稻谷玉米脂肪酸值测定操作练习-实操.doc

稻谷、玉米脂肪酸值测定操作练习
实验项目
稻谷、玉米脂肪酸值测定
时　长：　４h
目得要求
1、 熟悉与掌握脂肪酸值检验流程；
2、　掌握微量滴定管得使用与滴定终点得判断。
练习重点
1、 调节配制0、０１mｏl/L氢氧化钾—乙醇标准滴定溶液所需９5%乙醇至中性；
2、 0、０1mｏl／Ｌ氢氧化钾－乙醇标准滴定溶液得配制；
3、 样品制备:去杂、粉碎、称量、提取、过滤;
4、　脂肪酸值滴定速度控制；
5、 滴定终点得判断；
6、 脂肪酸值检测结果得得报出。
练习难点
1、 滴定速度控制；　
２、 滴定终点得判断。
预习要点
1、 脂肪酸值测定原理.
２、 脂肪酸值测定方法中对锤式旋风磨得要求有哪些？
３、 脂肪酸值测定用样品粉碎粒度要求?
４、 如何配制脂肪酸值测定所用０、01ｍol／L氢氧化钾—乙醇溶液？
5、　如何将稀释氢氧化钾标准溶液用得95％乙醇溶液调节至中性？
6、 影响脂肪酸值测定因素有哪些?
7、 脂肪酸值滴定应在什么条件下进行？
8、 脂肪酸值滴定速度应如何控制？
９、 如何判断脂肪酸值滴定终点？
１0、　应怎样报出脂肪酸值检测结果?
实验原理
在一定温度(1５℃~2５℃)条件下,以无水乙醇提取谷物及制品中得游离脂肪酸，用氢氧化钾标准溶液滴定，游离脂肪酸与氢氧化钾发生中与反应,以中与１０0 ｇ试样中游离脂肪酸所需氢氧化钾得毫克数表示。
谷物脂肪酸值测定得实质就是酸碱滴定。但由于谷物成分比较复杂,溶于乙醇得组分比较多,用乙醇提取游离脂肪酸得同时,还有其她醇溶性物质,如:醇溶蛋白、色素、植酸等也被提取出来,而且提取得游离脂肪酸不就是单一得脂肪酸,因此,提取液组分非常复杂，酸碱滴定也就与通常得强碱滴定单一得弱酸有所不同，就是强碱滴定混合弱酸。
试 　剂
与仪器
无水乙醇:Ａ、R；１%酚酞-乙醇溶液:1、0ｇ酚酞溶于1０0 mL 95％(V／V）乙醇；不含二氧化碳得蒸馏水：将蒸馏水煮沸１0min，加盖冷却；0、５mol/L氢氧化钾标准储备液;0、0１moｌ/L氢氧化钾-乙醇标准滴定溶液。
锤式旋风磨:具有风门可调与自清理功能,不易发热,粉碎后得样品一次通过CQ1６(４0目）筛得达95％以上；往返式振荡器,振荡频率为1０0次/min ；微量滴定管：5mL,最小刻度为0、0２mL；１０mＬ，最小刻度为0、02mL;移液管：50mL,25ｍL;天平:感量为０、0１g; 具塞锥形瓶：25０mL;锥形瓶：150mＬ。
实验步骤
1．０、01moｌ/L KOH—乙醇标准滴定溶液得配制
准确移取20mＬ已经标定好得０、５moｌ／L氢氧化钾标准储备液，用事先调节至中性得95％(V/V）乙醇稀释定容至１000mＬ,盛放于聚乙烯塑料瓶中。临用前稀释。（V浓=c稀×Ｖ稀/c浓）
注:需要组织单位提供事先配制并已经标定得0、5mol/L氢氧化钾标准储备液。
2.试样制备
稻谷试样得制备:从混合均匀得平均样品中分取１00 g左右,去除杂质（保留谷外糙米)，得到净稻谷样品.用锤式旋风磨粉碎，粉碎后得样品一次通过CQ1６(相当于40目)筛得应达到95％以上。粉碎样品（筛上、筛下得全部筛分范围样品)经充分混合后装入磨口瓶中备用.
玉米试样得制备：从混合均匀得平均样品中分取１０0 g左右，去除杂质，得到净玉米样品。用锤式旋风磨粉碎,粉碎后得样品一次通过CＱ１６（相当于４0目)筛得应达到95％以上.收集筛上、筛下得全部筛分范围得粉碎样品样品,经充分混合后装入磨口瓶中备用。
3、　试样处理
称取制备好得试样约1０ ｇ，精确到0、01 g，于２５0　mL具塞磨口锥形瓶中，并用大肚移液管（或同等精度加液器）加入５0、0 mL无水乙醇，置于往返式振荡器上振荡提取30　min,（振荡频率为１0０次／min)。静置１　min ～2 ｍｉn,在玻璃漏斗中放入折叠滤纸过滤.弃去最初几滴滤液，收集滤液25 mL以上.
注：样品粉碎后应在2h内进行提取.
4、 测定
用大肚移液管移取２5、0 mL滤液于150 ｍL锥形瓶中,加50 mＬ不含二氧化碳得蒸馏水，滴加3~4滴酚酞指示剂后,用氢氧化钾标准滴定溶液滴定至呈微红色,30　s不消褪为止。记下耗用得氢氧化钾标准滴定溶得体积（V1）。
注1:滴定速度宜先快后慢，不能太慢或太快,一般控制在(６～8）mL/ｍin,即每秒（2～３)　滴，滴定液成串不成线.临近滴定终点时，要适当放慢滴定速度,注意观察样液得颜色变化。
注2:有得样品由于受提取液本身颜色得影响,到达滴定终点时样液不可见微红色，当样液颜色与参照样液有明显色差时，即为滴定终点.
5、 空白试验
用移液管移取2５、0 mＬ无水乙醇于１５0 mL锥形瓶中，加５0 mＬ不含二氧化碳得蒸馏水，滴加3～5滴酚酞指示剂，用氢氧化钾标准滴定溶液滴定至呈微红色,３０ s不消褪为止.记下耗用得氢氧化钾标准滴定溶液体积（V0）。
6、　结果计算
按公式　 计算结果。
7、 报出结果
每份试样取两个平行样进行测定，两个测定结果之差得绝对值符合重复性要求时，以其平均值为测定结果;不符合重复性要求时，应再取两个平行样进行测定.若４个结果得极差不大于n=4得重复性临界极差[ＣrR95(4)］，则取４个结果得平均值作为最终测试结果;若４个结果得极差大于n=4得重复性临界极差[CrＲ95(4)],则取４个结果得中位数作为最终测试结果,结果保留三位有效数字。
实验记录1
（稻谷）
稻谷脂肪酸值测定记录
样品名称
编号
试样质量
(g)
试样耗标液体积(mL)
空白耗标液体积(mL)
制备样水分(%)
脂肪酸值
(mg/100g)

双试验差值(mg/100g)

四平行极差(mg/100g)

脂肪酸值报出结果(mg/100g)

　　 　 注:制备样水分按１3、0％计.
实验记录2
(玉米)
玉米脂肪酸值测定记录
样品名称
编号
试样质量
(g)
试样耗标液体积(mL)
空白耗标液体积(mL)
制备样水分(%)
脂肪酸值
(mg/100g)

双试验差值(mg/100g)

四平行极差(mg/100g)

脂肪酸值报出结果(mg/100g)

　注：制备样水分按１４、0％计.
思考题
１、 脂肪酸值测定方法中对锤式旋风磨得要求有哪些?
答：要求具有风门可调与自清理功能,不易发热,粉碎后得样品一次通过CQ１６(４0目）筛得达95％以上。
2、　测定脂肪酸值所用得粉碎样品就是通过CQ16（相当于４0目)筛得样品吗？
答：测定脂肪酸值所用得粉碎样品不仅仅就是通过CＱ１6(相当于４０目）筛得筛下物，而就是筛上、筛下得全部筛分范围样品，也即除了筛下物而外，还应该包括残留在筛上得样品。
3、 脂肪酸值测定为什么要做空白试验？
答：为了消除试剂得影响,减少系统误差。
４、 脂肪酸值滴定应在什么条件下进行？
答:滴定应在散射日光或日光型日光灯下对着光源方向进行,光线不能太强或太暗，阳光不能直射;环境温度应控制在15℃~２5℃之间。
５、 脂肪酸值滴定速度应如何控制？
答：滴定速度宜先快后慢，不能太慢或太快,一般控制在(6～８）mL/miｎ，即每秒（2～3)　滴，滴定液成串不成线.临近滴定终点时,要适当放慢滴定速度,注意观察样液得颜色变化。滴定手法应尽量一致，振摇速度一致,滴定操作要熟练,整个滴定过程一气呵成.
6、 如何判断脂肪酸值滴定终点？
答:对提取液颜色很浅得样品,可将滴定至微红色出现视为到达滴定终点；但有些样品由于受提取液本身颜色得影响，到达滴定终点时样液不可见微红色,终点难以判定,可用一个已加入提取液与去二氧化碳蒸馏水尚未滴定得锥形瓶作参照，当被滴定样液颜色与参照样液有明显色差时,即可视为已到滴定终点。
7、 影响脂肪酸值测定结果准确性得因素有哪些?
答:脂肪酸值测定就是较低浓度得强碱滴定多种混合弱酸得体系，加之提取液中除了酸性物质以外，还有一些其她得醇溶性物质如色素等也被提取出来，使提取液本身有一定颜色，而颜色及颜色得深浅因粮食种类与品种得不同而有所不同，从而增加了准确测定脂肪酸值得难度.因此,影响脂肪酸值测定结果准确性得因素很多,如：粉碎磨升温、样品粉碎细度、样品粉碎后到提取得间隔时间、计量器具、环境温度、振荡频率、振荡提取时间、指示剂用量、背景干扰、滴定速度、滴定操作得熟练程度、二氧化碳得影响、终点判定（每个人对颜色得敏感程度、每个人对微红色或明显色差得理解不同)、数据读取等等，都会对检测结果产生不同程度得影响，因此,要求在脂肪酸值测定得全过程都要严格、规范操作.