环境毒理学9-10.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,毒作用机理:,是研究在,靶器官,中，毒物或代谢活性产物与靶分子的相互作用，以及由这种作用所引发的一系列,生物化学或生物物理过程,，最终在,效应器官,导致毒作用的机理。,对不同概念的理解:,靶器官,贮存库,效应器官,靶器官不一定是效应器官。,毒物作用于靶器官后，其毒害作用直接由靶器官表现出来，则此器官是效应器官；,毒物作用于靶器官后，毒作用通过某种病理生理机制，也可由另一个效应器官表现出来。如有机磷酸酯农药的靶器官是神经系统，而效应器官则是瞳孔、唾液腺和横纹肌等。,3.3.1.1 共价结合学说,外源化学物与生物大分子相互作用的方式：,1.,非共价结合,一般为氢键结合，由于其结合能量相对较低，通常是可逆的。,2.,共价结合,一般是不可逆的，共价结合形成的加合物使外源化学物或其代谢物嵌入到生物大分子中而成为其中的一个组成部分，不能被一般的甚至稍强烈的生物化学或化学处理的方法所解离。,共价结合学说认为：,许多外源化学物对细胞的损害作用与其,本身或其亲电代谢物不可逆地结合于细胞大分子的亲核部位,（如蛋白质的巯基）有密切关系。这类外源化学物或其本身有足够的形成共价键的反应活性，或能通过细胞代谢活化过程而转变为能介导共价结合的产物。,1）蛋白质分子中的氨基、羟基、巯基,2）,DNA、RNA,中的碱基、核糖或脱氧核糖以及磷酸酯等亚单元,3）脂质中的磷脂酰丝氨酸、胆碱和乙醇胺,生物大分子中亲核部位：,共价结合的类型及后果,1）与核酸结合：,在核酸分子中，碱基、戊糖及磷酸等任何一个亚单元均可受到攻击，造成化学性损伤。,碱基,是最常见也是最重要的靶。,后果：碱基置换、碱基丢失、链断裂、核酸交联等。,2）与蛋白质结合：,蛋白质分子中有许多官能团可与外源化学物或其活性代谢物共价结合:,如半胱氨酸的巯基、组氨酸的咪唑基、色氨酸的吲哚基、酪氨酸的酚基、赖氨酸的,-,氨基、精氨酸的胍基以及苏氨酸和丝氨酸的羟基等。,生物学后果：,细胞膜结构及通透性改变；,引起各亚细胞结构和功能损伤；,影响酶的催化功能，引起代谢异常及能量供应障碍；,导致遗传毒性；,引起机体特殊的免疫反应。,3）与脂质结合：,外源化学物或其活性代谢产物与脂质发生共价结合的部位主要有丝氨酸、胆碱及乙醇胺等，脂质的化学损伤使膜结构和功能改变。,4）致死性掺入：,是指外源化学物或其代谢活性产物作为生物合成的“原料”掺入生物大分子，从而导致生物大分子组成及功能的异常。,3.3.1.2 自由基作用学说,自由基,（,free radical）,含有未配对电子的原子或分子，可通过共价键均裂或电子俘获产生。,特点:顺磁性、化学活性极高、生物半衰期极短（仅为10,-6,S）,1.氧自由基（,oxygen free radical,）,氧自由基又称活性氧中间体reactive oxygen intermediates,，,ROIs,），,它是个集合名词，不仅包括羟基自由基（,OH,）、,超氧化阴离子自由基（,O,2,）、,氢过氧自由基（,HO,2,等自由基物质，还包括单线态氧（,O,2,）、,过氧化氢（,H,2,O,2,）,等具有较强氧化性的中间代谢产物。,正常生理条件下，机体内自由基的产生与清除保持着动态平衡，一定的自由基水平是维持正常生命活动所必需的。,2.,生物机体内自由基来源,1)有些环境化学物本身具有自由基性质，如硝基、氨基化合物，芳香族化合物，四氯化碳等；,2)外源物在生物转化过程中形成；,3)内源性物质正常生物转化过程中形成。,参与自由基形成的酶系：,主要是肝微粒体混合功能氧化酶系统（,MFO,S,）,中的还原性辅酶，均以还原性代谢为主。,3.,自由基的危害,所有的细胞成分，包括脂质、蛋白质、核酸以及糖类均可受到自由基攻击引起脂质过氧化（,lipid peroxidation）。,脂质过氧化作用导致各种亚细胞结构的损伤，如细胞膜的通透性、流动性改变，滑面内质网扩张，粗面内质网上的核糖体脱落，线粒体肿胀和崩解，溶酶体破裂等。,脂质过氧化生物学后果：,1)膜脂质过氧化：,最普遍的后果就是细胞器/膜 结构改变与功能障碍。,如铜引起的过氧化反应可导致叶绿体生物膜上亚油酸过氧化物形成，该过氧化物可以最终分解成乙烯和乙烷而使生物膜遭到损害。,2)对蛋白质分子的损伤：,蛋白质是自由基攻击的重要靶分子。自由基可以通过作用于蛋白质分子的氨基酸残基与巯基而使其发生,交联和断解,，氨基酸结构改变可以导致蛋白质变性。,如硝基与亚硝基对血红蛋白的作用是一个典型的自由基反应。,自由基还可与酶的关键性氨基酸残基和巯基发生作用，使之,氧化,，从而影响酶的结构和活性。,3)对核酸分子的损伤：,核酸分子中的所有成分都可能受到自由基的攻击而造成损伤，引起碱基置换、嘌岭脱落、,DNA,链断裂等。,4.,自由基引发的脂质过氧化的一般过程：,以不饱和脂肪酸,L-H,为例，,L,为,脂质自由基，,LOO,为,脂质过氧自由基，,LOOH,为,脂质过氧化物启动阶段：,L-H+OH L+H,2,O,L+O,2,LOO,LOO+L-H LOOH+L,扩展阶段：,LOOH+Fe,2+,络合物,LO+OH,-,+Fe,3+,络合物,LOOH+Fe,3+,络合物,LOO+H,+,+Fe,2+,络合物,终止阶段：,LOO+LOO LOOL+O,2,L+L LL,LO+L LOL,5.生物体内自由基的清除,活性氧中间体防卫系统主要包括：,超氧化物歧化酶,superxide dismutase(SOD),过氧化氢酶,CAT,谷胱甘肽过氧化物酶（,GSH-Px）,还原型谷胱甘肽（,GSH）,尿酸,受体,（,receptor）,：,对特定生物活性物质具有识别能力并可选择性地与其结合的生物大分子。,受体按其分布位置：细胞膜受体、胞浆受体、胞核受体。,受体的化学性质一般认为是糖蛋白/脂蛋白/其他特殊蛋白质，只占细胞极小部分，却与配体有高度亲和力。,3.3.1.3 受体作用学说,配体,（,ligand）,:,对受体具有选择性结合能力的生物活性物质。,配体包括:,内源性活性物质：激素、抗体,外源性活性物质：毒物、食物、药物,受体与配体的结合是化学性的，除两者的构象必须互补以外，还需要两者间有相互吸引力，可通过分子间力、离子键、氢键等形式结合。,某些神经毒物的毒性作用，与其干扰正常受体-配体相互作用的能力有关。,例如，有机磷农药中毒是由于有机磷抑制胆碱酯酶的活性，使其失去分解乙酰胆碱的能力，导致乙酰胆碱积聚，后者与毒蕈碱型胆碱能受体（,M,型受体）和烟碱型胆碱能受体（,N,型受体）结合，产生毒蕈碱样和烟碱样神经症状。,外源物进入机体后：,1）在酶的作用下，发生生物转化,2）导致机体内酶含量和酶活性的改变,酶的诱导：外源化学物使某些代谢酶系的活力增强或酶的含量增加。,酶的抑制：抑制剂可使酶活力减弱，含量减少或催化反应速率减慢，甚至有的毒物能使酶永久失活。,3.3.1.4 对酶作用的影响,很多环境化学物的毒作用就是基于与酶的相互作用。,重金属可以与酶蛋白分子活性部位的巯基结合，抑制酶的活性，从而产生毒性效应。,如对氯汞苯甲酸可以通过与巯基结合而抑制巯基酶的活性。,三价有机砷化合物与辅酶硫辛酸作用时，可能会破坏硫辛酸辅酶，从而抑制丙酮酸氧化酶的活性。,外源性化学物对某一器官组织的毒性作用，可能导致其细胞膜的透性发生改变或被破坏，使细胞中的酶进入血清中，造成血清中某些酶活性的增高，因此，通过检测血清中某些器官组织的特异性酶的活性，可反映该器官组织是否正常或受化学物损害的程度，这在中毒诊断上有着重要意义。,如,CCl,4,或其它有机溶剂，导致血清中转氨酶及乳酸脱氢酶活性水平比正常高出几十倍。根据血清中这些酶活性水平，可以推测肝细胞受损伤的程度。,正常情况下，机体内细胞外液,Ca,2+,比细胞内,Ca,2+,高10,3,-10,4,倍，外源化学物会使,Ca,2+,内流增加，使细胞内钙稳态紊乱并引发一系列严重后果。,严重后果：,细胞死亡,细胞损伤,细胞凋亡,3.3.1.5 干扰细胞内钙稳态,许多外源化学物都能干扰细胞内钙稳态，如硝基酚、酮、过氧化物、醛类、二噁英、卤化链烷、链烯和,Cd,2+,、Pb,2+,、Hg,2+,等重金属离子。,生命活动所需能量来源于糖类和脂肪类等物质的生物氧化，产生的能量以,ATP,形式暂时储存。,外源物的影响：,干扰糖类氧化，使细胞不产生,ATP，,如氰化物、,H,2,S,使能量不能以,ATP,的形式贮存，如氯化联苯、钒类化合物,3.3.1.6 干扰细胞能量的产生与供给,3.3.2 化学污染物的三致作用,3.3.2.1 致突变作用,1）突变损伤的类型,基因突变（,gene mutation,）：,DNA,碱基对排列顺序发生改变。,主要类型:碱基置换,移码突变,大段损伤,碱基,：,腺嘌呤（,A,Adenine),鸟嘌呤（,G,Guanine),胞嘧啶（,C,Cytosine),胸腺嘧啶（,T,Thymine),A-T，G-C,三个碱基对构成一个密码子。,引起碱基置换的方式：,类碱基的引入,正常碱基对的化学改变,化学物与碱基结合,碱基对的自发突变,A,T,C,G,G,C,G,T,G,A,C,G,A,T,C,A,T,A,T,A,T,碱基置换,（,Base-pair substitution)：,染色体畸变(,chromosome aberration),：,染色体结构畸变：,染色体断裂及断裂后的异常重接,染色体数目改变：,因纺锤体受损后出现染色体分离异常,不同种属动物的染色体数目,种属 体细胞(2,n),性细胞(,n),物种 体细胞(2,n),性细胞(,n),人 46 23 猫 38 19,大鼠 42 21 兔 44 22,小鼠,40 20 狗 78 39,2）,DNA,损伤的分子机理,A）,共价结合形成化合物：,外源化学物可与,DNA,作用形成加合物，加合物较为稳定，通常很难用一般的化学或生物学方法使其解离。,如黄曲霉毒素,B、,苯并芘，在机体内先经生物活化形成环氧化物，然后与,DNA,发生共价结合产生巨大的加合物分子，从而诱变突变并最终致癌。,化学变化:,B）,碱基类似物取代：,分子结构与碱基非常相似的化合物，在,DNA,复制期与天然碱基竞争，取代其位置。,如5-溴脱氧尿嘧啶核苷能取代胸腺嘧啶,2-氨基嘌呤能取代鸟嘌呤,C）,改变或破坏碱基的化学结构：,有的化学物可使碱基氧化，从而破坏或改变其结构，有时引起链断裂。如亚硝酸根可使腺嘌呤和胞嘧啶发生氧化性脱氮。,D）,平面大分子嵌入,DNA,链：,有些大分子以静电吸附形式嵌入,DNA,单链的碱基之间或,DNA,双螺旋结构的相邻多核苷酸链之间。,物理变化:,DNA,构象改变也与突变有关。,3）,不以,DNA,为靶的损伤机理,目前比较注意对诱发染色体分离异常的研究，过去常概括为对纺锤体的毒作用。从理论上讲，受作用的靶比较广泛，不完全限于纺锤体本身。对,DNA,合成和复制有关的酶系统作用也可间接导致基因突变或染色体畸变,。,1)突变致癌学说：由突变引起癌变。,控制细胞分裂的基因发生了突变,控制细胞膜完整性的基因发生突变,控制,DNA,修复的基因发生了突变,3.3.2.2 致癌机理,2)癌基因学说：,认为所有细胞,DNA,分子中都存在有癌基因（,oncogene）,的遗传信息，在正常情况下，这种癌基因处于阻遏状态，只有在细胞内相关调节机制遭到破坏的情况下，癌基因才能表达，从而导致细胞癌变，形成肿瘤。,3)基因外调节障碍学说：认为是基因外的一些物质，如蛋白质、生物膜、,RNA,及某些激素等发生了变化，影响到基因的调节，使之出现不正常的关闭和开放。,癌变的非基因机理非常值得重视，因为有一些致癌物目前用任何一种致突变试验都不能检出致突变性，而且有一些实验也支持癌变的非基因学说。,近年来，已有学者试用基因机理和基因外机理结合的观点，来解释致癌机理。,致畸作用（,teratogenicity）,则指物理、化学和生物因素可使胚胎的生长发育过程受到干扰，影响其正常发育，致使胎儿在出生时具有某种器官形态结构异常。,凡能通过母体干扰胚胎或胎儿正常发育使其出生时具有畸形的因子称为致畸原（,teratogen）,或致畸物或致畸剂。,化学性致畸物质是最重要的一类致畸原，物理因子(如电离辐射)和生物因子(如某些病毒)也具有致畸作用。,3.3.2.3 致畸机理,相关机理：,1)基因突变、染色体畸变（突变致畸）,2)酶的抑制,3)生物合成的原料和数量不足,4)对细胞膜的损伤,5)细胞毒作用,6)非特异性发育毒性作用,7)母体及胚胎的正常功能受到干扰,3.3.3 细胞与亚细胞水平的毒性作用,3.3.3.1 对细胞膜的损伤,细胞膜的功能：,保护细胞、进行物质转运、能量转换、物质代谢、细胞识别、信息传递、运动等生理功能,损伤：细胞膜结构与功能的改变（膜成分、流动性、影响酶活性、质膜通透性）,3.3.3.2 对细胞器的损伤,1）滑面内质网,功能：含有一些酶如细胞色素,P450,酶系，具有解毒功能。,损伤：毒物如,CCl,4,会使内质网结构和细胞色素,P450,遭受破坏。,2）粗面内质网,功能：粗面内质网膜表面附着很多核糖体，是合成蛋白质的重要部位。,损伤：黄曲霉毒素、芳香胺等毒物能引起核糖体脱落，影响蛋白质的合成。,3）线粒体,功能：,含有多种酶，是生物代谢和能量转换的重要场所，是真核细胞进行氧化磷酸化的部位。,损伤：,毒物如氯霉素等引起线粒体膜和嵴的变形,克山病：缺乏硒引起的地方病（硒对线粒体膜有稳定作用）,4）高尔基体,功能：与细胞内物质的转运和细胞膜更新有关。,损伤：当内质网受损时，可发生肿胀及其他结构的改变。,5）微丝和微管,功能：微丝参与肌肉收缩、变形运动；微管参与细胞形态的维持、细胞运动等。,损伤：细胞松弛素可切断微丝，抑制细胞运动和收缩；如秋水仙素可分散微管，干扰纺锤体的功能。,6）溶酶体,功能：,含有多种酸性水解酶，主要功能是进行细胞内的消化作用，对生物大分子具有强烈的消化作用，可以消除细胞中无用的生物大分子，衰老的细胞器等。,损伤：毒物可使溶酶体损伤，使水解酶释放出来。,3.3.3.3 对细胞核的损伤,毒物可使细胞核发生非特异性改变，如出现核膜反折，产生核内包含体等。,改变的类型：,核仁离析：放线菌素,D、4-,硝基奎啉-,N-,氧化物、硫酸原黄素、,核仁破碎：乙硫氨酸、,-,鹅膏菌素、丰加霉素和放线菌素,3.4 影响毒性作用的因素,外源化学物的结构与性质,生物因素,非生物因素,接触条件,3.4.1 外源化学物的结构与性质,1）同系物的碳原子数,对于烷、醇、酮等碳氢化合物的同系物而言，一般是碳原子数愈多，毒性愈大（甲醇与甲醛除外）。但当碳原子数超过一定限度时（79个），毒性反而迅速下降。,同系物中，当碳原子数相同时，直链的毒性比支链的大，如庚烷异庚烷；成环的大于不成环的，如环戊烷戊烷。,3.4.1.1 化学结构与毒性,2）分子饱和度,分子中不饱和键增多，使化学物活性增大，其毒性也增加。,如二碳烃类的麻醉作用：乙炔乙烯乙烷。,对眼结膜的刺激作用：丙烯醛丙醛，丁烯醛丁醛。,3）官能团的影响,卤素：,卤素元素有强烈的吸电子效应，在结构中增加卤素原子可使分子极性增加，使其易与酶系统结合，使毒性增强。,例如，氯化甲烷的肝毒性大小依次是：,CCl,4,CHCl,3,CH,2,Cl,2,CH,3,ClCH,4,。,氨基：,胺具有碱性，易与核酸、蛋白质（包括酶）的酸性基团起反应。胺类化合物的毒性大小依次为：伯胺(,RNH,2,),仲胺(,RNHR),叔胺(,RNRR)。,羟基：,在芳香族化合物中引入羟基，可使分子极性增强，毒性增加。,例如，苯引入羟基转化成苯酚，苯酚具弱酸性，易与蛋白质中碱性基团结合，与酶蛋白有较强的亲和力，毒性增大。多羟基的芳香族化合物毒性更高。,巯基：,巯基容易与多种金属离子生成硫醇盐，比相应的醇化合物的脂溶性增大，更易于透过生物膜。,酸基：,羧基（,COOH）,和磺酸基（,SO,3,H）,等酸基引入时，有机分子的水溶性和电离度增高，脂溶性降低，由于难以吸收和转运，使其毒性降低。,电负性基团：,如硝基（,NO,2,）、,酮（,COR）、,醛（,CHO）、,三氯甲基（,CCl,3,）、,乙烯基（,CH=CH,2,）、,苯基（,C,6,H,5,）,等，可以与生物体内带正电荷的基团相互吸引，使其生物毒性增强。,化学物质的同分异构体之间毒性不同，一般为：对位邻位间位，如二甲苯、硝基酚、氯酚等。,但也有例外，如邻硝基苯醛的毒性大于其对位异构体的毒性。,同一化学物质的不同旋光异构体的毒性也不同。一般,L-,异构体易与酶、受体结合，具生物活性，而,D-,异构体反之。,4）构型的影响,有机磷化合物的结构与毒性,R,与,R,为烷基时，其碳原子数愈多毒性愈强，即甲基乙基异丙基。,Y,可以是硫（对硫磷），也可以是氧（对氧磷），为氧时较为硫时的毒性大。,X,一般为酸性基团。,X,为酸根时的毒性较弱酸根大；,X,为苯基时，其毒性与苯环上的取代基性质有关，毒性按大小依次为：-,NO,2,-CN-Cl-H-CH,3,-C,4,H,9,-CH,3,O-NH,2,；,若同为-,NO,2,，,则与取代位置有关，其毒性一般为：对位邻位间位。,1）脂/水分配系数,一般脂溶性高的毒物易于被吸收且不易被排泄，在体内停留时间长，毒性较大。,2）水溶性,一般有毒化学物在水中，特别是在体液中的溶解度愈大，毒性就愈强。,3）电离度,对于弱酸或弱碱性有机化合物，在体内环境的,pH,条件下，其电离度越低，非离子型比率越高，越容易吸收，易于发挥毒效应。,3.4.1.2 物理性质与毒性,4）挥发度和蒸气压,在常温下易于挥发的化学物，容易形成较大的蒸气压而通过呼吸道和皮肤吸收进入机体。,5）分散度,粉尘、烟、雾等气溶胶含有大量的悬浮固体物质，其毒性与分散度有关。颗粒越小，分散度越大，比表面积也越大，其生物活性就越强。,6）纯度,工业化学品中常混有溶剂、剩余的原料、合成的副产品、赋形剂、添加剂等杂质，这些杂质可能影响、增强、甚至改变原化合物的毒性作用，有的杂质比原化合物的毒性还要大。,1）种属差异,（,species/strain differences）,：,指外源化学物的毒性在人与动物之间、不同种生物之间以及同一物种的不同品系之间存在的差异。,例如，人对阿托品的敏感性要比兔大15倍，而士的宁对兔的毒性却比人大得多；苯可引起兔白细胞减少，而对狗则引起白细胞升高。,个体差异是指同一物种（系）之内，不同个体对外源化学物的反应方面存在的差异。,3.4.2 生物因素,2）年龄,在动物发育的不同阶段，某些组织器官和酶系的发育并不相同。,处于幼年期的动物，由于中枢神经系统未发育成熟，并且体内缺乏某种代谢酶，故对中枢神经系统兴奋剂的敏感性较差。如有机氯杀虫剂,DDT、,狄氏剂对新生大鼠的,LD,50,值分别为成年大鼠的20倍和210倍。,幼年和成年个体对毒物吸收与排泄能力的差异也可影响毒性。,3）性别与激素,一般情况下，成年雌性动物比雄性动物对化学物质的毒性敏感。例如，苯、二硝基苯、对硫磷等对雌性动物毒性较大，但也有些化学物质如铅、乙醇、马拉硫磷等对雄性大鼠毒性较强。,性别差异可能是由于激素对某些酶的活性有影响，从而影响了毒物的生物转化所致。如雄性大鼠将,DDT,转化为,DDE,的能力比雌性大鼠强。,4）营养失调,营养失调将影响化学物质的毒性作用。,营养不良，会引发微粒体酶的抑制或诱导，使化学物的生物转化速度发生变化，使毒物在体内的生物转化减慢，并出现异常毒性表现。,而营养的过剩，也有可能影响环境化学物在生物体内的毒性作用。,5）健康状况与心理因素,生物机体的健康状况也可影响化学物的毒性作用。例如，肝脏疾病一般会影响肝脏的解毒功能，从而使一些在肝脏中进行生物转化的毒物的毒性增强；有呼吸系统疾病的动物对刺激性气体及飘尘的反应增强。,良好的精神心理状态能启动人体一切自我调节的控制系统（例如神经系统、内分泌系统和免疫系统等）以增强抗病能力；而精神忧愁、情绪悲伤，则会削弱抗病能力，导致疾病的发生。,6）生物节律,生物节律即生物钟，是生命在长期进化过程中形成的基本特征。目前已有大量资料表明，动物对外源化学物作用的反应受到季节和昼夜变化规律的影响。化学物的毒性可因每日给药的时间或给药的季节不同而有差异。,例如，给小鼠腹腔注射相同剂量的乙醇，发现下午16时和20时死亡率最高；又如，给予大鼠相同剂量的苯丙胺，清晨3时死亡率为78，而上午8时仅为7。,1）温度,通常温度与毒性呈正相关关系，化学物质对生物体的毒性会随温度升高而增加。,2）湿度,高气湿，尤其伴随高气温时，使源化学物经皮肤吸收速度加快。气湿增大，汗液蒸发困难，皮肤表面的水合作用加强，水溶性强的化学物可溶于皮肤表面的水膜而被吸收，同时也延长了化学物与皮肤的接触时间，亦使吸收量增加。,3.4.3 非生物因素,3）气压,一些化学物的毒性对大气压的变化比较敏感，如士的宁在高原低气压下毒性降低，而氨基丙苯毒性增强。,4）,pH,在酸性较强的条件下（,pH5），,氢离子本身就可能对水生生物产生危害，它会增加鳃上皮的通透性而导致生物体内重要电解质的流失。,1）接触途径和方式,化学物经,不同途径,进入生物体，所引起的毒性反应程度有很大差异。,一般认为，同种动物通过不同途径接触外源化学物的吸收速度和毒性大小顺序是：,静脉注射腹腔注射肌肉注射经口经皮,接触时间:,接触频率和接触间隔:,3.4.4 接触条件,2）溶剂,溶剂对某些化学物的毒性有一定影响，如选择不当，可影响毒物的吸收、排泄进而影响其毒性。,如：,DDT,的油溶液对大鼠的,LD,50,为150,mg/kg，,而其水溶液为500,mg/kg，,其主要原因是油可促进,DDT,的吸收，如用油量过大会导致腹泻反而影响吸收。,3）毒物浓度与剂量,同等剂量情况下，一般是浓溶液较稀溶液毒作用强。,染毒剂量或容积对毒性也有影响，在动物实验中，一次灌胃容积一般为体重的12%，不应超过3%；静脉注射的容积对鼠类不能超过0.5,mL，,较大动物不能超过2,mL。,4）交叉接触,在考察和分析毒物毒性时，应充分重视交叉接触带来的影响。如在动物实验中，毒物经呼吸道接触时，应保护皮肤，防止气态毒物经皮肤吸收。,