糖化血红蛋白实验室检测基础及标准化进展.pptx

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,8,Sep 10,2014,青岛,糖化血红蛋白实验室检测,及,标准化,新进展,Hannah Yao,HbA1c,实验室检测,糖化血红蛋白的发展历史概述,1958,年，,Allen,报告，在离子交换层析上的的人血红蛋白可以分离出三个小组分，他们较,HbA,的负电荷更强，被命名为,HbA1a,HbA1b,HbA1c,。,1969,年,Rahbar,使用琼脂电泳，报告糖尿病患者的这些小血红蛋白组升高,1970,年代中期，弄清楚了是葡萄糖对血红蛋白,HbA,的非遗传修饰，产生了,HbA1c,1980,年中期，,GHb(,糖化血红蛋白）检测被广泛应用，但当时结果可比性很差,DCCT,研究发表后，,1996,年起，美国正式启动了,NGSP,项目，推动糖化血红蛋白检测的标准化。,2010,年达成了全球标准化共识,Hb,HbA,0,HbA,1,HbA1a,HbA1b,HbA1c,HbA,(,),HbA,2,(,),HbF,(,),95%,2%,1-3.5%,成人血红蛋白分三,种，,HbA,为主要成人,Hb,非糖化,Hb,糖化,Hb,6-8%,87-89%,血红蛋白,胎儿血红蛋白,HbF,在,胎儿及出生,6,个月以内的新生儿体内为高浓度，,6,个月后基本降为成人,水平,糖化和非糖化的血红蛋白,1%,1%,4%-6%,HbA,1,a:,链,NH2,端与其它糖成分结合的,产物,HbA,1,b:,HbA1c,进一步,代谢的,产物,HbA1c:,链,NH2,端与葡萄糖结合的产物,HbA1c,是血红蛋白,HbA,的糖基化产物,葡萄糖与血红蛋白,HbA,发生糖化反应,两步反应：,先快速生成不稳定,A1c,后缓慢生成稳定的,A1c,。,血红蛋白,HbA,糖化后，负,电荷会增加,HbA1c,的主要检测方法,基于电荷,离子交换高压液相色谱法（,HPLC,）,电泳法,毛细管电泳基于结构,硼酸亲和层析法,酶法,免疫法,国内上市的,IE-HPLC,方法的主要厂家平台,厂家,仪器,Bio-Rad,VARIANT II Turbo HbA1c Kit-1.0/2.0,VARIANT II HbA1c Program,D-10 Hemoglobin A1c Program,Tosoh,G7,G8,GX,Arkray,8160,8180,上海惠中,MQ2000,MQ2000PT,国内上市,的,LPLC,方法的主要厂家平台,厂家,仪器,深圳普门,GH-900 HbA1c Analyzer,Drew Scientific,Drew DS5,Diastat,江苏奥迪康,AC660,毛细管电泳法的检测原理,毛细管电泳分离血红蛋白组分是基于电荷等决定的电泳迁移率,一种高压,电源产生电场，,使,分子通过,毛细管从,阳极迁移,到阴极,。,患者红细胞裂解,液中带,正电荷的,血红蛋白组分将,首先被检测,到，其次,是中性物质，最后由带负电荷的,血红蛋白组份。电泳图谱显示,HbA1c,与,HBA0,分离,。,Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences,Am J Clin Pathol 2014;141:5-16,Sebia,糖化产品概览,Capillarys 2 with Flex Piercing,是,Sebia糖化系统中的唯一有,CFDA,证的，,8,个通道同时使用时，,1.6,分钟,/,检测。,全国总代理,-,广州执信,价格：,30,元,/,测试（到代理商）,今年在全国主要地区推广力度强，特别在南方两广地区是该公司传统重要市场,MiniCAP Capillary 2 Capillary2 with Flex Piercing,*,(Capillary2 with Flex Piercing,为,Capillary2,的升级版，只多了可采原始样本管，其他参数一致,),with Flex,硼酸,亲和色谱法的原理,A,：,患者的红细胞,裂解液注入到含有结合,了硼酸基团的树脂,的分析,柱中。,B,：在,pH,高于,8.0,时，血红蛋白被糖化,后产生,一个特殊的顺式二糖醇基团,与硼酸基团发生反应,C,：糖化的血红蛋白被绑定在分析柱中，而非糖化的血红蛋白组分直接流出,D,酸性缓冲液被使用，使得糖化的血红蛋白从分析柱内释放出来,图,E,是一种,简化的色谱图（,蓝线,），显示了非,糖化和,糖化血红蛋白组分的分离。,Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences,Am J Clin Pathol 2014;141:5-16,硼酸,亲和色谱法,特点,硼酸亲和色谱法直接检测的是总糖化血红蛋白，报告结果是计算出来的,HbA1c,。,硼酸,亲和色谱法不能分离出血红蛋白变异体,国内上市的硼酸亲和色谱法的主要厂家平台,厂家,仪器,Primus,Hb9210,PDQ Plus,Ultra2,Bio-Rad,In2it,Alere,Afinion,NycoCard,免疫分析,法检测原理,-,抗原抗体反应,A:,在没有,HbA1c,时，,polyhaptens,（包含多,个,HbA1c,表位,的,合成分子）与绑定在微粒上的抗,HbA1c,抗体反应，形成,不溶性,抗体,-polyhapten,复合物。,这导致,显著的,光散射（浊度,增加）,B:,患者红细胞裂解液中的,HbA1c,与抗,HbA1c,抗体结合,，形成可溶性抗原抗体复合物，从而减少光散射（浊度,降低）。通过比浊测定可检测出该样本中的,HbA1c,的量,Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences,Am J Clin Pathol 2014;141:5-16,酶法检测原理,A,：图示,是糖化的,HbA,的,链的前,8,个氨基酸，,患者的红细胞,裂解液在蛋白酶存在的情况,下，,氨基酸和小段肽链被释放,包括,HbA1c,的氨基,酸末端糖化,的,缬氨酸,B,：糖化缬氨酸的酶促去,糖化,反应,C,：缬氨酸去,糖化过程产生,H2O2.H2O2,的形成,可以,用,比色法测定,.,产生,的,信号,与,样本,中,的,HbA1c,成正比,Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences,Am J Clin Pathol 2014;141:5-16,国内免疫分析法,/,酶法厂家仪器平台及试剂盒,厂家,仪器,试剂盒,Roche,Cobas,生化系列机型,糖化血红蛋白检测试剂盒,(,免疫比浊法,)Tina-quant,系列试剂盒,Hitachi,生化系列机型,开放或罗氏试剂,Siemens,Dimension,等生化系列机型,糖化血红蛋白测定试剂盒,(,免疫比浊法,),ADVIA,生化分析系统,糖化血红蛋白,A,测定试剂盒,(,乳胶凝集法,),DCA Vantage,（,POCT,）,糖化血红蛋白检测试剂盒,(,免疫乳胶凝集抑制法,),Beckman,AU,生化系列机型,糖化血红蛋白检测试剂盒,(,比色法,),Beckman,其他生化系列,Abbott,ARCHITECT,生化仪系列,糖化血红蛋白测定试剂盒,(,化学发光微粒子免疫检测法,),Randox(,朗道）,血红蛋白,A1c,检测试剂盒,(,乳胶增强免疫比浊法,),德国胡曼,糖化血红蛋白,(HbA1c),测定试剂盒,JEOL Ltd,（希森美康代理）,糖化血红蛋白检测试剂盒,(,酶法,),Sekisui,（积水）,Medical,糖化血红蛋白检测试剂盒,(,酶法,),Audit Diagnostics,（北京欧迪代理）,糖化血红蛋白测定试剂盒,(,直接法,),国产厂商,国产生化分析系统,国产生化试剂,HbA1c,的主要检测方法的特点,方法,原理,优势,挑战,酶法,使用特别作用于氨基酸末端糖化的缬氨酸的酶检测,HbA1c,不受变异体的分析干扰,不能发现血红蛋白变异体,免疫法,使用针对糖化的,链氨基酸末端的抗体检测,HbA1c,在使用新一代的试剂盒时分析不受大多数常见变异体的干扰,不能发现血红蛋白变异体，新一代的试剂盒依然会受到少见变异体的分析干扰,硼酸亲和层析法,糖化的血红蛋白被绑定在硼酸基团树脂时，非糖化的血红蛋白组分直接流出分析柱,最小的,Hb,变异体分析干扰,检测的是总糖化血红蛋白，而不是,HbA1c,不能发现血红蛋白变异体,离子交换,HPLC,基于电荷分离血红蛋白组分,能够发现常见的血红蛋白变异体,变异体被共洗脱时易被干扰,毛细管电泳法,基于电荷分离血红蛋白组分,能够发现血红蛋白变异体,工作流程,Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences,Am J Clin Pathol 2014;141:5-16,糖化血红蛋白的重要地位,在第,59,届美国糖尿病学会年会上，,HbA1c,监测的重大影响与胰岛素问世相提并论，,并将前者作为血糖控制的金标准,2014,年,ADA,指南推荐：对于治疗达标（血糖控制稳定）的患者，每年应该至少进行两次,HbA1c,检测。对更改治疗方案或血糖控制未达标患者，应每年进行四次,HbA1c,检测,在临床上，无论用什么方法反映血糖的变化，最终都要以,HbA1c,的变化作为最终评价一种药物或一个治疗方案在血糖控制上是否有效的指标,Diabetes Care Volume 37,Supplement 1,January 2014,“中国糖化血红蛋白教育计划”教材,2010,年,ADA,率先正式推荐,HbA1c,诊断,DM,推荐原因之一就是在美国,HbA1c,已高度标准化,2011,年,WHO,推荐有条件的地方采用,HbA1c,诊断糖尿病,中国？,HbA1c,检测用于糖尿病筛查诊断的全球现状,HbA1c,有早期提示的价值，可作为糖尿病的诊断指标,最新,2013,版中国,2,型糖尿病防治指南,HbA1c,临床应用推荐,鉴于,HbA1c,检测在我国尚不普遍，检测方法的,标准化程度不高,，测定,HbA1c,的仪器和质量控制尚不能符合目前糖尿病的诊断的要求。本指南仍不推荐在我国采用,HbA1c,诊断糖尿病。,但对于采用,标准化,检测方法，并有严格质量控制，正常参考值在,4.0%6.0%,的医院，,HbA1c6.5%,可作为诊断糖尿病的参考。,中华糖尿病杂志,2014,年,7,月第,6,卷第,7,期,HbA1c,用于糖尿病监测和筛查诊断的必备条件,实验室指标参与临床评估、作为诊断,标准，除了,检测指标固有的先天优势外，具有符合要求,的,准确性,精密度（,CV,）,正确,度（,Bias,）,HbA1c,分析中的,CV,对临床判断的影响,0.5%HbA1c,是一个“临床上显著变化”的指标,CV%,6.0%A1C,6.5%A1C,7.0%A1C,2,5.76-6.24,6.24-6.76,6.72-7.28,3,5.64-6.36,6.11-6.89,6.58-7.42,5,5.4-6.6,5.85 7.15,6.3 7.7,不同室内,CV,对,A1C,分析的,影响（,95%,的可信区间）,正常人和病人无法区分,血糖控制好坏无法区分,HbA1c,分析中偏倚大对临床判断的影响,Copyright 2010 American Association for Clinical Chemistry,小,的偏倚将导致很大人群的误诊,标准化的目的和意义,目的,:,实现检验结果的可比性,-,保证检验质量,意义（益处）,可以建立起普遍接受（可用）的参考区间,可以合并分析、比较不同医学中心的研究资料,促进医学研究和研究成果的转化,能够有效地应用循证医学和检验医学实践指南,HbA1c,实验室检测,的标准化进展,全球范围内主要标准化,日本标准化,瑞典标准化,中国标准化之路,1993,年,CAP,糖化血红蛋白调查结果,HbA1c,Total,GHB,HbA1,在DCCT,和,UKPDS,结果,发表之前，美国有,800,个试验室在做,A1C,检测,，,CAP,实验调查显示在不同的实验室，用不同的检测方法得出的,A1C,结果,存有巨大的差异。,从DCCT认识标准化,在组织进行,DCCT,的临床试验中，考虑到当时检测“糖化血红蛋白”的方法繁多、相互间可比性差的问题,。,为了确保临床试验结果的可靠性，整个试验期间所有检测糖化血红蛋白的样品全部在两个实验室内检测，并强调仅以一个实验室为准，另一个实验室的结果必须校准至与该实验室一致,。,这就是,在当时没有,参考物质和参考方法的前提,下,采,取,的标准化，确保了试验成功！,DCCT,成果的推广,为了将,DCCT的成果用于临床为糖尿病病人服务，就必须要求美国的各实验室的糖化血红蛋白结果和,DCCT,值具有可比性；,因为如果仅确定任何方法的糖化血红蛋白值是否在实验室的“正常范围”，是没有意义的。需要更精确地了解：这个检测值和,DCCT,值的关系是什么？,因为只有,DCCT,结果直接和平均血糖及并发症风险有关。,国家糖化血红蛋白标准化计划,(NGSP),美国自,1996,年开始开展国家,糖化血红蛋白标准化计划,(NGSP,),开展,NGSP,的目的：,1.,糖化血红蛋白检测项目实现标准化,2,.,以使各临床试验室的检测结果与,DCCT,的,报告结果,具有可比性,NGSP,网络,PRL,PRL,NGSP,实验室网络,SRL,SRL,SRL,NGSP,监控网络,（月度）,SRL,CPRL,指导委员会,执行核心,SRL,SRL,SRL,SRL,NGSP,程序,NGSP,监控,网络,（月度）,厂商和实验室认证（,I,级和,II,级）,校准品,1,新鲜血,(,精密度与偏差,),认证,2,新鲜血,能力比对测试,3,新鲜血,常规临床实验室,NGSP,对厂家方法的认证,NGSP,要求：生产厂家有责任保证其它批号的试剂、校准品、质控品、（色谱柱）所测结果与认证结果保持一致,认证标准：逐步提高,认证有效期：,1,年,www.ngsp.org/docs/methods.pdf,NGSP,对实验室的认证,由,NGSP,的二级参考实验室来对实验室进行认证工作,得到认证的实验室所测结果是可靠的,认证标准：逐步提高,认证有效期：,1,年,,www.ngsp.org/docs/labs.pdf,38,CAP,项目：能力,比对,测试,美国,病理家学会（,CAP,）,2007,年开始,使用基于,NGSP,设定的目标值作精密度等级,(+CV),，要求逐年严格,2007,15,2008,12,2009,10,2010,8,2011,7,2012,7,2013/2014,6,www.ngsp.org/CAP/CAP09b.pdf,and,Meeting minutes from NGSP/IFCC Manufacturers Forum,AACC Atlanta 2011,2014,年,CAP,结果,NGSP,标准化成果,2013,年,调查,显示,3,000,多家,CAP,实验室,间，,A1C,的检测,结果,已经有效,的标准化,IFCC,国际标准化,1995,年,IFCC,成立,HbA1c,标准化,工作组，旨在建立具有高计量,学水准的参考系统，,实现,HbA1c,测定,的全球可比性,明确,定义,HbA1c,葡萄糖与血红蛋白,链,N,末端缬氨酸残基稳定的化合物，全称为：血红蛋白,链（血液）,-N-,（,1-,脱氧果糖,-1-,基）血红蛋白,链,制备纯度标准物质,建立一个特异,测定,HbA1c,的,参考方法,建立国际参考实验室网络,完成了与指定比对方法的比较工作,IFCC,参考方法的原理,谷氨酸内切酶,HbA1c,六,肽,HbA,0,六肽,糖基化的,链,N,末端的六肽片段,非糖基化的,链,N,末端的六肽片段,IFCC,参考方法的流程,溶血液制备,酶解,HPLC,串联毛细管电泳,HPLC,串联质谱,高特异性和准确性的计量结果,IFCC HbA1c Standardization,IFCC,参考方法的局限性,特异测定,HbA1c,IFCC,测定结果低于目前商业方法（,NGSP,）结果,耗时、费用高，,目前不适合临床实验室,其他国家,、,地区的标准化,日本标准化,参考方法：,KO500,（离子交换,HPLC法）,瑞典标准化,参考方法：,Mono S,（强氧离子交换树脂甲基磺酸盐,HPLC,法）,各,标准化组织,在,相应,区域,内实现,了,HbA1c,测定,结果的一致性，,但采用参考方法特异性不同，不同国家、地区间结果不具可比性。,不同国家值之间的差异,JDS/JSCC=0.927*IFCC+1.73,NGSP=0.915*IFCC+2.15,Sweden=0.989*IFCC+0.88,IFCC,%HbA1c,JDS,%HbA1c,2.0,3.6,4.3,5.6,6.4,7.6,8.6,9.6,10.8,11.6,NGSP,%HbA1c,4,6,8,10,12,改变数值对患者的影响,改变,HbA1c,报告,的数值范围的心理影响将对血糖控制产生影响,Ragnar Hanas,Diabetes Care 2002,25:2110-2111,对病人的心理影响,Ragnar Hanas,Diabetes Care 2002,25:2110-2111,糖化血红蛋白的百分比数字表示患者实际数字,.,虚线表示糖化血红蛋白值基于参考水平变化的预期变化,调整为较高的,DCCT,检测校准后，患者,的,HbA1c,结果降低，说明,血糖控制显著改善,当调整回瑞典检测校准后，患者,的,HbA1c,结果,升高，血糖控制恶化,如何看待不同结果,糖化血红蛋白的全球标准化之路,ADA/EASD/IDF,的,HbA1c,工作组，建立于,2004,年，目的是使,HbA1c,报告一致。,2007,年,5,月,4,日在意大利米兰召集了讨论审核，并发布了国际协调申明,2010,年正式公布了,HbA1c,全球标准化,测定共识,2010,年全球标准化共识内容,HbA1c,的检测必须在世界范围内标准化，包括参照系统和数值报告。,IFCC,的参考系统是唯一能够满足标准化要求的方法。,将来,HbA1c,同时以,IFCC,单位,(mmol/mol),以及衍生的,NGSP,单位,(%),报告，使用,IFCC-NGSP,换算公式进行转换。,NGSP,与,IFCC,关于报告单位,在美国，日本和中国依然报告,%HbA1c NGSP,欧洲和其他国家接受了,IFCC mmol/mol,NGSP,与,IFCC,关于报告单位的争论仍未结束,中国,HbA1c,产品的标准化认证现状,市面常见的,HPLC,方法获得,NGSP,认证；,多数免疫方法获得,NGSP,认证；,部分,POCT,、酶法获得,NGSP,认证；,国产生化试剂基本无,NGSP,认证,中国,HbA1c,标准化之路,EQA,（,NCCL,及各地临检中心）,NGSP,认证及国内一致性项目,参考系统建立及应用,IFCC,参考实验室网络,糖化血红蛋白教育计划,-CHEP,糖化血红蛋白标准化计划,-CHSP(CNSP),制定中国糖化血红蛋白相关行业标准,国内目前主要,EQA,项目卫生部临检中心（,NCCL,）,HbA1c,室间质量评价计划（,EQA,）,每年一次，,5,个样本，冰冻新鲜全血,各省临检中心,HbA1c,室间评价计划（,EQA,）,各省情况不一,美国病理协会,(CAP)HbA1c,室间质评计划（,CAP GH2 survey),全年测定,2,次，每次下发,3,个新鲜全血样本,厂家的,HbA1c,室间质量评价服务（,EQAS,）,Bio-Rad,公司,EQAS,NGSP,实验室认证及中国,NGSP,认证实验室情况,认证类型,#,样品比对,偏差标准,监测（是,/,否）,监测方案,厂商（,Manufacturer,）,40,40,样本中有,37,个结果在,6%否,I,级认证实验室（,Level I lab,）,40,40,样本中有,38,个结果在,6%,是,10,个样本（季度）,II,级认证实验室（,Level II Lab,）,40,40,样本中有,37,个结果在,6%,否,NGSP,实验室网络开展针对全球临床实验室的认证,国内与,2005,年开始与,NGSP,的联系,截至,2014,年,6,月，全球,NGSP,认证,实验室共有,147,家,，其中中国,NGSP,认证,实验室共有,28,家,www.ngsp.org/critsumm.asp,国内区域性的糖化血红蛋白一致性项目,上海糖化一致性项目,(SHGHP),目的是提高上海地区糖化检测质量。方法是参考,NGSP,的全血样本比对方法。,三家核心参考实验室均为,NGSP,一级认证实验室,目前有近百家实验室参与，以上海为主，已有相当数量各地实验室参加,南京地区糖化血红蛋白一致性,项目,江苏？西安？四川？新疆？,参考系统建立,IFCC,参考方法建立,NCCL,：,HPLC-LC/MS/MS,上海检验中心：,HPLC-CE,中国计量科学研究院：同位素稀释质谱法,北京市临床检验中心：,LC/MS/MS,参考物质,参考系统应用,卫生部临检中心,HbA1c,正确度验证,计划,始于,2012,年，参加实验室,87,家；,2013,年参加实验室,120,家；,全年活动,1,次，发放,2,个样本，为新鲜冰冻全血,靶值确定方法采用,IFCC,推荐参考方法,加入,IFCC,参考实验室网络,上海市临床检验中心,NCCL,北京市临床检验中心,中国糖化血红蛋教育计划（,CHEP),项目发起人：,纪立农教授,宁 光教授,陈文祥主任,主办单位：,中华医学会科普部,协办单位：,中国医院协会临床检验管理专业委员会,“,中国糖化血红蛋白教育计划,”是国家科技支撑计划项目“公众健康普及技术筛选与评价研究”的分课题“常见多发病防治技术要点筛选和普及研究”中的重要部分,中国糖化血红,蛋白教育计划,糖化血红蛋白标准化计划,-CHSP(CNSP),IFCC,实验室认证疑云？,全球均无,IFCC,临床实验室认证,中国哪家,IFCC,参考实验室执行？,如何收费？,中国,HbA1c,相关行业标准,SFDA,行业标准,糖化血红蛋白分析仪,-,针对厂家在中国上市,中国糖化血红蛋白实验室检测,指南,-,针对临床实验室,HbA1c,实验室检测和临床应用最新指南,中国糖化血红蛋白实验室检测,指南,目的：,为提高我国,HbA1c,检测质量，适应,HbA1c,临床应用发展的需要，,更科学合理有效地运用糖化血红蛋白，,充分发挥其作用,制定机构：,卫生部临床检验中心,国家食品药品监督管理总局医疗器械检验所,糖尿病专家,1,糖化,血红蛋白实验室检测,指南 中国糖尿病杂志,2013,年,8,月第,21,卷第,8,期,中国糖化血红蛋白实验室检测指南解读,对分析系统的要求,分析系统性能指标要求,对色谱柱的要求,对异常结果处理的建议,对结果报告的,要求,实验室保证,HbA1c,测定结果质量的,4,个环节,1.,分析系统的要求,测定方法要求溯源到,IFCC,参考方法，如,NGSP,认证,方法,实验室要知晓所选分析系统可能存在的干扰,因素,POCT,方法的精确性不能满足临床要求，目前不能用,于,糖尿病的诊断,2.,分析系统性能指标要求,报告,结果：以“,HbA1c”,或相当于“,HbA1c”,报告结果，,因为只有,这一个分析项目才有评估并发症发生的优良数据库,。,精密度,：室内,CV3%,（以小于,2%,为宜）；,HbA1c,测定质量目标：,0.5%HbA1c,注意：没有直接的证据显示,其它的检测指标与,糖尿病长期并发症风险,有,关,(,例如：总糖化血红蛋白、果糖胺或糖化血清蛋白,),3.,色谱柱的要求,实验室,应知晓本室所使用色谱柱可检测样品的数量,达到,检测数量限应及时更换，不可超量使用,不同,方法的色谱柱可检测样品数量不同,4.,异常结果处理,HbA1c,检测,结果低于,4%,或大于,15%,的样品应进行复查，并与临床医生沟通,对,测定结果与临床表现不符的样品应进行进一步检测,(,需在,NGSP,认证的方法下使用,),5.,结果报告,NGSP,单位（,%,）,+IFCC,单位（,mmol/mol,）,NGSP,与IFCC,转换公式,(NGSP=0.0915*IFCC+2.152),以,%,为单位的结果后,1,个小数点报告,如临床需要，需提供方法学名称,6,实验室保证,HbA1c,测定结果质量的,4,个环节,1,选择可靠的分析系统,2,规范化使用分析系统,3,知晓,HbA1c,检测的,干扰因素,4,参加室间质量评价,HbA1c,的测定结果受妊娠,影响,HbA1c,是反映血糖控制平均水平的指标。妊娠妇女血容量增加，,Hb,降低,，因此其,HbA1c,水平较非妊娠妇女低，不能真实反应平均血糖水平。,Radder JK et al.Neth J Med 2005 Jul-Aug,63(7):256-259.Partida Hernndez G et al.Ginecol Obstet Mex 2000 Oct,68:420-424.,进展迅速的,T1DM,有一些临床少见的情况，如进展迅速的,1,型糖尿病，这时,HbA1c,就可能没法“赶上”急性血糖变化的速度，因而不能反应真实的平均血糖水平。,药物,维生素,C,和,E,可抑制血红蛋白的糖基化，长期大剂量服用可以使,HbA1c,测定结果假性降低。,长期大剂量服用乙酰水杨酸盐嗜酒会导致血红蛋白乙酰化，使,HbA1c,测定结果假性升高,长期使用慢性麻醉剂，可使,HbA1c,测定结果假性升高,尿毒症,(,氨基甲酰化血红蛋白）对,HbA1c,测定,影响,HbA1c,的测定结果受,RBC,寿命的影响,任何改变红细胞寿命的因素都将导致,HbA1c,结果,不准确,RBC,寿命降低，,HbA1c,降低,：,溶血性贫血、大量的失血和输血,HbS,和,HbC,（,RBC,寿命缩短为,29,天）。,RBC,寿命增加，,HbA,1c,升高：,铁缺乏，脾切除术,后、再生障碍性贫血时，红细胞清除障碍或网织红细胞生成减少。,Kutter D et al.Clin Lab 2006,52(9-10):477-481.,Daae LN et al.Clin Chem 1999 Apr,45(4):569.,Wang Y et al.Clin Chem 2007,53(7):1394-1395.,变异体对红细胞寿命及,HbA1c,的影响,血红蛋白变异体会影响红细胞的寿命,*,红细胞的寿命会影响糖化血红蛋白的生成,红细胞的平均寿命是,120,天，当平均寿命,120,天时，,HbA1c,是,7%,110,天,=6.4%,130,天,=7.6%*,*“,Impact of Hemoglobin Variants on,HbA1c;,Interpretation:Do we assume too much?”,MLO,in July,2012,*,David B,Sacks;AACC Webinar April 10th,2012.,最新,2013,版中国,2,型糖尿病防治指南推荐,对于患有贫血和血红蛋白异常疾病的患者，,HbA1c,结果是不可靠的。可用血糖、糖化血清白蛋白或糖化血清蛋白来评价血糖的控制。,HbA1c,测定所采用的方法应可以溯源到,DCCT,中曾使用过的,HbA1c,检测方法。,如何发现会影响,HbA1c,的影响因素？,有贫血的血红蛋白病，妊娠，进展迅速的,1,型糖尿病，长期服用某些药物，尿毒症等影响因素，多可通过临床病史和其他生化检测发现,如何发现近,2/3,的无临床症状的血红蛋白病,-,变异体？,HbA1c,实验室检测,中有效,提示血红蛋白变异体非常重要,2012,年,IDF,全球,2,型糖尿病指南,异常血红蛋白（血红蛋白变异体）会影响糖化血红蛋白的检测。,确定是否存在异常血红蛋白（血红蛋白变异体）可以使用,高效液相色谱法（,HPLC,）,或质谱法,总结,Take-home Message,2013,临床指南,2013,实验室指南,启示,HbA1c,的临床使用,1),评价长期血糖控制的金指标，治疗之初每,3,月,1,次，达到治疗目标可每,6,个月,1,次。,2),暂不推荐用于诊断和筛查,3),对于采用标准化检测方法，并有严格质量控制，正常参考值在,4.0%6.0%,的医院，,HbA1c6.5%,可作为诊断糖尿病的参考。,伯乐,HbA1c,可做为诊断糖尿病的参考,HbA1c,不适用情况（干扰因素）,1),对于患有贫血和血红蛋白异常疾病的患者，,HbA1c,结果是不可靠的。,2),可用血糖、糖化血清白蛋白或糖化血清蛋白来评价血糖的控制。,知晓,HbA1c,检测的干扰因素,伯乐,HPLC,可以分辨血红蛋白异常疾病患者,HbA1c,检测系统的选择,标准化的检测方法，,溯源到,DCCT,使用过的方法，,HbA1c,正常值为,4%6%,应选用测定结果可溯源,IFCC,参考方法的分析系统，如获得，,NGSP,认证,伯乐,HbA1c,是可靠的分析系统,DCCT,唯一供应商,质量控制,严格质量控制,规范化使用分析系统,伯乐第三方质控品及软件,室间质量评价,严格质量控制,参加室间质量评价（能力验证）计划,伯乐糖化,EQAS,