1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过,细胞水平,或,细胞器水平,上的操作,按照人们的意愿来,改变,细胞内的,遗传物质,或,获得细胞产品,的一门综合科学技术。,什么叫细胞工程?,按操作对象分类,植物细胞工程,动物细胞工程,2.1植物细胞工程,2.1.1植物细胞工程的基本技术,2.1.2植物细胞工程的实际应用,植物组织培养技术,植物体细胞杂交技术,植物繁殖的新途径,作物新品种的培育,2.1植物细胞工程,2.1.1植物细胞工程的基本技术,植物组织培养技术,生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的
2、都有发育成为完整个体所必需的,。,2.原因:,具有某种生物,的任何一个细胞,都具有发育成,的潜能。,完整生物体,1.定义:,细胞的全能性,全套遗传物质,全套遗传信息,3.全能性的程度:,(,1)受精卵的全能性,最高,受精卵,生殖细胞,体细胞,(,2),植物细胞动物细胞,(4),(3)分化程度低的细胞分化程度高的细胞,全部基因,4.生物体内细胞并没有表现出全能性,而是分化成为不同的组织器官的原因,基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果,5、植物细胞表现出全能性的条件:,处于,离体,状态,在一定的,营养物质、激素,和,其他外界条件,的作用下,植物细胞就可能表现全能性,发育成完整的植株。,
3、1958年美国科学家斯图尔德利用胡萝卜韧皮部的细胞进行细胞培养,植物组织培养技术,一、植物组织培养技术,(一)、植物组织培养的过程,阅读P,34,的实验,回答问题:,1.植物细胞表现出全能性的条件有哪些?,2.在植物组培过程中,为什么要进行一系列的消毒,灭菌,并且要求无菌操作?,3、为什么切取胡萝卜根的形成层,其他部分也能培养成小植株吗?,4、为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养?,5、决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么?,6、请同学们概括出植物组织培养技术的流程图。,1.植物细胞表现出全能性的条件有哪些?,2.在植物组培过程中,为什么要进行一系列的消毒,灭菌,并且要求无菌操作?,3、为什
4、么切取胡萝卜根的形成层,其他部分也能培养成小植株吗?,细胞离体、一定的营养物质、激素和其他外界条件,避免杂菌在上面迅速生长消耗营养,且有些杂菌会危害培养物的生长。,想一想,其形成层容易诱导成愈伤组织,其他部分如叶、花也能培养成小植株,只是稍微困难些。,4、为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养?,5、决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么?(P43),6、请同学们根据上述过程概括出植物组织培养,技术的流程图,并与同学交流。,在有光时,往往容易形成维管组织,而不易形成愈伤组织。,植物激素。,一般,,当生长素含量高于细胞分裂素时,有利于根的形成。,当生长素含量低于细胞分裂素时,有利于芽的形成。,接种
5、试管苗的形成,愈伤组织的形成,移栽大田,培养成正常植株,胡萝卜的组织培养,取材,消毒,植物组织培养技术,离体器官,组织细胞,脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又,重新分化,成根或芽等器官。,植物体,愈伤组织,脱分化,根、芽,1、过程,再分化,已经,高度分化,的植物细胞经诱导后逐渐失去原来的结构和功能,转变成,未分化,细胞的过程,即形成愈伤组织。,脱分化:,再分化:,愈伤组织,:,一些,已分化,的细胞,经过激素的诱导,已分化的细胞恢复了细胞分裂能力,而增殖形成的无组织结构、无器官分化的薄壁细胞团,根据上述过程,请同学们讨论归纳出组织培养的概念。,2、植物组织培养的概念:,植物组织培养就是在无菌
6、和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。,3、条件,离体 培养基:无机物、有机物和植物激素(生长素,细胞分裂素等),适宜温度、光照、pH和无菌环境。,小结:,植物组织培养的过程,外植体,愈伤组织,根、芽,植物体,脱分化,再分化,(离体的,已分化组织或细胞),(未分化),(分化),幼芽或幼根?,条件?,优点,?,特点?,繁殖速度快,不受季节限制,工厂化生产,幼苗无毒,保持优良性状,适宜温度、无光、pH和无菌环境。,无机物、有机物和植物激素(,生长素,细胞分裂素等,),无定形状态,薄壁细胞,高度液泡
7、化,排列疏松、无规则,无叶绿体,不进行光合作用,分化程度低去分化较易,条件:需光,1.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,下列哪一项条件是不需要的(),A.消毒灭菌,B.适宜的温度,C.充足的光照,D.适宜的养料和激素,C,反馈练习,2.要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株,不需要(),A.具有完整细胞核的细胞,B.离体状态,C.导入外源基因,D.一定的营养物质和激素,C,3、植物组织培养形成的愈伤组织进行培养,又可以分化形成根、芽等器官,这一过程称为:,A、脱分化 B、去分化,C、再分化 D、脱分化或去分化,4、下列不能作为植物组织培养的材料是,A、秋海棠的叶,B、马铃薯的
8、块茎,C、成熟的花粉,D、木质部中的导管细胞,D,木质部的导管细胞是死细胞,成熟的筛管细胞无细胞核。,小结:,植物组织培养的过程,外植体,愈伤组织,根、芽,植物体,脱分化,再分化,(离体的,已分化组织或细胞),(未分化),(分化),幼芽或幼根?,条件?,优点,?,特点?,繁殖速度快,不受季节限制,工厂化生产,幼苗无毒,保持优良性状,适宜温度、无光、pH和无菌环境。,无机物、有机物和植物激素(,生长素,细胞分裂素等,),无定形状态,薄壁细胞,高度液泡化,排列疏松、无规则,无叶绿体,不进行光合作用,分化程度低去分化较易,条件:需光,因为不同种生物之间存在着,生殖隔离,,所以用传统的有性杂交方法是不
9、可能做到这一点的。,于是,这些科学家试图用这两种植物的体细胞进行杂交,来实现这一美妙的设想。,二、植物体细胞杂交技术,这幅番茄马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗?为什么?,(1),(1),(2),(3),(4),(5),植物体细胞杂交,过程示意图,1,你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合,遇到的第一个障碍是什么?,2,有没有一种温和的去壁方法呢?,3,为什么两个原生质体能发生融合,这与细胞膜的什么特性有关?,4,、把原生质体放在一起能自然融合吗?,5,如何将杂种细胞培育成杂种植株?,请思考:,涉及的方法,(1),酶解法,去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体。,植物细胞,原生质体,(2),人工
10、诱导,两种植物的原生质体融合成杂种细胞。,离心、振动、电刺激,聚乙二醇(PEG)处理,(3)用,植物组织培养法,培养杂种细胞为杂种植株。,纤维素酶、果胶酶,物理法:,化学法:,杂种植株,融合的原生质体AB,再生出细胞壁,脱分化,愈伤组织,再分化,1、过程,植物细胞的融合,植物组织培养,植物细胞A,原生质体B,原生质体A,杂种细胞AB,去 壁,去 壁,人,工,诱,导,方法?,促进融合的方法?,融合完成的,标志,植物细胞B,二、植物体细胞杂交技术,细胞融合的基础:,细胞膜的流动性,植物细胞A,植物细胞B,愈伤组织,脱分化,杂种植物,再分化,融合,植物组织培养,去壁,杂种细胞,生壁,原生质体A,原生
11、质体B,酶解法,融合原生质体,诱 导,植物体细胞杂交技术,2、概念,将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。,3、优势和未解决的问题,优势,(,与有性杂交方法比较),:打破了不同种生物间的生殖隔离障碍,大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。,并且培育出了许多在生产上有较高应用价值的杂种植株品种。例如:,烟草海岛烟草、胡萝卜羊角芹、,白菜甘蓝等等。,白菜,甘蓝,白菜甘蓝,“白菜甘蓝”同普通白菜相比,具有生长期短、耐热性强和易于贮藏等优点。,未解决的问题:未能让杂种植物按照人们,的需要表现出亲代的优良。,1.为什么“番茄马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所
12、想像的那样,地上长番茄、地下结马铃薯?,主要原因是:,生物基因的表达不是孤立的,它们之间是相互调控、相互影响的,,马铃薯番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质,但这些遗传物质的表达受到相互干扰,不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达,,所以,杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯。,P38,思考与探究,2.自然界中有一种含有叶绿体的原生动物眼虫,说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活,请探讨:动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗?如果理论上可行,请设计出具体实验方案。,比较,植物组织培养,植物体细胞杂交技术,所属范畴,原理,步骤,意义,联系,无性繁殖,细胞全能性,脱分化,
13、再分化,保持优良性状,繁殖速度快、大规模生产,提高经济效益,植物体细胞杂交技术应用了植物组织培养技术,克服不同种生物远源杂交的障碍,去除细胞壁,融合形成杂种细胞,组织培养,细胞的膜流动性,细胞全能性,染色体变异、基因重组,所采用技术的理论基础,植物细胞工程,通常采用的技术手段,植物组织培养,植物体细胞杂交,植物细胞的全能性,小结,反馈练习,1、植物体细胞杂交的过程实质是(),A、细胞质融合的过程,B、细胞核融合的过程,C、细胞膜融合的过程,D、细胞原生质体融合的过程,D,2、在植物细胞工程中,当原生质体融合成一个细胞后,,,需要诱导产生细胞壁,参与这一过程的细胞器(),A、叶绿体、高尔基体 B
14、线粒体、高尔基体C、叶绿体、线粒体 D、线粒体、内质网,B,6、右图为植物体细胞杂交过程,示意图。据图回答:,1)步骤是_,_,最常用的方法是_.,2)步骤一般常用的化学试剂是,_目的是_,_.,3)在利用杂种细胞培育成为杂种,植株的过程中,运用的技术手段,是_,其中步骤相,当于_,步骤相当于_,去掉细胞壁分离出有,活力的原生质体,酶解法,聚乙二醇(PEG),诱导原生质体融合,植物组织培养,脱分化,再分化,6、右图为植物体细胞杂交过程,示意图。据图回答:,4)植物体细胞杂交的目的是获得,新的杂种植株。使_,能够在新的植物体上有所表现,,其根本原因:,5)从理论上讲,杂种植株的育性,_。若运用
15、传统有性杂交方法,能否实现?_。并说明理由:,因此,这项研究对于培养作物新品,种方面的重大意义在于:,.,两个亲本的遗传性状,杂种植株获得了双亲的遗传物质,可育,不能,因为不同种生物之间存在生殖隔离,克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩展了,可用于杂交的亲本组合范围,7.基因型为AaBb的水稻(含24条染色体)的花药通过无菌操作接入试管后,在一定条件下形成试管苗,问,:,(,1)愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规,则的细胞团,愈伤组织形成过程中,必须从培养基,中获得_ 等营养物质。,(2)要促进花粉细胞分裂生长,培养基中应有_,_和_两类激素。,水、无机盐、维生素和小分子有机,物,细胞分裂素,
16、植物生长素,(3)愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根,再由芽发育成叶和茎。这一过程必须给予光照,其原因是_能利用光能制造有机物,供试管苗生长发育。,(4)试管苗的细胞核中含_条脱氧核糖核苷酸链。,(5)培育成的试管苗可能出现的基因型有_。,叶绿体,24,AB、aB、Ab、ab,2.1.2 植物细胞工程的实际应用,资料1 科学家应用多倍体育种的方法,,培育出的三倍体无子西瓜,具有无子、,含糖高、口感好等特点。,但因其不结种子,,每年必须用四倍体和,二倍体西瓜杂交培育,种子,不仅增加了生,产成本,也给无籽西,瓜的普及带来困难。,资料2 病毒引起的植物病害有500多种。,受害的植物包括粮食作物、蔬菜
17、果树和花卉,,如水稻、小麦、棉花、马铃薯、油菜、大蒜、,苹果、枣、唐菖蒲、兰花等。而且没有有效的,防治办法,只能拔除病株,造成很大的经济损,失。,病毒多集中在种子、老叶等器官中,在幼,嫩的器官和未成熟的组织中较少,在分生区几,乎不含病毒。,资料3 兰花因高雅美丽而深受人们喜爱。,兰花常用分根法和种子进行繁殖。在兰花的,常规繁殖中,遇到的,难题是:用分根法繁,殖速度缓慢,不利于,新品种的推广;用种子,繁殖又很困难,因为,兰花的种子十分微小,,胚很纤弱,种子几乎,没有储藏营养物质,,在发芽过程中很容易夭折。,(一)微型繁殖技术(也称快速繁殖技术),一、植物繁殖的新途径,1.概念:,快速繁殖优良品
18、种的植物组织培养技术。,2.优点:,1)保持优良品种的遗传特性;,2)高效快速地实现种苗的大量繁殖。,(二),作物脱毒,长期进行无性繁殖的作物,易积累感染的病毒,导致产量降低,品质变差。,分生区(如茎尖)的细胞,进行组织培养,获得脱毒苗,1.原因:,2.材料:,3.方法:,4.结果:,(,三)神奇的人工种子,1.天然种子的局限,1)培育周期长。,2)优良杂种的后代会发生性状分离而丧失其优良特性。,3)生产会受到季节、气候和地域的限制,并且需要占用大量的土地实现制种。,1.人工种子,胚状体,(三)神奇的人工种子,通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,经过人工薄膜包装得到的种子
19、胚状体(或不定芽、顶芽和腋芽)+人工种皮,(2)人工种子组成,1,)人工种皮的有效成分,加入适量的养分、无机盐、有机碳源以及农药、,抗生素、有益菌、植物生长调节剂等。,诱导植物愈伤组织,体细胞胚的诱导,体细胞胚的成熟,体细胞胚的机械化包裹,贮藏或种植,思考,设计人工种子制备技术的主要流程图,一、植物繁殖的新途径,(三)神奇的人工种子,培植周期短;,后代无性状分离;,不受气候,季节和地域限制;,可以很方便地贮藏和运输。,1)优点:,一、植物繁殖的新途径,(三)神奇的人工种子,(一)单倍体育种,二 作物新品种的培育,体细胞中含有本物种配子染色体数目的个体。,由配子不经过受精作用而直接发育成的个
20、体。例:蜜蜂中的雄蜂,长得弱小,而且高度不育。,1.单倍体定义:,2.单倍体形成:,3.单倍体植株的特点:,4.,设计出通过植物花药组织培养生成正常植株的实验流程。,(一)单倍体育种,二 作物新品种的培育,花药,花粉细胞培养,接种,脱分化,愈伤组织,根、芽,再分化,单倍体植株,移栽,正常植株,染色体加倍,后代都是纯合子,明显缩短育种年限,5.优点:,(一)单倍体育种,二 作物新品种的培育,(二),突变体的利用,植物组织培养过程中,由于培养细胞一直处于不断的分生状态,易受到培养条件和外界压力的影响而产生突变。,1.产生,:,筛选对人们有利突变体,进而培育新品种。,2.利用:,二 作物新品种的培育
21、蛋白质,脂肪,糖类,药物,香料,生物碱等,1.细胞产物种类:,三 细胞产物的工厂化生产,植物的组织培养,2.技术:,3.成就:,1、植物的微型繁殖技术是指(),A植物体细胞杂交技术 B嫁接,C营养繁殖 D植物组织培养,课堂演练,2、科学工作者把胡萝卜的韧皮部细胞分离出来,将单个细胞放入培养基中培养,获得了许多完整的植株,这些植株的特点是(),A彼此性状相似 B变异频率较高,C单倍体 D都是纯合子,D,A,3用植物组织培养技术,可以培养或生产(),A食品添加剂 B无病毒植物,C.人工种子 D前三项都是,4下列四个选项中没有采取植物组织培养技术的是(),A,花药离体培养得到单倍体植株,B,秋水仙素处理幼苗获得多倍体植株,C,人工种子的培育,D,“番茄马铃薯”杂种植株的培育过程,D,B,5、马铃薯利用它的块茎进行无性繁殖,种植的世代多了以后往往会感染病毒而减产,为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植。获得无病毒幼苗的最佳办法是(),A选择优良品种进行杂交,B进行远缘植物体细胞杂交,C利有芽尖进行组织培养,D人工诱导基因突变,C,6.甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗,以保证该品种的品质和产量水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及细胞的(),A.有丝分裂 B.分化,C.减数分裂 D.全能性,C,






