供试品溶液制备的主要原则课件.ppt

Click to edit Master title style,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,中药分析,第三章 中药分析供试品的制备,要点导航,1.,掌握,常用,中药样品的粉碎、提取、纯化和浓缩方法。,2.,熟悉,中药样品的衍生化方法及不同类型中药样品的,前,处理特点。,学习内容,第一节 中药样品前处理方法,第二节 不同类型中药样品的前处理特点,第一节 中药样品前处理方法,供试品,溶液制备的主要原则,最大限度地保留待测成分，排除干扰成分，使待测成分在溶液中的浓度达到分析方法的要求。,一、粉碎,粉碎的,目的：,确保取样均匀,而具有代表性,，,提高分析结果的准备确度和精密度；,有利于,样品中的待测组分更快、更彻底地被提取出来,。,粉碎,设备,：,粉碎机,、研钵,、铜,冲、匀浆机等,二、提取,提取的目的,：,为了将样品中的待测成分溶解和释放出来，并制成一定浓度的溶液。,浸渍法,超声提取法,回流提取法,连续回流提取法,水蒸气蒸馏法,消化法,超临界流体萃取法,微波辅助萃取法,加压液体萃取法,三、纯化,（一）沉淀法,（,1,）沉淀除去杂质,（,2,）沉淀为待测组分,三、纯化,（二）液,-,液萃取法：,1、,直接萃取法：,利用待测组分与干扰成分在有机溶剂和水两相中分配系数不同，多次萃取,2、,离子对萃取法：,在一定,pH,介质中，某些有机酸（碱）性成分形成的离子与带相反电荷的离子（离子对试剂）定量结合为弱极性的离子对化合物，而易溶于有机溶剂，从而实现分离。,BH,+,（水相）,+In,-,（水相）,BH,+,In,-,（水相）,BH,+,In,-,（有机相）,三、纯化,（三）色谱法：,1、,硅胶：根据吸附作用大小不同而实现分离,2、,氧化铝：极性吸附剂，常用中性氧化铝,3、,大孔树脂：分离纯化作用依赖其与被吸附分子间的范德华力,4、,聚酰胺：氢键吸附作用,5、,离子交换树脂：离子交换作用,6、,硅藻土、纤维素：分配作用原理,满山红油的鉴别,取本品,0.1g,，加正己烷,5ml,使溶解，置硅胶柱（,120,150,目，,3g,，内径为,1cm,，湿法装柱，上加无水硫酸钠,3g,）上，用正己烷,50ml,洗脱，弃去洗脱液，再用正己烷,-,乙酸乙酯（,50:1,）,50ml,洗脱，收集洗脱液，作为供试品溶液。,小建中颗粒中白芍的鉴别,处方,白芍,400g,大枣,200g,桂枝,200g,炙,甘草,133g,生姜,200g,取,本品,1.5g,，加硅藻土,1g,，研匀，加甲醇,30ml,，,加热回流,1h,，滤过，滤液浓缩至,约,2ml,，,加中性,氧化铝,2g,，拌匀，干燥，加在中性氧化铝柱（,100,200,目，,1g,，内径为,1cm,）上，用甲醇,100ml,洗脱,，收集洗脱液，蒸干，残渣加无水乙醇,1ml使溶解，作为供试品溶液。,小青龙颗粒中的五味子醇甲的鉴别,处方,麻黄,154,g,桂枝,154g,白芍,154g,干姜,154g,细辛,77g,炙甘草,154g,法半夏,231g,五味子,154g,取本品,10g,或,5g,（无蔗糖），研细，加甲醇,50ml,，超声处理,30min,，滤过，滤液蒸干，残渣用水,20ml,溶解，通过,D101,型大孔吸附树脂柱（内径为,1cm,，柱高为,10cm,），用水,100ml,洗脱，再用,70%,乙醇,40ml,洗脱，收集,70%,乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇,1ml,使溶解，作为供试品溶液。,通乐颗粒中枳壳的鉴别,处方,何首乌 地黄,当归,麦冬 玄参,麸炒枳壳,取本品,2g,，研细，加甲醇,30ml,，超声处理,30min,，滤过，滤液蒸干，残渣加水,10ml,使溶解，加在聚酰胺柱（,30,60,目，,5g,，内径为,1.5cm,，湿法装柱）上，先用水,100ml,洗脱，弃去水液，继用,35%,乙醇,100ml,洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇,2ml,使溶解，作为供试品溶液。,肾复康胶囊中益母草的鉴别,处方,土,茯苓,366g,槐花,93g,白茅,根,366g,益母草,93g,广藿香,28g,取本品内容物,3g,，加甲醇,30ml,，,加热回流,1h,，滤过，滤液蒸干，残渣用,0.1mol/L,盐酸溶液,5ml,溶解,，通过强酸型阳离子交换树脂柱（,732,型钠型，内径为,0.9cm,，柱长为,12cm,），用水洗至洗脱液近无色，弃去水洗液，再以,2mol/L,氨溶液,50ml,洗脱,，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇,1ml,使,溶解，作为供试品溶液。,三、纯化,（四）固相萃取法：,基于相似相溶原理和,HPLC、GC,固定相理论,（五）微萃取技术：,SPME，LPME,四、浓缩,水浴蒸发法：,适合对热稳定的非挥发成分,自然挥散法：,适合极易挥发溶剂或小体积提取液,减压浓缩法：,适合对热不稳定成分，可回收溶剂,气流吹蒸法：,适合少量液体，结构不稳定、易氧化成分,冷冻干燥法：,适合对热不稳定的生物样品,五、衍生化,甲酯化：,脂肪酸及油脂与甲醇酯化反应,GC,分析,硅烷化：,活泼氢基团,+,硅烷化试剂硅烷化,GC,分析,酰化：,具有极性基团,+,酰化试剂酰化,不对称衍生化：,加不对称,/,手性衍生化试剂,GC/HPLC,紫外衍生化：,加具有紫外吸收基团的试剂,HPLC-UVD,荧光衍生化：,加荧光衍生试剂,HPLC-,荧光检测,电化学衍生化：,加电化学试剂,HPLC-,电化学检测器,蓖麻油中蓖麻油酸的含量测定,取本品,40mg,，精密称定，置,50ml,圆底烧瓶中，加入,0.5mol/L,氢氧化钾,-,甲醇溶液,5ml,，在,60,水浴中回流,30min,，至油滴全部消失，再加入三氟化硼乙醚甲醇（,1:3,，,ml/ml,）,4ml,，回流,5min,，冷却，精密加入正己烷,5ml,，振摇,5min,，分取正己烷，用饱和氯化钠溶液洗涤两次，每次,5ml,，放置，取上清液，置,10ml,具塞试管中，加,1g,无水硫酸钠脱水，振摇，精密量取上清液,1ml,，置,10ml,量瓶中，用正己烷稀释到刻度，摇匀，即得。,