第14章中药鉴定学.ppt

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,1 中药鉴定学的含义和任务,鉴定中药的品种和质量,制定中药标准,寻找和扩大新药源的应用学科。,“保质寻新,整理提高”,总论,1.1鉴定中药的品种质量,1.1.1品种,中药中泛指物种，物种不同、成分不同、疗效不同。一定品种的中药,是中医治病的物质基础。,“虽有良医而药味为伪药,则良医无济于事”，,影响质量的首要因素。,1.1.2 品种混乱的原因：,以假充真,1982年陕西省对县以上药材系统523个单位调查，全省“伪品”26种，混淆品、误用品143种，35个县销售的巴戟天是羊角藤，22个县的乌梅均为苦李子和山杏1995年元月，我们在汉西发现十九种中药混淆品，包括收存的金钱白花蛇、丹皮、土茯苓、五灵脂、前胡等的伪品。,多源现象,石斛,同属,10余种,大黄 同属 3种,川贝母 同属 4种,1.1.3 品种是变化的,物种的本质具有二重性。,种既存在又不存在：,一方面按形态和生殖的不连续性标准划分的种在自然界有一定普遍性，另一方面至今还没有一个把所有有机体都划分成统一的生物学单位的不连续性标准。,种是又间断又连续的，连续的部分发生在种和种的交叉处，变异是多元化的，中间过渡的。,在生态环境改变的情况下品种也发生变化，优劣是量变，真伪是质变。,1.1.4 质量：地道药材品种退化、有效成分含量、杂质和有毒物含量、霉变程度。,地理变化,内蒙黄芪栽培在河北，分枝多，柴性大，甜味低。,生态变化,柴胡栽培，主根小，须根多，柴性大，显微结构改变。,不当加工,苦参水泡切制提不出苦参碱,伪制假药：,五味子提取了浸膏,金银花粘附杂质40%,海金砂含灰砂30%,没药含树皮、砂石要求10%，广东销毁一批，杂质30,1.1.5 中成药鉴定,显微鉴定,针对含有中药材粉末的成方制剂，借助显微镜观察检品种是否含有各组分中药材的粉末。,理化鉴定,对待检中成药中主要药物的有效成分进行光谱或色谱分析，检验是否含有其有效成分及含量的多少。,1.2 继承遗产，整理品种,1.2.1 本草考证，理清源流,几千年来，我们积累了三千多种中药的宝贵药学史料，它是指导现代用药的基础。但古代文献浩如烟海，有些又难免出错，需要本草考证及研究。,虎掌和南星纲目上为一物，根据调查:虎掌为半夏属掌叶半夏，含多量生物碱，为治疗宫颈癌的南星品种;,天南星为天南星属 天南星、东北天南星、异叶天南星.,现已把它们列为不同品种中药。,1.2.2 整理品种，澄清混乱（一物一名）,我国幅员辽阔，品种繁多，各地用药习惯和名称不尽相同，同名异物，同物异名现象严重，亟待整理。,贯众6科 35种,绵马贯众 含绵马酸类 杀虫效好,紫萁贯众 含促脱皮甾酮，促进代谢,金钱草、连钱草、广金钱草等,1.2.3 研究调查，继承发展。,参考本草，不唯本草，不以本草为唯一尺度,青蒿菊科青蒿和黄花蒿，青蒿不含青蒿素，90药典删去。,茵陈：茵陈传统用苗，但花蕾期利胆有效成分6.7 二甲氧基香豆素和茵陈色酮等含量高，现茵陈蒿与茵陈（苗）同入药。求同存异，,现代与传统共存，新苗与老茎共存。,1.3 研究和制定中药质量标准,1、药品管理法,1984.9.20 颁布 1985.7.1实施,2001.2.28修订 2001.12.1实施,2、中药质量标准,中药标准含义：,是国家对中药质量及其检验方法所作的技术规定，是中药生产、经营、使用、检验和监督管理部门共同遵循的法定依据。,制定原则：安全有效、技术先进、经济合理,适用范围：新中药材、新中成药、老药再评价,标准和政策,1994年 卫生部药政局 中药新药研究指南（药学、药理学、毒理学）,1999年 国家药品监督管理局 中药新药研究的技术要求,2002年12月1日实施 SFDA 药品注册管理办法,现阶段我国中药材及中药制剂的质量控制,主要依据中华人民共和国药典(一部)规定的常规方法进行,包括性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、薄层色谱鉴别等,只是部分药材和制剂有1个或数个指标成分的含量测定方法.从目前情况看,仅靠这些方法在许多情况下并未能达到较好控制中药质量的目的,如在使用已批准生产的中药注射剂中常有产生不良反应的现象,这与制剂质量控制方法不规范,从而造成制剂质量不稳定有密切关系。,中药指纹图谱具有整体、宏观和模糊分析等特点,可以通过对中药整体特性的描述,采取适当模糊的处理方式,达到整体质量控制的目的。,以指纹图谱作为质量控制方法已成为目前的国际共识。根据所用方法的不同将指纹图谱分为三类：色谱指纹图谱、光谱指纹图谱和DNA指纹图谱。,为实现中药质量标准现代化并与国际接轨,国家食品药品监督管理局已下发了中药指纹图谱研究要求,首先要求对中药注射剂进行指纹图谱研究,并正在抓紧进行指纹图谱库的建立工作,以逐步实现中药材、中成药质量标准现代化。,中药质量控制方法研究的必然模式:将全成分指纹图谱和效标成分定性定量测定相结合,建立起符合中医用药特色规律的中药系列质量控制统一智能方法系统.,1.4 寻找和扩大新药源,1.4.1 中药资源,1.4.1.1 天然资源,（1）品种丰富,据中国药材总公司历时10年（1984,1994），动用4万人的调查表明，我国药用植物、动物12807种。其中药用植物11146 种(约占87%),药用动物1581 种(约占12%),药用矿物80 种(占不足1%),（中药大词典1977，5800,6000种，植物5000）,320种大宗植物药、29种动物药，总蕴藏量850万吨，野生资源是最宝贵的资源。,甘草、麻黄、独活、冬虫夏草来自野生植物,蟾酥、斑蝥、蜈蚣、蟑蜕来自野生动物,石膏、芒硝、朱砂、自然铜来自天然矿物,（2）发现了原完全依靠进口的野生资源如胡黄连、马钱子、安息香、沉香、广木香、阿魏。,1.4.1.2 中药生产,各地常规经销品种600种，家种大宗药材150种，可提供的种植面积480万亩，年产量30,35万吨。,（1）进口引种成功，砂仁、肉桂、丁香、广木香、柯子、豆蔻。,（2）蛤蚧、金钱白花蛇，梅花鹿、全蝎、珍珠养殖成功。,（3）产量超万吨的有当归、茯苓、生地等。,（4）合成中药：冰片、人工牛黄、,人工培育牛黄,。,1.4.1.3 地道药材,天时、地利、人力（家种+野生）,内蒙：黄芪、甘草,吉林：人参、鹿茸,辽宁：细辛、五味子,甘肃：当归、大黄,山西：党参,山东：北沙参、金银花,广西：蛤蚧,青海：大黄,江苏：薄荷,宁夏：枸杞子,安徽：丹皮、芍药,云南：三七,福建：泽泻,广东：砂仁、槟榔、益智、巴戟天,河南：山药、牛膝、红花、地黄,浙江：玄参、浙贝、麦冬、杭菊、郁金、玄胡、白芍、白术,四川：黄连、附子、川贝、川芎、川乌、川黄柏,1.4.1.4 药食两用动物,“新三鸡”（乌骨鸡、珍珠鸡、七彩山鸡）,新三鸟（鹧鸪、鹌鹑、肉鸽）,新三龟（草龟、金钱龟、金头龟）,我国出口的药用营养型动物有乳鸽、甲鱼、黄鳝、泥鳅、鳜鱼、墨鱼、草鱼等近百种，尤其活甲鱼、金钱龟、桂花鱼、活黄鳝、活泥鳅最为抢手。,一是动物类药材需求急剧增长，二是野生药用动物资源日趋枯竭，标志养殖药用动物的黄金时期到来。,珍珠养殖仍然是中药生产的重要产业。,据预测，今后较长时期营养型药用动物价挺货紧，大力发展药用动物前景广阔。,1.4.2寻找和扩大新药源的途径,以亲缘关系为线索：,根据生物科属亲缘相近，一般含有近似成分的规律，寻找类似疗效的中药。,进口阿魏、马钱子、沉香国内,东北满山红（兴安杜鹃）治气管炎，西北小叶枇杷（烈香杜鹃）广东紫花杜鹃，疗效类似；,贝母属，新疆贝母、伊犁贝母、平贝母、湖北贝母均润肺平喘。,人参、三七、西洋渗、珠子参含人参皂甙（股胶兰）；,湖北麦冬，短葶山麦冬多糖和皂苷含量与麦冬相近，但抗缺氧和免疫功能与麦冬相同或更优,一筹，“山麦冬”95进入药典。,以有效成分为线索：,薯蓣皂甙元薯蓣属穿龙薯蓣、黄姜、,粉萆薢（粉背薯蓣）尚有绵萆薢和福州薯蓣。,芸香科黄柏属、毛茛科唐松草属、小檗科小檗属均可作小檗碱的资源植物。,岩白菜素为紫金牛科紫金牛中所含有的镇咳成分，该成分首次发现于虎耳草科岩白菜中，后从虎耳草科筛选，发现落新妇属含量较多。,青黛菘蓝、蓼蓝、马蓝 叶制成。,以药理和临床疗效为线索：,五味子,垂盘草等,扩大药用部位：,乌龟腹甲（龟板）背甲+腹甲（龟甲）,老药新用：,丹参、川芎、葛根、山楂、三七、银杏叶心血管疾病,人工栽培、养殖：,野转家 射干,金钱白花蛇、鹿、麝、蜈蚣、蝎、土鳖虫。,人工合成，代用品研究：,人工牛黄、体外培育牛黄天然牛黄,新阿胶驴皮胶,组织培养、生物工程：,紫杉醇（生物技术）,1.4.3中药资源保护,地大物博、物产丰富、品种繁多,数量减少迅速，种群繁殖困难，濒危品种增加。,全球性原因：热带森林破坏严重（马达加斯加，90%森林被毁），20年前地球上每天消失一个物种，今天每小时消失一个物种。,地区性原因：,1）,生态环境破坏严重，人口耕地沙化水土,2）,野生动植物保护意识差，法制不健全,。,发达国家海洋动物(鲸、海豹等）限捕，陆地野生动物一般禁捕。,我国野生药用动物原来大量捕杀，熊、虎、蛇类、麝,一级珍稀动物鼋当鳖卖（晴川饭店94.8购鼋80公斤，置冰库内，仅对晴川罚款21960元，售出单元红卫水产未处罚）,3）,不科学的滥采滥伐,野生珍稀植物在未大量栽培前，不得进入制药工业应用（保护企业、保护植物）。,问题：,1、为什么说物种是具有二重性？,2中药鉴定学的任务是什么？,3、寻找和扩大新药源的方法有哪些？举例说明。,4、影响中药质量的因素有那些?,2 中药鉴定学发展史,2.1 古代文献,诗经关于植物药记载约50种,山海经大体动物61、草木52、矿物3。一般都有产地、形态、治疗及个别特点。,最早的药物学专著,神农本草经,，成书秦汉时期，载药365种。,梁代陶弘景,以神农本草经和名医别录编成,神农本草经集注，载药730种,.,神农本草经集注首先使用按自然属性分类的方法。,我国第一部药典性质的本草，唐新修本草，载药850种。,附图经7卷，药图22卷，,首次出现了图文鉴定的方法,。,现存最早的完整本草,经史证类备急本草,，又称“政和本草”、大观本草”,，,简称证类本草,，为宋唐慎微（1082年）编写，载药1746种，新增628。,重大贡献的本草纲目，明代李时珍,编写,，,载药1892种，,在“证类本草”的基础上编写,。,按药物属性进行分类，如植物药草类分为：山草、芳草、湿草、毒草、蔓草、水草、石草、莓草、杂草等，将高良姜、豆蔻、缩砂密、益智等排列属芳香类，这是自然分类的先驱；,对性状有较精细的观察，校正历代本草的一些错误，“以兰花为兰草，卷丹为百合合，此寇氏衍义之舛谬，谓黄精即钩吻，旋花即山姜，乃陶氏别录之差伪。,总结历代用药经验和知识，并加入自己的试验。,新增药物为三七、曼陀罗、大风子、烧酒、葡萄酒、樟脑等，仍是医学上很有价值的药物。,“纲目”对中外医学和生物学有很大影响，17世纪传到国外，翻译为多国文字。,版本：,（1）,1598年胡承龙金陵版，为各版祖本,。,夏良心版（江西版）与金陵版同,，,1977、1981年人卫的纲目,的校正本即以夏良心版为底本。,（2）钱蔚起版对金陵版附图全面修改，部分失真69%。,（3）张绍棠版，许多植物种类完全改掉，使纲目大大失真。1957、1963人卫彩印本即以张绍棠本为底本。,清乾隆年间（1765）赵学敏本草纲目拾遗,，拾遗补正纲目载药921种，新增药物716，为冬虫夏草、鸦胆子、银柴胡、浙贝母。,道光年间（1821）吴其,濬,植物名实图考1714种，植物名实图考长编838种,植物附形态、产地、性味、用途、插图，属药用植物专著。,2.2 近、现代研究概况,2.2.1 国内中药鉴定学发展概况,1、研究、仲裁管理机构,研究机构：中医药研究院和所,仲裁管理机构：药品检验所（中国药品生物制品检验所），药品食品监督管理局（SFDA）,2、法典、文献、教材,法典：,中国药典、部颁标准,文献：,生药学上编（1933），赵橘黄、徐伯均,生药学下编（1937），叶三多，徐伯均,中国药用植物志1955-1965，裴鉴、周太炎,药材学，徐国均、药材634种，生产、鉴定、应用,中药志第二版册（1979、1982、1984、1988、1994、1998）,中药大辞典（老1977、新1998上、下册,新华本草纲要（1988、1990、1991）,中药材品种论述谢万宗,中药鉴别手册（1972）上、中、下册,中国药用植物志八册,中国药用动物志,常用中药材品种整理和质量研究 南方组：徐国均；北方组：楼之岑,中药材手册（1957、1990）,药材学（1960）上、下册 中国药材学（1998）徐国均,生药学楼之岑,中药材粉末显微鉴定（1986）徐国均 380种,中成药显微分析 （1997）徐国均 200种,（3）教材,1977年出版 中药鉴定学 第一版 成都中医学院主编,1980年出版 中药鉴定学 第二版 成都中医学院主编,1986年出版 中药鉴定学 第三版 任仁安主编,1996年出版 中药鉴定学 第四版李家实主编,2003年出版 中药鉴定学 第五版 康廷国主编,2.2.2 国外生药学发展概况,美国、德国、法国、英国、日本研究概况,形态学解剖学植物化学生物化学和分子生物学,2.3 中药鉴定学研究,中药材和中成药质量标准研究,中药鉴定新技术、新方法研究,中药材GAP研究,中药资源开发研究,3 中药的采收、加工和贮藏,3.1中药的采收,3.1.1 采收与质量的关系,李杲谓：,“凡诸草，木、昆虫产之有地；,根、叶、花、实，采之有时。,失其地则性味少异，失其时则气味不全。”,“春采茵陈夏采蒿，知母黄芩全年刨,九月中旬采菊花，十月上山摘连翘”,性状：,冬麻、质重，春麻、中空。,党参第二年9,10月茎苗枯萎时，浆水充足，肥大，白露前生长缓慢，生物碱8,9月最高。,成分：,草麻黄 8,9月，生物碱含量最高。,甘草 甘草甜素 生长初期65%,开花前期10%,盛花期4.5%,开花末期3.5%,洋地黄叶 强心甙 夜间（部分水解）,日照含量回升,槐米：含多量芦丁，开花、结果则下降。,根据成分、动态积累,3.1.2 各类药材一般采收原则,根和根茎类：,地上部分将枯萎（秋）或春初刚露苗时采，此时贮存营养物最丰富，有效成分最高，倒苗较早的在夏末采收。,茎木类：,秋冬,关木通、大血藤、首乌藤、忍冬藤（藤茎）,全年,苏木、降香、沉香（心材）,皮类：,多数春末夏初，如黄柏、厚朴、秦皮，,此时形成层分裂快，伤口易愈合；,少数秋冬，如川陈皮、肉桂，此时成分含量多。,叶类：,开花前或果实未成熟前，,春夏光合作用旺盛期采如艾叶、臭梧桐叶。,桑叶：冬季,花类：,花蕾,金银花、槐花、辛夷、丁香,初花,洋金花、金花（蒲黄、松花粉）,盛花,菊花、西红花,果实、种子类：,幼果枳实、青皮,近成熟瓜蒌、栀子、山楂,成熟经霜山茱萸（变红）川楝子（变黄）,种子成熟果实的种子,全草：,幼苗绵茵陈（秋季 茵陈蒿）,茎叶盛时青蒿、穿心莲、淡竹叶,开花益母草、荆芥、香薷,3.2 中药的加工,3.2.1 加工的意义,通过加工 促使干燥，保证质量，建立形象，便于运输。,3.2.2 加工的方法,（1）拣、洗 拣除去外药用部位洗去泥沙，种子须筛去果壳。芳香药材不用水洗。,揉搓打光，如党参、光山药等。,（2）切片增值,便于干燥，缩小体积，便于运输,大黄切块，鸡血藤、木通、大血藤，山楂、木瓜等切片。,挥发性成分，易氧化的成分不宜切片，如当归、川芎、槟榔、麻黄。,（3）煮、蒸、烫：含浆汁、淀粉的药材不易直接干燥，须经烫煮。,烫煮可防虫卵，易于保存。,白芍、明党蒸至透心,天麻、红参蒸透,太子参略烫,黄精、玉竹、熟地熟制起滋润作用,（4）熏硫：山药、白芷、川贝母，使色泽洁白，防止霉烂。,（5）发汗：厚朴、杜仲、玄参、续断,（6）干燥：含挥发油类、花草、叶类、全草类或易变色、变质的药材，均不易烈日下暴晒或高温下烘干，均应阴干烘干的温度以50,60为宜，对成分无影响，又能抑制酶活动。多汁果实类可7090干燥。,3.3 中药的贮藏,3.3.1 贮存中的变质现象,（1）,虫蛀：多种害虫，其中螨为害最大。螨属节肢动物门、蛛形纲、蜱螨目中的小动物大小介于0.3,1mm，种类很多。药材和中成药都可寄生，染有螨的药物使之短期内发霉变变，服后引起消化系统、泌尿系统、呼吸系统的疾病。螨类及虫卵的检查，螨类生长适宜温度25，相对湿度80%以上，最旺时间58月，害虫1635。,含脂肪油（苦杏仁、桃仁、柏子仁），淀粉（白芷、山药、薏苡仁）；蛋白质（金钱白花蛇）易虫蛀。,含辛辣成分的药材一般不易虫蛀，如胡椒、花椒。,（2）,生霉：黄曲霉菌黄曲霉素B1最小，在紫外光（365mm）下有荧光反应，薄层层析展开，荧光下观察可以鉴定。,（3）变色：贮存不当或贮存过久。,（4）走油：,贮存不当油分外溢（如柏子仁）或,在受潮、变色、变质后表面呈现的油样变化。,含脂肪油（杏仁、桃仁）、挥发油（当归、肉桂）、糖类等（天冬、枸杞）成分的药材，也会“走油”。,走油的原因与温度过高，贮存日久，长期日照，与空气接触引起变质有关。,（5）其它：,自然分解 如绵马、番红花,挥发 樟脑、冰片，含挥发油类药物,风化 芒硝、胆矾,3.3.2 贮存注意事项,（1）仓库管理：,入库检查：污染严重的不入库,定期检查：,分库保管：贵重、毒剧、动物类,科学配置：丹皮与泽泻放一起，泽泻不虫蛀，丹皮不变色。,（2）虫害防治：,氯化苦，25以上自然挥发，有效杀虫剂，剧毒、戴防护面具。,溴甲烷,（3）气调养护：塑料帐内充入N,2,或CO,2,有的地区经验：在一定温度湿度下可有效杀死螨类。,（4）其它：,A、大枣+盐贮存，交互层列，10：1，盐可回收,B、远红外线烘烤后取出，同上,C、自然低温防治仓库害虫，高温时用化学方法，低温室外零下几度，冻死害虫,中药通报，1988(11):16,D、十一种动物药（海马、海龙、蕲蛇等）,95%乙醇（10:1）吸尽鼓风加热浸润,加花椒、樟脑50g入塑料袋密封，再入容器封装,中药材1988(2):33,4、中药鉴定,4.1,鉴定的依据程序和中药拉丁名,4.1.1,药典和其它国家标准,（1）中华人民共和国药典简称中国药典,1953、1963、1977、1985、1990、1995、2000、2005,除第一版，均分为一、二部，第一部收载中药材和成方制剂,（2）中华人民共和国卫生部药品标准简称部颁标准,1963；1992部颁标准 中药材第一册,部颁进口药材标准（未公开发行）附于宁夏标准1993,（3）地方药品标准（已取消，仅供参考）,省、自治区、直辖市药品标准,4.1.2 鉴定的程序,（1）取样：,核对标签：品名、产地、批号、规格、等级、包装或标志是否相符。,检查样品完整性，清洁程度、水迹、霉变、污染状况。,取样注意代表性，大批药材，不但各包件可能有差异，同一包件中不同部位也可能有差异，选择不同包件，包件的不同部位取样，贵重药材逐件取样。,取样量=鉴定用量+留样量（复核、重复分析）,个大1kg 个小种子类510g,（2）鉴定,（3）检验报告,4.1.3 中药拉丁名,中药有了拉丁名，可进一步统一中药名称，防止混乱，,有利于对外贸易和国际学术交流。,药用部位（第一格）+药品（第二格）,Rhizoma Coptidis 黄连,Folium Eriobotryae 枇杷叶,Flos Carthami 红花,Semen Strychni 马钱子,Calculus Bovis 牛黄（,Bos Taurus domesticus,）,（1）一属中只有一个品种入药，或一属中有多品种作一种药，一般用属名。,（2）一属中不同品种作不同药材时，除一种外，均需加种名,Radix Angehicae Sinensis 当归,Radix Angelicae Pubescentis 独活,Herba Asari 细辛,Herba Asari Forbesii 马蹄细辛（杜衡）,（3）药用不同部位入药或不同属植物入药加et（和）seu（或）,Radix et Rhizoma Rhei 大黄,Herba Erodii seu Geranii 老鹳草,（4）拉丁名中的形容词位于最后,Semen Armeniacae Amarum（苦杏仁Semen Sojae Preparatum（淡豆豉）,（5）习惯用法,Poria（茯苓）、,Moschus（麝香）、,Aloe（芦荟）、,Catechu（儿茶）、,Mel（蜂蜜）、,Scorpio（全蝎）,Pericarpium Granati（石榴皮、用种名）；,Polyporus（猪苓）,4.2,鉴定方法,四大鉴别，各种方法有其特点和适用对象，如全草、根、粉末；有时需几种方法配合运用。,4.2.1,来源鉴定,观察植物形态,观察特征，采集有花果标本。单纯靠营养器官是不够的，有时易得出错误结论。重点采集完整繁殖器官。,核对植物学文献,植物志、图鉴、植物分类学报、补编，必要时查对原始文献,核对标本 最好到植物所,注意同种植物在不同生长期的形态差异，必要时请专家协助鉴定。,4.2.2,性状鉴定,宏观观察方法，观察的深度与分析水平，思想框架有关。,形状：形状一般较固定，注意经验鉴别术语，“蚯蚓头”“枣核艼”,大小：种子果实变化幅度较小，沙苑子2.5mm，草沙苑3mm。,颜色：海金砂棕红色、掺砂呈淡棕色,表面：（光滑程度），有无毛茸（叶、果、种子），皱纹、鳞毛（金毛狗脊）,质地：指软硬、坚韧、疏松、致密、粘性、粉性等程度。,南沙参质轻松，断面裂隙“松泡”；,山药，含淀粉粒多，折断淀粉容易飞扬“粉性”；,当归，柔软，含油而润泽“油润”；,郁金，经蒸煮加工，质硬，断面透明有光泽“角质”,断面：与结构有关,淀粉粒多平坦；,纤维多纤维性；,石细胞多颗粒性；,纹理：形成层环、单子叶结构、双子叶结构、菊花心、筋脉点、车轮纹、罗盘纹,气味：强烈刺激性和毒性药材，口尝要小心，尝后吐出，嗽口和洗手。,麻舌的药材：南星、半夏、乌头、一支蒿,水试：,西红花黄色,秦皮碧蓝色荧光,葶苈子、车前子、光明子加水体积膨胀、种子粘滑,火试：,海金砂燃烧有爆鸣声，且有闪光,青黛燃烧有紫色烟雾,4.2.3,显微鉴定,制片方法：,横切片、纵切片（徒手、滑走、石蜡切片）,粉末片、,表面片、,组织解离制片、,矿物磨片,封藏试剂：,水、稀甘油、斯氏液：观察淀粉粒、油润、菌丝,水合氯醛：观察组织、晶体；溶解淀粉粒、蛋白质、叶绿体、树脂、挥发油，使收缩膨胀。,5%KOH切片清洁液：溶解淀粉粒、蛋白质，使之膨胀，增加透明度。处理后应立即洗去碱液，封藏，以免长时间破坏组织。,等量乙醚乙醇液：脱脂剂，除去种子中脂肪油、挥发油及树脂等，观察糊粉粒；,氯化碱液 漂白剂 甲：100g Na,2,CO,3,250ml +乙：100gCa-Cl-ClO750ml，对颜色浑暗的切片可漂白，除去叶绿素等,细胞壁和细胞内含物的检查：,木化 浓盐酸+间苯三酚 红色,纤维素 氯化锌碘液 兰或紫色,淀粉粒 I,2,兰色,糊粉粒 Hg(NO,3,),2,砖红色,油滴 苏丹,红色,草酸钙 50%H,2,SO,4,针状结晶（硫酸钙）,碳酸钙 HCl 溶解+CO,2,+CaCl,2,硅质块 HF 溶解 CaF,2,粘液质、树胶 钌红试液 染成红色。,扫描电镜 超微分析,立体感、真实感强，丰富显微鉴定内容,花粉粒、种子表面具有分析价值,4.2.4,理化鉴定,1、物理常数测定（比重、黏稠度、硬度等）,比重蜂蜜1.349以上，,薄荷油0.890.91;,竹黄 粉末（过4号筛）10g 体积不得少于35ml（轻泡）,2、膨胀度 S=,V,/,W,每1g药材在溶剂中的体积ml数,北葶苈子（12）南葶苈子（3）,3、色度：检查白术走油情况,精密称取最粗粉2g，置具塞烧瓶中，加55%乙醇50ml，用稀盐酸调节PH2-3，振摇1小时，离心（每分钟4000转）15分钟，吸取上清液10ml，置比色管中，与同量的对照液（此比色用FeCl,3,液,5ml，C,O,Cl,2,液,3ml，CuSO,4,液0.6ml，用水稀释成10ml制成），同置白纸上，自上面透视，显色不得较深。,4、（泡沫指数）溶血指数：用标准皂素比较,溶血指数应说明温度和动物血，以能产生溶血的最低浓度说明之。,5、微量升华：,大黄素、丹皮酚、安息香酸,属于显微化学反应，迅速提取出来，进行有选择的反应,6、荧光反应：,黄连木部金黄色荧光,秦皮 日光 天蓝色荧光,银柴胡醇溶液 篮色荧光,芦荟水溶液 硼纱 绿色荧光,7、显微化学反应：,柴胡横切片 无水乙醇硫酸 黄绿绿色篮色（柴胡皂甙）次生韧皮部以外）,黄连粉末 95%乙醇+30%HNO,3,小檗碱针簇状结晶,8、一般测定：,灰分测定：,生理灰分：将中药粉碎高温炽灼，其细胞组织及其内含物形成的灰分。,总灰分：药材生理灰分+所附无机残渣,酸不溶灰分：药材灰化后，用10%HCl洗涤，所得灰分。,生理灰分中 CaSO4含量多且差异大，用HCl除去，生理灰分中的钙盐，总灰分中泥沙、杂质等硅酸盐保留，以评定质量。,水分测定：9%11%13%15%,浸出物测定：党参 45%乙醇55.0%,挥发油、总黄酮、总皂甙、总鞣质测定,9、指纹定性分析,TCl、UV、IR、GC、HPLC,10、含量测定,薄层扫描、HPLC、GC、UV,11、有害物检查,有机氯农药DDT、BHC（六六六）；,有机磷农药,黄曲霉素 溶于CHCl,3,、MeOH 不溶于乙烷、乙醚、石油醚 有强荧光,12、微量元素分析,游离态有机络合体,4.3,中药鉴定的难点和空白,同一药材 同属不同品种的鉴别，其性状、结构相似。,如党参属、沙参属、钩藤属、石斛属、黄精属的药材,同种药材不同地区产品的鉴别,薄层色谱鉴别和含量测定只一小部分,动物药提取物的鉴别,如阿胶、龟板、蛇胆,未知药材鉴别及检索,已知形状、结构、粉末、它的药名或范围,未知粉末鉴别,4.4,中药鉴定新技术、新方法,色谱法,色谱法是在20 世纪初产生,于60 年代开始用于中药分析,经逐步完善最后列入1977 年版中国药典,且在以后各版药典的中药和成方制剂中的应用比例迅速上升,成为中药鉴别最主要的方法之一.色谱法包括:薄层色谱法(TLC)、薄层扫描法(TLCS)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、气质联用法(GC-MS).,光谱法,鉴别中药的原理:选择某一波段波长,以此通过中药的粉末或提取液,测定中药对这一波段波长的吸收并记录其吸收光谱.光谱法包括:紫外光谱法(UV)、导数光谱法(DS)、红外光谱法(IR)、荧光光谱法(FP)、核磁共振波谱法(NMR)、质谱法(MS).,X 射线衍射法,当对某物质(晶体或非晶体)进行衍射分析时,该物质被X 射线照射产生不同程度的衍射现象,物质组成、晶型分子内成键方式、分子的构型、构象等决定该物质产生特有的衍射图谱.X衍射图谱分析可以给出待测中药材全体成分的衍射图形及衍射峰值,将衍射信息进行傅里叶变换,可获得每一中药的较为简单且又能反映药材整体结构特征的图谱.该方法适用于结晶度较强的矿物类药和部分动植物类药的鉴别.,近红外漫反射光谱技术,近红外光谱包含了大多数类型有机化合物的组成和分子结构的信息.借助于化学计量学中的多元统计、曲线拟合、聚类分析、多元校准等方法定标,将其所含的定性、定量信息提取出来.能够用于中药材的鉴别.,扫描电镜技术,是一种超微鉴定方法.扫描电子显微镜的分辨率较光学显微镜高数万倍,能够观察药材表面的细微特征,而且立体感强,样品制作简单.目前主要应用于药材花粉粒、叶表面、种皮表面的鉴定研究.,热分析法,是研究样品及参比物在相同环境下等速加温时,两者的温度与时间或与加热温度的变化关系的方法.分析的结果用热谱图表示,比较两者热图谱的差异,以达鉴别中药的目的.,按分析内容分为:,热重量法(热量法TG)、,差示热量分析法(差热分析法DTA),差示扫描量热法(差动法DSC),在中药的鉴别分析中,差热分析法最为常用.,电分析法,示波极谱法:中药提取液中所含的化学成分,有的是电活性物质,利用示波极谱滴定仪可测得其dE/dt-E曲线,不同药材其曲线上出现切口和示波图形是不同的,可达到鉴别目的.,等电点法:通过测量氨基酸的等电点来鉴别蛋白质类中药.,电泳技术,中药中的一些带电荷的成分如有机酸、蛋白质、多肽、氨基酸、生物碱和酶等在一定强度的电场中,在相同的时间内,由于各成分的电荷性质、电荷量和分子量不同,造成泳动方向(向正极或负极)、速度和距离等不同,结合谱带条数和染色结果达鉴别的目的.,电泳的种类:,醋酸纤维素薄膜电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),琼脂糖凝胶电泳,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),等电聚焦电泳(IFE),高效毛细管电泳(HPCE),分子生物学技术,聚合酶链式反应(PCR):是1985 年发明的一种模拟自然DNA 复制过程的快速体外DNA 片段扩增技术,又称无细胞分子克隆技术,获得1993年诺贝尔化学奖.该技术的问世,为中药鉴别提供了一条新途径.PCR 能将药材中提取的痕量的DNA 扩增到足以供检测和分析的数量.在PCR的基础上延伸出的鉴定方法有很多种,如RFLP、RAPD、AP-PCR、AFLP、SSR、DNA测序等.其中,随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)最为普通,它无需专门设计扩增反应引物,也无须预先知道被研究生物基因组的核苷酸序列,尤其是在目前绝大多数动植物中药没有基因组DNA 资料的情况下,RAPD 技术有很强的通用性,它最适于种下居群(品种)间的差异,也适用于种间和个体间.,基因芯片(gene chip)又称DNA 微阵列(DNA microarray),是一种新型分子生物技术.于20 世纪80 年代提出,90 年代初期迅速发展.近几年用于中药的品种鉴定.应用这一技术的前提是应用分子生物学技术找出待鉴定中药的特定寡核苷酸序列并将其集成在芯片上,然后提取样本DNA 进行扩增,荧光标记后与芯片杂交.若样本中存在与之互补的序列即可检测出来,从而达到鉴定的目的.基因芯片技术的优点是可以在一块芯片上同时点上成千上万个探针,进行大规模的药材鉴定,大大节约时间和精力,碱少随机误差,提高鉴定效率.,以遗传物质为基础的分子生物学方法弥补传统鉴定方法的不足,成功地鉴定中药的物种,但不鉴定优劣,因而不能取代中药化学成分指纹图谱等的鉴定.,免疫技术,不同的动植物药材含有不同的特异蛋白,利用该特异蛋白为抗原制备的特异抗体与检品中的特异抗原结合产生沉淀反应来鉴别药材的真伪为免疫鉴别.尤其适合亲缘关系比较近的动物药的基源鉴别.,免疫鉴别还有酶标法和单克隆抗体法.,中药生物效应鉴定法,在中医药理论指导下，以中药的归经、功能主治为线索，通过高效液相、液质联用、气质联用等现代分离分析手段和放射性配体,受体结合分析法研究中药活性成分对机体生物分子（受体）的作用，在此基础上建立国际承认的中药质量评价、控制方法，方法的表征体现为有效成分含量或有效成分半数有效浓度EC50值、半效抑制浓度IC50值、表观解离常数Ki值.,化学模式识别法,模式识别在六十年代末被引入到化学领域.它基于一个十分直观的基本假设,即“物以类聚”:同类或相似的“样本”间的距离应较近,不同类的“样本”间的距离应较远.这样就可以根据各样本间的距离或距离的函数来判别、分类,并利用分类结果预报未知.,模式识别法中的主成分分析法(PCA)、SIMCA分类法、贝叶斯(Bayes)判别法、聚类分析法(CA)、模糊动态聚类分析法、人工神经网络技术(ANN)等,另外还有计算机图像分析技术(CIA)、导数谱线组法(DSUVG)等,这些方法通常是根据采集到的药材总成分提取物的大量光谱或色谱数据以及某些经量化后的指标,运用计算机对这些数据进行处理,去粗取精去伪存真,从数据分析中获取能用于药材分析鉴别的有用信息,然后以计算机代替人对药材进行分析、鉴别、判断,进行分类和鉴别真伪.,聚类分析(CA),它对一些观察对象(样品)依据某种特征加以归类分析,将性质相近的归入同一类,将性质差别比较大的分在不同的类,从而达到鉴别的目的.聚类分析很有实用价值,特别是当模式类数事先并不知道时更为有用.,人工神经网络(ANN),是一种模拟人脑功能的信息处理系统.它借鉴了人脑神经系统处理信息的过程,以数学网络拓扑结构为理论基础,以巨量并行性、高度容错能力、信息加工和贮存的一体化以及自组织、自学习功能为特征.目前得到了广泛应用的一种网络是BP(back propagation).人工神经网络技术提取的特征能够全面反映原始数据的信息.采用人工神经网络处理中药化学模式识别数据,简单而直观.,计算机图像分析技术(CIA),图像分析是近20 年来兴起的一门新技术,它可将不同层次二维图像用计算机进行处理,获取此图像的三维定量数据.在中药鉴定方面,它可将果实、种子、花粉或组织切片中的某一特征的形态用计算机进行处理,比较其形态差异,从而达到鉴别的目的.,