2025年微生物实验题库.doc

01.革兰氏染色的关键操作环节是:
A.結晶紫染色。
B.碘液固定。
C.酒精脱色。
D.复染。
02.放线菌印片染色的关键操作是:
A.印片時不能移動。
B.染色。
C.染色後不能吸干。
D.A-C。
03.高氏培养基用来培养:
A.细菌。
B.真菌。
C.放线菌。
04.肉汤培养基用来培养:
A.酵母菌。
B.霉菌。
C.细菌。
05.無氮培养基用来培养:
A.自生固氮菌。
B.硅酸盐细菌。
C.根瘤菌。
D.A,B均可培养。
E.A,B,C均可培养。
06.在使用显微镜油镜時,為了提高辨别力,一般在镜頭和盖玻片之间滴加:
A.二甲苯。
B.水。
C.香柏油。
07.常用的消毒酒精浓度為:
A.75%。
B.50%。
C.90%。
08.用甲醛進行空气熏蒸消毒的用量是:
A.20ml/M3。
B.6ml/M3。
C.1ml/M3。
09．高压蒸汽灭菌的工艺条件是:
A.121℃/30min。.
B.115℃/30min。
C.130℃/30min。
10．巴氏消毒的工艺条件是:
A.62-63℃/30min。
B.71-72℃/15min。
C.A.B.均可。
11．半固体培养基的重要用途是:
A.检查细菌的运動性。
B.检查细菌的好氧性。
C.A.B.两项。
12．半固体培养基的琼脂加入量一般是:
A.1%。
B.0.5%。
C.0.1%。
13.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是:
A.排冷气彻底。
B.保温時间合适。
C.灭菌完後排气不能太快。
D.A-C。
14．目镜頭上的"K"字母表达:
A.广视野目镜。
B.惠更斯目镜。
C.赔偿目镜。
15.目镜頭上的"P"字母表达:
A.平場目镜。
B.广视野目镜。
C.平場赔偿目镜。
16.物镜頭上的"PL"字母表达:
A.正低相差物镜。
B.正高相差物镜。
C.负高相差物镜。
17.物镜頭上的"UVL"字母表达。
A.無荧光物镜。
B.摄影物镜。
C.相差物镜。
18．镜頭上標有"對C"字母的镜頭是:
A.相差调整望遠镜。
B.摄影目镜。
C.相差目镜。
19．"PA"表达:
A.馬铃薯培养基。
B.高氏培养基。
C.肉汤培养基。
20.無菌室空气灭菌常用措施是:
A.甲醛熏蒸。
B.紫外灯照射。
C.喷石炭酸。
D.A.B.并用。
21.干热灭菌的关键操作是:
A.灭菌物不能有水。
B.保温過程中不能開箱门。
C.降温不能太快。
22．霉菌水浸制片的关键操作是:
A.菌丝要分散。
B.菌丝首先要用50%的乙醇浸润。
C.盖盖玻片不能有气泡。
D.A-C。

23.用来染芽胞的染料一般是:
A.孔雀绿。
B結晶紫。
C.复紅。
D.番紅。
24．复紅法染鞭毛的关键操作是:
A.玻片洁净。
B.染料新鲜。
C.菌体活化合适。
D.A.B.C。
25.镀银法染鞭毛的关键操作是:
A.玻片洁净。
B.染料無沉淀。
C.加热合适。
D.菌体活化合适。
E.A-D。
26．進行简朴染色使用的染色液一般是:
A.复紅。
B.蕃紅。
C.結晶紫。
D.孔雀绿。
E.A-D均可。
27.物镜頭上的"APO"字母代表:
A.消色差物镜。
B.复消色差物镜。
C.半消色差物镜。
28．物镜頭上的"Ach"字母表达:
A.平場物镜。
B.超平場物镜。
C.消色差物镜。
29．物镜頭上的“NH”字母表达:
A.正相差物镜。
B.负相差物镜。
C.负高相差物镜。
30．物镜頭上的“0.17”表达:
A.规定的盖玻片厚度。
B.规定的载玻片厚度。
C.镜頭浸油的深度。
31．镜頭上標有“NK"字母的镜頭是:
A.摄影目镜。
B.荧光目镜。
C.相差目镜。
32．目镜頭上的“PK”字母表达:
A.平場目镜。
B.赔偿目镜。
C.平場赔偿目镜。

33．物镜頭上的"Splan"字母表达:
A.超平場物镜。
B.平場物镜。
C.消色差物镜。
34．物镜頭上的"SplanApo"表达:
A.超平場复消色差物镜。
B.超平場半消色差物镜。
C.超平場物镜。
35.物镜頭上的"Planapo"表达:
A.超平場物镜。
B.平場物镜。
C.平場复消色差物镜。
36．物镜頭上的"Plan"字母表达:
A.平場物镜。
B.消色差物镜。
C.超平場物镜。
37．目镜頭上的"W"字母表达:
A.广视野高眼點赔偿目镜。
B.高眼點目镜。
C.广视野目镜。
38．目镜頭上的"SWK"字母表达:
A.超广视野目镜。
B.高眼點赔偿目镜。
C.平場赔偿目镜。
39.目镜頭上的"WHK"字母表达:
A.超广视野目镜。
B.广视野高眼點目镜。
C.平場赔偿目镜。
40.物镜頭上的"錯.L"字母表达:
A.消色差物镜。
B.半消色差物镜。
C.复消色差物镜。

判断題
( √ )01.無菌吸管上端塞入棉花是為了過滤口中的有菌空气。
( × )02.無菌吸管上端塞入棉花的目的是為了防止菌液吸入口中。
( √ )03.稀释平板测数時,放线菌计数的原则是选择每皿中菌落数在30-300個之间的稀释度進行计数。
( √ )04．稀释平板测数時,细菌计数的原则是选择每皿中菌落数在30-300個之间的稀释度進行计数。
( × )05.稀释平板测数時,细菌,放线菌,真菌的计数原则是选择每皿中菌落数在30-300個的稀释度進行计数。
( √ )06．稀释平板测数時,真菌的计数原则是选择每皿中菌落数在10-100個的稀释度進行计数。
( × )07.稀释平板测数時,细菌、放线菌、真菌的计数原则是选择每皿中菌落数在10-100個的稀释度進行计数。
( √ )08.用混菌法测微生物活菌数時,每個平皿中的菌液加入量是1ml。
( √ )09.用涂抹法测微生物活菌数時,每個平皿中的菌液加入量是0.1ml。
( √ )10．用油镜镜检時应将聚光器升至最高。
( × )11．使用高倍镜時,可将聚光器升至最高。
( √ )12.為了满足微生物對微量元素的需要,配制培养基所用的水最佳使用自来水。
( √ )13.稀释测数用的無菌水一般是由自来水灭菌而成。
( × )14.观测根霉,青霉只需用低倍镜观测即可。
( × )15.试验室一般使用血球计数板测微生物的總菌数。
( × )16．浸油的油镜頭可用软的卫生紙擦净。
( × )17.為了节省時间,可直接在染色涂片上滴加香柏油後,直接用油镜观测。
( √ )18.使用油镜的對的操作环节是:
1.低倍镜观测。
2.高倍镜观测。
3.转出高倍镜頭,滴加香柏油後用油镜观测。
( √ )19.在擦拭显微镜镜頭時,应向一种方向擦拭。
( √ )20.显微镜镜頭的放大倍数越大,它的数值孔径值越大,其镜口角也越大。
( √ )21.稀释平板测数一般是采用拾倍稀释法。
( × )22稀释平板测数一般采用的是二倍稀释法。
( × )23.做稀释平板测数時,只需一支吸管從頭稀释到尾即可。
( √ )24.做稀释平板测数時,每做一种稀释度都必须更换一支無菌吸管。
( × )25.稀释平板测数時,無论是用混菌法,還是用涂抹法,每個平皿中的菌液加入量都是1ml。
( × )26.稀释平板测数時,無论是用混菌法,還是用涂抹法,每個平皿中的菌液加入量都是0.1ml。
( √ )27.试验室做固体培养基時,常加1.8%的琼脂作凝固剂,做半固体培养基時,琼脂加入量一般是0.5%。
( × )28.试验室做固体培养基,常加2%的琼脂作凝固剂,做半固体培养基時,琼脂加入量一般是1
( × )29.E.coli經革兰氏染色後,菌体呈紅色,它是革兰氏正反应细菌。
( × )30.在光學显微镜下,根霉的孢子囊是透明的。
( × )31.使用手提灭菌锅灭菌後,為了尽快排除锅内蒸汽,可直接打開排气阀排气。
( × )32.苏雲金杆菌的芽胞在菌体的中央。
( × )33.所有真菌菌落的表面干燥,呈绒毛状。
( × )34.所有放线菌菌落表面干燥,呈粉粒状。
( × )35.所有细菌菌落的表面都是光滑湿润状。(芽胞菌菌落表面粗糙。)。
( √ )36．镜台测微尺每小格的实际長度是10微米。
( × )37.目镜测微尺每小格的实际長度是10μm。
( × )38.镜台测微尺每小格的实际長度是10nm(纳米)。
( × )39.血球计数板两边的平台比计数区高0.1cm。
( √ )40.血球计数板两边的平台比计数区高0.1mm。
( √ )41.棉花塞塞入试管的長度应為棉塞全長的2/3。
( × )42.棉花塞塞入试管的長度应為棉塞全長的2/3。
( × )43.摆斜面的長度应不超過试管長度的2/3。
( √ )44.摆斜面的長度应不超過试管長度的1/2。
( √ )45.血球计数板计数区的面积是1mm2。
( × )46.用血球计数板计数時,任数5個大方格(80個小格)的菌数即可。
( √ )47.在使用细菌计数板计数時,為了防止计数偏大,计数区四面压线的菌只能数两边。
( √ )48.目镜测微尺每格的实际長度是未知的,需用長度已知的镜台测微尺校正。
( × )49.测微生物的细胞大小時,需要校正的是镜台测微尺每格的实际長度。
( √ )50.测微生物细胞大小時,需要校正的是目镜测微尺每格的实际長度。
( √ )51.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000mm3。
( × )52.血球计数板计数区共有400個小格,每小格的面积是1/400cm2。
( √ )53.用分装器将培养基分装试管時,应谨防培养基沾染试管口。
( × )54.琼脂的熔化温度是90℃以上,凝固温度是45℃如下。
( √ )55.琼脂的熔化温度是95℃以上,凝固温度是45℃如下。
( √ )56.玻璃器材洗净後在急需時可采用高压蒸汽灭菌,而不能用干热灭菌。
( √ )57.细菌计数板每小格的体积是1/0mm3。
( × )58.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000cm3。
( √ )59.無菌室用甲醛熏蒸消毒後可喷氨水以減少甲醛的刺激。

填空題
01.霉菌水浸片的制片程序是加一滴水于载玻片中央,用解剖针挑取菌丝少許,将菌丝用50%的酒精浸润,将菌丝用蒸馏水水洗,将菌丝放入载玻片水滴中并小心分散,盖上盖玻片。
02.放线菌印片染色的操作程序是印片,干燥,固定,复紅染色2-3分钟,水洗,晾干。
03.固体培养基常用洋菜(琼脂)作凝固剂,一般固体培养基的用量一般為1.5-2.0%_,半固体培养基的用量一般為0.5%__。
04.简朴染色的操作程序是涂片,干燥,固定,复紅染色1-2分钟,水洗,晾干。
05.使用手提式灭菌锅進行灭菌的操作程序是__锅内加水,灭菌物体装锅,對称上紧密封螺帽将锅密封上,加热升温,排尽锅内冷空气,升温至灭菌工艺条件(一般為98kpa),在工艺条件下保压计時(一般為30分钟),届時间後切断热源,降温,出锅。
06．试验室配制固体培养基的操作程序是照配方称取药物,将药物溶解在一定量的水中後加热煮沸,将琼脂按量称取後用水浸湿,将浸湿的琼脂加入煮沸的营养液中,待琼脂所有融化後调整pH值,补充损失的水分,分装培养基入不一样的容器中。
07.有荚膜的细菌用负染色法染色後,荚膜為無色,菌体為_紅色.
08.细菌經革兰氏染色後,革兰氏正反应菌呈__紫色,革兰氏负反应菌呈__紅色。
09.细菌經简朴染色後呈__所染染料的颜色_。
10.显微镜的光學系统由_反光镜,聚光镜,物镜,_和目镜构成。
11．显微镜的机械部分包括_镜座,镜臂,载物台,转换器,镜筒,推進器,粗動螺旋,微動螺旋聚光镜升降螺旋。等九部分构成。
12.高氏培养基一般用来培养_放线菌,其pH值為_7.5-8.0__。
13.PA培养基一般用来培养真菌__菌,其pH值為5-6_。
14牛肉膏、蛋白胨培养基一般用来培养_细菌,其pH值為_、7.0-7.2__。
15.無氮培养基一般用来培养自生固氮菌。其氮源来自_空气中的N2_。
16.干热灭菌的工艺条件是160-170℃/2h_。
17.使用显微镜低倍镜观测時,聚光器应當減少,使用显微镜高倍镜观测時,聚光器应當合适升高。
18.革兰氏染色的关键操作是酒精脱色_。
19.显微镜的倍数越大,焦深越小,调焦应當越小心_。
20.按培养基的形态,可将培养基分為液体_,固体_,半固体__三种类型。
21.配制常规培养基時一般用_自来_水。
22.热灭菌一般用来灭菌玻璃器材,培养基的灭菌一般用_高压蒸汽灭菌。
23.细菌稀释测数一般采用10倍__稀释法,稀释用试管無菌水為9__毫升。
24.配制培养基時常用_1molNaOH、和1molHCL调整pH值。
25.按培养基的特殊用途,可将培养基提成__选择培养基,加富培养基,鉴别培养基等。
26.选择培养基可用来分离培养我們所需的特殊微生物类群,例如我們要從土壤中分离纤维分解菌,可以运用_纤维素_作唯一碳源来筛选纤维分_解菌___；要分离产蛋白酶的微生物,可以运用酪蛋白,作唯一氮源分离_蛋白分解菌_。
27．革兰氏染色的操作程序是涂片,干燥,固定,結晶紫染色1分钟,水洗,碘液媒染1分钟,水洗,95%的乙醇脱色25秒,水洗,蕃紅复染3-5分钟,水洗,晾干__。
28.培养基是人工配制的适合不一样微生物生長繁殖或积累代謝产物的营养基质。按营养物质的不一样来源可分為_天然培养基,合成培养基,半合成培养基__三大类。
29.高倍镜頭的数值孔径一般為_0.65,,放大倍数為_40x__。
30.油镜頭的数值孔径一般為_1.25,放大倍数為_100x或90x__。
31.低倍镜頭的数值孔径一般是0.25__,放大倍数為_10x或8x__。
32.穿刺接种使用的接种工具為__接种针,斜面接种使用的接种工具為接种环__。
33.進行稀释测数使用的重要器材有__酒精灯,1ml無菌吸管,9ml试管装無菌水,9cm的無菌平板
34.用孔雀绿和复紅作细菌芽胞染色時,可使菌体呈紅色,使芽胞呈_绿色。
35.用曰光灯作光源時,一般用_平面反光镜,用自然光作光源時,一般用凹面__反光镜
36.無菌室杀菌一般采用紫外灯照射,和喷洒化學药剂(如酚)相結合的措施。
37.半固体培养基一般用来检查_细菌的运動性。
38.摆试管斜面的基本操作措施是将摆斜面用特制木条放在桌面上,将装有固体培养基的试管趁热放在特制木条上摆成斜面,斜面長度不得超過试管長度的1/2,将试管棉塞部分用灭菌报紙盖上,以防空气中微生物落到棉塞上引起污染。
39不能加热灭菌的液体培养基应采用滤法除菌,一般用的器皿有蔡氏细菌過滤滤和膜滤_。
40.藍细菌的培养可用膜滤_培养基。
41.分离酵母菌時為了克制细菌的生長,一般用_膜培养基。
42.從土壤中分离真菌時,一般在培养基中加入_孟加拉紅和_链霉素显_克制细菌的生長。
43.测微生物的大小使用的重要工具是微镜,镜台测微尺和_目镜测微尺。
44.测微生物的数量使用的重要工具是_显微镜和血球计数板_。
45.進行细菌的显微计数時使用的重要工具是显微镜和细菌计数板_。
46.一般光學显微镜测酵母菌的大小的操作程序是将镜台测微尺置载物台上,调焦找到台尺,在低倍镜下校正目镜测微尺每格的長,在高倍镜下校正目镜测微尺每格的長,去掉台尺换上待测样本片,在高倍镜下测出拾個酵母菌宽和長的格数,将校正值乘入,算出拾個酵母菌的平均宽和平均長,以平均宽x *平均長Y(μm)表达酵母菌的大小。
47.显微计数的操作程序是_将待测菌進行合适的稀释,将计数板置于载物台上,在低倍镜下找到计数区,将菌液加到计数区上,调焦看到菌体,按五點取样法计数五個大方格的菌数,计算每小格的含菌数,计算出單位体积(如每ml)中的含菌数。
48.荚膜染色法的操作程序是_涂片,風干,加复紅染色3-5分钟,水洗,晾干,加墨素涂抹,風干。
49.芽胞染色的操作程序是片,干燥,固定,孔雀绿加热染色15分钟,水洗,复紅染色2-3分钟,水洗,晾干。
50.芽胞染色的关键操作是孔雀绿加热染色_。
51.放线菌印片染色的关键操作是_印片時不能移動__。
52.用负染色法染荚膜的关键操作是_涂抹墨素要薄。
53.摇床振荡培养一般用来培养_好气微生物,享格特的厌氧操作措施一般用来培养专性厌氧菌
54.革兰氏染色反应与细菌细胞壁的_构造_和__构成_有关。在革兰氏染色過程中,當用95%酒精处理後,就放在显微镜下观测,革兰氏阳性菌呈_紫_色,而革兰氏阴性菌呈_無色。
55.血球计数板与细菌计数板的重要差异是前者计数区的深度是後者的五倍
56.制霉菌水浸片時加棉兰染色液可使菌体呈_浅兰色。
57.Anabaenaazo對ica的异型胞一般是_间生在光學显微镜下它是_透明的,细胞两端有极节_。它能控制氧气的進入,保持异型胞内_低氧分压,以利于固定分子氮_。
58.配制培养基時,应注意多种营养物质的配比,尤其是C:N比(碳氮比)。一般而言,當C:N³5:1時,有助于_菌体生長；當C:NÐ5:1時,有助于__积累代謝产物。

59.由于多种微生物對某种化合物如抗生素、染料的敏感性不一样,可以运用這一特性来從土壤中分离出不一样类群的微生物。如在培养基中加入青霉素(链霉素),會杀死或克制细菌和放线菌的生長而分离出真菌__；在培养基中加入__結晶紫__,有助于分离到革兰氏阴性菌。
60．细菌在革兰氏染色過程中,最终用蕃紅复染的原因是G-细菌經結晶紫染色、碘液媒染、酒精脱色後菌体紫色脱去,故需用蕃紅复染,這样在光镜下才能見到紅色的菌体。
61.高倍镜下能看到的物象在油镜下看不到往往是由于_片置反和_菌体著色太浅引起。
62.微生物在培养基中生長時,由于其_新陈代謝而使培养基_pH值发生变化；因此在配制培养基時,為维持该条件的相對恒定,常在培养基中加入缓冲物质如_碳酸盐(CaCO3)_或_磷酸盐
63.一般而言,微生物在含糖基质上生長,會产_酸_,而使_pH下降_；微生物分解蛋白质或氨基酸會产_碱_,而使_pH上升.
64.在微生物培养過程中使用的培养皿首先是被_Petri采用的,因此又称培养皿為_Petri_dish。Hesse在其妻子的启发下,将固体培养基使用的凝固剂由明胶改為_琼脂
65.显微镜的微動螺旋每转一圈升降距离為_0.1毫米
66.两個經典的革兰氏正反应细菌和革兰氏负反应细菌經革兰氏染色後都呈阴性反应往往是由于_酒精脱色時间過長和__菌体培养時间太長引起。
67.检查乳品和饮料与否具有_大肠杆菌(E.Coli)_等肠道细菌,可采用_伊紅--美兰_培养基,在這种培养基平板上_大肠杆菌(E.Coli)__會形成具有_金属___光泽的紫黑色小菌落。
68.细菌鞭毛經镀银法染色後呈_褐_色。
69.细菌鞭毛經李夫森法染色後呈_紅色。
70.由于升汞(HgCL2)有腐蚀作用,因此不能用于金属器皿消毒,尤其是_铝制品。

思索題
01.试述在一般光學显微镜下测定微生物细胞大小的基本措施。
测定微生物细胞的大小重要使用目镜测微尺。其措施如下:
1.先用長度已知的镜台测微尺校正目镜测微尺。校正的措施是让台尺与目尺重叠,看台尺的X格恰好与目尺的Y格重叠,然後用计算目尺每格的長.分别校正目镜测微尺在低倍镜,高倍镜及油镜下每格所代表的实际長度。
2.将待测微生物制成水浸片或染色涂片置载物台上,调焦找到微生物後用目镜测微尺测量其宽几格,長几格,然後乘上對应放大倍数下的校正值。
3.一般测10個微生物,然後以平均值表达。
4.若是酵母、细菌等單细胞微生物,一般测其宽和長,然後以平均宽´平均長表达,單位為μm。

02．以测苏雲金杆菌工业菌粉中的活菌数為例,试述稀释平板计数的基本措施。
1.测数前先准备好测数用的1ml無菌吸管,9cm無菌平板,9ml试管無菌水和牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。
2.称取10克工业菌粉加入90ml無菌水中置摇床上或用手振荡20-30分钟,让菌体分散。
3.将上述振荡過的菌液按無菌操作法進行拾倍稀释直到10-8。
4.取9cm無菌平板9套用记号笔在平板底编号,10-8编3套,10-7编3套,10-6编3套。   
5.用1支1ml的無菌吸管,取1ml10-8的稀释菌液放入编号10-8的平板中,如此将三個反复做完.同法取10-7稀释菌液放入三個编号為10-7平板中.同法取10-6稀释菌液放入三個编号為10-6平板中.(均要按無菌操作法做)。
6.将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基熔化冷至45-50℃後,在酒精灯火焰边按無菌操作法倒入上述9套平板中,每個加入量大概15-20ml,边加边摇動平板,使培养基与菌液充足混匀。
7.待培养基凝固後,将平板倒過来,置28-30℃下培养48小時後计数。

03.试述划线分离的操作措施。
1.取9ml無菌平板一套在火焰旁按無菌操作法倒人15-20ml营养琼脂,让其冷凝成平板。
2.左手拿上述平板,右手拿接种环在火焰上灭菌後沾取原始分离物在平板上平行划线三条
3.将接种环在火焰上灭菌,左手平板转動大概70度,用灭菌接种环通過第一次划线的地方作二次划线,亦划三条。
4.同上法再作第三次,第四次划线。
5.盖上平板盖,将平板倒過来置28-30℃下培养2-4天後观测成果.划的好应在第四次划线处出現單個菌落。
注:本答案也可画图阐明。
04.试述检查细菌的运動性的操作措施。
检查细菌的运動性有两种措施:
1.镜检法
将待检样品制成菌悬液,滴一點菌液于一盖玻片上,取一凹窝载玻片,将凹窝對准菌悬液盖在盖玻片上,然後将盖玻片和载玻片一起翻转,让菌悬液在凹窝上的盖玻片下.然後在显微镜下观测,观测应找悬液的边缘.因细菌為了更多地接触空气,總向水滴的边缘运動,观测時要注意将细菌的运動与分子的布朗运動区别開。
2.半固体穿刺法
将待检细菌穿刺接种在半固体试管培养基中若细菌仅沿穿刺线生長,阐明细菌不运動。若细菌沿穿刺线向周围扩散生長,阐明细菌有运動性。

05．简述配制培养基的基本原则:
培养基是人工配制的适合不一样微生物生長繁殖,或用于积累代謝产物的营养基质。因此配制培养基時应注意如下原则:
1.根据微生物的不一样选用不一样的培养基,以满足微生物對营养物的需要。如自养型微生物所规定营养较简朴,而异养型微生物营养规定较复杂。培养细菌,放线菌,真菌等各有不一样的培养基。
2.注意多种营养物质的浓度与配比。微生物生長所需要的营养物质往往在合适時才生長良好。浓度大往往會克制微生物的生長。如糖类,多种重金属盐类假如浓度太高,也會影响微生物的生長。同步多种营养物质的浓度比也应注意,尤其是C/N比。
3.注意将培养基的pH值控制在一定范围内。為了防止因微生物生長繁殖或积累代謝产物後影响培养基pH值,常在其中加入磷酸盐,碳酸盐,以维持培养基pH值的相對恒定。
4.同步還应考虑培养基的氧化還原電位及原材料的經济、易购和来源广泛的原则。

06．试述配制培养基的基本過程及应當注意的問題。
配制培养基的基本過程是:
1.按培养基的配方称取多种药物,用量太少的药物应配制成溶液後再取一定量加入。
2.将多种药物加水溶解,一般是加所需水量的二分之一。
3.若配固体培养基,按2%的用量称取琼脂,用水将琼脂浸湿一下,用手挤去琼脂中過多的水分,加入2的溶液中。
4.加热至琼脂所有溶解,并补足所需的所有水量。
5.用1molNaOH和1molHCL调整pH至规定值。
6.用分装器将培养基分装入试管或三角瓶中,塞上棉塞并包扎,灭菌後备用。
注意事项:
1.配制過程中,在加热熔化琼脂時,要不停搅拌,以防糊底。
2.分装時不要让培养基沾染试管口或瓶口,以防培养過程中轻易污染杂菌。  

07.试述显微计数的基本措施。
显微计数一般用来测微生物單细胞的数量,大一點的细胞如酵母菌用血球计数板,小一點的细胞如细菌用细菌计数板。该测数措施不能区别死活细胞,测出的是微生物總的细胞数量。
血球计数板和细菌计数板构造相似,计数区的面积都是1mm2,两者的差异在于血球计数板的深度為0.1mm。细菌计数板的深度為0.02mm。無论是血球计数板還是细菌计数板计数区都划為25個大方格,每個大方格又划為16個小格。因此每小格的体积為1/4000mm3或1/0mm3。计数時,先在显微镜下找到计数区,然後将菌液稀释到合适浓度,取少許菌液滴在计数区上盖上特制盖玻片,亦可先盖盖玻片。然後用吸管将菌液從计数板上的沟裏加入。靠菌液的表面张力充斥计数区。计数時采用五點取样法数数,即四角各取一种大方格,再在中央取一种大方格。计数時大方格四面压线的细胞只数两边,以防增長数量。将5個大方格的菌数加起来除以80得出每個小格的菌数,再乘以4000即為1mm3的菌数,再乘上1000即為1ml的菌数,乘上稀释倍数即為样品含菌数。 

08．標本片上的某一物象,第一次看到後怎样再次找到它?
要做到這一點,首先取决于显微镜的好壞,若显微镜上的推進器带有纵横標尺,很轻易做到這一點。首先记住標本片放到推進器上的方向,然後记下观测某一物体時推進器上的纵横標尺的数字。如纵3,横4。當標本片拿下来後,若要反复观测本来的物象,只要按原方向将標本片荚在推進器上,将推進器推進到第一次观测该物体的纵,横標尺数字纵3,横4,即可看到第一次观测過的物体。       

09.试述在光學显微镜下所看到的Anabaenaazo對ica的重要特性。
Anabaenaazo對ica的重要特性是:
1.菌体為丝状体,营养细胞為绿色,藻丝不扭曲。
2.该菌有异型胞,异型胞间生,無色透明,两端有极點。
3.厚壁孢子無色、大、两端無极點。

10．革兰氏染色反应的成败关键是什么?為何革兰氏染色有拾分重要的理论与实践意义?
因通過革兰氏染色,可把几乎所有的细菌都提成G+和G-菌两大类细菌,在细胞构造、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都展現出明显的差异。因此,任何细菌只要通過革兰氏染色,即可提供不少重要的生物學特性方面的信息。
革兰氏染色反应的成败关键是:
1).菌龄:12-24小時的纯培养物。
2).革兰氏染色操作技术其中严格控制酒精脱色時间和菌液涂布時应均匀而薄是关键。
3).培养基的构成。  

11．怎样從土壤中分离得到一种微生物的纯培养体?
首先要根据分离對象选择合适的培养基。若要分离真菌应选用馬丁-孟加拉紅选择培养基；若要分离细菌应选用牛肉膏蛋白胨培养基；若要分离放线菌应选用高氏培养基。土样采回来後,用常规的拾倍稀释分离法進行稀释分离,若分离细菌,一般稀至10-8,若分离放线菌,一般稀至10-6；若分离真菌,一般稀至10-4。取最终三個稀释度倒平板获得單個菌落。将平板上出現的單菌落转接斜面培养,同步镜检菌体的纯度,若不纯,应将培养的單菌落斜面再次進行稀释分离。倒平板获得單菌落,转接斜面培养,同步镜检菌体的纯度。反复几次直到得到菌体單一的單菌落方可认為是某一微生物的纯培养体。

12．察氏培养基的构成為:蔗糖:30克,磷酸氢二钾:1.0克,硝酸钠:2克,硫酸镁0.5克,氯化钾:0.5克,硫酸亚铁:0.01克,蒸馏水:1000ml.
试述:
①该培养基的C源,N源各是什么物质。
②除C源和N源外的其他物质起什么作用:
③该培养基為何不加生長因子?
⑴该培养基的C源物质是蔗糖,N源物质是硝酸钠。
⑵磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钾、硫酸亚铁為该培养基提供矿质营养。蒸馏水提供水分。
⑶该培养基培养的微生物在培养基上能合成自身所需的所有生長因子,故無需添加生長原因,该培养基所培养的微生物為野生型。

13. 简述采用多管发酵法测定自来水大肠杆菌群的措施。
采用多管发酵法测定自来水大肠杆菌群培养基：乳糖蛋白胨发酵管（内有倒置小套管），三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵管（瓶）（内有倒置小套管），伊紅美藍琼脂平板，灭菌水．
    仪器或其他用品：载玻片，灭菌的带玻璃塞空瓶，灭菌培养皿，灭菌吸管，灭菌试管等。
（一）自来水水样的采集：先将自来水龙頭用火焰烧灼3min灭菌，再開放水龙頭使水流5min後，以灭菌三角烧瓶接取水样，以待分析。
（二）检查措施：
1.初(步)发酵试验  在2個具有50ml三倍浓缩的乳糖蛋白胨发酵烧瓶中，各加入100m1水样。在10支具有5m1三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵管中，各加入10 m1水样。混匀後，37℃培养24h，24h未产气的继续培养至48h。
2.平板分离  經24h培养後，将产酸产气及48h产酸产气的发酵管(瓶)，分别划线接种于伊紅美藍琼脂平板上，再于37℃下培养18—24h，将符合下列特性的菌落的一小部分，進行涂片，革兰氏染色，镜检。①深紫黑色、有金属光泽；②紫黑色、不带或略带金属光泽；③淡紫紅色、中心颜色较深。
3.复发酵试验  經涂片、染色、镜检後，如為革兰氏阴性無芽胞杆菌，则挑取该菌落的另一部分,重新接种于一般浓度的乳糖蛋白胨发酵管中，每管可接种来自同一初发酵管的同类型菌落1-3個,37℃培养24h，成果若产酸又产气，即证明有大肠菌群存在。