医学寄生虫学9隐孢于虫肺孢子虫.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,隐孢于虫,（,Cryptosporidium,Tyzzer，1907,）,是一种寄生于宿主消化道的球虫类寄生,虫。最早由Tyzzer在小鼠胃腺上皮细,胞内发现并命名。,1976年后，才证实本虫可以感染人体。,隐孢子虫是一种呈世界性分布的，能引起人和动物腹泻的，重要的机会性致病原虫。,已被公认为最重要的人类腹泻的肠道病原体之一。,由本虫引起的隐孢子虫病(cryptosporidiasis)是一种人兽共患病。,种类繁多 至少21种。微小隐孢子虫（C.parvum）,引起腹泻，机会致病，与艾滋病有关。,一、形态,卵囊,呈圆形或椭圆形，直径36,m，囊壁稍厚且光滑，无色，成熟卵囊内含4个裸露的子孢子和由颗粒物组成的残留体（residual body），子孢子为月牙形，大小约1.50.75,m，无孢子囊，核1个，位于虫体后部,。,电镜观察下的成熟卵囊。,在宿主小肠。,子孢子-滋养体-型裂殖体。,型裂殖体,型裂殖体,第2代滋养体-型裂殖体-裂殖子-雌、雄配子体-合子-卵囊。,卵囊,薄壁卵囊-子孢子逸出-侵人肠上皮细胞-自体内重复感染,厚壁卵囊,-随宿主粪便排出体外,完成整个生活史约需5-11天。,厚壁卵囊在外界环境中抵抗力较强，可,在低温或常温下存活数月并保持感染性。,三、致 病,1.致病机制,隐孢子虫寄生在肠黏膜，使肠绒毛萎缩，变,短变粗，或融合、移位和脱落；多种粘膜酶,减少；肠上皮细胞出现老化和损落速度加快,现象。,破坏肠绒毛的正常功能特别是对脂肪和糖类,的吸收功能障碍，导致患者持久腹泻。,为机会性致病原虫。在免疫功能低下或受损,患者，隐孢子虫发育、繁殖迅速，患者发病,急，腹泻程度严重，常表现为霍乱样水泻，,患者甚至死亡。,三、致 病,2.临床表现:,免疫功能正常者，感染后常表现为自限性,腹泻，粪便呈水样或糊状，极少有血样便；,伴有消化道症状，腹痛、腹胀、呕吐、纳,差、乏力等症状。,免疫功能异常的病人，腹泻程度较为严重，,常为持续性霍乱样水泻，伴有剧烈腹痛、,电解质紊乱和营养不良，是艾滋病的主要,致死原因之一。,四、实验诊断,1病原体检查 从病人粪便、,胆汁、痰液或,支气管灌洗液等标本中查得本虫卵囊即可,确诊,。标本可以是新鲜的，也可以经甲醛,固定。经浓缩后的标本在相差显微镜下观,察卵囊为明亮的双折光的圆形小体内含子,孢子和深色的颗粒状的残留体。由于未染,色的卵囊无色透明，且易与标本中的非特,异性颗粒相混淆，故需采用染色方法检查,卵囊。,1,病原体检查,（直接涂片法、浓集法）,常用的染色方法有：,1）金胺-酚染色法 经染色的卵囊，需用荧光显,微镜观察。镜下虫体呈圆形，发出乳白色略,带绿色的荧光，中央淡染；似环状。,2）改良抗酸染色法 染色后，标本的背景呈蓝,绿色，卵囊为玫瑰红色，可见内部结构。本,法缺点为经染色后，标本中存在的非特异性,红色抗酸颗粒易与卵囊相混淆，难以鉴别。,3）金胺酚-改良抗酸染色法 用本法可克服,上述染色法的缺点。本法先用金胺酚染,色后，再用改良抗酸染色法复染。用光,学显微镜观察，卵囊同抗酸染色所见，,但非特异性颗粒被染成蓝黑色，两者颜,色截然不同，极易鉴别，使检出率和准,确性大大提高。,2免疫学诊断方法 有荧光标记单克,隆抗体法和酶联免疫吸附试验检测,病人粪便卵囊或血清抗体。此二法,均有市售试剂盒。两者均有高度的,特性和敏感性。,3分子生物学方法可用核酸探针或PCR检测,粪便中的卵囊。近年新发展了用生物素,等标记的核酸探针结合PCR法检测粪便标,本中卵囊，可检出最底为0.1pg的隐孢子,虫DNA，相当于每克粪便中含有5个卵囊。,分子生物学方法的敏感性和特异性都很,高，特别适用于大样本中少量卵囊的检查。,五流行,(1)传染源：病人、带虫者及病畜。,(2)传播途径：卵囊污染食物、水,源，经口感染。,(3)易感者：人对隐孢子虫普遍易,感，免疫功能低下或缺陷者尤,易感染。,感染率0.38%15.21%,0.92%97%不等。,六防治,(1)治疗病人、带虫者和病畜。常用药物,有大蒜素、巴龙霉素、螺旋霉素等。,(2)加强人畜粪便管理，防止病人和病畜,粪便中的卵囊污染水源和食物。,(3)注意个人饮食、饮水卫生，提倡喝开,水；避免与病人、病畜接触。,4）保护免疫功能低下的人群，增强免疫力。,卡氏肺孢子虫,（Pneumocysis,carinii,Delanoe,et,Delanoe，1912）简称肺孢子虫，广泛存在于人和其他哺乳动物的肺组织内，可引起卡氏肺孢子虫肺炎（pneumosystis carrinii pneumonia,PCP)或称肺孢子虫病（pneumocystosis）。本虫为一种威胁人类健康的机会致病寄生虫。,艾滋病合并卡氏肺孢子虫感染一例,患者男性，40岁，河北人，已婚，,京津高速路某收费站负责人。,主诉,：发热、咳嗽4天，气短、呼吸困难一天。,于1993年6月4日收住人民医院呼吸内科。,查体：,体温38，脉搏128次/分，呼吸42次/分，,血压100/70 mmHg。神志清楚，发育正常，营,养差。急性病容，呼吸困难，口唇紫绀，皮肤,未见黄染及皮疹。全身未触及肿大的淋巴结。,颈部无抵抗。双下肺叩诊呈浊音，听诊可闻及,湿罗音。心律齐，未闻及心脏杂音。腹软，未,触及肝、脾。,实验室检查：,血红蛋白150g/L（正常男性120160g/L）,血白细胞,510,9,/L（正常410,9,1010,9,/L），淋巴细胞（0.4 10,9,/L）。血沉110mm/1h（正常男性15 mm/1h）。,血糖、血钾、血钠、血氯正常。,骨髓涂片未见异常。血培养为阴性。,血气分析：,PaO,2,3020mmHg（正常103.5-0.42年龄mmHg）,X线检查：,两肺呈弥漫性羽毛状和斑片阴影。,住院病程：,经积极抗感染和吸氧等治疗，病情未好转，发,展为呼吸衰竭。气管切开行人工呼吸机维持，患者神志不,清，血压下降，于1993年6月14日呼吸、循环衰竭死亡。,抗HIV抗体检查：,ELISA法，阳性；蛋白印迹确认（报告结果后,10小时患者死亡）。,尸体解剖主要发现：,两肺弥漫性实变，间质性肺,炎，大部分肺泡腔内充满泡沫状蛋白性渗出物，银,染色显示大量卡氏肺孢子虫；肺门淋巴结可见酪,样坏死，少量类上皮细胞和郎罕氏巨细胞。两肾,上腺可见核内巨细胞包含体。,病理最后诊断：,艾滋病患者，继发肺卡氏肺孢子虫,病，肺门淋巴结结核，巨细胞病毒感染，因卡氏肺,孢子虫性肺炎导致呼吸、循环衰竭死亡。,1909,年Chagas 在枯氏锥虫感染的实验豚鼠肺印片中发现.,1912年Delanoe夫妇在大鼠肺部发现并定名为卡氏肺孢子虫.,(,Pneumocystis carinii,),卡氏肺孢子虫病（pneumocystosis,）,属孢子虫纲，16s rRNA序列分析，不典型真菌，位于子囊菌和担子菌之间.,世界各地均有分布，一般认为经空气传播。,本病为艾滋病患者常见并发症和主要致死原因之一.,1952年Vanek和Jirovec在患有间质性肺炎的死亡病儿肺渗出液中查到该虫体,（,卡氏肺孢子虫肺炎,Pneumocystis carinii,pneumonia,PCP,）,主要寄生在人或哺乳动物的肺泡、肺泡上皮细胞或肺泡间隙中.,可引起间质性浆细胞性肺炎。,生活史中分,包囊,和,滋养体,两个阶段,一、形态,滋养体、包囊前期和包囊。,1、滋养体外形：,在姬氏染色标本中，滋养体呈多态形。,2、滋养体大小：,小滋养体11.5m,大滋养体28m。,3、滋养体细胞结构：细胞核1个，深紫色；细胞质淡蓝色。线粒体、核糖体、内质网及空泡、糖原。,4、包囊前期：,35m，形态多变。,5、包囊形态：,形状：呈圆形或椭圆形，,包囊细胞结构：经姬氏染色的标本，胞质为浅蓝色，胞核为深紫色。囊壁不着色，透明似晕圈状或环状，成熟包囊内含有8个香蕉形囊内小体intracystic bodies），各有1个核。,大小：,直径为46m，,包囊，内有8个囊内小体，Giemsa染色,二、生活史,三、致病,健康人感染本虫多数为隐性感染，无症状，当宿主免疫力低下时，处于潜伏状态的本虫即进行大量繁殖，并在肺组织内扩散导致间质性浆细胞性肺炎。肺组织的泡沫状渗出物为肺泡内蛋白性渗出伴脱落变性的肺泡细胞，少量巨噬细胞、虫体的滋养体和包囊等。,卡氏肺孢子虫感染,隐性感染,临床表现：,间质性肺炎.,婴儿型（流行型）,：早产儿、体质虚弱和营养不良的婴儿,成人型（散发型）,:先天性免疫缺陷病、艾滋病、,恶性肿瘤或长期使用免疫抑制剂等病人,PCP,是艾滋病病人最常见的并发症在美国有60%80艾滋病人合并,PCP,（儿童高于成人）。,AIDS中PCP临床起病隐匿，常为潜在性，进展较为缓,慢，从发病到呼吸功能不全大约需要数周。,主要症状有发烧、干咳、呼吸困难和紫钳，最终发展,为弥漫性两肺肺炎。,重症患者如诊断不及时，26周内死亡，,病死率极高。有的病程短促，可于发病后48天内死亡。,AIDS患者PCP的临床表现,Pathogenesis,PCP来源于潜伏感染的再次激活,肺孢子虫进入健康人体,长期潜伏于气管、支气管或肺泡腔内（隐性感染）,病原体开始繁殖，产生大量滋养体和包囊,（宿主免疫力低下时）,肺组织内迅速扩散导致PCP,宿主对肺孢子虫感染的防御,以细胞免疫为主其中T细胞起很大作用,CD,+,4,细胞通过细胞因子激活肺胞巨噬细胞,肺胞巨噬细胞吞噬滋养体和包囊,HIV 感染者因CD,+,4,细胞功能低下而增加了PCP的发病危险。,（CD,+,4,细胞 200/ul，就可能发生PCP。）,四、诊断,（一）病原学诊断,可收集痰液或支气管分泌物涂片镜检，但阳性率很低，应用支气管冲洗术可提高检出率。也可进行经皮穿刺肺活检、支气管镜肺活检或开胸肺活检，这些方法虽可靠，但损伤大。,A:,3 cysts in bronchoalveolar material,Giemsa stain;the rounded cysts(size 4 to 7 m)contain 6 to 8 intracystic bodies,whose nuclei are stained by Giemsa;the walls of the cysts are not stained;note the presence of several smaller,isolated trophozoites,.,B:,cysts in lung tissue,silver stain;the walls of the cysts are stained black;the intracystic bodies are not visible with this stain;baby who died with pneumonia in California.,支气管分泌物涂片，显示包囊，甲笨胺蓝染色,（二）免疫学诊断,常用方法为IFA、ELISA或补体结合试验。但由于大多数正常人都曾有过肺孢子虫隐性感染，血清中都有特异性抗体存在，故检测血清抗体的方法一般不用于肺孢子虫病的诊断。,近年来，DNA探针、rDNA探针和PCR技术等已试用于肺孢子虫病诊断，显示有较高的敏感性和特异性。,血清学诊断,(Serological diagnosis),分子生物学诊断,（Molecular diagnosis）,PCR及DNA探针技术应用于检测肺孢子虫病的诊断,常用方法:免疫荧光法、免疫组织化学法及ELIAS等。,五、,卡氏肺孢子虫的流行,本病呈世界性分布，一般认为包囊经空气传播是该虫的传播途径。,在正常人群中血清流行病学调查中发现，有110呈隐性感染。,血清抗体检测发现，在4岁以下儿童中有75%抗体阳性。人类的带虫状态可持续多年，提示肺孢子虫携带者可能为本病传染源。,1979年报告了国内首例肾移植术后合并PCP的成人患者。至2000年底，我国大陆报道已超过百余病例。发病人数呈明显上升趋势。,六、防治原则,本病如得不到及时治疗，死亡率很高，如及早治疗则可有6080生存。常用药物有戊烷脒，乙胺嘧啶及复方新诺明。目前国内多数医院治疗白血病时加服磺胺噻唑（ST）合剂，对预防并发卡氏肺孢子虫肺炎有良好效果。,