微生物标本采集省名师优质课获奖课件市赛课一等奖课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,快速、准确、效能,本幻灯片资料仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请参考专业资料。谢谢,微生物标本采集,第1页,快速、准确、效能,标本质量微生物检验结果质量,正确选择、采集、运输,错误标本 错误结果错误治疗,第2页,快速、准确、效能,研究表明，分析前和分析后是当代检验误差主要起源。,有报道，有,93%,试验室误差来自分析前，分析前阶段质量控制是整个检验质量控制中一个轻易被忽略却非常主要步骤。,它是取得准确试验结果主要确保。,第3页,快速、准确、效能,标本采集规范化是微生物检验分析前质量控制主要内容之一。,第4页,快速、准确、效能,标本规范化采集主要性,正确采集、处理与运输细菌培养标本直接关系到致病菌培养正确性与阳性率高低，是临床细菌检验成功关键。,标本质量好坏直接影响诊疗结果正误，,不妥标本可造成假阴性、假阳性结果出现，所以标本采集与处理规范化是准确、及时地向临床提供主要临床感染信息基础。,好微生物检验标本可提升试验室工作效率及病患照料质量，降低医疗成本。,第5页,快速、准确、效能,国内微生物标本采集当前存在问题：,如痰培养污染口腔大量细菌：,如肺炎链球菌等在口腔可能为定植菌，但它有是大叶性肺炎常见致病菌。,尿培养：大肠埃希菌常是尿路感染菌，但尿袋常污染这种细菌，采样方法不规范时，会污染这种细菌。,第6页,快速、准确、效能,正确运输方式,标本因冷藏及pH,改变或在氧气中暴露，可能降低很各种细菌存活时间,苛养菌,-,脑膜炎球菌，淋病奈瑟菌，,流感嗜血杆菌，肺炎链球菌,肠道菌,-,沙门菌，志贺氏菌，,霍乱弧菌，空肠弯曲菌及厌养菌,定量评价细菌数量培养（尿标本）（运输时间）,对环境敏感菌株在运输中数量快速降低时，假如运输时间太长，其它菌则成倍增加，目标细菌可同其它菌一起过分生长。,需进行细菌学检测全部标本，应在搜集后,2,小时内送到试验室,第7页,快速、准确、效能,准确汇报培养结果不足,可能造成假阴性结果原因,采集和运输标本不理想,(,可能控制,),延误了培养时间,；,病原菌数量极少，或,标本量不够检出,(,敏感度,),WBC,、其它身体免疫因子或,使用抗生素抑制生长,在当初全部培养方法不能培养微生物,(,不足,),第8页,快速、准确、效能,临床医生要合理用好两种数据,1.,当地域、本单位病原流行病学资料，指导经验用药。,（微生物室、院感办、临床科室）,2.,药敏试验汇报，纠正经验用药。,重视病原学检验,尽可能在应用抗菌药品之前留取标本送检,.,以提升病原学诊疗率,为选药和调整药品提供依据,.,第9页,快速、准确、效能,一、标本采集和处理标准,可能致病源，,搜集到越多越好，保持其活性,非无菌部位，防止污染,:,消毒,降低增生,:,低温保留及使用输送培养基,无菌部位,防止污染,:,确实消毒,第10页,快速、准确、效能,发觉感染应,及时,采集微生物标本作病原学检验,最好是病程,早期、急性期或症状经典,时，而且必须在,使用抗生素或其它抗菌药品之前,采集,标本采集时应,严格无菌操作,，采集标本应无外源性污染，降低或防止机体正常菌群及其它杂菌污染,要搜集,足够量,标本,标本采集后应,马上,送至微生物室,第11页,快速、准确、效能,二、血液培养,病人出现以下临床表现，或同时具备以下几个临床表现时应采集血培养。,1,发烧（,38,）或低温（,36,）,2,寒战,3,白细胞增多（,1010/L,，尤其有“核左移”时）,4,粒细胞降低（成熟多形核白细胞,110/L,）,5,血小板降低,6,昏迷,7,多器官衰竭,8,血压降低,9,呼吸加紧第12页,快速、准确、效能,几个特殊情况：,1,可疑新生儿败血症时，除发烧或低温外，极少培养出细菌，应增加尿液和脑脊液培养。,2,老年菌血症病人可能不发烧或不低温，如伴有身体不适、肌痛或中风，可能是感染性心内膜炎，也应采取血培养。,3,骨髓培养与血液培养送检指征是基本一致，临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。但当骨髓炎时或长久使用抗菌药品患者，抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。,第13页,快速、准确、效能,皮肤消毒和预防血培养污染,要求和提议：,提议使用碘酊或者洗必泰。,碘酊、次氯酸和洗必太消毒效果要胜于碘伏。,碘酊和洗必泰作用大致相等。,消毒剂要求有足够作用时间以确保消毒效果。碘酊要求,30,秒，碘伏要求,1.52,分钟。洗必泰要求消毒作用时间与碘酊相等，而且没有过敏反应，消毒后无须擦去，但不能用于小于,2,个月婴儿,第14页,快速、准确、效能,皮肤消毒,碘酊、次氯酸和洗必太消毒效果要胜于碘伏。,碘酊和洗必泰作用大致相等。,消毒剂要求有足够作用时间以确保消毒效果。碘酊要求,30,秒，碘伏要求,1.5,2,分钟。洗必泰要求消毒作用时间与碘酊相等，而且没有过敏反应，消毒后无须擦去，但不能用于小于,2,个月婴儿。,第15页,快速、准确、效能,培养瓶消毒程序,(1),用,70,酒精消毒血培养瓶橡皮塞子。,(2),酒精作用,60s,。,(3),在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签去除橡皮塞子表面剩下酒精，然后注入血液。,第16页,快速、准确、效能,皮肤消毒后不可触摸穿刺点,血液因为菌量少和血液成份影响不提议直接涂片。,抽取血液后，不要换针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固。,采血培养应尽可能在抗菌药品使用之前，采集血培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养），每次,2,瓶，同时作需氧和厌氧培养。因为研究已证实，多份血培养能够提升检测全部菌血症和真菌血症以及帮助排除血培养假阳性。,第17页,快速、准确、效能,血培养血量,对于成年患者，当血培养血量在,2-30ml,范围内，病原菌阳性培养率与血量成正比。,对于婴幼儿，抽血量不应超出患者总血量,1%,。,血标本量不足：血液体积少于血培养瓶标签上推荐血量,80%,第18页,快速、准确、效能,对于疑似菌血症者，提议采集,2-3,套血培养,有研究表明一套血培养阳性率为,65%,，,2,套,80%,，,3,套,96%,第19页,快速、准确、效能,为何要送检厌氧瓶？,正视厌氧瓶功效！,增加采血量,增加兼性厌氧菌分离机会,增加厌氧菌分离机会,提升阳性率！,第20页,快速、准确、效能,关于厌氧血培养瓶使用,研究中，使用“配对需氧,/,厌氧血培养瓶”比用“两个需氧血培养瓶”复现出更多金葡、肠杆菌科细菌和厌氧菌。,推荐常规血培养包含配正确需氧,/,厌氧血培养瓶。,当抽得血少于推荐血量时，应该首先接种需氧瓶；剩下血液接种厌氧瓶。,第21页,快速、准确、效能,第22页,快速、准确、效能,关于厌氧血培养瓶使用,绝大多数需氧致病菌都是兼性厌氧菌。坚持需氧加厌氧双瓶培养，不但能够取得双倍血培养血量，还能够增加这些兼性厌氧菌检出率。,更何况，一些兼性厌氧菌在厌氧环境中得以更加快生长出来。,所以，这些细菌血培养可能在厌氧瓶中更早汇报阳性或者只在厌氧瓶中生长。,第23页,快速、准确、效能,结论,假如不送检厌氧瓶，将会损失,16%,报阳机会！,厌氧瓶更优于需养瓶更加快报阳！,第24页,快速、准确、效能,危重病人三级汇报,一级：汇报培养阳性和涂片汇报。,我们科室第一时间电话通知临床医生，并要求医生开出细菌涂片医嘱（不需采样，只要送单），我们在细菌涂片汇报上描述我们意见。,二级：汇报确切涂片和培养初步汇报（有改变时）,三级：正式判定和药敏汇报,第25页,快速、准确、效能,三、痰标本培养,检验项目：痰常规培养及判定、嗜血杆菌培养、真菌培养及判定、痰液常规、真菌涂片、抗酸涂片,痰常规培养及判定、嗜血杆菌培养、真菌培养及判定、痰液常规、真菌涂片、抗酸涂片能够同一标本送检。,痰液普通细菌培养需要同时进行痰液常规，痰液常规能够提醒痰标本初步信息，上皮细胞多少提醒痰标本留取污染口腔细菌程度，影响着痰培养结果可靠性。,第26页,快速、准确、效能,三、痰标本,采集方法,自然咳痰,以晨痰为佳。,用清水重复漱口，用力咳出呼吸道,深部痰,，痰液直接吐入无菌容器中，,尽快送检,。不然有细菌,（如肺炎球菌、流感嗜血杆菌）,在外界可能死亡。痰量极少者可用雾化吸入加温至,45,10,NaCl,水溶液，使痰液易于排出。,要求采到肺深部痰液，不要唾液。,第27页,快速、准确、效能,三、痰标本,采集方法,吸痰管取痰法,对咳嗽乏力或昏迷病人，用吸痰管经鼻腔或口抵达气管腔内吸引痰液。双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管患者，可用吸痰管经人工气道插至叶支气管水平吸引痰液。,支气管镜采集法、支气管肺泡灌洗等,第28页,快速、准确、效能,三、,痰标本质量评定,痰培养前需做标本质量评定，即涂片进行细胞学筛选和细菌学显微镜检验。明确唾液对标本污染程度。并可初步判定是否有病原菌存在，病原菌数量及其类别，有利于初步汇报、选择培养基和对培养结果综合分析。,普通认为，来自下呼吸道合格痰标本应是含脓细胞和支气管柱状上皮细胞较多，而受唾液污染严重不合格标本则扁平鳞状上皮细胞较多。,中华医学会呼吸病学分会制订标准：痰直接涂片检验每低倍视野鳞状上皮细胞,10,个、白细胞,25,个。,第29页,快速、准确、效能,三、,痰标本注意事项,以晨痰为好。最好在应用抗菌药品之前采集标本。,采集后应马上送检，以预防一些细菌在外环境中死亡。,室温下延搁数小时定植于口咽部非致病菌呈过分生长而肺炎链球菌、葡萄球菌和流感嗜血杆菌检出率则显著下降。,约有,1/4-1/2,肺部感染患者可能发生菌血症，应同时做血培养。,第30页,快速、准确、效能,四、尿培养,标本送检指征：,有经典尿路感染症状；,肉眼脓尿或血尿；,尿常规检验表现为白细胞和,/,或亚硝酸盐阳性；,不明原因发烧，无其它局部症状；,留置导尿管病人出现发烧；,膀胱排空功效受损；,泌尿系统疾病手术前。,第31页,快速、准确、效能,四、尿培养,检验项目：尿培养及菌落计数、真菌培养及判定、细菌涂片检验、抗酸杆菌、真菌涂片检验,第32页,快速、准确、效能,四、尿培养采集方法,清洁中段尿：最好留取早晨清洁中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围；开始排尿，将前段尿排去，中段尿约,10-20ml,直接排入专用无菌容器中，马上送检，,2h,内接种。该方法简单、易行，是最惯用尿培养标本搜集方法，但很轻易受到会阴部细菌污染，应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取。如需即时采样，应采集在膀胱停留,4,h,以上尿液，方法同上。,第33页,快速、准确、效能,四、尿培养采集方法,留置导尿管搜集尿液：利用留置导尿管采集标本时，应先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸收尿液，操作时应预防混入消毒剂，注意不能从尿液搜集袋中采集尿液。,第34页,快速、准确、效能,四、尿培养注意事项,普通于晨起第一次尿液送检，如需即时采样，应采集在膀胱停留,4,h,以上尿液。应选在抗菌药品应用之前。,标本采集后应及时送检、及时接种，室温下保留时间不得超出,2h,（夏季保留时间应适当缩短或冷藏保留）,4,冷藏保留时间不得超出8h,，但应注,意冷藏保留标本不能用于淋病奈瑟菌培养。,有一部分尿路感染患者可能发生菌血症，应同时做血培养。,第35页,快速、准确、效能,五、开放性感染标本,检验项目：脓性分泌物培养及判定、脐部分泌物真菌培养及判定、脐部分泌物细菌涂片检验、脐部分泌物抗酸杆菌涂片检验、脐部分泌物真菌涂片检验,第36页,快速、准确、效能,五、开放性感染标本,采集方法：,开放性感染和已溃破化脓灶：先用灭菌生理盐水冲洗表面污染菌（采样前要先进行表皮消毒，采组织肉芽上新鲜分泌物，不能直接采脓苔中央），用灭菌拭子（采取前应用无菌盐水预湿）采取脓液及病灶深部分泌物。注意尽可能取化脓组织与正常组织交界处脓汁，因为脓汁中心细菌大部分已死亡，交接处活菌较多，会提升阳性率。,全部脓性标本提议同时进行细菌涂片，经过涂片观察尽早了解细菌相关信息，如细菌分类，是否混和感染，白细胞情况、细菌侵袭还是定植等情况。,第37页,快速、准确、效能,六、封闭性脓液,深部脓肿常见不外乎肺脓肿（上呼吸道正常菌群混合感染、结核可能性均存在）、肝脓肿（肠道菌群混合、结核可能性）、腹腔脓肿（肠道菌混合可能性极大）、盆腔脓肿（肠道菌群、阴道菌群其它如肾脓肿、胰腺脓肿相对较少。,脓液直接接种，不能增菌，即直接用注射器抽取或拭子采样（无法抽取或开放性时）。,脓液标本提议同时进行细菌涂片，经过涂片观察尽早了解细菌相关信息，如细菌分类，是否混和感染，有没有厌氧菌，白细胞情况等,第38页,快速、准确、效能,六、封闭性脓液,检验项目：脓液普通培养及判定、脓液真菌培养及判定、脓液厌氧菌培养及判定、脓液细菌涂片检验、脓液抗酸杆菌涂片检验、脓液真菌涂片检验,第39页,快速、准确、效能,七、粪便,【,标本送检指征,】,1,急性腹泻：大便次数显著增多，腹痛，里急后重，往往伴有发烧，大便性状为粘液便或脓血便。,2,慢性腹泻：大便次数多，多为稀便，伴有全身乏力等症状。,3,无痛性大量水样便或米泔样稀便。,4,先吐后泻：恶心、呕吐、腹痛、腹泻。有集体发病史，多为细菌性食物中毒所致。,5,抗生素治疗后腹泻：常发生于长久抗生素治疗后，糊状便，排便次数增加。,6,高热惊厥：通常为中毒性痢疾，多见于婴幼儿和小儿。,第40页,快速、准确、效能,七、粪便,【,标本采集方法,】,自然排便采集法：粪便先排入一洁净容器中，调取有脓血粘液部位粪便,2,3g,，液状粪便取絮状物盛于无菌容器内马上送检。,直肠拭子法：如,不易取得粪便时或排便困难患者,，可采取直肠拭子方法采集，取出后置于灭菌容器内马上送检。方法为将拭子前端用无菌生理盐水湿润，然后插入,肛门约,4-5cm,（幼儿约,2-3cm,）,处，轻轻旋转擦取直肠,表面粘液,后退出。,第41页,快速、准确、效能,七、粪便,【,标本采集注意事项,】,采集时间：应在急性期采样，以提升检出率，最好在用药前。,粪便标本不可被尿液污染，不可在地上或粪池内采样，不可用卫生纸搜集（卫生纸可能抑制粪便中一些致病菌生长）。,标本运输过程中必须确保其安全，预防溢出，防止细菌污染。,第42页,快速、准确、效能,