药物分析维生素类药物的分析培训课件.ppt

本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。,Binzhou Medical University,药物分析教研室,主讲人：于晨,本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。,本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。,本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。,Binzhou Medical University,药物分析教研室,主讲人：于晨,*,本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。,*,本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。,*,本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。,概 述,维生素维持正常生理功能所必需的、,微量营养物质，人体不能合成维生素。,必须从外界食物中摄取。,维生素的发现是,20,世纪的伟大发现之一。,1897,年,C,.,艾克曼在爪哇发现只吃精磨的白米即可患脚气病，未经碾磨的糙米能治疗这种病。并发现可治脚气病的物质能用水或酒精提取,当时称这种物质为,“,水溶性,B,”,。,Christiaan Eijkman,1929,诺贝尔生物医学奖,The Discovery of Vitamin,发现简史,必需维生素,13,种,维生素,A,，维生素,B,，维生素,C,，维生素,D,，维生素,E,，维生素,K,，维生素,H,（生物素），维生素,P,，维生素,PP,，维生素,M,，维生素,T,，维生素,U,，水溶性维生素。,分类,A,B1,C,D,E,Vitamins,Contents,维生素,A,的简介,是鱼类肝脏中提取的一种不饱和脂肪醇，又称鱼肝油。目前主要采用人工合成。,在体内以视黄醇的形式储存，缺乏会影响视色素的合成，导致夜盲症，视力减退。,第一节 维生素,A,的分析,全反式,第一节 维生素,A,的分析,结构,共轭多烯醇侧链的环己烯,黄色棱形，,62-64,淡黄色棱形，,57-58,无定型，,28-29,去氢维生素,VitA,2,去水维生素,VitA,3,易发生脱氢、脱水、聚合反应,第一节 维生素,A,的分析,溶解性,:,与三氯甲烷、乙醚、环已烷或石油醚能任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。,不稳定性：,含有多个不饱和键，性质不稳定，易被空气中氧或氧化剂氧化，易被紫外光裂解，特别是在加热和金属离子存在时更易氧化变质从而失活。,第一节 维生素,A,的分析,性质,紫外吸收：,共轭多烯醇侧链结构，在,325-328nm,之间有最大吸收，可用于鉴别第一节 维生素,A,的分析,max,相对生物效价,顺反异构,维生素,A,325.5,100%,全反式,新维生素,Aa,328,75%,2,顺,新维生素,Ab,320.5,24%,4,顺,新维生素,Ac,310.5,15%,2,，,4,顺,异维生素,Aa,323,21%,6,顺,异维生素,Ab,324,24%,2,，,6,顺,第一节 维生素,A,的分析,天然维生素,A,主要是反式,CHCl,3,可用于鉴别和含量测定,与三氯化锑呈色,:,三氯甲烷,+,三氯化锑,=,不稳定的蓝色,与三氯化锑呈色反应,第一节 维生素,A,的分析,鉴别实验,Vit A,SbCl,3,CHCl,3,(,无水无醇,),蓝色,紫红色,（一）,Carr-Price,反应,蓝色,紫红,第一节 维生素,A,的分析,条件：无水、无醇,SbCl,3,水,SbOC,l,乙醇可使碳正离子的正电荷消失,第一节 维生素,A,的分析,要求仪器和试剂必须干燥无水，,三氯甲烷必须无醇,第一节 维生素,A,的分析,max,为,326nm,一个吸收峰,max,为,350,390nm,三个吸收峰,五个共轭双键,六个共轭双键,最大吸收峰红移,（二）,UV,法,第一节 维生素,A,的分析,第一节 维生素,A,的分析,维生素,A,在无水乙醇溶液中溶解,立即进行,UV,扫描,在,360nm,处有一最大吸收峰,.,当盐酸水浴加热,30s,迅速冷却,此过程发生脱水反应,扫描时出现三个吸收峰,USP,显色剂 磷钼酸,规定斑点颜色和,R,f,值,BP,对照品法,显色剂 三氯化锑,（三）,TLC,法,第一节 维生素,A,的分析,展开剂：环己烷,-,乙醚（,80,：,20,）,均显蓝色斑点，维生素醇（,R,f,=,0.1,）,维生素醋酸酯（,R,f,=,0.45,）,维生素棕榈酸酯（,R,f,=,0.7,）,酸值,取乙醇与乙醚各,15ml,，置锥形瓶中，加酚酞指示剂,5,滴，滴加氢氧化钠滴定液（,0.1mol/L,）至显粉红色，再加本品,2.0g,，振摇使溶解，用氢氧化钠滴定液（,0.1mol/L,）滴定，酸值应不大于,2.0,（附录,VIIH,杂质检查,过氧化值,取本品,1.0g,，加冰醋酸,-,三氯甲烷（,6:4,）,30ml,，振摇使溶解，加碘化钾的饱和溶液,1ml,，振摇,1,分钟，加水,100ml,与淀粉指示液,1ml,，用硫代硫酸钠滴定液（,0.01mol/L,）滴定至紫蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。消耗硫代硫酸钠滴定液（,0.01mol/L,）不得过,1.5ml,。,杂质检查,第一节 维生素,A,的分析,含量测定,（一）,UV,法（三点校正法）,第一节 维生素,A,的分析,维生素,A,在,325328nm,的波长范围内有最大吸收，可用紫外法进行含量测定但维生素,A,原料常混有杂质如：,第一节 维生素,A,的分析,维生素,A,的氧化产物,第一节 维生素,A,的分析,维生素,A,在光照下产生的无活性的聚合物,第一节 维生素,A,的分析,第一节 维生素,A,的分析,第一节 维生素,A,的分析,测定对象：,VitA,醋酸酯时，,ChP2015,规定,第一法 等波长差法,第一节 维生素,A,的分析,第二法 等吸收比法,测定对象：,VitA,醇时，,ChP2015,规定,第一节 维生素,A,的分析,合成的或天然的维生素,A,均为酯式维生素,A,，根据供试品中干扰杂质的多少，可采用：,（,1,）直接测定法,（,2,）皂化法,第一节 维生素,A,的分析,求,求效价,（,1,）基本步骤,4.,测定方法,A,选择，A328,测定或,A328,校正,求标示百分含量,（,1,）第一法（直接测定法，适用于纯度高的,维生素,A,醋酸酯的测定,）,1,）方法,取样品适量，精密称定，加环己烷溶解,在,300,、,316,、,328,、,340,、,360nm,测吸收度，以确定最大吸收波长（,A,328,或,A,328,校正,）。,第一节 维生素,A,的分析,b.,判断法,最大吸收波长在,326-329nm,之间，且,5,个波长下的绝对值差值均不超过,0.02,时，可直接用,328nm,波长处的测得的吸收度值求得吸收系数。,a.,计算吸收度比值（,A,i,/A,328,）：与中国药典的吸收度比值相比较，判断每个差值的绝对值是否超过,0.02,。,第一节 维生素,A,的分析,最大吸收波长在,326-329nm,之间，计算,5,个波长下的绝对差值，如果有一个或几个超过,0.02,，应按以下的方法进行判断：,A,328,校正,=3.52,（,2 A,328,A,316,-A,340,）,第一节 维生素,A,的分析,（,1,）第一法（直接测定法，适用于纯度高的,维生素,A,醋酸酯的测定,）,1,）方法,取样品适量，精密称定，加环己烷溶解,在,300,、,316,、,328,、,340,、,360nm,测吸收度，,确定,A,2,）计算,a.,吸光系数,E,1%,1cm,第一节 维生素,A,的分析,b.,求效价（,IU/g,）：效价指每,g,供试品所含维生素的,A,的国际单位数。,第一节 维生素,A,的分析,1IU=0.344g,全反式维生素,A,醋酸酯,IU/g=,第一节 维生素,A,的分析,每克纯品相当多少个单位（,IU,）,?,1IU=0.344g,全反式维生素,A,醋酸酯,第一节 维生素,A,的分析,第一节 维生素,A,的分析,c.,求维生素,A,占标示量的百分含量,AA,328,或,A,328,校正,D,供试品的稀释倍数,换算因子,维生素,A,醋酸酯在环己烷中,1900,；,维生素,A,醇在异丙醇中,1830,W,为平均内容物重量；,W,为称取内容物重量（供试品取用量）,L,比色池厚度,标示量为处方中规定的每粒中所含的国际单位数,第一节 维生素,A,的分析,VitAD,胶丸中,VitA,的含量测定,精密称取本品,(,规格,10000VitAIU/,丸,),装量差异项下（平均装量,0.08262g/,丸）的内容物,0.2399g,至,250ml,量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取,2.0ml,，置另一,20 ml,量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测定最大吸收波长为,328nm,，并在下列波长处测得吸收度为,第一节 维生素,A,的分析,A,300,：,0.354,A,316,：,0.561,A,328,：,0.628,A,340,：,0.523,A,360,：0.216,A,300,/A,328,：,0.555,A,316,/A,328,：,0.907,A,328,/A,328,：,1.000,A,340,/A,328,：,0.811,A,360,/A,328,：,0.299,求本品中维生素,A,的含量？,第一节 维生素,A,的分析,A,300,/A,328,：,0.564,A,316,/A,328,：,0.893,A,328,/A,328,：,1.000,A,340,/A,328,：,0.833,A,360,/A,328,：,0.344,0.555,0.907,1.000,0.811,0.299,+0.01,0.01,0,+0.02,+0.04第一节 维生素,A,的分析,第一节 维生素,A,的分析,适用于维生素,A,醇,（等吸收比法）,第一法无法消除杂质干扰时用此法,皂化法、,6/7A,法,（,2,）第二法,第一节 维生素,A,的分析,水溶性,脂溶性,第一节 维生素,A,的分析,判断,max,是否在,323,327nm,之间,取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定,计算,是,否,第一节 维生素,A,的分析,判断,A,300,/A,325,是否大于,0.73,是,否,取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定,计算,A,325,(,校正,),0,3%,3%,f,第一节 维生素,A,的分析,高效液相色谱法,流动相：正己烷异丙醇997,3,）,检测波长：,325nm,系统适用性实验考察分离度,是否能将维生素,A,醋酸酯顺式和反式分开,第一节 维生素,A,的分析,三氯化锑比色法,max,618nm,620nm,标准曲线法,第一节 维生素,A,的分析,缺点：,呈色不稳定（,5 10s,内）,水分干扰,与标准曲线温差,1,专属性差,三氯化锑有腐蚀性,优点：简便 快速,第一节 维生素,A,的分析,小结,维生素,A,共轭多烯醇侧链的环乙烯,性质：脂溶性；不稳定，可与三氯化锑呈色,鉴别：三氯化锑反应；,UV,；,TLC,含量测定：,紫外,-,分光光度法（三点校正）,三氯化锑比色法,A,B1,C,D,E,Vitamins,Contents,维生素,B1,广泛分布于米糠、麦麸和酵母中，具有维持糖代谢及神经传导与消化的正常功能。主要用于治疗维生素,B1,缺乏症、多发性神经炎及胃肠疾病。,第一节 维生素,B1,的分析,氨基嘧啶环,噻唑环,亚甲基,氯化,4-,甲基,-3(2-,甲基,-4-,氨基,-5-,嘧啶基,),甲基,-5-,（,2-,羟基乙基）噻唑鎓盐酸盐,结构与性质,维生素,B1,（盐酸硫胺）,第二节 维生素,B,1,的分析,结构与性质,维生素,B,1,为白色结晶或结晶性粉末,易溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚,水溶液呈酸性,1.,溶解性,性质,噻唑环、嘧啶环共轭双键,12.5g/ml,盐酸溶液（,9 1000,）,max,=246,nm,2.,硫色素荧光反应,3.UV,杂原子的反应，能与某些生物碱沉淀试剂反应，生成组成恒定的沉淀，可用于鉴别和含量测定。,4.,与生物碱沉淀试剂反应,5.,氯化物的特性,与,NaOH,共热，形成硫化钠，硝酸铅生成黑色沉淀；,6.,硫元素反应,7.,红外光谱特征,二、鉴别试验,（一）硫色素荧光反应,为维生素,B1,所特有,NaOH,H,2,O,环合,O,2H,硫色素,Thiochtome,溶于丁醇，显蓝色荧光,维生素,B,1,VitB,1,H,+,H,+,H,+,沉淀反应,H,+,S,元素反应,Cl,-,反应,硫元素反应和氯化物反应,H,+,Company Logo,三、含量测定,高氯酸滴定液（,0.1mol/L,）的滴定度,(T),为,16.86mg/ml,。,喹那啶红亚甲蓝,(,紫红天蓝,),非水溶液滴定法,紫外分光光度法,维生素,B,1,分子中具有共轭双键，在紫外区有吸收,10.1M HCl,2H,2,0,3H,3,PO,4,buffer,4alcohol,246,232,255,注意,维生素,B,1,片的测定,片剂、注射剂,=421,（每片）相当于标示量的,%=,A=ECL,ChP,1,1,标示量,%,W,E,A,%,cm,100,D,100,平均片重,（每,ml,）相当于标示量的,标示量,%,V,E,A,%,cm,100,D,100,NaOH,硫色素荧光法：维生素,B1,的专属性反应,原理,1,、,2.,方法,VitB,1,铁氰化钾,NaOH,硫色素,异丁醇,荧光,ex-365nm,em-435nm,+NaOH+,铁氰化钾,+,异丁醇,+NaOH+,异丁醇,对照液,+NaOH+,铁氰化钾,+,异丁醇,+NaOH+,异丁醇,供试液,S,d,A,b,特点,3,、,小结,维生素,B,1,（盐酸硫胺）,氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成季铵盐。,性质：水溶性；硫色素反应；可与生物碱沉淀剂反应,鉴别：硫色素反应；沉淀反应；,Cl,、,S,反应,含量测定：非水滴定；紫外分光光度法；,硫色素荧光法,A,B1,C,D,E,Vitamins,Contents第三节 维生素,C,的分析,维生素,C,是胶原蛋白形成所必需的，有助于保持间质的完整，维生素,C,缺乏可导致齿龈肿胀，出血，皮下瘀点，关节及肌肉疼痛，毛囊角化，严重缺乏可引起坏血病。所以维生素,C,又称为抗坏血酸。,L-,抗坏血酸,(,有生物活性,),L-,二酮古罗糖酸,L-,去氢抗坏血酸,无生物活性,第三节 维生素,C,的分析,结构与性质,C,3,OH,的,pKa=4.17,C,2,OH,的,pKa=11.57,2.,酸性,一元酸,性质,1.,溶解性,易溶于水，水中呈酸性；略溶于乙醇，不溶于三氯甲烷或乙醚,L(+),抗坏血酸,活性最强,比旋度,+20.5+21.5,手性,C,（,C,4,、C,5,）,3.,旋光性,*,*,含有四个光学异构体,有活性,有活性,无活性,4.,还原性,二烯醇结构,与碱反应,5.,水解反应,弱碱中生成单钠盐，,强碱中水解,糖类的显色反应,50,结构与糖类相似,6.,具糖的性质,五碳糖,维生素,C,7.UV,特征,维生素,C,具有共轭双键,利用还原性：与氧化剂的反应,鉴别试验,（一）与,AgNO,3,反应,去氢抗坏血酸,黑色,（二）与,2,，,6-,二氯靛酚反应,氧化型,玫瑰红色,（酸性）,还原型,蓝色,(,碱性,),无色,与碱性酒石酸铜反应,与,KMnO,4,反应,（三）与其他氧化剂反应,砖红色沉淀,试剂褪色,磷钼酸 钼蓝,与磷钼酸反应,（四）薄层色谱法,（五）糖类反应,H,2,O,-,CO,2,戊糖,-,3H,2,O,糠醛,50,蓝色,维生素,C,可在三氯醋酸或盐酸存在下水解、脱羧、生成戊糖，再失水，转化为糠醛，加入吡咯，加热至,50,产生蓝色,0.01mol/L HCl,（五）紫外光谱法,BP2010,杂质检查,（一）溶液的澄清度与颜色检查,内酯环水解,糠醛缩合呈色,高于或低于,pH.0-6.0,空气、光线、温度,维生素,C,脱羧,控制有色杂质,维生素,C,（二）铁、铜离子,（三）草酸的检查,草酸与金属离子作用形成沉淀；所以对,Vc,的原料，尤其是注射液，要进行草酸检查；,加入,CaCl,2,，比浊法；,原子吸收分光光度法,（二）铁、铜离子,原子吸收分光光度法,四、含量测定,维生素,C,维生素,C,制剂,碘量法,二氯靛酚法,紫外分光光度法,高效液相色谱法,指示剂 淀粉指示液,（一）碘量法,原理：利用,V,c,强的还原性,HAc,取本品约,0.2g,，精密称定，加新沸过的冷水,100ml,与稀醋酸,10ml,使溶解，加淀粉指示液,1ml,，立即用碘滴定液（,0.05mol/L,）滴定，至溶液显蓝色，在,30,秒内不褪。每,1ml,碘滴定液,(0.05mol/L),相当于,8.806mg,的,C,6,H,8,O,6,。,2,、方法,原料药,（,2,）酸性环境 稀醋酸,（,1,）,新沸冷,H,2,O,减慢,VitC,被,O,2,氧化速度,（,3,）立即滴定,赶走水中,O,2,，,减少,O,2,的干扰,3,、注意事项,（,4,）附加剂干扰的排除,片剂,过滤,注射剂,抗氧剂,丙酮,甲醛,Na,2,SO,3,NaHSO,3,Na,2,S,2,O,3,Na,2,S,2,O,5,（二）,2,，,6-,二氯靛酚滴定法,快速滴定，专属性强，用于含,Vit C,的制剂与食品分析,自身指示终点,1.,原理,2.,方法,（,2,）快速滴定,2min,内,（,1,）酸性环境,HPO,3,-HAc,稳定,VitC,防止其他还原性物质干扰,（,3,）亦可剩余比色测定,（定量过量）,（测剩余染料）,3.,注意事项,（,4,）二氯靛酚不稳定，须临用前配制并标定,专属性强，多用于含,V,c,的制剂和食品的分析,配制方法：,NaHCO,3,42mg+,水,50 ml,，加二氯靛酚钠二水合物,0.5g+,水,200 ml,过滤，即得。,标定方法：用干燥的维生素,C,对照品进行标定,（三）高效液相色谱法,人血浆中,VitC,浓度的,HPLC,法测定,小结,维生素,C,（,L,抗坏血酸）,烯二醇结构,性质：水溶性；酸性；旋光性；还原性；水解性,糖类性质；紫外吸收特性,鉴别：硝酸银反应；二氯靛酚钠反应；,氧化反应；,TLC,；糖类反应；紫外,杂质检查：澄清度与颜色检查,铁、铜离子检查,草酸检查,含量测定：碘量法；二氯靛酚滴定法；,高效液相色谱,AB1,C,D,E,Vitamins,Contents,Sources,Sunlight,Foods,Fortified Milk,Fish Oils,Deficiency,佝偻病,牙齿松动,鸡胸,骨质疏松,脚成弓形,Function,促进钙、磷的吸收；,促进骨骼和牙齿的正常生长；,调节柠檬酸的代谢,第四节 维生素,D,的分析,胆甾醇,7-,脱氢胆甾醇,维生素,D3(,胆骨化醇,),维生素,D2(,麦角骨化醇,),麦角甾醇,维生素,D,是一类抗佝偻病维生素的总称，目前有,10,多种，都是甾醇衍生物。,维生素,D,2,维生素,D,3,第四节 维生素,D,的分析,维生素,D,2,、,D,3,无色针状结晶或白色结晶性粉末；无臭，无味；遇光或空气均易变质。,溶解性,:,维生素,D,2,在三氯甲烷中极易溶解,在丙酮乙醇乙醚中易溶；维生素,D,3,在乙醇、丙酮、三氯甲烷或乙醚极易溶解；二者均在植物油中略溶，在水中不溶。,不稳定性,:,毒性增强,.,含有多个烯键，所以极不稳定，宜氧化变质，效价降低，毒性增强。,第四节 维生素,D,的分析,旋光性,:,有五到六个手性碳原子,均具有旋光性,.,维生素,D,2,6,个手性碳原子,维生素,D,3,5,个手性碳原子,第四节 维生素,D,的分析,显色反应 甾类化合物,氯仿溶液 黄色 红色 紫色 绿色,紫外吸收特性,无水乙醇,265nm,维生素,D,2,为,460,490,维生素,D,3,为,465,495,醋酐,硫酸,E,1cm,1%,E,1%,1cm,二、鉴别试验,（一）显色反应,1,与醋酐,-,浓硫酸反应,氯仿溶液,黄色,红色,紫色,绿色,醋酐,硫酸,2,与三氯化锑反应,本品,1,2-,二氯乙烷,三氯化锑试液,橙红色,粉红色,3,其它显色反应,维生素,D,三氯化铁,橙黄色,二氯丙醇,乙酰氯,绿色,（二）比旋度鉴别,无水乙醇溶液,维生素,D,2,比旋度为,102.5,至,107.5,维生素,D,3,比旋度为,105,至,112,（,三）其它鉴别方法,薄层色谱法、,HPLC,法,制备衍生物测熔点,紫外、红外吸收光谱,（四）维生素,D,2,、,D,3,的区别反应,维生素,D,2,维生素,D,3,96%,乙醇,10ml,取,0.1ml,乙醇,1ml,和,85%,硫酸,5ml,红色,max,570nm,黄色,max,495nm,三、杂质检查,（一）麦角甾醇的检查,维生素,D,2,90,%,乙醇溶液,洋地黄皂苷溶液,不得发生浑浊或沉淀,（二）前维生素,D,的光照产物,（三）有关物质检查,Ch.P 2010,NP-HPLC,含量测定,USP34-NF29,化学法,色谱法,微生物法,BP2010,化学法,色谱法,光谱法,四、含量测定,正相高效液相色谱法,（一）维生素,D,测定法,含量以单位表示,每单位相当于维生素,D 0.025,g,注意：计算的是维生素,D,及前维生素,D,经折,算成维生素,D,的总量,固定相：,硅胶,流动相：,正己烷正戊醇（,997,：,3,）,检测波长：,254nm,第一法：,用于无维生素,A,醇及其他干扰的供试品,第二法：,(1),皂化提取,;(2),净化用色谱柱系统分离收集维生素,D,，得供试品溶液,B;(3),按第一法进行测定。,第三法：,当样品经皂化提取及净化用色谱系统分离收集后，前维生素,D,峰仍受干扰时，采用此法。,小结,维生素,D,抗佝偻病维生素的总称,性质：脂溶性；不稳定；旋光性；,显色反应；紫外,鉴别：显色反应；比旋度；,VD,2,、,VD,3,区别,杂质检查：麦角甾醇；,前维生素,D,光照产物有关物质,含量测定：三法,A,B1,C,D,E,Vitamins,Contents,主要讲解,第五节 维生素,E,的分析,维生素,E,早在,20,世纪,20,年代就被人们发现，,Evans,和他的同事在研究生殖过程中发现，酸败的猪油可以引起大鼠的不孕症。,是与生育有关的维生素的总称,1936,年分离出结晶体,1938,年被瑞士化学家人工合成,维生素,E,的显微照片,维生素,E,胶囊,维生素,E,类结构与相对活性,名称,R,1,R,2,烃链,相对活性,-,生育酚,CH,3,CH,3,C,16,H,33,1.0,-,生育酚,CH,3,H,C,16,H,33,0.5,-,生育酚,H,CH,3,C,16,H,33,0.2,-,生育酚,H,H,C,16,H,33,0.1,-,生育酚,CH,3,H,C,16,H,27,0.5,维生素,E,的结构,2R*(4R*,8R*)-3,4-,二氢,-2,5,7,8-,四甲基,-2-(4,8,12-,三甲基十三烷基,)-2H-,苯并吡喃,-6-,醇醋酸酯,-,生育酚醋酸酯,生物效价,右旋体 ：消旋体,=1.4,：,10,（天然品）,（合成品）,维生素,E,的性质,性状,:,黄色或金黄色,粘稠状,透明,液体,脂溶性,:,溶于,丙酮、乙醇、乙醚或植物油,等,有机溶剂,中,水溶性,:,不,溶于水,稳定性,:,无氧时对热、酸稳定，对碱不稳定，,对氧敏感，遇光可被氧化，,色渐变深，,UV,：乙醇溶液中,max,284nm,（一）,硝酸反应,二、鉴别试验,生育酚,HNO,3,（橙红色）,生育红,维生素,E,在硝酸酸性条件下，水解生成生育酚,水解,三氯化铁联吡啶反应,O,（二）,生育酚,对,-,生育醌,红色,Fe,3+,O,max,=284nm,min,=254nm,0.01%,无水乙醇中,UV,法,（三）,薄层板 硅胶,G,展开剂 环己烷,-,乙醚（,4,：,1,）,显色剂 硫酸（,105,5,）,TLC,法,（四）,VitE R,f,=0.7,-,生育酚,R,f,=0.5,-,生育醌,R,f,=0.9,维生素,E,合成过程,2,3,5-,三甲基对二苯酚植醇,+,-,生育酚,-,生育酚醋酸酯,三、杂质检查,三、杂质检查,（一）酸度,游离醋酸,（二）生育酚,硫酸铈滴定液（,0.01mol/L,）,二苯胺（亮黄灰紫）,利用游离生育酚的还原性，,将硫酸铈还原成硫酸亚铈,三、杂质检查,1.,原理,2.,试剂,问药典中规定的维生素,E,中所含的游离生育酚的限量是多少？,计算,每,ml,硫酸铈滴定液（,0.01mol/L,）相当于,0.002154g,的游离生育酚,2.15,限量,(,三,),有关物质的检查,(,四,),残留溶剂：环己烷的检查,四、含量测定,GC,法,（一）,GC,特点,1,、,选择性好,灵敏度高,速度快,分离效能好,挥发性低、不稳定、极性强衍生化。易受样品蒸气压限制,载气,N,2,固定液,硅酮（,OV-17,）,担体硅藻土或高分子多孔小球,柱温,265,检测器氢火焰离子化检测器,(FID),内标正三十二烷,n 500,R2,内标法加校正因子定量,2,、,VitE,测定的色谱条件,内标法,供试液（样品,+,内标）,内标物,对照液（对照,+,内标）,是样品中不存在的物质,与被测组分峰靠近,能与各组分完全分离,与被测组分的量接近,样品,dl,生育酚,固定相,十八烷基硅烷键合硅胶,流动相甲醇,-,水（,49,：,1,）,检测波长,292nm,R,2.6,RSD0.8%,（二）,HPLC,法（外标法）,（三）荧光分光光度法,对照品,dl,生育酚,在,220400nm,波长范围内，以发射、激发波长间隔,为,40nm,扫描同步荧光光谱，测定同步荧光峰的荧光强度信号值。,V,E,=,F,样品,-,F,空白,F,标准,-,F,空白,4.0,（,mg/L),第六节 复方制剂中多种维生素的分析,一、离子对,HPLC,法测定多种维生素,以樟脑磺酸作为离子对试剂，以二巯基丙烷磺酸钠作为抗氧剂,二、反相,HPLC,法同时测定,9,种水溶性维生素,三、非水反相,HPLC,法同时测定,4,种脂溶性维生素,练习与思考,A,型题,1.,维生素,B,1,的鉴别方法是,A.,三氯化铁反应,B.,硫色素反应,C.,柯柏反应,D.,与碱性酒石酸铜试液反应E.,双缩脲反应,2.,维生素,E,中国药典,规定的含量,测定方法为,A.,非水溶液滴定法,B.,旋光法,C.HPLC,法,D.,紫外分光法,E.GC,法,B,型题,A,。亚硝基铁氰化钠反应,B.,硫色素反应,C.,硝酸反应,D.,三氯化锑反应,E.,硝酸银试液的反应,1.,维生素,C,2.,维生素,E,3.,维生素,B,1,4.,维生素,A,E,C,B,D,X,型题,1.,用碘量法测定的药物有,A.,醋酸地塞米松,B.,丙酸睾酮,C.,维生素,C,D.,硫酸阿托品,E.,维生素,C,注射液,返 回,2.,可用紫外分光光度法测定含量的,药物有,A.,维生素,A,丸剂,B.,丙酸睾酮,C.,维生素,A,D.,硫酸阿托品,E.,维生素,B,1,片,简答题,简述碘量法测维生素,C,含量的原理及实验注意事项。,练习与思考,A,型题,1.,维生素,B,1,的鉴别方法是,A.,三氯化铁反应,B.,硫色素反应,C.,柯柏反应,D.,与碱性酒石酸铜试液反应,E.,双缩脲反应,2.,维生素,E,中国药典,规定的含量,测定方法为,A.,非水溶液滴定法,B.,旋光法,C.HPLC,法,D.,紫外分光法,E.GC,法,B,型题,A,。亚硝基铁氰化钠反应,B.,硫色素反应,C.,硝酸反应,D.,三氯化锑反应,E.,硝酸银试液的反应,1.,维生素,C,2.,维生素,E,3.,维生素,B,1,4.,维生素,A,E,C,B,D,X,型题,1.,用碘量法测定的药物有,A.,醋酸地塞米松,B.,丙酸睾酮,C.,维生素,C,D.,硫酸阿托品,E.,维生素,C,注射液,返 回,2.,可用紫外分光光度法测定含量的,药物有,A.,维生素,A,丸剂,B.,丙酸睾酮,C.,维生素,A,D.,硫酸阿托品,E.,维生素,B,1,片,简答题,简述碘量法测维生素,C,含量的原理及实验注意事项。,