左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，左手立刻盖上,_,。,待平板冷却凝固后，将平板,_,放置，使皿盖在下、皿底在上。,基础知识巩固,链接教材,4,纯化大肠杆菌,图,11341,(1),平板划线法,(,图中,_),：经过接种环在琼脂固体培养基表面,_,操作，将聚集菌种逐步稀释分散到培养基表面。,称量,灭菌,拔出棉塞,火焰,培养皿皿盖,倒过来,A,连续划线,第4页,基础知识巩固,链接教材,(2),稀释涂布平板法,(,图中,_),：将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不一样稀释度菌液分别涂布到,_,表面，进行培养。当稀释倍数足够高时，即可取得单个细菌形成,_,。,5,菌种保藏,(1),对于频繁使用菌种，能够采取,_,法。,(2),对于需要长久保留菌种，能够采取,_,法。,二、土壤中分解尿素细菌分离与计数,1,筛选菌株,(1),自然界中目标菌株筛选依据：依据它对,_,要求，到对应环境中去寻找。,(2),试验室中微生物筛选原理：人为提供有利于,_,生长条件,(,包含营养、温度、,pH,等,),，同时抑制或阻止其它微生物生长。,B,琼脂固体培养基,菌落,暂时保藏,甘油管藏,生存环境,目标菌株,第5页,基础知识巩固,链接教材,(3),选择培养基：允许特定种类微生物生长，同时,_,和,_,其它种类微生物生长培养基。,2,统计菌落数目,(1),惯用方法：,_,法。,(2),统计依据,当样品,_,足够高时，培养基表面生长一个菌落，起源于样品稀释液中一个,_,。经过统计平板上菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌。,(3),其它方法：还可利用,_,计数。,3,设置对照,设置对照主要目标是排除试验组中,_,对试验结果影响，提升试验结果,_,，比如为了排除培养基被杂菌污染可能性，需以,_,培养基培养作为空白对照。,抑制,阻止,稀释涂布平板,稀释度,活菌,显微镜直接,非测试原因,可信度,未接种,第6页,项目,内容,试验原理,(1)能合成_细菌才能分解尿素,(2)配制以_为唯一氮源培养基，能够生长细菌就是能分解尿素细菌,试验流程,土壤取样,(,富含,_),配制土壤溶液和制备培养基,_,涂布平板与培养,菌落,_,判定,(1)方法：在以尿素为唯一氮源培养基中加入_指示剂培养分解尿素细菌,(2)原理：细菌分解尿素反应中，细菌合成脲酶将尿素分解成了_，其会使培养基中_增强，pH升高,基础知识巩固,链接教材,4,试验设计,脲酶,尿素,有机质,系列稀释,计数,酚红,氨,碱性,第7页,2,纤维素分解菌筛选,(1),方法：,_,法。,(2),原理：,_,。,(3),培养基：以,_,为唯一碳源选择培养基。,基础知识巩固,链接教材,三、分解纤维素微生物分离,1,纤维素酶,(1),纤维素酶是一个复合酶普通认为它最少包含,_,、,_,和,_,三种组分。,(2),作用：纤维素,_,_,。,C,1,酶,C,X,酶,葡萄糖苷酶,纤维二糖,葡萄糖,刚果红染色,透明圈,红色复,合物,纤维素,第8页,基础知识巩固,链接教材,(4),试验流程,纤维素,选择培,养基,梯度稀释,判别纤维素分解菌,透明圈,第9页,考点一微生物分离与培养,考点互动探究,消毒和灭菌区分,条件,结果,消,毒,较为温和物理或化学方法,仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害微生物(不包含芽孢和孢子),灭,菌,强烈理化原因,杀死物体内外全部微生物，包含芽孢和孢子,2,两种纯化细菌方法比较,比较项目,平板划线法,稀释涂布平板法,图示,关键操作,接种环在固体平板培养基表面连续划线,一系列梯度稀释；涂布平板法操作,第10页,考点互动探究,比较项目,平板划线法,稀释涂布平板法,注意事项,每次划线前后均需灼烧接种环,稀释度要足够高，为确保试验成功能够增加稀释度范围,菌体获取,在含有显著菌落特征区域菌落中挑取菌体,从适宜稀释度平板上菌落中挑取菌体,比较项目,平板划线法,稀释涂布平板法,优点,能够依据菌落特点取得某种微生物单细胞菌落,既能够取得单细胞菌落，又能对微生物计数,缺点,不能对微生物计数,操作复杂，需要涂布多个平板,第11页,考点互动探究,3,平板划线操作,3,个易错点,(1),灼烧接种环之后，要冷却后再进行接种，以免温度太高杀死菌种。,(2),划线时最终一区域不要与第一区域相连。,(3),划线用力要大小适当，预防用力过大将培养基划破。,第12页,1,安徽名校联盟模拟,依据微生物分离和培养知识，回答以下问题：,(1),分离纯化大肠杆菌关键步骤是,_,，该步骤惯用方法有两种：,_,和,_,，其中一个方法是将菌液进行一系列,_,，然后将不一样稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面进行培养。,(2),在微生物试验室培养过程中，取得纯净培养物关键是,_,，所以需要对培养基和培养皿进行,_,处理，操作者双手需要进行清洁和,_,。,(3),分离分解尿素细菌培养基中要以尿素为唯一,_(,填“碳源”或“氮源”,),。,考点互动探究,典例追踪,第13页,考点互动探究,答案,(1),接种平板划线法稀释涂布平板法梯度稀释,(2),预防外来杂菌入侵灭菌消毒,(3),氮源,解析,(1),分离纯化大肠杆菌关键步骤是接种，该步骤惯用方法有两种：平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不一样稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面进行培养。,(2),在微生物试验室培养过程中，取得纯净培养物关键是预防外来杂菌入侵，所以需要对培养基和培养皿进行灭菌处理，操作者双手需要进行清洁和消毒。,(3),分离分解尿素细菌培养基中要以尿素为唯一氮源。,第14页,2,河南商丘一中模拟,回答以下相关微生物相关问题：,(1),在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑,_,、,_,和渗透压等条件。因为该细菌含有体积小、结构简单、变异类型轻易选择、,_,、,_,等优点，所以常作为遗传学研究试验材料。,(2),在微生物培养操作过程中，为预防杂菌污染，空气中细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能,_,。,考点互动探究,典例追踪,(3),通常，对取得纯菌种还能够依据菌落形状、大小等菌落特征对细菌进行初步,_,。,(4),培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采取检测方法是,_,_,。,(5),若用大肠杆菌进行试验，使用过培养基及其培养物必须经过,_,处理后才能丢弃，以预防培养物扩散。,第15页,考点互动探究,解析,(1),大肠杆菌含有体积小、结构简单、变异类型轻易选择、易培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。,(2),紫外线能使蛋白质变性，还能损伤,DNA,结构。,(3),对取得纯菌种还能够依据菌落形状、大小等菌落特征对细菌进行初步判定。,(4),培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采取检测方法是将未接种培养基在适宜温度下放置适宜时间，观察培养基上是否有菌落产生。,(5),有大肠杆菌会释放一个强烈毒素，并可能造成肠道出现严重症状，使用过培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以预防培养物扩散。,答案,(1),温度,pH,易培养生活周期短,(2),损伤,DNA,结构,(3),判定,(,或分类,),(4),将未接种培养基在适宜温度下放置适宜时间，观察培养基上是否有菌落产生,(5),灭菌,第16页,考点二微生物筛选与计数,考点互动探究,选择培养基作用原理,(1),在培养基中加入某种化学物质，如加入青霉素能够分离出酵母菌和霉菌；加入高浓度食盐能够得到金黄色葡萄球菌。这里加入是在满足基本所需培养成份基础上加入。,(2),改变培养基中营养成份，如缺乏氮源时能够分离出固氮微生物；以石油作为唯一碳源时，能够分离出能消除石油污染微生物。,(3),改变微生物培养条件，如将培养基放在高温环境中培养能够得到耐高温微生物。,(4),经过一些特殊环境分离微生物，如在高盐环境中可分离耐盐菌；在高温环境中可分离得到耐高温微生物。,第17页,考点互动探究,选择培养基与判别培养基比较,种类,制备方法,原理,用途,举例,选择培,养基,培养基中加入一些化学物质,依据一些微生物对一些物质或环境条件癖好、抗性而设计,从众多微生物中分离所需微生物,加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌,判别培,养基,培养基中加入某种指示剂或化学药品,依据微生物产生某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生显著特征改变而设计,判别不一样种类微生物,伊红美蓝培养基能够判别大肠杆菌,第18页,考点互动探究,3,两种计数方法比较,比较,项目,间接计数法,(,稀释涂布平板法,),直接计数法,(,显微计数法,),原理,当样品稀释度足够高时，培养基表面生长一个菌落，起源于样品稀释液中一个活菌，经过统计平板上菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌,利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积样品中微生物数量,公式,每克样品中菌落数：(CV)M。C：某稀释度下平板上生长平均菌落数；V：涂布平板时所用稀释液体积(mL)；M：稀释倍数,每毫升原液所含细菌数：每小格平均细菌数,40010 000,稀释倍数,缺点,当两个或多个菌体连在一起时，平板上观察到只是一个菌落,不能区分细胞死活,结果,比实际值偏小,比实际值偏大,第19页,1,江西赣州一模,某试验小组欲从豆油污染土壤中筛选出能高效降解脂肪菌株。请回答：,(1),在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以,_,为唯一碳源固体培养基上，从功效上讲，该培养基属于,_,培养基。,(2),为防止培养皿污染，需将培养皿呈,_,状态放置。为防止培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行,_,处理。,(3),为了筛选出菌株，可将适量,_,试剂滴加在平板中菌落周围，洗去浮色后，假如菌落周围现象是,_,，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。,(4),纯化菌种时，为了得到单菌落，可采取,_,法将菌种接种于新培养基平板上。,考点互动探究,典例追踪,第20页,考点互动探究,解析,(1),欲筛选出能降解豆油菌株，培养基中应只含有豆油而无其它碳源，不能降解豆油细菌在此培养基上不能生存；从功效上讲，这类培养基属于选择培养基。,(2),为防止培养皿污染，需将培养皿呈倒置状态放置；为防止培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行梯度稀释处理。,(3),因为脂肪遇苏丹,试剂会出现红色，所认为了筛选出目标菌株，可将适量苏丹,试剂滴加在平板中菌落周围，洗去浮色后，假如菌落周围现象是出现透明圈、不出现红色圈，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。,(4),分离纯化菌种时，需采取接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，使聚集在一起细菌细胞分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落，方便纯化菌种。,答案,(1),豆油选择,(2),倒置梯度稀释,(3),苏丹,出现透明圈、不出现红色圈,(4),平板划线,第21页,2,辽宁辽南协作体二模,为了调查某城市自来水水质情况，某研究小组测定了自来水水样中细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答以下问题：,(1),该小组采取稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。涂布平板所用培养基是,_(,填“固体”或“液体”,),培养基；该培养基制备过程是,_,。对培养基灭菌方法是,_,法。在涂布接种前，随机取若干灭菌后空白培养基培养了一段时间，若空白培养基出现了菌落。请分析说明原因,(,写出两个,),：,_,；,_,。,考点互动探究,典例追踪,(2),培养基灭菌后，将,1 mL,水样稀释,1000,倍，在,3,个平板上用涂布法分别接入,0.1 mL,稀释液；经适当培养后，,3,个平板上菌落数分别为,51,、,50,和,49,。据此可得出每升水样中活菌数为,_,个。,(3),该小组采取平板划线法分离水样中细菌。操作时，第二次及以后每次划线之前都要灼烧接种环，目标是,_,菌种，使下次划线菌种直接起源于,_,。,第22页,考点互动探究,解析,(1),涂布平板所用培养基是固体培养基；该培养基制备过程是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。对培养基灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。在涂布接种前，随机取若干灭菌后空白培养基培养了一段时间，若空白培养基出现了菌落，其可能原因是培养基灭菌不合格；倒平板过程被污染,(,或培养皿灭菌不合格,),。,(2),培养基灭菌后，将,1 mL,水样稀释,1000,倍，在,3,个平板上用涂布法分别接入,0.1 mL,稀释液；经适当培养后，,3,个平板上菌落数分别为,51,、,50,和,49,。据此可得出每升水样,(1 L,1000 mL),中活菌数,1000101000,5.010,8,(,个,),。,(3),该小组采取平板划线法分离水样中细菌。操作时，第二次及以后每次划线之前都要灼烧接种环，目标是杀死上次划线后接种环上残留菌种，使下次划线菌种直接起源于上次划线末端。,答案,(1),固体计算、称量、溶化、灭菌、倒平板高压蒸汽灭菌培养基灭菌不合格倒平板过程被污染,(,或培养皿灭菌不合格,),(2)5.010,8,(3),杀死上次划线后接种环上残留上次划线末端,第23页,3,河南洛阳模拟,为从土壤中筛选能有效降解有机化合物,X,细菌，研究人员用化合物,X,、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制培养基，成功地筛选出能高效降解化合物,X,细菌,(,目标菌,),。图,11342,是从土壤中筛选出该细菌过程示意图，下表是分离纯化结果。请回答以下问题：,统计项目：透明圈直径,/,菌落直径,考点互动探究,典例追踪,图,11342,(1),培养基中有机化合物,X,主要为目标菌提供,_,等营养要素。从土壤中富集能有效降解有机化合物,X,细菌时，应选取,_(,填“固体”或“液体”,),培养基。,菌落编号,1,2,3,48,小时,1.6,2.8,3.0,72,小时,2.2,1.2,5.0,96,小时,2.3,1.2,4.2,第24页,(2),配制成,10,1,浓度稀释液时，用无菌移液管从富集液上清液中吸收,1 mL,，移入盛有,_mL,无菌水试管中，并依次配制,10,2,10,10,梯度稀释液。,(3),在分离、纯化过程中，图中过程接种方法分别为,_,。在倒平板前，应对玻璃器皿和培养基灭菌，灭菌方法是,_,。,(4),分析菌种分离纯化结果，应选择为,_,号菌落进行扩大生产，原因是,_,。,(5),试验过程中还需配制空白培养基作为对照，其目标是,_,_,。,考点互动探究,典例追踪,第25页,考点互动探究,解析,(1),微生物生长需要水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，化合物,X,为目标菌提供碳源和氮源等营养要素；从土壤中富集能有效降解有机化合物,X,细菌时，应选取液体培养基。,(2),配制成,10,1,浓度稀释液时，用无菌移液管从富集液上清液中吸收,1 mL,，移入盛有,9 mL,无菌水试管中。,(3),据图分析，菌落均匀是稀释涂布平板法接种，平板上有显著划痕是平板划线法接种；对玻璃器皿和培养基灭菌需要使用高压蒸汽灭菌法灭菌。,(4),据表分析，,3,号菌落透明圈直径,/,菌落直径最大，菌种降解化合物,X,能力最强，所以应该使用,3,号菌落进行扩大生产。,(5),试验中将空白培养基进行培养目标是作为对照试验，以检验培养基和平板灭菌是否合格。,答案,(1),氮源、碳源液体,(2)9,(3),稀释涂布平板法、平板划线法高压蒸汽灭菌法,(4)3,透明圈直径,/,菌落直径越大，菌种降解化合物,X,能力越强,(5),检验培养基和平板灭菌是否合格,第26页,考点三微生物在其它方面应用,考点互动探究,分离纤维素分解菌所用两种培养基比较,分离纤维素分解菌试验中先用选择培养基，再用判别培养基。,(1),选择培养基为液体培养基，以纤维素作为碳源和能源微生物能够正常生长，而其它绝大多数微生物不能正常生长；因培养基中无凝固剂，为液体培养基，利用液体培养基能使营养成份被充分消耗，以增加纤维素分解菌浓度。,(2),判别培养基含琼脂，为固体培养基，细菌可在培养基上形成肉眼可见菌落。刚果红染色法应用就是判别培养基。,第27页,1,安徽六校教育研究会二模,现在大力提倡无纸化办公，不过每年依然不可防止地产生大量废纸，其主要成份是木质纤维，人类正努力将其转化为一个新资源,乙醇。图,11343,是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇基本工艺流程，请回答相关问题：,考点互动探究,典例追踪,图,11343,第28页,(1),自然界中步骤需要微生物大多分布在,_,环境中。将从土壤中取得微生物培养在以,_,为碳源，并加入,_,培养基上，筛选周围有,_,菌落。,(2),在如上所述筛选过程中取得了三个菌落，对它们分别培养，并完成步骤，且三种等量酶液中酶浓度相同，则你认为三种酶液活性,_(,填“一定相同”“不一定相同”或“一定不一样”,),，能够经过,_,进行定量测定。,(3),生产中能够满足步骤常见菌种是,_,，为了确保取得产物乙醇，步骤要注意,_,。,考点互动探究,典例追踪,第29页,考点互动探究,解析,(1),富含纤维素环境中纤维素分解菌较多，筛选纤维素分解菌时在纤维素作为唯一碳源选择培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其它微生物则不能生长；在培养基中加入刚果红，其可与培养基中纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心透明圈。,(2),三种酶液活性不一定相同原因是纤维素酶活性不一定相同，需要对其活性进行判定。,(3),满足步骤常见菌种是酵母菌，步骤表示无氧发酵，即发酵装置密闭,(,或确保无氧条件等,),。,答案,(1),富含纤维素纤维素刚果红透明圈,(2),不一定相同对纤维素酶分解纤维素后所产生葡萄糖,(3),酵母菌发酵装置密闭性,(,或确保无氧条件等,),第30页,2,江西南昌重点中学二模,科技工作者研究出利用秸秆生产燃料酒精技术，大致流程以下列图,(,以玉米秸秆为例,),。请回答：,图,11344,(1),玉米秸秆预处理后，应该选取特定酶进行水解，使之转化为发酵所需葡萄糖。从以下哪些微生物中能够提取到上述酶？,_,。,A,酿制果醋醋酸菌,B,生长在腐木上霉菌,C,制作酸奶乳酸菌,考点互动探究,典例追踪,D,生产味精谷氨酸棒状杆菌,(2),若要从土壤中分离生产这种酶微生物，培养基中碳源为,_,。,(3),某同学对这种微生物培养液进行数量测定，在稀释倍数为,10,5,对应培养基中测得平板上菌落数平均值为,23.4,，那么每毫升样品中菌落数是,(,涂布平板时所用稀释液体积为,0.2 mL)_,个。,(4),用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得菌落数量多，原因是,_,。,第31页,考点互动探究,解析,(1),生长在腐木上霉菌、生长在落叶堆中蘑菇及反刍动物瘤胃中生存一些微生物中含有纤维素酶。,(2)筛选目标微生物需要使用选择培养基，培养基中碳源为纤维素。,(3),依据题意可知，每毫升样品中菌落数是,23.410,5,0.2,1.1710,7,(,个,),。,(4),用稀释涂布平板法进行微生物计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到是一个菌落，所以实际活菌数量要比测得菌落数量多。,答案,(1)B,(2),纤维素,(3)1.1710,7,(4),当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到是一个菌落,第32页,考例考法直击,1,全国卷,空气中微生物在重力等作用下，能够一定程度地沉降。某研究小组欲用平板搜集教室空气中微生物，以了解教室内不一样高度空气中微生物分布情况。试验步骤以下：,配制培养基,(,成份：牛肉膏、蛋白胨、,NaCl,、,X,、,H,2,O);,制作无菌平板；,设置空白对照组和若干试验组，进行相关操作；,将各组平板置于,37,恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落平均数。,回答以下问题：,(1),该培养基中微生物所需氮起源于,_,。若要完成步骤，该培养基中成份,X,通常是,_,。,(2),步骤中，试验组操作是,_,_,。,(3),若在某次调查中，某一试验组平板上菌落平均数为,36,个,/,平板，而空白对照组一个平板上出现了,6,个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了,_,现象。若将,30(,即,36,6),个,/,平板作为本组菌落数平均值，该做法,_(,填“正确”或“不正确”,),。,第33页,考例考法直击,解析,本题考查微生物培养与计数，主要考查学生识记、了解与试验设计能力。,(1),培养基中牛肉膏和蛋白胨中都含有蛋白质，可作为氮源。用于计数培养基应为固体培养基，需加入琼脂等凝固剂。,(2),该试验目标是了解教室内不一样高度空气中微生物分布情况，所以需将灭菌后平板放置在教室不一样高度位置上，开盖暴露一段时间，然后再在恒温箱中培养。,(3),空白对照组应是无菌平板，所以应该无菌落出现，有菌落出现说明培养基被污染了，那么其它各试验组培养基也不合格，所以需要重新制作平板。,答案,(1),牛肉膏、蛋白胨琼脂,(2),将各试验组平板分别放置在教室不一样高度位置上，开盖暴露一段时间,(3),污染不正确,第34页,考例考法直击,2,全国卷,某同学用新鲜泡菜滤液为试验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生乳酸能溶解培养基中碳酸钙。回答以下问题：,(1),分离纯化乳酸菌时，首先需要用,_,对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释理由是,_,。,(2),推测在分离纯化所用培养基中加入碳酸钙作用有,_,和,_,。分离纯化时应挑选出,_,菌落作为候选菌。,(3),乳酸菌在,20,长久保留时，菌液中常需要加入一定量,_(,填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”,),。,第35页,考例考法直击,答案,(1),无菌水泡菜滤液中菌浓度高，直接培养极难分离得到单菌落,(2),判别乳酸菌中和产生乳酸,(,或酸,),含有透明圈,(3),甘油,解析,本题考查微生物培养及泡菜制作方面知识。,(1),分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释理由是在稀释度足够高菌液里，聚集在一起乳酸菌将被分散成单个细菌，从而能在培养基表面形成单菌落。,(2),在分离纯化所用培养基中加入碳酸钙作用有中和乳酸菌代谢过程中产生乳酸和利于乳酸菌识别与分离。分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈菌落作为候选菌。,(3),乳酸菌在,20,长久保留时，甘油可起到密封和隔绝空气作用。,第36页,考例考法直击,3,新课标全国卷,植物秸秆中纤维素可被一些微生物分解。回答以下问题：,(1),分解秸秆中纤维素微生物能分泌纤维素酶，该酶是由,3,种组分组成复合酶，其中葡萄糖苷酶可将,_,分解成,_,。,(2),在含纤维素培养基中加入刚果红,(CR),时，,CR,可与纤维素形成,_,色复合物。用含有,CR,该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌菌落为中心,_,。,(3),为从富含纤维素土壤中分离取得纤维素分解菌单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基,(,成份见下表,),：,注：“”表示有，“”表示无。,据表判断，培养基甲,_(,填“能”或“不能”,),用于分离和判别纤维素分解菌，原因是,_,；培养基乙,_(,填“能”或“不能”,),用于分离和判别纤维素分解菌，原因是,_,。,酵母膏,无机盐,淀粉,纤维素粉,琼脂,CR,溶液,水,培养基甲,培养基乙,第37页,考例考法直击,解析,(1),纤维素酶是一个复合酶，该酶是由,C,1,酶、,C,X,酶和葡萄糖苷酶,3,种组分组成，前两种酶可将纤维素分解为纤维二糖，葡萄糖苷酶可将纤维二糖分解为葡萄糖。,(2),刚果红可与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物便无法形成，出现以纤维素分解菌为中心透明圈。我们能够经过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。,(3),生物适应一定环境，环境对生物含有选择作用，只有在纤维素含量丰富环境中纤维素分解菌才会发挥作用。纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基。纤维素分解菌判别培养基属于固体培养基，要分离和判别纤维素分解菌，都需要以纤维素为主要碳源培养基，培养基乙不含有选择作用。,答案,(1),纤维二糖葡萄糖,(2),红透明圈,(3),不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维素，不会形成,CR,纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌,第38页,考例考法直击,4,新课标全国卷,为了调查某河流水质情况，某研究小组测定了该河流水样中细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答以下问题：,(1),该小组采取稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后空白平板先行培养了一段时间，这么做目标是,_,然后，将,1 mL,水样稀释,100,倍，在,3,个平板上用涂布法分别接入,0.1 mL,稀释液；经适当培养后，,3,个平板上菌落数分别为,39,、,38,和,37,。据此可得出每升水样中活菌数为,_,。,(2),该小组采取平板划线法分离水样中细菌。操作时，接种环经过,_,灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线末端开始划线。这么做目标是,_,。,(3),示意图,A,和,B,中，,_,表示是用稀释涂布平板法接种培养后得到结果。,第39页,考例考法直击,A,B,图,11345,(4),该小组将得到菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发觉：振荡培养细菌比静置培养细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提升培养液中,_,含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提升,_,利用率。,第40页,考例考法直击,解析,(1),为了确定培养基灭菌是否合格，微生物学试验普通会设置空白对照：随机取若干灭菌后不接种培养基在相同条件下培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成，若无菌落生成说明灭菌合格；利用平板菌落计数法计算公式估算水样中活菌数：,M(,稀释倍数,),100,3.810,7,/L,。,(2),接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后每次划线时，总是从上一次末端开始划线，这么做目标是经过划线次数增加，使每次划线时菌体数目逐步降低，方便得到单个菌落。,(3),由题图可知，,B,图菌落分布相对均匀，应为稀释涂布平板法接种结果。,(4),振荡培养能够增加液体培养基氧气含量，促进好氧型微生物生长，另外振荡培养还能够使菌体与培养液充分接触，提升营养物质利用率。,答案,(1),检测培养基平板灭菌是否合格,3.810,7,(2),灼烧将聚集菌体逐步稀释方便取得单个菌落,(3)B,(4),溶解氧营养物质,第41页,教师备用习题,1,高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大实用性。研究者从热泉嗜热菌样品中筛选了高效产生高温淀粉酶嗜热菌，其筛选过程如图所表示：,(1),进行过程目标是,_,，过程所使用接种方法是,_,法。,(2),从用途上来说，,号培养基属于,_,培养基，配制时仅以,_,作为唯一碳源；从物理状态上来说，,号培养基属于固体培养基，配制时应加入,_,作为凝固剂。,(3),、,号培养基配制和灭菌时，灭菌与调整,pH,先后次序是,_,。普通对配制培养基采取,_,法灭菌。,(4),培养一段时间后，应从,号培养基上挑出,_,菌落，接种到,号培养基上。,第42页,教师备用习题,答案,(1),稀释稀释涂布平板,(2),选择淀粉琼脂,(3),先调整,pH,，后灭菌高压蒸汽灭菌,(4),透明圈大,解析,(1),据图分析，过程称为稀释，过程是为了筛选单菌落，可用稀释涂布平板方法给,号培养基接种。,(2),号培养基按功效分称为选择培养基，配制培养基时需要以淀粉为唯一碳源；在液体培养基中添加琼脂能够配制成固体培养基，,号培养基属于固体培养基。,(3),培养基制作完成后要调整,pH,，再灭菌；培养基普通进行高压蒸汽灭菌。,(4),培养一段时间后，菌落周围会出现透明圈，透明圈越大说明菌落分解淀粉能力越强，所以应从,号培养基上挑出透明圈大菌落，接种到,号培养基上。,第43页,教师备用习题,2,有机农药苯磺隆是一个除草剂，长久使用会污染环境。研究发觉，苯磺隆能被土壤中一些微生物降解。分离降解苯磺隆菌株和探索其降解机制试验过程如图甲、乙所表示。,(1),微生物生长繁殖所需主要营养物质有碳源、水、,_,四类，该试验所用选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是,_2),纯化菌株时，通常使用划线工具是,_,。划线某个平板培养后，第一划线区域划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域及其它划线区域均无菌落，造成划线无菌落可能操作失误有,_,、,_,。,(3),为探究苯磺隆降解机制，将该菌种培养液过滤离心，取上清液作图乙所表示试验。该试验假设是,_,，该试验设计是否合理？,_,。为何？,_,。,第44页,教师备用习题,答案,(1),氮源和无机盐只有能利用苯磺隆微生物能正常生长和繁殖,(2),接种环接种环灼烧后未冷却划线未从第一区域末端开始,(3),目标菌株能分泌降解苯磺隆蛋白质不合理缺乏空白对照,解析,(1),微生物各种培养基配方普通都含有水、碳源、氮源和无机盐四类营养物质；选择培养基允许特定种类微生物生长，同时抑制或阻止其它种类微生物生长，因而培养基必须以苯磺隆为唯一碳源，只让目标菌株生存繁殖。,(2),纯化菌株时，通常使用划线工具是接种环,(,或接种针,),；接种环在平板内每一次划线前，都要先灼烧灭菌冷却后划线，而且要从上一次划线末端而非空白处划线，不冷却会烫死上次划线末端菌株，从空白处划线是不会有菌落生长。,(3),图乙上清液中加入蛋白酶溶液是用于水解上清液中某蛋白质，由此可判定试验假设是目标菌株经过分泌某种蛋白质来降解苯磺隆，不过尚需设置不加入蛋白酶对照组试验，不然没有说服力，因而试验设计不合理。,第45页,