1、备注:培养基和激素母液配制方法 (1)母液配制时,先向容量瓶中注入1/3定容体积的蒸馏水,再一一称取各种盐放入烧杯中溶解,装入容量瓶, 不得一次称取所有盐,混合溶解!在配制大量母液时,氯化钙最后加入。 (2)200×Fe盐溶液 称取1.39g FeSO4•7H2O溶于水(A液);称取1.865 g Na2•EDTA溶于热水(B液); 将A液缓慢倒入正在加热的B液中,加水接近250ml,煮沸,混合液颜色变深,冷却到室温,定容到250ml后,置于棕色试剂瓶内4℃保存。 (3)0.5mg/ml 2,4-D母液的配法 称取50mg 2,4-D,置于小烧杯内;加少量无水
2、乙醇或95%乙醇使之完全溶解; 加水定容至100ml,4℃保存。如果出现沉淀,需要重新配置。 (4)0.5mg/ml α-NAA母液的配法 称取100mgNAA置于小烧杯内;用1N的KOH溶液溶解NAA; 用水定容至200ml,4℃保存。 (5)0.5mg/ml 6-BA母液的配法 称取100mg 6-BA置于小烧杯中;加少量的浓盐酸,用玻棒研磨成糊状,再加入少量浓盐酸,使之完全溶解;用水稀释并定容至200ml,4℃保存。 (6)100mM乙酰丁香酮(As)的配制 称取196.2mg As,用5ml DMSO直接溶解,再加水定容至10ml,过滤灭菌后,分装
3、入无菌小管,-20℃冰冻保存。使用前加入灭菌培养基。 (7) 0.5mg/ml KT和ABT的配法 称取50mg kenetin或ABT生根粉,先用少量1N KOH溶解,再用水稀释定容至100ml,4℃保存。 (8)其他附加物的溶解及配制 A、称取吗啉乙磺酸(MES)5g溶于水中,定容至10mL。4℃保存。 B、称取1g L-半胱氨酸(Cys) 溶于2mL 0.2mol/L或10%的NaOH溶液, 用蒸馏水稀释定容至10mL,现用配制。4℃保存。 C、称取850mg硝酸银,用蒸馏水溶解后定容至100mL。4℃保存。 D、头孢霉素(cefotaxime)2500mg,用蒸
4、馏水溶解后定容至10mL。4℃保存。 E、潮霉素(Hyg B),商品已溶解,筛选时一般加5、8、12mg/L梯度浓度。 植物培养的其他相关知识: 培养基culture medium是植物组织培养的重要基质。在离体培养条件下,不同种植物的组织对营养有不同的要求,甚至同一种植物不同部位的组织对营养的要求也不相同,只有满足了它们各自的特殊要求,它们才能很好地生长。因此,没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官,在建立一项新的培养系统时,首先必须找到一合适的培养基,培养才有可能成功。在植物组织培养历史进程中,事实上也紧密地伴随着培养基的研制史。对植物的营养要求的不断认识,对已有
5、培养基的改进,或者将新发现的植物激素、新的有益成分应用于培养基之中,都大大促进了组织培养研究的迅速发展,取得越来越多的成功。 一、培养基的种类和成分 (一)培养基的种类 培养基的名称,一直根据沿用的习惯。多数以发明人的名字来命名,如White培养基,Murashige和Skoog培养基(简称MS培养基),也有对某些成分进行改良称作改良培养基, 目前国际上流行的培养基有几十种,常用的培养基及特点如下: (1)MS培养基 它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高,为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适,可满足植物的营养和生理需要
6、它的硝酸盐含量较其他培养基为高,广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养,效果良好。有些培养基是由它演变而来的。 (2)B5培养基 是1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计的。其主要特点是含有较低的铵,这可能对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜,如双子叶植物特别是木本植物。 (3)White培养基 是1943年由White为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良,称作White改良培养基,提高了MgSO4的浓度和增加了硼素。其特点是无机盐数量较低,适于生根培养。 (4)N6培养基 是1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的
7、其特点是成分较简单,KN03和(NH4)2S04含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。 (5)KM-8P培养基 它是1974年为原生质体培养而设计的。其特点是有机成分较复杂,它包括了所有的单糖和维生素,广泛用于原生质融合的培养。常用培养配方见表3-1。 (二)、培养基的成分 培养基的成分主要可以分水、无机盐、有机物、天然复合物、培养体的支持材料等五大类。 1.水 水是植物原生质体的组成成分,也是一切代谢过程的介质和溶媒。它是生命活动过程中不可缺少的物质。配制培养基母液时要用蒸馏水,以保持母液及培养基成分的精确性,防止贮藏过程发霉变质'大规模生产时可用
8、自来水。但在少量研究上尽量用蒸馏水,以防成分的变化引起不良效果。 2、无机元素(inorganicelement) 大量元素,指浓度大于0.5mmol/L的元素,有N,P,K,Ca,Mg,S等。其作用是: (1)N 在制备培养基时以N03-N和NH4-N两种形式供应。 (2)P 是磷脂的主要成分。常用的物质有KH2P04或NaH2P04等。 (3)K制备培养基时,常以KCl、KNO,等盐类提供。 (4)Mg、S和Ca、它们常以MgS04·7H20提供、CaCl2·2H20提供。 微量元素 指小于0.5mmol/L的元素,Fe,B,Mn,Cu,Mo,Co等
9、 3.有机化合物(organic compound) 培养基中若只含有大量元素与微量元素,常称为基本培养基。为不同的培养目的往往要加入一些有机物以利于快速生长。常加入的有机成分主要有以下几类: (1)碳水化合物 最常用的碳源是蔗糖,葡萄糖和果糖也是较好的碳源,可支持许多组织很好的生长。不同植物不同组织的糖类需要量也不同,实验时要根据配方规定按量称取,不能任意取量。高压灭菌时一部分糖发生分解、制定配方时要给予考虑。在大规模生产时,可用食用的绵白糖代替。 (2)维生素(vitamin) 这类化合物在植物细胞里主要是以各种辅酶的形式参与多种代谢活动,对生长、分化等有
10、很好的促进作用。主要有Vsl(盐酸硫胺素)、VD6(盐酸吡哆醇)、Vpp(烟酸)、VC(抗坏血酸)、有时还使用生物素、叶酸、VB2等。一般用量为0.1-1.Omg/L。有时用量较高。Vm对愈伤组织的产生和生活力有重要作用,VB6能促进根的生长,Vpp与植物代谢和胚的发育有一定关系。Vc有防止组织变褐的作用。 (3)肌醇 (myo-inosit0l)又叫环己六醇,在糖类的相互转化中起重要作用。使用浓度一般为lOOmg/L,适当使用肌醇,能促进愈伤组织的生长以及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、分化有促进作用,对细胞壁的形成也有作用。 (4)氨基酸(aminoacide) 是很好的有机
11、氮源,可直接被细胞吸收利用。培养基中最常用的氨基酸是甘氨酸,其他的如精氨酸、谷氨酸、谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常用。有时应用水解乳蛋白或水解酪蛋白,它们是牛乳用酶法等加工的水解产物,是含有约20种氨基酸的混合物,用量在10-1000mg/L之间。由于它们营养丰富,极易引起污染。如在培养中无特别需要,以不用为宜。 4.植物激素(hormone) 是植物新陈代谢中产生的天然化合物,它能以极微小的量影响到植物的细胞分化、分裂、发育,影响到植物的形态建成、开花、结实、成熟、脱落、衰老和休眠以及萌发等许许多多的生理生化活动,在培养基的各成分中,植物激素是培养基的关键物质,
12、对植物组织培养起着决定性作用。 (1)生长素类(auxin) 在组织培养中,生长素主要被用于诱导愈伤组织形成,诱导根的分化和促进细胞分裂、伸长生长。在促进生长方面,根对·生长素最敏感。在极低的浓度下,(10-5-10-8mg/L)就可促进生长,其次是茎和芽。天然的生长素热稳定性差,高温高压或受光条件易被破坏。在植物体内也易受到体内酶的分解。组织培养中常用人工合成的生长素类物质。 IAA(indoaceticacid吲哚乙酸)是天然存在的生长素,亦可人工合成,其活力较低,是生长素中活力最弱的激素,对器官形成的副作用小,高温高压易被破坏,也易被细胞中的IAA分解酶降解,受光也易分解。
13、 NAA(naphthaleneaceticacid萘乙酸)在组织培养中的起动能力要比IAA高出3-4倍,且由于可大批量人工合成,耐高温高压,不易被分解破坏,所以应用较普遍。NAA和IBA广泛用于生根,并与细胞分裂素互作促进芽的增殖和生长。 IBA(indolebutyric acid吲哚丁酸)是促进发根能力较强的生长调节物质。 2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)起动能力比IAA高10倍,特别在促进愈伤组织的形成上活力最高,但它强烈抑制芽的形成,影响器官的发育。适宜的用量范围较狭窄,过量常有毒效应。 生长素配制时可先用少量95%酒精助溶。2,4-D可用0.1mol/L的NaOH或K
14、OH助溶。生长素常配成1mgdml的溶液贮于冰箱中备用。 (2)GA(gibberellicacid赤霉素) 有20多种,生理活性及作用的种类、部位、效应等各有不同、培养基中添加的是GA3,主要用于促进幼苗茎的伸长生长,促进不定胚发育成小植株;赤霉素和生长素协同作用,对形成层的分化有影响,当生长素/赤霉素比值高时有利于木质部分化,比值低时有利于韧皮部分化;此外,赤霉素还用于打破休眠,促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发。一般在器官形成后,添加赤霉素可促进器官或胚状体的生长。赤霉素溶于酒精,配制时可用少量95%酒精助溶。赤霉素不耐热,高压灭菌后将有70%-100%失效,应当采用过滤灭菌法加入
15、 (3)细胞分裂素类(cytokinin) 这类激素是腺嘌呤的衍生物,包括6-BA(6-苄基氨基嘌呤)、Kt(kinetin激动素)、n(zeatin玉米素)等。其中Zt活性最强,但非常昂贵,常用的是6-BA。 在培养基中添加细胞分裂素有三个作用:①诱导芽的分化促进侧芽萌发生长,细胞分裂素与生长素相互作用,当组织内细胞分裂素/生长素的比值高时,诱导愈伤组织或器官分化出不定芽。②促进细胞分裂与扩大。③抑制根的分化。因此,细胞分裂素多用于诱导不定芽的分化、茎、苗的增殖,而避免在生根培养时使用。 生长素与细胞分裂素的比例决定着发育的方向,是愈伤组织、是长根还是长芽。如为了促进芽器官
16、的分化,应除去或降低生长素的浓度,或者调整培养基中生长素与细胞分裂素的比例。 生长调节物质的使用甚微,一般用mg/L表示浓度。在组织培养中生长调节物质的使用浓度,因植物的种类、部位、时期、内源激素等的不同而异,一般生长素浓度的使用为0.05-5mg/L,细胞分裂素0.05-10mg/L。 5,培养材料的支持物 (1)琼脂(agar) 在固体培养时琼脂是最好的固化剂。琼脂的用量在6-10g/L之间,若浓度太高,培养基就会变得很硬,营养物质难以扩散到培养的组织中去。若浓度过低,凝固性不好。 (2)其他 有玻璃纤维、滤纸桥、海绵等,总的要求是排出的有害物质对培养材料没有影响
17、或影响较小。 6.抗生物质(antibiotic) 抗生物质有青霉素、链霉素、庆大霉素等,用量在5-20mg/L之间。添加抗生物质可防止菌类污染,减少培养中材料的损失,尤其是快速繁殖中,常因污染而丢弃成百上千瓶的培养物,采用适当的抗生素便可节约人力、物力和时间。尤其对大量通气长期培养,效果更好。 7、抗氧化物(antioxide) 抗酚类氧化常用的药剂有半胱氨酸及Vc,可用50-200mg/L的浓度洗涤刚切割的外植体伤口表面,或过滤灭菌后加入固体培养基的表层。其他抗氧化剂有二硫苏糖醇、谷胱甘肽、硫乙醇、及二乙基二硫氨基甲酸酯等。 8、活性炭(active carbon) 使
18、用浓度为0.5-108/L。它可以吸附非极性物质和色素等大分子物质,包括琼脂中所含的杂质,培养物分泌的酚、醌类物质以及蔗糖在高压消毒时产生的5-羟甲基糖醛及激素等。茎尖初代培养,加入适量活性炭,可以吸附外植体产生的致死性褐化物;其效力优于Vc和半胱氨酸;在新梢增殖阶段,活性炭可明显促进新梢的形成和伸长,但其作用有一个阀值,一般为0.1%-0.2%,不能超过0.2%。 活性炭在胚胎培养中也有一定作用,如在葡萄胚珠培养时向培养基加入o.1%的活性炭,可减少组织变褐和培养基变色,产生较少的愈伤组织。 二、培养基的制备 (一)、母液(stock so1ution)的配制和保存 在植物组织培
19、养工作中,配制培养基是日常必备的工作。为简便起见,通常先配制一系列母液,即贮备液。所谓母液是欲配制液的浓缩液,这样不但可以保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取,而且还便于低温保藏。一般母液配成比所需浓度高10-100倍。母液配制时可分别配成大量元素、微量元素、铁盐、有机物和激素类等。配制时注意一些离子之间易发生沉淀,如Ca2+和S042-,Ca2+Mg2+和PO43-一起溶解后,会产生沉淀,一定要充分溶解再放入母液中。配制母液时要用蒸馏水或重蒸馏水。药品应选取等级较高的化学纯或分析纯。药品的称量及定容都要准确。各种药品先以少量水让其充分溶解,然后依次混合。一般配成大量元素、微量元素、铁盐、
20、维生素等母液,其中维生素 氨基酸类可以分别配制,也可以混在一起。母液配好后放入冰箱内低温保存,用时再按比例稀释。 下面以MS培养基制备为例,概述其制备方法见表2-3。 (1)大量元素母液可配成浓度10倍母液。用分析天平按表2-3称取药品,分别加100ml左右蒸馏水溶解后,再用磁力搅拌器搅拌,促进溶解。注意Ca2+和阳Po43-易发生沉淀。然后倒人1000ml定容瓶中,再加水定容至刻度,成为10倍母液。 (2)微量元素母液 可配成浓度配成比100倍的母液。用分析天平按表准确称取药品后,分别溶解,混合后加水定容至1000ml。 (3)铁盐母液 可配成100倍的母液,按表称取药品,可加
21、热溶解,混合后加水定容至1000ml。 (4)有机物母液 可配成500倍的母液。按表分别称取药品,溶解,混合后加水定容至500ml。 (5)激素母液的配制 每种激素必须单独配成母液,浓度一般配成1mg/ml。用时根据需要取用。因为激素用量较少,一次可配成50ml或100ml。另外,多数激素难溶于水,要先溶于可溶物质,然后才能加水定容。 它们的的配法如下: 将IAA、IBA、GA等先溶于少量的95%的酒精中。再加水定容-定浓度。NAA可先溶于热水或少量95%的酒精中,再加水定容到一定浓度。2,4-D可用少量1mol NaOH溶解后,再加水定容到一定浓度。将Kt和BA
22、先溶于少量1mol的HCI中再加水定容。将玉米素先溶于少量95%的酒精中,再加热水到一定浓度。配制好的母液瓶上应分别贴上标签,注明母液名称、配制倍数、日期及配1L培养基时应取的量。 (二)、培养基的配制 按表用量筒移取大量元素母液100ml,用专一对应的移液管分别吸取微量元素母液10mi、铁盐母液10ml、有机物母液10ml,均置人1000ml定容瓶中,若不加任何激素,则为MSo培养基;若需加激素按配方移取激素母液即可。 将已装母液的定容瓶用蒸馏水或自来水定容到1000ml,取1/3左右倒人小铝锅中加热。同时,称好30g蔗糖,称琼脂丝7g(或琼脂粉),也倾人小铝锅中,边加热边搅拌,防止
23、糊底。旺火煮开,再用文火加热,直至琼脂全部融化即清澈见底为度。(若用琼脂粉,应加入100ml左右的液体培养基,并搅拌均匀)。然后再倾人定容 瓶余下的液体培养基,摇晃均匀即可。 培养基配好后,要调整pH值。用0.1M的NaOH或HCl液调成5.8pH值左右。在培养基配方不大变动的情况下可用经验法。可以将连续三次测定所加入的酸或碱液的平均值作为以后调整的用量值。调后注意一定要摇动均匀,还要注意酸或碱液不要放置时间太久。 (三)、培养基的分装与灭菌 培养基合成后要趁热分装,100ml的容器约装入30-40ml培养基,即1L培养基约装35瓶左右。太多则浪费培养基,太少不易接种和影响生长
24、但要根据培养对象来决定。如果培养时间较长时,应适当多装培养基,生根等短期培养时,可适当少加培养基。分装时不要把培养基弄到管壁上,以免日后污染。装后用封口材料包上瓶口,扎口后,写上培养基种类,准备灭菌。注意不能放置时间过长,以免产生污染。 培养基用高压灭菌。打开锅盖,加水至水位线。把已装好培养基的三角瓶,连同蒸馏水及接种用具等放人锅筒内,装时不要过分倾斜培养基,以免弄到瓶口上或流出。然后盖上锅盖,对角旋紧螺丝,接通电源加热,当升至0.05MPa时,打开放气阀放气,回"0',后关闭放气阀。当气压上升到0.10MPa时,保压灭菌20min,到时停止加热。当气压回"0"后打开锅盖,取出培养基,
25、放于平台上冷凝。灭好的培养基不要放置时间太长,最多不能超过1周。 试剂溶解方法(供参考) 试剂名称 溶解方法 ABA 脱落酸 溶于碳酸氢钠水溶液、氯仿、丙酮、乙酸乙酯和乙醚,微溶于苯和水。 ACES 该品0.1ml/L水溶液(20℃),PH值为3.0-4.5 丫啶橙 溶于水和乙醇。水溶液带橙黄色荧光。PH值8.4-10.4(由无色至黄绿色) 丙烯酰胺 无色透明片状结晶。溶于水、乙醇、丙酮、乙醚和三氯甲烷,微溶于甲苯,不溶于苯和庚烷。 腺苷 溶于水,微溶于乙醇和乙醚。 ADP Na2 5′-二磷酸腺苷二钠 溶于水。 琼脂 缓溶于热水成湖状,呈中性
26、不溶于冷水和乙醇。 琼脂糖 溶于热水,遇冷凝结成胶 L-丙氨酸 溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙醚和丙酮。 卵清白蛋白 溶于水和缓冲液 BSA V 牛血清白蛋白V 溶于水、氯化钠溶液及缓冲液后,成澄清溶液。 过硫酸铵 溶于水,但能缓慢水解并生成过氧化氢,热至120℃开始分解。 苦杏苷 味苦,溶于水和乙醇,不溶于乙醚。 AMV反转录酶 溶于PH缓冲液中,一般试剂1ul含有10-100单位。 α-淀粉酶 溶于水 L-精氨酸 易溶于水,不溶于乙醇和乙醚。 L-精氨酸盐酸盐 溶于水,微溶于乙醇。 抗坏血酸(维生素C) 溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙醚、苯、三氯
27、甲烷和石蜡醚等。 L-天门冬酰胺 无色或白色晶体。溶于酸和碱溶液,不溶于乙醇、乙醚和苯。 L-天门冬氨酸 溶于热水和稀酸,不溶于乙醇。 ATP Na2 溶于水。 BCIP 5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸 BCIP的钠盐用水溶,BCIP游离酸用DMSO溶。 6-BA 6-苄氨基嘌呤 溶于稀碱、稀酸溶液,不溶于乙醇。 BES 溶于水。 生物素 较易溶于热水和稀碱溶液,水溶液极易生长霉菌。 Bis-Tris 溶于水。 溴酚蓝 溶于乙醇、乙醚、苯和稀碱溶液,微溶于水。 CAPS 溶于水。 羧甲基纤维素 溶于水。 干酪素 溶于稀碱和浓酸中,不溶于水和有机溶剂
28、 酸水解干酪素 能溶于碱溶液和浓酸,难溶于水。 过氧化氢酶 溶于水。 纤维素酶 溶于水。 CHAPS 溶于水。 CHES 2-环己胺-1-乙磺酸 溶于水。 氯霉素 溶于乙醇。 胆固醇 溶于乙醚、丙酮、三氯甲烷、二氧六环、乙酸乙酯和植物油等,微溶于乙醇,难溶于水。 辅酶A 溶于水和生理盐水,几乎不溶于乙醇、乙醚、丙酮。 秋水仙碱 1g能溶于22ml水,220ml乙醚和100ml苯易溶于乙醇和氯仿,几乎不溶于石蜡醚。 刀豆蛋白A 用10mM、Ph8.5、含100uMCaCI2的PHEPES缓冲液溶解。 考马斯亮兰G-250 能溶于乙醇和热水,微溶于冷水
29、 考马斯亮兰R-250 微溶于热水和乙醇,不溶于冷水。 结晶紫 溶于水、乙醇和三氯甲烷和热水,微溶于丙酮。 氯化铯 溶于水。 CTAB 溴代十六烷基三甲胺 溶于乙醇、三氯甲烷和热水,微溶于丙酮。 L-半胱氨酸盐酸盐 溶于水、乙醇和丙酮、乙酸和氨水,水溶液呈酸性。 细胞松弛素B 易溶于水和酸性溶液。 细胞色素C 溶于水。 胞嘧啶 易溶于热水,微溶于冷水。 DAB 溶于稀酸。 DEPC 焦碳酸二乙脂 能与甲醇、乙醇和乙醚相混溶,遇水逐渐分解。 硫酸葡聚糖钠 不溶于乙醇。在强碱溶液中能与多种金属离子络合。 2,4-D 2,4-二氯苯氧乙酸 溶于乙醇、
30、乙醚和丙酮,难溶于水。 二氯二甲基硅烷 能溶于乙醚、苯等相混溶。遇水和乙醇易分解。 二甲基甲酰胺 能与水、乙醇、甲醇、乙醚和三氯甲烷等任意混溶。 DMSO 二甲基亚砜 由吸湿性。能与水、乙醇、乙醚、丙酮、乙醛、吡啶、乙酸乙酯、苯二甲酸二丁脂、二烷和芳烃化合物等任意混溶,不溶于乙炔以外额脂肪烃化合物。 鱼精DNA 易溶于碱溶液,微溶于水,不溶于乙醇和其他有机溶剂。 DnaseI 溶于水。 DTT 二硫代苏糖醇 能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和氯仿。 EB 溴化乙锭 能溶于水和乙醇。 EDTA 2Na 乙二胺四乙二钠盐 PH值接近8.0时溶于水。
31、EGTA PH值接近8.0时溶于水。 伊红Y二钠盐 易溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙醚。 固蓝B 能溶于水。 铁蛋白 系水溶性蛋白。 FITC 异硫氰酸荧光素 能溶于水,在水中分解。 6-呋喃氨基嘌呤(激动素) 白色片状结晶。为两性化合物,易溶于稀酸或稀碱溶液,难溶于水、乙醇、乙醚和丙酮。 明胶 溶于若随、甘油和乙酸,不溶于乙醇、乙醚和三氯甲烷等有机溶剂。 G-418硫酸盐 溶于水。 赤霉素 易溶于甲醇、乙醇、丙酮;适度的溶于乙酸乙酯。 姬姆斯染料 溶于甲醇和甘油(1:1)溶液呈蓝色,配制后的溶液易燃。 氧化型谷胱苷肽 能溶于水,不溶于乙醇和乙醚。
32、 还原型谷胱甘肽 溶于水,不溶于乙醇、乙醚和丙酮。 盐酸胍 易溶于水,溶于乙醇。 异硫氰酸胍 能溶于乙醇和水,与酸接触能放出极毒的气体。 鸟嘌呤 易溶于酸和苛性碱溶液,微溶于乙醇和乙醚,不溶于水。 鸟苷 溶于氨水、氢氧化钠和稀酸溶液,微溶于乙醇和乙醚,不溶于水。 苏木精 溶于热水、热乙醇、氨水、碱、硼砂溶液和甘油。微溶于冷水(由粉红至绿色)。 肝素钠 微具潮解性,易溶于水。 L-组氨酸 溶于水,微溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙醚。 HRP 辣根过氧化物酶 溶于水。 透明质酸酶 易溶于水,不溶于乙醇、乙醚和丙酮。 咪唑 易溶于水、乙醇、乙醚和吡啶,微溶于苯
33、和石油醚。 吲哚-3-乙酸 易溶于乙醇,溶于乙醚和丙酮,微溶于水和三氯甲烷。 吲哚-3-丁酸 溶于乙醇、乙醚和丙酮,不溶于水和三氯甲烷那。 肌醇 白色结晶性粉末。溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙醚。 胰岛素 用0.01N盐酸溶解,使用前用20Mm NaOH调至Ph7.5 IPTG 溶于水。 十二烷基肌氨酸钠 溶于水。 溶菌酶 溶于水。 麦芽糖 易溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙醚。 D-甘露醇 溶于水,微溶于低级醇和‘胺类。 MES 2-(N-吗啡啉)乙磺酸 溶于水。 L-甲硫氨酸 溶于水和稀乙醇,不溶于无水乙醇,乙醚和苯。 甲叉双丙烯酰胺 溶于水、乙醇
34、和含水丙酮。 次甲基兰 难溶于冷水和乙醇,加热易溶乙醇,不溶于乙醚。 MOPS 3-(N-吗啡啉)丙磺酸 溶于水。 NAD98% 辅酶I 溶于水,不溶于丙酮等有机溶剂。 NADH 还原型辅酶I 溶于水。 NADP98% 辅酶II 溶于水、甲醇,几乎不溶于乙醚、乙酸乙酯。 NADPH98% 还原型辅酶II 溶于水。 α-萘乙酸(NAA) 易溶于热水,溶于丙酮、乙醚、三氯甲烷和碱溶液,微溶于冷水。 NBT 硝基四氮唑蓝 易溶于乙醇,溶于水,微溶于乙醚。 VB5烟酸 易溶于沸水和沸乙醇,溶于苛性碱,碳酸钠溶液,不溶于乙醚和酯类。 NP-40 能与水混合,溶液呈
35、中性,溶于极性有机溶剂。 油红O 易溶于有机溶剂,能溶于丙酮,微溶于乙醇,不溶于水。 寡霉素 能溶于乙醇和苯,不溶于丙酮和水。 OPD 邻苯二胺(盐酸盐) 易溶于乙醇、乙醚和三氯甲烷,微溶于水。 PEG4000 聚乙二醇4000 溶于水和乙醇,不溶于乙醚。 PEG6000 聚乙二醇6000 溶于水和乙醇 胃蛋白酶 溶于稀酸。 蛋白胨 溶于水,不溶于乙醇。 酚红 溶于乙醇,氢氧化钠和碳酸钠溶液,不溶于水、三氯甲烷和乙醚。 L-苯丙氨酸 溶于水,不溶于乙醇和乙醚。 L-多聚赖氨酸 易溶于水,几乎不溶于常用有机溶剂。 蛋白酶A 该品0.5mg完全溶于1ml
36、水中,溶液无色透明。 PVP K-30 能溶于乙醇和氯仿,几乎不溶于乙醚。溶于水中呈胶状溶液。 丙酮酸激酶 溶于3.8mol/l的硫酸铵溶液中。 VB2 核黄素(维生素B2) 易溶于稀碱溶液,微溶于水。 RNA 酶抑制剂 溶于PH缓冲液中 脱氧核糖核酸酶 溶于PH缓冲液中 SDS 十二烷基硫酸钠 易溶于水,溶于热乙醇。 硝酸银 易溶于氨水,不溶于水、乙醇和甘油,微溶于乙醚。 叠氮钠 能溶于水及氨水,微溶于乙醇,不溶于乙醚。 碘化钠 能溶于水、乙醇和甘油,其水溶液呈弱碱性。 D-山梨醇 易溶于水,微溶于冷乙醇,不溶于乙醚。 亚精胺 能溶于水、乙醇和乙醚
37、 可溶性淀粉 溶于沸水,不溶于冷水、乙醇和乙醚。 蔗糖 易溶于水,微溶于乙醇。 TEMED 四甲基乙二胺 能与水、乙醇和其他有机溶剂相混溶。 盐酸噻胺(维生素B1) 易溶于水和甲醇,溶于甘油,不溶于乙醇和苯。 噻唑兰(MTT) 能溶于水和甲醇,不溶于氯仿。 凝血酶 易溶于生理盐水,溶液呈淡黄色混浊溶液。 Tricine 三(羟甲基)甲基甘氨酸 能溶于水。 Tris 三羟甲基氨基甲烷 溶液水,不溶于乙醚。 Triton X-100 曲拉通X-100 能溶于水、甲苯、二甲苯和乙醇,不溶于石油醚。 台盼兰 溶于水,溶液呈深蓝色,不溶于醇。 胰蛋白酶1:250 易溶于水,不溶于有机溶剂。 吐温20 能溶于水、稀酸、稀碱及多数有机溶剂。 吐温80 能分散于水及甲苯中,能溶于棉子油、丙酮、乙醚和二氧六环。 尿素 溶于水、乙醇和苯,难溶于乙醚,不溶于三氯甲烷。 二甲苯青FF 易溶于乙醇,溶于水,溶液呈蓝色。 酵母粉 溶于水呈黄色至棕色。






