检验科生物安全防护课件.ppt

Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,*,以前的实验室,.,现在的实验室对个人防护有了新的要求,.,1,生物安全概要,简介,实验室内感染,生物危害分类,感染,/,生物危害控制,溢出响应,生物医学废弃物处理,总结,2,什么是生物安全,?,从业人员处理生物危害材料时的措施，以避免感染自己、他人或环境,达到此目的主要通过：,工程学控制,行政管理控制,操作与规程,个体防护设备,3,什么是生物危害,?,例如：,病毒、细菌、真菌和寄生虫以及他们的毒素,血液和体液,还有人和动物的组织,变异的细胞系和一些特定类型的核酸,是由生物或者此种生物产生的物质引起的对人、动物或环境具有潜在威胁,4,为什么我们关注生物危害物质？,可能获得实验室感染,(LAI),环境污染,造成研究的污染,公众知晓,5,实验室感染,谁,什么,哪里,何时,如何,研究者,SARS,台湾,2003,年,12,月,微生物学家,西尼罗病毒,美国,2002,年,8,月,划伤,实验室工作人员,流脑,美国,2000,年,气溶胶,?,实验室工作人员,牛痘病毒,欧洲,2002,年,接触,8,1979,1999,年间实验室相关感染（,LAI,）的统计,实验室感染,9,暴露的风险,有关的病原体,体液的类型,暴露的途径,暴露的持续时间暴露过程中的血液量,此次暴露病毒的浓度,个人保护设备使用,10,如果发生了暴露或可能发生了暴露,开始急救,通知你的管理者或指定的人,向医院的急诊部门或大学的卫生服务部门报告,向职业卫生、伤残和死亡办公室报告（电话或网络）,11,全面预防,预防血传病原体传播的最简单的行之有效的方法,包括,:,教育,洗手,穿防护设备,使用安全的工作规程,如果不能保证样品的非感染性，按照感染性样品处理,If samples cannot be guaranteed non-infective treat as infectious!,12,生物危害的分类,常见病原体,非传统的病原体,重组,DNA,组织培养,动物工作,解剖的标本,13,BSL,4,BSL,3,BSL,2,BSL,1,_,_,水平按箭头方向由低到高,微生物对人、动物、植物和,/,或环境的危险性,程序和设备需求,围堵策略水平需求,对人员、环境和社区的保护程度,生物危害的等级,14,危险,分组,个体危险,公众危险,遏制,例子,1,Low,Low,Level 1,大肠杆菌 细杆菌,2,Moderate,Limited,Level 2,大肠杆菌,0157:H7,链球菌、沙门氏菌、腺病毒、肝炎病毒,A,、,B,、,C,，流感，麻疹。,3,High,Low,Level 3,炭疽杆菌，结核分支杆菌，汉坦病毒，,HIV,，黄热病度,4,High,High,Level 4,拉沙病毒,埃博拉病毒,马尔堡病毒,Unlikely to cause disease in healthy workers or animals,Rarely cause serious human or animal disease,May cause serious disease,Likely to cause very serious disease,常见病原体的等级,15,不常见的病原体,传播性的海绵体脑病阮病毒疾病；致死性神经变性情况,庫賈氏病,新型克雅氏病,疯牛病,绵羊瘙痒病，慢性消耗性疾病。,对通常的灭活病毒的破坏方法产生抗性,与危害处理办公室接触以评估其需求（防护、程序、废弃物的处理）,16,重组,DNA,危险级别依赖于,DNA,的来源、载体及宿主,生物安全委员会将帮助研究者作出这方面的判断,遗传工程,=,在体外将遗传物质从一个细胞参入到另一个细胞,17,组织培养,一般可能含有致病微生物的潜在风险,Level 2,人和灵长类的含有支原体的细胞系,当使用新的细胞系时要进行详细的评估,其他,Level 1,18,动物工作,动物可储存感染性的微生物（自然的或引进的）,等级基于所从事工作的类型,对所有从事动物工作的人员都需要进行专门的动物照料培训,所有的工作包括动物的使用必须得到动物委员会的许可,19,解剖的标本,所有的 标本都应考虑其可能存在的感染性微生物,考虑标本的类型尤为重要,血液,器官,组织,脊髓,脑组织,来自于感染的病人,一般而言，生物,2,级仅仅依据于其工作的特性,20,感染,/,生物危害控制,工程控制,管理控制,实践与操作,个人防护设备,21,工程控制,在技术层面上,通过改变危害的来源以减少 或根除危害的暴露,防护,:,一道,vs,二道,防护水平,22,第一道防护（一级屏障）,确保工作人员和直接环境免受感染性微生物的暴露,保护性的外壳,封闭感染性的微生物或动物,培养皿,玻璃罐,瓶塞等,生物安全柜，手套箱和动物笼等装备,控制的效果取决于防护的完整性,23,第二道防护（二级屏障）,保护实验室外的环境免遭暴露,包括实验室设计和规章制度,24,生物安全防护水平,防护水平与危险水平相似,生物安全委员会将对研究提案进行评估以确保防护水平恰当。,一级 二级 三级 四级,25,一级水平,最基本的实验室,不需要特别的设计特性,不需要生物安全柜可在开放的实验台上进行工作,26,二级水平,具有生物危害,2,级的临床、诊断、研究和教学部门,如果具有气溶胶或溅出的潜在风险，需要一级或二级生物安全柜,必须制定处理溢出的应急方案,使用权应加以控制,27,专门的设计和建造,一级屏障保护个体,二级屏障保护环境,所有工作人员必须进行专门的培训：病原微生物的使用，个人防护设备，设备、废弃物处理，还有实践与操作,三级水平,安全柜：,型(全密封型),28,四级水平,在一个国家一般只有一个,设计规范异常的严格，工作人员完全与感染性材料隔离,29,30,31,生物安全柜,对生物病原物理防护的有效方法，尤其当产生气溶胶时。,高效分子空气过滤器能以,99.97%,的效率去除颗粒（最小,0.3,微米）,有三个主要级别的安全柜（,I,II,III,）能提供不同水平的保护。,32,在生物安全柜内安全操作,使用前,:,确保生物安全柜经过检验,关闭紫外灯，打开荧光灯,用适宜的消毒剂消毒工作台面,将最基本的条目放入安全柜,在工作之前，让排风机运转,5-10,分钟,33,使用中,:,确保材料和器材放置在接近安全柜内的后部，尤其是产生气溶胶的设备，不要阻挡通风口。,使用技术减少飞溅和气溶胶的产生。,总的工作流程应该是从清洁区域到污染区域。,减少运动以免阻碍气流,在生物安全柜内打开火焰存在着争议。,在生物安全柜内安全操作,34,使用后,:,保持排风机工作至少,5,分钟以清洁安全柜,移走和消毒用过的器材和材料,消毒安全柜台面,关闭排风机和荧光灯，打开紫外灯。,在生物安全柜内安全操作,35,保养,:,2,次,/,天,-,擦拭工作台面,1,次,/,周,擦拭紫外灯,1,次,/,月,擦拭所有的垂直面,1,次,/,年,紫外灯强度验证,-,用甲醛气体去除沾染,(ORM),-,认证,(ORM),在生物安全柜内安全操作,36,行政管理控制,危险评估,医学监测,培训,/,教育,资源,检查,符号,&,标志,根据程序、信息和方法将暴露危险降至最低,37,风险评估,确定防护的种类,方法和所需的安全设备,使用者的职责,能从,ORM,得到的帮助,考虑的方面有,:,实验设计,方法,个人的经验和知识情况等,www.hc-sc.gc.ca/pphb-dgspsp/ols-bsl/lbg-ldmbl/pdf/lbg-3e-draft.pdf,*,行政管理控制,38,医学监测,用医学方法监测环境污染对人类健康的影响，观察人群健康水平和人体对环境污染的生物学效应。,培训,&,教育,实验室专门的政策和规程,生物安全培训,行政管理控制,39,检查,日常的自查,生物安全检查清单,此外检查实验室以确保其按照规程或,指导方针工作并提供反馈意见,行政管理控制,40,标记,&,标签,生物危害标记必须粘贴在使用生物危害材料的实验室的门上,生物危害标签应贴在使用生物病原的容器、设备和储存装置上,行政管理控制,41,实践和规程,总的安全指导方针,好的微生物学实践,洗手,专门的规程,离心机,注射器、针头和其他的尖锐物,移液管,混匀器、研磨器、超声破碎仪、冷冻真空干燥器,接种环,冷冻切片机,42,一般实验室安全指导方针,基本的常识,你必须了解你所面对的实验室的危险，并且经过正确的培训以便处理这些危险。,最基本的是知道所有的实验危险,举出,5,个例子,?,b,i,o,s,a,f,e,t,y使用移液管和移液器,使用接种环,分离血清,打开安瓶,使用离心机,43,良好的微生物实践,(GMP),基本的使用标准适用于所有的微生物学实验工作,目的,预防实验室人员和环境被污染,预防实验或样本被污染,无菌操作、减少气溶胶产生、控制污染、个人防护、应急反应。,44,洗手,预防感染的单纯有效的方法之一,如果经常正确的执行,何时洗手？,开始任何操作之前,离开实验室之前,当手有明显的污物时,在安全柜内完成任何实验之前和之后,每次脱掉手套时,在触及脸和嘴之前,下班时,Level 1 lab,-a non antiseptic soap can be used,Level 2 lab,-requires antiseptic hand washing solutions,45,安全使用离心机,使用前,裂纹？过满？平衡？,盖子或塞子安置正确？,转速能达到？,使用可封闭的转子,使用后,离心完全停止？,溢出或渗漏？,使气溶胶沉降（,30,分钟）,or,在生物安全柜内打开,46,注射剂及针,尽可能避免使用,在生物安全柜内完成感染性材料的操作,使用注射器时小心抽吸,保护从塞子退出的针,不要弄弯、切断或翻新针,处理所有使用过的针和注射器，将其放入黄色的尖锐物体盛放器内,47,移液管,禁用嘴吸移液管,所有的生物危害材料的移液管都应在生物安全柜内使用。,不要使液体溢出，使用移液管装置。,避免飞溅，沿管壁将液体慢慢注入试管或瓶内,不要用抽,-,吸混匀溶液。,可再度使用的移液管应水平放置在已消毒的浅盘上,48,混匀器、研磨器、超声破碎器和冷冻干燥器,尽可能地在,BSC,内操作，再打开前静置,5,分钟以使气溶胶沉降。,安全地混匀,不要用玻璃混匀罐,使用后立即清除污染,冷冻真空干燥器,使用玻璃制造的真空部件时，确保使用前无损坏。,使用后所有的表面都要消毒,尽可能使用真空蒸发套,49,接种环,在开放的火焰上灭菌可能产生含有活微生物的气溶胶,柄越短，越能减少震动,一次性的塑料接种环是较好的替代,50,冷冻干燥器,在准备冰冻切片时戴手套，当使用冷冻干燥器时戴厚手套。,经常性的去污,(70%,乙醇,or,专门的消毒剂,),防备和上锁,!,51,个体防护设备,个体防护设备是非常重要的防护屏障，也是最后一道防护线,监督者和使用者的职责就是确保使用个体防护设备,护目镜,手套,实验室外衣,鞋,52,个体防护设备,考虑的标准,阻断暴露的途径,提供保护的级别,容易使用,只有当正确的选择、适合、小心使用和个体培训才能产生效果,确保离开实验室前脱下个体防护设备,53,个体防护设备,鞋袜,应该穿包裹脚趾的鞋，在一些较高级防护的实验室和动物设施部门穿靴子。,实验室外衣,长袖达膝的外衣,有弹性的袖口,后背系带的长大衣,定期清洗,54,个体防护设备,手套,对于从事生物病原的人使用乳胶、腈、乙烯树脂材料的手套,测验的手套不应再用，实用的手套能消毒再用，如果它们没有变形的征兆。,考虑弹性和手掌的长度,双层手套,危险处理办公室对那些具有过敏的人提供帮助，找到替换材质的手套。,在公共场所不要带实验手套,55,个体防护设备,眼和脸防护,护目镜、安全眼镜可以保护眼睛,面罩可以保护面部皮肤,呼吸罩,56,溢出,溢出反应不同主要基于：,溢出的是什么？,溢出多少？,在哪里溢出的,?,对环境潜在的风险是什么？,溢出物应该被立即清理（除非产生了气溶胶），确保正确的去除污染方法,确保恰当的使用个体防护设备，清除设备容易使用,57,溢出,一般清理,用吸收性物质盖住溢出区域,用恰当的消毒剂（,10%,漂白剂）浸泡溢出区,从吸收性物质的外围向内倒消毒剂,确保每个玻璃碎片都被捡起（用镊子！）并将其放入尖锐物品盛放器内。,作用,20-30,分钟,擦拭掉吸收性物质,废弃物应放入适当的生物危害物品袋，以便高压灭菌处理,58,溢出,特殊案例,在离心机内,在生物安全柜内,开放区域,(,实验室,再转送过程中,),可用的溢出响应方案在：,,www.uottawa.ca/services/ehss/SPILLRESPONSEPLAN.pdf,59,废弃物处理,生物废弃物,(,未处理,),60,废弃物处理,生物废弃物,(,已处理,),With H,2,O 1:10,In compliance with Sewer use by-laws,*,61,特殊的废弃物,EB,（溴化乙锭）,(,4.2 g,亚硝酸钠,(NaNO2),和,20 ml,次磷酸,(50%)(H3PO2),加蒸馏水至,300 ml,）,用蘸取清洗液的纸巾清洗,1,次污染区，然后用纸巾蘸取自来水清洗,5,次，再用新的纸巾擦拭,1,次，最后用紫外灯检测，以确保,EB,被完全清除。,Recombinant DNA,（重组,DNA,）,液体培养物必须加次氯酸钠至终浓度,10%,，作用至少,5,分钟，然后倒入下水道。,62,总 结,生物安全,保证个体和环境不受感染,生物危害,微生物,血液和体液，组织和组织培养,大学内的每一个人都有职责,正确的知识、计划和关注，生物暴露是可避免的,63,谢谢！,64,