花药和花粉培养.ppt

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,花药和花粉,(hufn),培养,植物,(zhw),组织培养学,第一页，共二十五页。,第5章 花药和花粉,(hufn),培养,本章主要内容,(nirng),：,花粉和花药培养技术,花粉和花药培养应用,花药,(huyo),和花粉培养,第二页，共二十五页。,(1)掌握花药培养和花粉培养的区别；,(2)了解花药最正确(zu ji)接种时期；,(3)掌握花药培养的大致过程；,(4)掌握花粉发育的四种途径；,(5)掌握花粉培养的大致过程。,花药和花粉(hufn)培养,本章,(bn zhn),教学目的与要求,第三页，共二十五页。,第一节 花药和花粉培养,(piyng),技术,花药培养,是,将花粉发育至一定阶段,(jidun),的花药接种到人工培养基上进行培养，以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的技术。,花药,(huyo),和花粉培养,第四页，共二十五页。,花粉培养：是将花粉从花药中别离出来,接种到人工(rngng)培养基上进行培养，以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的过程。,油菜成熟,(chngsh),花药的结构,花粉囊,花粉囊壁,成熟,(chngsh),花粉粒,花药裂口,第一节 花药和花粉培养技术,第五页，共二十五页。,一、花药,(huyo),和花粉的培养方法：,一花粉发育时期：,1、适宜时期：单核期,尤其是单核中、晚期(wnq)(单核靠边期),雄配子体的发育,营养细胞,生殖细胞,精子,第一节 花药和花粉培养(piyng)技术,第六页，共二十五页。,花粉粒形态,(xngti),：,第一节 花药,(huyo),和花粉培养技术,花粉粒即,雄配子体,。为,2细胞,(xbo),花粉,或,3细胞花粉,2,-,细胞花粉,3-,细胞花粉,第七页，共二十五页。,2、花粉,(hufn),发育时期的检测：,外部形态观察,：在水稻中，一般叶枕距为5-15,cm，,颖片淡黄绿色、雄蕊长度接近颖片长度的1/2时，可能为单核靠边期的花粉,(hufn),。,压片染色法,：是检测花粉发育时期的简便有效方法，常用染色剂为,醋酸洋红,。,第一节 花药和花粉培养,(piyng),技术,第八页，共二十五页。,二培养(piyng)过程,1、花药培养过程：,1预处理:低温冷藏是最常用的方法,2外表消毒,3接种,4培养(piyng)形成花粉植株。,花粉-愈伤组织-苗,花粉-胚状体-苗,第一节 花药和花粉培养(piyng)技术,选幼年树花蕾,第九页，共二十五页。,水稻,(shudo),花药培养过程：,旗叶鞘用70酒精,(jijng),擦洗一遍,剥去旗叶鞘,(yqio),，取出稻穗,10漂白粉10,min,无菌水洗,3,次,培养5天，花药变褐，20天后花药裂开，长出淡黄色的花粉愈伤组织，先长芽，后长根，形成幼苗。,用接种环接种到培养基上,左手持穗，右手用镊子取花药，放无菌培养皿中,第一节 花药和花粉培养技术,第十页，共二十五页。,花药培养脱毒技术,(jsh),1974年日本：花药培养可以脱除草莓病毒；,花药采取时期,单核期：花蕾4-6,mm，,花药1,mm,花药诱导愈伤组织培养基,MS+IAA4mg/L+BA2mg/L+KT2mg/L+,蔗糖30,g+,琼脂7,g/L,增殖分化,(fnhu),培养基,MS+GA1mg/L+IBA0.2mg/L+BA1mg/L+,蔗糖30,g+,琼脂7,g/L,生根培养基,1/2,MS+IBA0.2mg/L+,活性炭3,g/L+,蔗糖20,g+,琼脂7,g/L,第一节 花药和花粉,(hufn),培养技术,第十一页，共二十五页。,草莓花药,(huyo),愈伤组织,花药植株,第一节 花药,(huyo),和花粉培养技术,第十二页，共二十五页。,2、花粉,(hufn),培养,花粉培养成苗途径与花药培养比较(bjio):,相同点：,胚状体成苗途径、愈伤组织再分化成苗途径,不同点：,花粉培养：,需进行花粉的别离,特殊的花粉诱导培养,第一节 花药,(huyo),和花粉培养技术,第十三页，共二十五页。,花粉,(hufn),培养过程,取花蕾（镜检）,预培养数天,取花药,消毒,分离花粉,第一节 花药,(huyo),和花粉培养技术,接种,培养,愈伤组织发生,第十四页，共二十五页。,二、培养基,第一节 花药和花粉,(hufn),培养技术,根本(jbn)培养基,激素种类,(zhngli),和浓度,蔗糖浓度,第十五页，共二十五页。,一根本(jbn)培养基：,第一节 花药和花粉,(hufn),培养技术,MS,和,H,培养基：,适合,(shh),双子叶植物花药培养；,B5培养基：,适合豆科和十字花科花药培养；,N6,培养基：,适合禾谷类作物的花药培养。,第十六页，共二十五页。,第一节 花药(huyo)和花粉培养技术,细胞分裂素,可促进胚状体形成；,生长素,可诱导愈伤组织形成。,细胞分裂素与生长素比值,(bzh),高,时可诱导愈伤组织分化苗,二激素种类(zhngli)和浓度,第十七页，共二十五页。,较高,浓度,蔗糖,(zhtng),可诱导花粉形成,愈伤组织,；,较低,浓度,蔗糖可使愈伤组织分化成,苗,。,第一节 花药,(huyo),和花粉培养技术,三蔗糖(zhtng)浓度,第十八页，共二十五页。,三、单倍体植株染色体加倍,(ji bi),的方法,第一节 花药和花粉,(hufn),培养技术,1、自然加倍：花粉细胞核有丝分裂或核融合，染色体可自然加倍，获得纯合二倍体。,2、人工(rngng)加倍：用秋水仙素处理单倍体植物，可使染色体加倍溶液浸苗、处理愈伤组织和用含0.4%秋水仙素的羊毛脂涂抹单倍体植株的顶芽、腋芽，可得到能结实的二倍体植株,3、将单倍体植株诱导的愈伤组织反复继代培养，再分化可得到二倍体植株。,第十九页，共二十五页。,第二节 花药,(huyo),和花粉培养的应用,-,单倍体植株育种,1、克服后代别离(fnl)，缩短育种周期；,2、有利于筛选隐性突变体，选择效率高;,3、有利于隐性基因控制性状的选择,4、快速获得自交系的超雄株,花药,(huyo),和花粉培养,第二十页，共二十五页。,大大缩短育种,(y zhng),周期,第二节 花药和花粉培养,(piyng),的应用,第二十一页，共二十五页。,(1)花药培养是器官培养，花粉培养属细胞培养。,(2)花药培养一般选择花粉的单核期进行接种。,(3)花药培养包括：选择材料-消毒-接种培养-愈合组织生成-分化出单倍体植株。,(4)花粉的发育(fy)途径包括：营养细胞发育(fy)、生殖细胞发育(fy)、营养和生殖细胞同时发育(fy)及花粉均等分裂发育(fy)。,(5)花粉培养包括花粉的别离-预处理-培养过程。,花药和花粉,(hufn),培养,本章,(bn zhn),小结：,第二十二页，共二十五页。,作业,(zuy),：,1、花药离体培养与单倍体育种是一回事吗？,2、花药离体培养得到的植株一定是单倍体吗？,3、花药离体培养与花粉,(hufn),离体培养一样吗？,第二十三页，共二十五页。,谢谢(xi xie)!,第5章 花药,(huyo),和花粉培养,第二十四页，共二十五页。,内容,(nirng),总结,花药和花粉培养。第5章 花药和花粉培养。花粉培养：是将花粉从花药中别离出来,接种到人工培养基上进行(jnxng)培养，以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的过程。花粉-愈伤组织-苗。花粉-胚状体-苗。用接种环接种到培养基上。草莓花药愈伤组织,花药植株。胚状体成苗途径、愈伤组织再分化成苗途径。第二节 花药和花粉培养的应用 -单倍体植株育种。3、花药离体培养与花粉离体培养一样吗,第二十五页，共二十五页。,