微生物的实验室培养第二课时.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,微生物的实验室培养第二课时,*,微生物的实验室培养第二课时,微生物实验室培养,（知识点总结）,2,微生物的实验室培养第二课时,复习题,1、甲、乙、丙是三种微生物，下表、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖；甲能在中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是：,粉状硫,10g,K,2,HPO,4,4g,FeSO,4,0.5g,蔗糖,10g,（NH）,2,SO,4,0.4g,H,2,O,100mL,MgSO,4,9.25g,CaCI,2,0.5g,A、甲乙丙都是异养微生物,B、甲乙都是自养微生物、丙是异养微生物,C、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物,D、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物,3,微生物的实验室培养第二课时,复习题,2、培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是：,化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线灭菌,高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法,A、B、,C、D、,4,微生物的实验室培养第二课时,三、纯化大肠杆菌,实验目的：,接种大肠杆菌于培养基上，经过培养使其形成由单个细胞繁殖形成的子细胞群体，即菌落。,实验过程：(知识网络）,配制培养基,接种大肠杆菌,恒温培养箱中培养（1224h）,结果分析与评价,计算 称量 溶化 灭菌 倒平板,调PH 分装 包扎,菌种保藏,平板划线,稀释涂布平板,未接种的培养（对照组）,接种的培养（实验组）,培养基配制成功与否？,接种操作成功与否？,5,微生物的实验室培养第二课时,配制培养基,在火焰旁,右手拿,锥形瓶，,左手拔出,棉塞；,右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口,迅速,通过火焰；,左手,将培养皿,打开一条缝隙,，,右手,将培养基,倒,入培养皿，,立刻盖,上皿盖。,待平板冷却,凝固后,，将平板,倒过来,放置。,倒平板过程总结：,6,微生物的实验室培养第二课时,Q1.培养基高压蒸汽灭菌后，需冷却到_左右时，才能倒平板。用什么办法来估计培养基的温度？,_,Q2.操作时锥形瓶口通过酒精灯火焰的目的是：,_,Q3.将平板倒置的目的是：,_,Q4.在倒平板过程中，将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？,_,50,感觉锥形瓶的温度刚刚,不烫手，,就可以倒平板了,防止,瓶口微生物,污染,培养基,既可以使,培养基表面冷凝的水分更好的挥发，,又可以防止,皿盖上的水珠落入培养基，造成污染,不能，,因为,空气中的,微生物可能,在皿盖和皿底之间的培养基上,滋生,。,配制培养基,7,微生物的实验室培养第二课时,平板划线接种,原理：,通过,接种环在琼脂固体培养基表面,连续划线的操,作,，将聚集的菌种,逐步稀释,分散到培养基表面。,8,微生物的实验室培养第二课时,平板划线接种,灼烧接种环,冷却,划线 （第一区域）,蘸取菌液,灼烧接种环,冷却,划线 （第二区域）,灼烧接种环,冷却,划线 （第三区域）,灼烧接种环,冷却,划线 （第四区域）,灼烧接种环,冷却,划线 （第五区域）,灼烧接种环,平板倒置放置培养,9,微生物的实验室培养第二课时,平板划线接种,第一区域,第二区域,第三区域,第四区域,第五区域,10,微生物的实验室培养第二课时,Q2：,每次划线前灼烧接种环的目的：,Q3：,划线结束后灼烧接种环的目的：,平板划线接种答案：,避免,接种环上可能存在的微生物,污染,培养基,答案：,杀死,上次划线结束后,残留的菌种,答案：,及时杀死接种环上残留的菌种，,避免污染,环 境和操作者。,Q1：,第一步灼烧接种环的目的：,11,微生物的实验室培养第二课时,稀释涂布平板接种,原理：,将,菌液,进行一系列梯度稀释，,并将,不同稀释度,菌液,分别,涂布到,琼脂,固体培养基,上进行培养。,当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成,的,标准菌落,。,12,微生物的实验室培养第二课时,1、梯度稀释,2、涂布平板,稀释涂布平板接种,13,微生物的实验室培养第二课时,结果分析与评价,1、培养基制备成功的标准,2、接种操作成功的标准,如果,未接种的,培养基在恒温箱中保温12天后,无菌落,生长，,说明,培养基配制是,成功,的，否则实验失败，需重新配制。,如果,培养基上生长的菌落颜色、性状、大小基本一致，,并符合大肠杆菌菌落的特点，,则说明,操作是符合要求的。,如果,培养基上出现了其他菌落，,则说明,接种过程中，无菌,操作还未达到要求，实验失败，需分析原因，再次实验。,14,微生物的实验室培养第二课时,菌种的保藏（了解）,1、,临时保藏,：适用于,频繁使用,的菌种。,将菌种接种到固体斜面培养基，在适宜的温度下培养。当菌落长成后，将试管置于4的冰箱中保藏,2、,甘油冷冻管保藏：,适用于需,长期保存,的菌种。,在3mL甘油瓶中，装入1mL甘油灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀，放-20的冷冻箱中保藏,15,微生物的实验室培养第二课时,纯化大肠杆菌,（实验过程）,16,微生物的实验室培养第二课时,