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细胞的衰老与死亡,*,细胞的衰老与死亡,第一节 细胞衰老,第二节 细胞的死亡,内 容,2,细胞的衰老与死亡,一、细胞衰老与机体衰老,(,一,),细胞衰老的概念,是指随着时间的推移,细胞增殖能力和生理功能逐渐下降的变化过程。细胞在形态上发生明显变化，细胞皱缩，质膜透性和脆性提高，线粒体数量减少，染色质固缩、断裂等。,第一节 细胞衰老（,cell aging,）,3,细胞的衰老与死亡,（二）机体衰老与细胞衰老,1,机体的衰老并不等于体内所有细胞都衰老,不同组织的细胞寿命不同：,小肠上皮细胞,2,5,天、胰腺上皮细胞约,50,天,皮肤表皮细胞,1,2,个月,2,机体的衰老与体内细胞的衰老有着密切的联系,生物体的衰老可能是组织中干细胞的衰老引所致,4,细胞的衰老与死亡,二、二倍体细胞体外增殖能力和寿命,1.Hayflick,界限（,Hayflick limitation):,体外培养的二倍体细胞的增殖能力和寿命是有一定限度的。,2.,体外培养的二倍体细胞分裂次数与供体年龄之间呈反比关系。,3.,不同物种的细胞最大分裂次数与动物平均寿命成正比关系。,5,细胞的衰老与死亡,三、体内细胞的衰老与其增殖能力和分化,程度有关,（一）不育细胞群的衰老,1.,短寿细胞不具有普遍意义的衰老,，,如 红细胞、,白细胞、皮肤表皮细胞、口腔和胃、肠道上皮细,胞。,2.,长寿细胞衰老与年龄呈线性关系，是研究细胞衰,老的理想的材料，如神经细胞和心肌细胞。,6,细胞的衰老与死亡,（二）暂不增殖细胞群的衰老,仍然保留分裂能力，在一定条件下可以恢复其增殖能力，如肝、肾实质细胞、软骨细胞，很少用来研究衰老。,（三）具有干细胞特性的增殖细胞群的衰老,细胞分裂周期延长，自我更新和多向分化潜能衰退，将导致组织器官结构与功能的衰退，是研究细胞衰老的重要模型。,7,细胞的衰老与死亡,四、细胞衰老的表现,（一）衰老细胞中水分含量减少,内水分减少，细胞萎缩,（二）衰老细胞中色素,蓄积,电镜下细胞质中的脂褐素颗粒由单位膜包裹形成较高电子密度不规则小体，含有浅亮的脂滴,8,细胞的衰老与死亡,1,细胞膜的变化,磷脂含量下降，胆固醇与磷脂的比值升高；磷脂中,不饱和脂肪酸含量及卵磷脂与鞘磷脂的比值随增龄,而下降,细胞膜的黏滞性增加，膜流动性降低。,（三）细胞膜系统的改变,2,内质网的变化,粗面内质网数量减少，排列无序，膜膨胀、崩,解，膜表面核糖体数量减少，光面内质网呈空泡,状。,9,细胞的衰老与死亡,3,高尔基复合体的变化,囊泡种胀，伴有扁平囊的断裂崩解，分泌功能降低。,4,溶酶体的变化,溶酶体功能降低，细胞内残余体积累。,（四）线粒体的变化是细胞衰老的重要指标,数量减少，体积的增大，氧化产能功能下降。,（五）细胞骨架的改变,G-,肌动蛋白含量下降，微丝数量减少，与微丝相关的,信号传递功能下降。,10,细胞的衰老与死亡六）核结构的改变,核膜内折、崩解、染色质固缩化。,（七）蛋白质合成变化,蛋白质合成速率降低，特异蛋白、酶结构和数量,改变，是细胞衰老的重要标志：,半乳糖苷酶（,SA-gal,）表达增加,超氧化物歧化酶（,SOD,）表达减少,11,细胞的衰老与死亡,干细胞的自我更新、增殖和分化的能力下降。,（八）成体干细胞的衰老,五、细胞衰老的机制,（一）“错误成灾”学说,DNA,损伤和修复功能下降，导致核酸、蛋白质、,酶等生物大分子合成错误，引起细胞代谢功能障,碍，导致细胞衰老死亡。,12,细胞的衰老与死亡,（二）自由基学说,认为衰老是由于自由基（,free radical,）对细胞成分,的攻击伤害所致；1.,自由基导致氧化性损伤,:,基因突变、脂质过氧化,2.,自由基产生,(1),环境中的高温、辐射、光解、化学物质等。,(2),体内各种代谢反应产生：,线粒体呼吸链电子泄,漏产生；,过氧化物酶体的多功能氧化酶催化,底物羟化产生。,13,细胞的衰老与死亡,3.,自由基清除系统,（,1,）抗氧化酶：,谷胱甘肽过氧化物酶（,GSH-PX,）、超氧化物歧化酶（,SOD,）、过氧化物酶（,PXP,）及过氧化氢酶（,CAT,）,（,2,）抗氧化剂（,antioxidant,）：,谷胱甘肽（,GSH,）、维生素,C,、,-,胡萝卜素、,维生素,E,、半胱氨酸、硒化物、巯基乙醇等。,14,细胞的衰老与死亡,三）端粒学说,DNA,每复制一次，端粒末端就缩短一段，当端粒缩短到一定程度而不能再分裂复制，细胞便衰老死亡；,端粒酶（,telomerase,）可以利用自身,RNA,为模板合成端粒,DNA,，加到染色体,3,末端，补偿端粒末端丢失的序列，从而延长细胞的寿命；,体细胞无端粒酶活性，生殖细胞、干细胞和恶性肿瘤细胞中有明显的端粒酶活性。,15,细胞的衰老与死亡,（四）遗传程序学说,生物体细胞内特定基因按照预定程序有序地开启和,关闭，控制着个体的生长发育、衰老死亡。,（五）细胞衰老相关基因,1,衰老基因,（,1,）,MORF4,基因：位于,4,号染色体上，基因发生突变,可导致细胞永生化,（,2,）,p16,和,p21,基因：基因产物是,CDK,抑制因子（,CKI,），可通过抑制,CDK,的活性导致细胞周期停滞，阻断细胞增殖，导致细胞衰老,16,细胞的衰老与死亡,细胞衰老时,p16,表达增强，能特异性地拮抗,Cdk4,、,Cdk6,结合,cyclin D,，而使,G1-Cdk,失活，从而阻止,Rb,蛋白磷酸化,使,Rb,不能与,E2F,分离，,E2F,处于持续失活状态，细胞被滞留在,G1,期，从而阻断细胞周期的正常运行，维持了衰老细胞不可逆的生长停滞状态。,17,细胞的衰老与死亡,衰老细胞端粒长度的缩短（可视作,DNA,的一种损伤）会诱导细胞中,p53,含量明显增加，继而诱导,p21,的表达，抑制,Cdk,的活化，使得,Rb,不能被磷酸化，,E2F,处于持续失活状态，最终引发细胞衰老。,18,细胞的衰老与死亡,(3),老年性退行性疾病有关的基因,截脂蛋白,E,基因,-,冠状动脉硬化,淀粉样蛋白基因,-,阿尔茨海默病,2,抗衰老基因 也称长寿基因（,longevity gene,）,延长因子,-1,基因、,WRN,基因、,Klotho,基因,SIRT1,的基因,19,细胞的衰老与死亡,（六）成体干细胞的衰老,1,遗传因素,无法修复积累的,DNA,损伤,衰老相关基因的表达：,p53,、,p16,基因过度表达,2,环境因素,干细胞巢中的酶、调控因子等变化,20,细胞的衰老与死亡,六细胞衰老与疾病,1.,早老性疾病,早老症,(Hayflick-Guilford,综合征,),儿童,绝大多数,Hutchinson-Gilford,早老症的致病原因是由体内核纤层蛋白,A,（,lamin A,）基因突变所致。,lamin A,的基因突变影响,DNA,损伤修复，基因组不稳定，从而使,lamin A,蛋白缺陷的细胞终止分裂，衰老过程加并过早死亡。,21,细胞的衰老与死亡,2.,干细胞衰老相关疾病,老年性再生障碍性贫血、白血病、骨质疏松、,型糖尿病、动脉粥样硬化、血脂代谢障碍。,22,细胞的衰老与死亡,第二节 细胞的死亡,（,cell death,）,细胞死亡是指细胞生命活动的结束，细胞死亡有两种不同的形式：,1.,坏死（,necrosis,）性死亡,2.,细胞凋亡（,apoptosis,）,23,细胞的衰老与死亡,1.,坏死（,necrosis,）性死亡,:,由于损伤、缺血或感,染引起的细胞死亡现象，伴生炎症。,2.,细胞凋亡（,apoptosis):,由死亡信号诱发的受调,节的细胞死亡过程，是细胞生理性死亡的普遍形,式。凋亡过程中,DNA,发生片段化，细胞皱缩分解,成凋亡小体，被邻近细胞或巨噬细胞吞噬，不发生,炎症。,24,细胞的衰老与死亡,一、细胞凋亡具有重要的生物学意义,1,发育过程中清除多余的细胞,细胞凋亡在指（趾）形成中的作用 蝌蚪发育过程尾部细胞的凋亡,25,细胞的衰老与死亡,程序性细胞死亡对发育中神经细胞数量的调节,26,细胞的衰老与死亡,2,清除正常生理活动过程中无用的细胞,衰老的红血细胞、前,T,、前,B,淋巴细胞,3,清除病理活动过程中有潜在危险的细胞,DNA,损伤的细胞、有癌变危险的细胞、病毒,感染的细胞,27,细胞的衰老与死亡,在发育过程中凋亡异常引起并指（趾）,凋亡异常,28,细胞的衰老与死亡,二、细胞凋亡的形态学和生化特征,1,.,形态学特征,细胞凋亡与细胞坏死的形态学比较,29,细胞的衰老与死亡,电镜下的凋亡细胞,(A-B),与坏死细胞,(C),30,细胞的衰老与死亡,.,细胞凋亡的生化特征,(1),染色质裂解为特定的,DNA,片段a.,细胞凋亡中,DNA,内切酶的活化，形成长度,180200bp,及其整倍性片段,b.,在,DNA,电泳中形成梯状带,31,细胞的衰老与死亡,(2),细胞膜磷脂酰丝氨酸（,phosphatidylserine,，,PS,）,:,是早期凋亡细胞的特殊标志。,(3),胱天蛋白酶（,caspase,）：,凋亡过程中由这些蛋白酶构成一系列级联反应，,使靶蛋白活化或失活而介导各种凋亡事件。,32,细胞的衰老与死亡,特征 细胞凋亡 细胞坏死,诱导因素 生理及弱刺激 强烈刺激,受累范围 单个细胞丢失 成群细胞死亡,膜完整性 保持到晚期 早期即丧失,细胞体积 减少、固缩 增大、肿胀,染色质 凝聚成半月形 稀疏成网状,细胞器 无明显变化 肿张破坏,溶酶体 保持完整 破坏外溢,细胞形状 形成凋亡小体 破裂成碎片,基因组,DNA,有控降解 随机降解,大分子合成 一般需要 不需要,基因调控 有 无,后果 不引起炎症反应 引起炎症反应,意义 生理死亡方式 病理死亡方式,细胞凋亡与细胞坏死的区别,33,细胞的衰老与死亡,三、细胞凋亡的分子机制,（一）线虫和哺乳动物细胞的凋亡相关基因,1.,线虫细胞凋亡基因,线虫,（,C.elegans,）,发育过程中有,1090,个细胞，有,131,个细胞将进入 程序化死 亡；,34,细胞的衰老与死亡,已发现,15,个基因与线虫细胞凋亡有关,可分为四组：,细胞死亡基因（,cell death gene,）,:,ced-3,、,ced-4,死亡抑制基因（,cell death suppresser gene,）,:,ced-9,(1),直接相关基因,(2),与死亡细胞吞噬有关的基因,ced-1,、,ced-2,、,ced-5,、,ced-6,、,ced-7,、,ced-8,、,ced-10,(3),控制,DNA,裂解 基因,:,nuc-1,(4),特异细胞类型凋亡的基因,:,ces-1,、,ces-2,egl-1,和,her-1,35,细胞的衰老与死亡,2.,人和哺乳动物细胞凋亡相关基因及其产物,（,1,）,Caspase,家族,(ced-3,的同源物,),是一类半胱氨酸蛋白水解酶（,cysteine aspartic acid,specific protease,），简称胱天蛋白酶（,caspase,）,共同特点,:,是富含半胱氨酸，被激活后能特异地切割靶蛋白的天,冬氨酸残基后的肽键。,37,细胞的衰老与死亡,已发现的,Caspase,家族成员共有,15,种,根据在凋亡级联反应中的功能不同可分为两类：,凋亡上游的起始者,:Caspase 2,、,8,、,9,、,10,、,11,；,凋亡下游的执行者,:Caspase 3,、,6,、,7,。,其中,Caspase,1,、,4,、,11,参与白细胞介素前体活化，,不直接参加凋亡信号的传递,38,细胞的衰老与死亡,细胞凋亡过程中,Caspase,级联效应,a.Caspase,酶原的活化：,Caspase,酶原在特异位点被切割（通常由另一家族成员催化），切割产生的片段聚合形成由,2,个小亚基和,2,个大亚基组成的有活性的,Caspase,四聚体。,39,细胞的衰老与死亡,细胞凋亡过程中,Caspase,级联效应,b.Caspase,级联效应：少量活化的起始,Caspase,能够切割许多下游,Caspase,酶原，产生大量活化的下游,Caspase,，其中执行,Caspase,切割细胞质内及细胞核内重要结构和功能蛋白，导致细胞凋亡。,40,细胞的衰老与死亡,（,2,）,Bcl-2,蛋白家族,(,是线虫,ced-9,的同源物,),根据其功能可以分为两大类,:,抑制凋亡的,Bcl-2:Bcl-2,、,Bcl-xL,、,Bcl-w,、,Mcl-1,能阻止线粒体外膜的通透化，保护细胞免于凋亡。,促进细胞凋亡的,Bcl-2:Bax,、,Bak,，,Noxa,能够促进线粒体外膜的通透化，促进细胞凋亡。,41,细胞的衰老与死亡,（,3,）,p53,基因,(,抑癌基因,),DNA,损伤,p53,活化,p21,基因转录 细胞,阻止在,G1,期,如果,DNA,损伤不能被修复，,p53,持续增,高引起细胞凋亡。,（,4,）,Fas,和,Fasl,Fas,是广泛存在于正常细胞和肿瘤细胞膜表面受体，,Fas,配体,Fasl,主要表达于活化的,T,淋巴细胞，,两者结合将导致携带,Fas,的细胞凋亡。,42,细胞的衰老与死亡,（二）细胞凋亡信号信号通路,43,细胞的衰老与死亡,四、细胞凋亡失常与疾病,（一）细胞凋亡过低导致的疾病,1,细胞凋亡与肿瘤,肿瘤细胞凋亡抑制基因和凋亡活化基因表达异常,如肿瘤细胞常有,p53,基因的突变或缺失、,一般肿瘤细胞高表达,Fasl,，借以凋亡淋巴细胞，,而又低表达,Fas,，而降低凋亡，形成肿瘤细胞,有逃逸免疫及凋亡耐受的特性。,44,细胞的衰老与死亡,2,细胞凋亡与系统性红斑狼疮,由于,Fas,表达缺陷，引起自身反应性,T,细胞的凋亡,功能丧失，导致,T,淋巴细胞凋亡障碍,（二）细胞凋亡过度导致的疾病,1,细胞凋亡与神经退行性疾病,中枢神经系统神经细胞的丧失是各种神经退行性,疾病的病理特点,45,细胞的衰老与死亡,HIV,感染的细胞膜表面可表达,gp120,，其受体,存在于免疫的,CD4,+,T,淋巴细胞膜上，当,gp120,与,CD4,+,T,淋巴细胞结合后，可诱导,CD4,+,T,淋巴,细胞凋亡，导致免疫系统崩溃。,2,细胞凋亡与,AIDS,病,3,细胞凋亡与心血管疾病,动脉粥样硬化、心肌病、急性心肌梗死，以及心力,衰竭中均伴随着细胞凋亡。,46,细胞的衰老与死亡,思考题,1.,简述细胞衰老的主要特征。,2.,什么是,Hayflick,界限,?,3.,细胞衰老与个体衰老的关系如何,?,4.,简述细胞凋亡的形态学特征及其与坏死的主要区别。,5.,简述细胞凋亡的生物学意义。,6.,简述动物细胞凋亡主要的两条信号通路。,7.,何谓,Caspase,家族,?,在细胞凋亡过程中起何作用,?,8.,试述细胞凋亡与医学的关系。,47,细胞的衰老与死亡,推荐阅读资料,1.,美,Leonard P.Guarente,等编著，李电东主译,.,衰老,分子生物学,.,科学出版社,2009,2.,王亚平主编，干细胞衰老与疾病,.,科学出版社,2009,3.,美,Lewin,B,等编著,桑建利，连慕兰等译,.,细胞,.,科学出版社,2009,4.,翟中和,王喜中,丁明孝,.,细胞生物学（第三版）,.,高,等教育出版社,2007,5.,周柔丽,医学细胞生物学,.(,第二版,).,北京大学医学出版,社,2006,6.,易 静 汤雪明 医学细胞生物学,.,上海科学技术出版社,2009,8.Alberts B,Johnson A,Lewis J,et al.Molecular Biology,of Cell.5th ed.New York.Landon.Garland Publishing,Inc,2008,48,细胞的衰老与死亡,Cell,Nature,Science,EMBO,Annual Review of Cell Biology,Cell Research,主要期刊杂志,49,细胞的衰老与死亡,生物学网站,生物谷,of Visualized Experiments,生物网址通,www.bio-