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细胞信号传递与疾病.ppt

1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,概述,细胞信号传递的类型,主要的细胞内信号传递途径,研究细胞信号传递的常用方法,肾脏病医学中心,第二附属医院,新陈代谢 生长发育,遗传信息 环境变化信息,基本模式,调节方式,外界信息,体内信息,细胞信号传递,:,细胞感受、传递环境刺激以及调节代谢反应和基因表达的分子途径,细胞信号传递是生命的基本现象,肾脏病医学中心,第二附属医院,主要的细胞间信号分子,内分泌激素,含氮类:,氨基酸衍生物,小肽类,蛋白质类,糖蛋白,甾类:,神经递质:,胆碱类,氨基酸,单胺类,旁,/,自分泌,生长因子:,细胞因子:,气体分子:,

2、NO,,,CO,肾脏病医学中心,第二附属医院,细胞间信号分子与信号传递途径的特征,信号分子一般质量较小而易于移动,信号分子快速产生,快速灭活,级联放大作用,信号传递途径是一个网络系统,Ca,2,在不同细胞中的生物学作用,概述,细胞信号传递的类型,主要的细胞内信号传递途径,研究细胞信号传递的常用方法,细胞信号传递的基本方式,第一信号/外界信号,细胞膜上/胞内的受体蛋白,第二信号,蛋白激酶的激活,蛋白磷酸化的联级反应,信号蛋白入核,新的蛋白质表达,生,物,学,效,应,细胞信号传递的基本方式,G,蛋白介导的细胞信号转递途径,受体酪氨酸蛋白激酶介导的信号转递途径,核受体及其信号转递途径,细胞信号传递的

3、基本方式,细胞,_,细胞相互作用介导的信号传递途径,细胞,_,基质相互作用介导的信号传递途径,细胞_细胞相互作用介导的信号传递途径,细胞_细胞相互作用的结构,Ca,2+,依赖信号途径,PI3K-Akt,Rho,NF-,k,B,信号途径,Wnt,细胞外基质与细胞相互作用的主要分子,细胞外基质与细胞相互作用引发的信号传递,蛋白酶与细胞相互作用引发的信号传递,NO_鸟苷酸环化酶信号转导途径,NO,合成酶催化,L-,精氨酸生成,NO,和胍氨酸,NO,合成酶,(NOS),分类:,神经元型,(,nNOS,NOS 1),内皮细胞型,(,ecNOS,NOS 2),诱导型,(,iNOS,NOS 3),功能:激活

4、乌苷酸环化酶,刺激,cGMP,合成,概述,细胞信号传递的类型,主要的细胞内信号传递途径,研究细胞信号传递的常用方法,蛋白激酶介导的信号转递途径,受体酪氨酸蛋白激酶介导的信号转递途径,Receptor tyrosine protein,kinase,RTPK,非受体酪氨酸蛋白激酶介导的信号转递途径,酪氨酸蛋白激酶介导的信号转递途径,RTPKs 的结构基本结构,RTPKs 的结构基本结构,RTPKs 的活化,RTPKs 的活化与活性的调节,无活性单体,有活性寡聚体,底物的磷酸化,自身磷酸化,去磷酸化,RTPKs 的下游信号传递途径,底物靶蛋白,酶类:,PLC,g,ras.GAP,Src,酪氨酸蛋白

5、激酶,PI3,激酶,酪氨酸蛋白磷酸酶,结构蛋白:,Annexins,et al.,Ras,-MAPK,途径,PI3,激酶,-,Akt,途径,RTPKs 的信号传递,RTPKs下游的,Ras-MAPK,途径,RTPK,RTPK,生长因子,Grb2(接头蛋白),GRF(Sos),Ras-GDP,Ras-GTP,MAPKKK(Raf),MAPK,信号传递途径,RTPKs下游的,Ras-MAPK,途径,RTPKs下游的,Ras-MAPK,途径与细胞的增殖,Human,S.cerevisiae,RTPKs下游的,PI3激酶-Akt,途径,RTPKs下游的,PI3激酶-Akt,途径与细胞的存活,RTPKs

6、下游的,PI3激酶-Akt,途径的生物活性作用,信号传递途径间的作用,MAPK途径与,PI3激酶-Akt,途径的关系,iNOS mRNA,L-Arg,NO,NOS,TGF-,b,超家族受体,T,b,R,I,和,T,b,R,II,受体丝/苏氨酸蛋白激酶介导的信号转递途径,TGF-,b,1对不同细胞产生的作用,概述,细胞信号传递的类型,主要的细胞内信号传递途径,研究细胞信号传递的常用方法,组织标本的要求,新鲜组织,/,细胞,4,C,下,处理标本,干冰,液氮或,-,80,C,冻存标本,磷酸酶抑制剂,钒酸钠,氟化钠,蛋白酶抑制剂,检测细胞信号传递的主要方法,Western Blot,Western Blot,检测蛋白磷酸化的注意事项,抗体的选择,杂交条件的选择,抗体的滴度,杂交液的配制,曝光条件,4,C,RAPA洗3次,免疫共沉淀,检测蛋白磷酸化,待测标本,扑捉抗体,充分混合,4,C 1,2hr,加,Protein A-Agarose,4,C过夜,4,C离心,3000rpm,扑捉抗体,检测抗体,Protein A-Agarose,检测蛋白磷酸化的抗体,a,

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