磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,磺胺,嘧啶钠药物代谢动力学参数测定,一、实 验 目 的,1.,掌握磺胺类药物血浆药物浓度的测定方法,2.,掌握药物半衰期的计算方法,3.,了解药物血浆半衰期测定及计算的临床意 义,二、实 验 原 理,1.,多数药物在体内按一级动力学规律消除,静脉注射后，如以血浆药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其时量关系常呈直线。,2.,药物血浆半衰期（,half life,，,T,1/2,）为：,Ke,=2.303(logC,1,-logC,2,)/t,2,-t,1,二、实 验 原 理,3.,呈色原理：,磺胺类药物在酸性溶液中，与亚硝酸钠起重氮反应，生成重氮盐。此重氮盐在碱性溶液中与酚类,化合物起偶联反应，生成橙红色的偶氮化合物。,偶氮化合物的显色深浅与磺胺的浓度有关。,三、实 验 动 物,家兔（体重,2.5Kg,左右）,四、实 验 器 材 和 药 品,1.,器材：分光光度计、离心机、兔手术台、手术器,械、动脉夹、动脉插管、磅秤、注射器、,移液管、离心管、试管等,分光光度计 离心机,四、实 验 器 材 和 药 品,2.,药品：,20%,磺胺嘧啶钠溶液、,1%,肝素钠溶液、,0.02%,磺胺嘧啶,钠溶液（标准液）、,7.5%,三氯醋酸溶液,、,0.5%,亚硝酸钠,溶液、,0.5%,麝香草酚溶液,、,20%NaOH,溶液、,20%,乌拉坦溶液、蒸馏水,五、实 验 步 骤,（一）,动物基本操作,（二）测定液和标准液的配制,（三）比色管的配制,（四）比色与计算,（一）动物基本操作,(,血液标本的采集）,1.,抓取,家兔,1,只，称重，用,20,乌拉坦溶液,5mL/kg,行耳缘静脉麻醉，然后固定于手术台上。,2.,气管插管,手术区,剪毛，沿正中线剪开颈部皮肤，钝性分离皮下组织及肌肉，找出并游离气管，穿一根线备用。确定甲状软骨的位置，在其下,34,环装软骨处切一倒“,T”,形切口，插管固定。,(一)动物基本操作(血液标本的采集）,3,.游离颈总动脉：分开肌肉层后，,找出一侧颈总动脉并分离约,23cm左右在其下穿线两根线备用,。,（一）动物基本操作,4.,全身肝素化：耳缘静脉注射,肝素,5ml,。,线,1,结扎远心端，待血管充盈后，动脉夹夹闭近心端,远心端剪一,“,V,”,形口，动脉插管，线,2,结扎固定（二次固定）,5.,动脉插管（肝素润洗）,（一）动物基本操作,6.,取血：打开动脉夹取空白血样,2ml,置于用肝素浸过的试管中待用；然后,由耳缘静脉注射,20,磺胺,嘧啶钠溶液,2ml/kg,，于给药,后,10min,及,40min,各取血,2ml,，分别置于同上试管中,待用,（二）测定液和标准液的配制,测定液的配制,：用,1ml,注射器抽取,上述血液各,0.2ml,，,置于已盛有,5.8ml,7.5,三氯醋酸,溶液的玻璃试管中，充分,摇匀，然后以,1500r/min,，离心,5min,待用。,标准液的配制：取,0.02,磺胺嘧啶钠,溶液,0.2ml,，,加入已装有,5.8ml,7.5,三氯醋酸,溶液试管中,，摇匀待用,。,成分,空白管（,mL,）,标准管,（,mL,）,测定管（,mL,）,给药前,给,药,10min,给,药,40min,测定液,/,/,1.5,1.5,1.5,标准液,/,1.5,/,/,/,蒸馏水,1.5,/,/,/,/,0.5,NaNO,2,0.5,0.5,0.5,0.5,0.5,0.5,麝香草酚,1.0,1.0,1.0,1.0,1.0,（三）各比色管的配制,蒸馏水,0.02%NaSD,1,组标本各取,0.2ml,加入,2,组,2,组各试管先加,三氯乙酸,5.8ml,2,组测定液各取,1.5ml,清液加入,3,组,加,0.5mlNaNO,2,加,1ml,麝香草酚,标本,（,1,组）,测定液（,2,组）,比色液（,3,组）,空白管,标准管,给药前,药后,10,药后,40,取,13,支试管,分别用记号笔,标记,（四）比色与计算,用72,2,型分光光度计进行比色，选波长520nm，以空白管调,“,0,”,点，读出标准管及各测定管光密度，并记录。,六、实 验 结 果,标准管,测定管,给药前,给药,后,10min,给药,后,40min,光密度值,1.,各比色管的,光密度值,六、实 验 结 果,2.,计算,Ke,及,T,1/2,Ke,=2.303(logC,1,-logC,2,)/t,2,-t,1,C,NaSD,=C,标,/OD,标,（,OD,给药后,-OD,给药前,）,七、注 意 事 项,1.麻醉时一定把握好速度。,2.每次取血之前要先将残血放掉。,3.各盛血的试管及动脉插管要用肝素浸润，动脉插管前要先注射肝素,(,全身肝素化,),。,4.将血样加到三氯醋酸试管中应边加边,摇匀，否则易出现血凝块,。,5.配制比色管的时候各个试管要做好标记。,6.加亚硝酸钠和麝香草酚的顺序不要混乱,。,谢谢,