不同环境条件对白灵菇菌丝生长的影响[修改].doc

不同环境条件对白灵侧耳菌丝生长的影响﹡
摘 要：对白灵侧耳（Pleurotus nebrodensis）菌丝生长适宜的温度、培养料含水量、pH值进行了研究。结果表明，白灵侧耳菌丝生长的适宜温度范围为22～28℃，最适温度28℃；培养料适宜绝对含水量65％～75％，最适绝对含水量75％；适宜pH值为5.02～7.24，最适pH值5.79。
关键词：白灵侧耳；温度；培养基含水量；pH值
中图分类号：

白灵侧耳(Pleurotus nebrodensis)又名白灵菇、白阿魏蘑，隶属于真菌门(Eumycota)、担子菌亚门(Basidiomycotina)、层菌纲(Hymenomycetes)、伞菌目(Agaricales)、侧耳科（Pleurotaceae）、侧耳属(Pleurotus)，是一种品质极为优良的大型肉质伞菌，我国野生种仅分布于新疆干旱沙漠地区[１]。白灵侧耳子实体脆嫩可口，香味浓郁，营养价值很高，其人工栽培菇品在国内外市场上供不应求，开发前景广阔，但商业化生产规模一直处于较低的发展水平，且栽培产量和品质不稳定，主要原因是对白灵侧耳生产菌株的有关生物学特性缺乏系统的研究，尚未形成一套完整的标准化栽培管理技术体系。为此，我们对影响白灵侧耳菌丝生长的环境因素进行了试验研究，为确立白灵侧耳优质、高产栽培技术体系提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 供试菌株
白灵侧耳（白棒１号），系本所优选出的生产菌株，试验用母种为本所保存并复壮扩繁。栽培性状优良：子实体洁白，盖大肉厚，柄长呈粗棒状，速生高产。
1.2 供试培养基
基础培养基1 马铃薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨3g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁1g，复合维生素B（片）10mg，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH自然。
基础培养基2 棉籽壳86％，麦麸12％，蔗糖1％，熟石膏（CaSO4）1％。
基础培养基3 马铃薯200g，蔗糖20g，蛋白胨3g，琼脂粉20g，水1000mL。
1.3 温度试验
自16～34℃设七个温度梯度，以基础培养基1作供试培养基，平板接种后置于设定处理温度的联立恒温培养箱中培养7d，观察不同温度下白灵侧耳菌丝生长情况。
1.4 水分试验
将基础培养基2烘干至恒重(60℃,5hr)，测定其初始含水量，分别添加不同量的水分，将培养料配成绝对含水量自45～82％设九个处理,计算公式如下:

﹡基金项目：山东省农业良种产业化工程项目“珍稀食用菌良种培育与产业化开发”（2002年第3009号）
作者简介：单洪涛（1974-），男，助理研究员，主要从事食用菌育种与技术研究工作。
﹡﹡通讯作者：万鲁长，研究员，E－mail：zbswsw@

A:相对含水量
B:绝对含水量
C:基础培养基含水量
M1:基础培养基重量
M2:配制培养料所添加水量
M3:烘干后基础培养基重量
配制好后，分别装入21mm*200mm的试管中，每一试管装干培养料10g（以扣除培养料初始含水量计），料高120mm，在0.145Mpa压力下灭菌2h，接种后置于25℃恒温箱中培养，观察培养料不同含水量对白灵侧耳菌丝生长的影响，分别于第29d和第42d测定菌丝生长速率。
1.5 pH试验
将基础培养基3于灭菌前分别用1mol/L盐酸和5%氢氧化钠溶液调节pH值，灭菌后用HANNA pH211型测定仪再次分别测定培养基pH，平板接种后置于25℃恒温条件下培养7d，观察记录不同pH值对白灵侧耳菌丝生长的影响。
1.6 菌丝生长速率测定及生长势观察
于平板培养基中央接种一块菌龄和生长势均一致、直径5mm的活化菌丝圆片，水分试验于试管内接种一块直径1cm的活化菌丝圆片，置于25℃恒温箱中培养。
按十字交叉法测量白灵侧耳菌丝生长菌落直径，将菌落平均直径减去供试菌圆片直径后除以培养时间，计算各处理菌丝日平均生长速率；水分试验记录菌丝封料时间和菌丝吃料速率。并观察记载各处理菌落形态及菌丝生长势。每个试验处理均重复5次，采用Duncan氏新复极差分析方法对各试验处理进行差异显著性检验。
2 结果与分析
2.1 温度试验结果
温度对白灵侧耳菌丝生长影响很大。由表1、图1可知，供试白灵侧耳菌株菌丝生长温度为16～34℃，适宜温度为22～28℃，最适宜温度为28℃。
表1 温度对白灵侧耳菌丝生长的影响
Table 1． Effects of temperature on the growth of P. nebrodensis mycelium
温度(℃)
temperature(℃)
菌落形态
Colony morphology
菌丝长势
Mycelium growth vigor
菌丝长速(mm/d)
Mycelium growth rate(mm/d)
差异显著性
Significance of difference
0.05
0.01
34
白色、圆整，平铺，较密

Round, intact, white, relatively dense, tile
+
1.00
a
A
16
白色、圆整，稀薄
Round, intact, white, tenuity
+
2.32
b
B
31
白色、圆整，平铺，较密
Round, intact, white, relatively dense, tile
++
2.44
b
B
19
白色、圆整，稀薄
Round, intact, white, tenuity
+
2.76
c
C
22
白色、圆整，绒毡状
Round, intact, white, blanketlike
+++
3.44
d
D
25
白色、圆整，旺盛，棉絮状
Round, intact, white, vigorous, cottony
++++
4.43
e
E
28
白色、圆整，旺盛，棉絮状
Round, intact, white, vigorous, cottony
++++
5.32
f
F
++++表示菌丝生长势最强，+++表示菌丝长势较强，++表示菌丝长势一般，+表示菌丝长势弱，下同
++++ indicates that the mycelium grow most vigorously, +++ the mycelium grow more vigorously,
++ the mycelium grow ordinarily, + the mycelium grow weakly, similarly hereinafter

Mycelium growth rate

temperature

图1 不同温度下白灵侧耳菌丝生长速率
Fig.1．Mycelium growth rate of P. nebrodensis under different temperature
2.2 水分试验结果
培养料不同含水量对白灵侧耳菌丝生长影响很大。培养料含水量过低，菌丝难以萌发，生长缓慢、细弱，封口极慢；过高，培养料易积水，虽然菌丝早期萌发、定植快，封口早，但后期长速变慢，生长不均匀。由表2、图2可以看出，能够使菌丝生长的培养料绝对含水量为50％～75％，适宜绝对含水量为65％～75％，最适绝对含水量为75％。当培养至55d时，所有处理均未表现子实体分化现象，说明白灵侧耳菌丝营养生长成熟需要较长的后熟培养期，这是在实际生产中需要注意的。
表2 培养基含水量对白灵侧耳菌丝生长的影响
Table 2． Effects of water content of the medium on the growth of P. nebrodensis mycelium
绝对含水量(%)
water content
相对含水量(%)
Relative water content
料水比(相对)
Ratio of sample to water(relative)
菌丝封料
时间(d)
cover with facies
成活率(％)
survival percent
菌丝长势
Mycelium growth
菌丝生长速率(mm/d)
Mycelium growth rate(mm/d)
29d
差异显著性
Significance of difference
42d
差异显著性
Significance of difference
0.05
0.01
0.05
0.01
45
37.99
1∶0.61
16.7
40
+
0.96
a
A
0.91
a
A
50
43.63
1∶0.77
8.7
70
+
1.68
b
B
1.59
b
B
55
49.27
1∶0.97
8.3
70
+
1.99
c
C
1.91
c
C
60
54.90
1∶1.22
8.1
100
++
2.19
d
D
2.10
de
E
65
60.54
1∶1.53
6.5
100
+++
2.53
e
E
2.36
f
F
70
66.18
1∶1.96
6.3
100
+++
2.60
e
E
2.53
g
G
75
71.82
1∶2.55
5.6
100
+++
2.92
f
F
2.81
h
H
80
77.45
1∶3.44
5.0
100
++
2.55
e
E
2.19
e
E
82
79.71
1：3.93
5.0
100
++
2.23
d
D
2.10
cd
D

Mycelium growth rate

Water content
图2 培养基不同含水量条件下白灵侧耳菌丝生长速率
Fig.2．Mycelium growth rate of P. nebrodensis under different water content of the medium
2.3 pH试验结果
白灵侧耳在不同pH值的培养基中菌丝生长速率差异明显，在pH值（灭菌后，下同）4.04～10.26范围内均可以生长，其中pH值为5.79的处理4，菌丝长速稍次于pH值为5.02的处理3，二者之间无极显著性差异，与其它处理间差异均呈极显著；当pH值大于7.24时，菌丝长速急剧下降，且菌丝生长势变弱；综合考虑菌丝生长速率与长势，白灵侧耳菌丝适宜pH值为5.02～7.24，最适pH值为5.79。
表3 pH值对白灵侧耳菌丝生长的影响
Table 3．Effects of pH on the growth of P. nebrodensis mycelium
处理
Treatments
灭菌前pH
Before sterilization
灭菌后pH
After sterilization
菌落形态
Colony morphology
菌丝长势
Mycelium growth vigor
菌丝长速(mm/d)
Mycelium growth rate(mm/d)
差异显著性检验
Significance of difference
0.05
0.01
1
3.01
3.12
-
-
0.00
-
-
3
5.02
5.02
菌落平铺，较稀薄
relatively tenuity, tile
+++
4.49
a
A
4
5.99
5.79
浓白，旺盛，棉絮状
white dense, vigorous, cottony
++++
4.39
b
A
5
6.47
6.26
浓白，旺盛，棉絮状
white dense, vigorous, cottony
++++
4.11
c
B
6
7.02
6.41
浓白，旺盛，棉絮状
white dense, vigorous, cottony
++++
4.05
c
B
7
8.01
7.24
浓白，旺盛，棉絮状
white dense, vigorous, cottony
++++
4.01
c
B
2
4.02
4.04
平铺，绒毡状
Blanketlike, tile
++
2.16
d
C
8
9.00
8.35
浓密，旺盛
dense, vigorous
+
1.66
e
D
9
10.1
9.14
浓密，较旺盛
dense, relatively vigorous
+
1.12
f
E
10
11.00
9.72
致密，绒毡状
dense, blanketlike
+
0.84
g
F
11
12.01
10.26
致密的小白点
A dense spot
+
0.37
h
G

Mycelium growth rate

pH after sterilization
图3 不同pH条件下白灵侧耳菌丝生长速率
Table 3．Mycelium growth rate of P. nebrodensis under different pH
3 结论与讨论
3.1 研究结果表明，白灵侧耳菌丝生长适宜温度范围为22～28℃，最适温度28℃；培养料绝对含水量不宜低于60％或高于75％，适宜的绝对含水量为65％～75％，最适绝对含水量75％，在实际生产中，一般使用相对含水量来配制栽培料，可根据原料的自然含水量，按照本文中公式计算得出，如果生产上所使用的栽培料与文中基础培养基2相同，则适宜白灵侧耳菌丝生长的培养料相对含水量为60％～70％左右，最适相对含水量约为70％，这与陈士瑜等研究结果基本一致［2］；适宜白灵侧耳菌丝生长的pH值范围5.02～7.24（灭菌后），最适pH值5.79（灭菌后）。
3.2 本试验仅考虑了初始环境条件对白灵侧耳菌丝生长的影响，对于试验过程中培养基含水量、pH值的动态变化，未采用保持条件恒定的方法，这与食用菌实际生产条件相一致，对实际生产更具有指导意义。
3.3 由于试验仅用一个白灵侧耳菌株作为研究对象，该菌株与其它不同来源的白灵侧耳菌种是否有差异，尚需进一步研究。
参考文献：
［1］黄年来，吴经纶、陈忠纯等.18种珍稀美味食用菌栽培［M］.北京:中国农业出版社,1998.17.
［2］陈士瑜、易文林、周雅冰等.珍稀菇菌栽培与加工［M］.北京:金盾出版社，2003.45～46.
［3］刘生学.白灵菇的生物学特性及栽培技术要点［J］.甘肃农业科技,2002（10）：34～35.
［4］王文治、王永庄、蔡玉侠等.白灵茹生物学特性及高产栽培技术［J］.天津农学院学报,2002（2）：61～62.
［5］雷民.白灵菇的高产栽培技术［J］.四川农业科技,2003（7）：27
［6］张红伟.白灵菇栽培经验简介［J］.中国食用菌,2003（2）：29～30
［7］茅盛浩.白灵菇高出菇率栽培技术要点［J］.中国食用菌,2004（5）：29～30

Effects of Different Environmental Factors on The Mycelium Growth of Pleurotus nebrodensis
SHAN Hong-tao1, HUANG Chun-yan1, WAN Lu-zhang1, ZHANG Bai-song1, SUN Shu-kai2, YU Ren-e3
1.The Institute of Plant Protection,Shandong Academy of Agricultural Sciences,Jinan 250100,China
2.The popularization center of agriculture technique of Muping,Muping,Shandong 264100,China
Abstract: Effect of temperatures, water content of the medium, pH on the mycelium growth of Pleurotus nebrodensis was studied. The results showed that the temperature for the mycelium growth of Pleurotus nebrodensis were 22～28℃ with the optimum temperature being 28℃, the water content of the medium were 65%～75% with the optimum water content of medium being 75%. the pH were 5.02～7.24 with the optimum pH being 5.79.
Key words: Pleurotus nebrodensis; temperature; water content of the medium; pH
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