2025年江苏省泰州市泰州中学、江都中学、宜兴中学生物高三上期末监测模拟试题.doc

2025年江苏省泰州市泰州中学、江都中学、宜兴中学生物高三上期末监测模拟试题
考生请注意：
1．答题前请将考场、试室号、座位号、考生号、姓名写在试卷密封线内，不得在试卷上作任何标记。
2．第一部分选择题每小题选出答案后，需将答案写在试卷指定的括号内，第二部分非选择题答案写在试卷题目指定的位置上。
3．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。

一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)
1．某同学做了以下实验：取A、B两支试管，在A中加入煮熟的蚕豆子叶，B中加入发芽的蚕豆子叶。在两试管中分别加入亚甲基蓝溶液（亚甲基蓝氧化态为蓝色，还原态为无色）一段时间后倒出溶液，两试管中的子叶都呈蓝色。然后两试管分别加水淹没子叶，抽气，在水面覆盖适量石蜡油，适宜温度下保温一段时间后，A管子叶蓝色深度不变，B管子叶蓝色变浅。取出两管子叶放在滤纸上一段时间，A管子叶蓝色深度不变，B管子叶蓝色深度一定程度恢复。下列分析不合理的是（ ）
A．该实验中抽气并在水面覆盖适量石蜡油的目的是隔绝空气，制造无氧环境
B．保温后A管子叶蓝色深度不变的原因是高温导致酶失活，细胞无呼吸作用
C．保温后B管子叶蓝色变浅的原因是亚甲基蓝被无氧呼吸产生的[H]还原
D．滤纸上B管子叶蓝色深度恢复的原因是子叶进行有氧呼吸将亚甲基蓝氧化
2．1979年的10月26日，人类彻底消灭了天花，从此不再接种天花疫苗。天花疫苗除可以对抗天花病毒，还能抵抗与天花病毒亲缘关系较近的一些痘病毒，如猴痘病毒等。天花病毒和猴痘病毒的传播途径如下图所示，下列说法正确的是（ ）

A．接种牛痘能使机体产生并保留相应的记忆细胞和B细胞，从而治疗天花
B．终止天花疫苗的接种不影响人类对猴痘病毒的免疫力
C．猴痘病毒可在人一畜、畜一畜之间传播，但不能在人一人之间传播
D．人体内浆细胞可以来源于B细胞与记忆细胞
3．下列关于染色体组和染色体变异的叙述，错误的是
A．不同物种的染色体组中可能含有相同的染色体
B．同种生物的细胞处于有丝分裂后期时染色体组数最多
C．减数分裂过程中的染色体结构变异可导致异常配子的产生
D．细胞内染色体数目以染色体组形式成倍增加导致个体不育
4．下图是在最适的温度和pH条件下，人体内某种酶的酶促反应速率随底物浓度变化的示意图。下列有关叙述错误的是

A．底物浓度为a时，再增加底物浓度，反应速率加快
B．底物浓度为b时，再增加酶的浓度，反应速率加快
C．底物浓度为a时，适当提高温度，反应速率会加快
D．底物浓度为b时，适当提高pH值，反应速率会减慢
5．我国科研人员发现线粒体外膜蛋白FUNDCl能够介导衰老、受损的线粒体通过自噬方式清除，在维持细胞线粒体稳态中发挥关键作用。线粒体自噬可以抑制炎症小体的激活从而抑制肝癌的发生。下列有关叙述错误的是（ ）
A．线粒体外膜蛋白FUNDCl在真核细胞中普遍存在
B．FUNDCl缺失会引起受损线粒体在肝脏细胞中的积累
C．与线粒体自噬过程密切相关的细胞器有溶酶体和线粒体等
D．通过敲除小鼠细胞内的FUNDCl基因可以抑制小鼠肝癌的发生
6．把一个细胞中的磷脂分子全部提取出来，在空气和水界面上将它们铺成单分子层(假定单分子间距离适当且相等)。推测在下列细胞中，空气和水界面上磷脂单分子层的表面积与原细胞的表面积之比最大和最小的细胞分别是(　　)
①洋葱根尖成熟区表皮细胞　②蛙的红细胞　③人体浆细胞　④乳酸菌细胞　⑤酵母菌细胞
A．①② B．③④
C．③② D．⑤④
7．2019年诺贝尔生理学或医学奖颁给了研究细胞对氧气的感应和适应机制的三位科学家。研究表明，HIF是普遍存在于人和哺乳动物细胞内的一种蛋白质．在正常氧气条件下，HIF会迅速分解；当细胞缺氧时．HIF会与促红细胞生成素(EPO)基因的低氧应答元件（非编码蛋白质序列）结合，使EPO基因表达加快．促进EPO的合成。HIF的产生过程及其对EPO基因的调控如图所示，下列分析正确的是（ ）

A．过程①和过程②在低氧环境中才能够进行
B．HII-的含量与细胞内的氧气含量呈正相关
C．细胞在正常氧气环境中EPO基因不能表达
D．EPO含量增加会促进细胞中HIF含量下降
8．（10分）某丘陵地区实行退耕还林后，经过数十年的演替发展为树林。以下分析正确的是

A．演替过程中物种的丰富度提高，种群数量增长都符合“J”型增长模型
B．生态系统的物质循环加快，恢复力稳定性逐渐提高
C．若将上图所示的食物网中的C的食物比例由A∶B＝1∶1调整为2∶1(能量传递效率为10%)，则该生态系统能承载C的数量约是原来的0.727倍
D．可以采用样方法调查蚜虫、跳蝻等害虫的种群密度，在对其进行生物防治的过程中存在着信息传递
二、非选择题
9．（10分）1996年克隆羊“多莉”诞生以后，马、牛、兔、猫、狗、骆驼等哺乳类动物的体细胞克隆相继成功，但与人类相近的灵长类动物（如猴）的体细胞克隆一直未被攻克。2017年底两只体细胞克隆猴“中中”和“华华”先后在中国科学院神经科学研究所诞生，成功培育全球首个体细胞克隆猴。
（1）用动物体细胞克隆动物，实际上是通过___________来实现的，该技术分为______________________和______________________，其中难度更大的是___________，原因是______________________，恢复其全能性十分困难。
（2）体细胞克隆猴的诞生还需要___________技术和___________技术的支持。
（3）体细胞克隆猴的重要意义在于，能够在一年内产生大批___________相同、可以模拟人类疾病的模型猴，将为人类疾病机理研究、干预、诊治带来光明前景。
10．（14分）光呼吸是所有进行光合作用的细胞在光照和高氧低二氧化碳情况下发生的一个代谢过程。它是光合作用一个损耗能量的副反应。即绿色植物在照光条件下的呼吸作用。特点是有机物在被分解转化过程中虽也放出CO2，但不能生成ATP，使光合产物被白白地耗费掉。所以光呼吸越强，光合生产率相对就低。
光呼吸现象产生的分子机制是O2和CO2竞争Rubisco酶。在暗反应中，Rubisco酶能够以CO2为底物实现CO2的固定，而当O2浓度高、CO2浓度低时，O2会竞争Rubisco酶。Rubisco酶以O2为底物，对五碳化合物进行加氧氧化。光呼吸使光合作用产物损失的具体过程如图所示。

水稻、小麦等C3植物的光呼吸显著，通过光呼吸损耗光合作用新形成有机物的1/4，而高粱、玉米等C4植物的光呼吸消耗很少，只占光合作用新形成有机物的2%~5%。与C3植物相比，C4植物代谢的不同点是，C4植物叶肉细胞的细胞质基质具有一种特殊的PEP羧化酶，它催化如下反应：PEP+HCO3—→苹果酸（C4）+Pi。苹果酸进入维管束鞘细胞，生成CO2用于暗反应，再生出的丙酮酸（C3）回到叶肉细胞中，进行循环利用。叶肉细胞包围在维管束鞘细胞四周，形成花环状结构。PEP羧化酶与CO2的亲和力是Rubisco酶的60倍，也就是PEP羧化酶能固定低浓度的CO2。

水稻和小麦作为养活全世界几乎40%人口的主要作物，它们的产量近几年越来越难满足全球快速增长的食物需求。目前，国际上有很多科研人员致力于提高水稻、小麦的光合速率的研究，旨在提高粮食作物产量。
（1）在光呼吸过程中，有机物被氧化分解，却无ATP生成，而ATP能应用于___________________（写出三条）等生命活动中，故会造成有机物浪费的结果。
（2）有观点指出，光呼吸的生理作用在于高温天气和过强光照下，蒸腾作用过强，植物失水过多，____________大量关闭，导致CO2供应减少。此时的光呼吸可以消耗光反应阶段生成的多余的____________，并且光呼吸的最终产物还可以作为暗反应阶段的原料，这是有重要正面意义的。
（3）综合文中信息，请解释C4植物光呼吸比C3植物小很多的原因__________。
（4）请根据高中所学知识和本文中的信息，在基因水平上写出两条具体的提高水稻、小麦光合作用的研究思路__________。
11．（14分）请回答基因工程相关问题：
（1）限制酶切割DNA分子时，断裂的是___________键｡为了保证目的基因与载体的正确连接，通常用两种_________________________________不同的限制酶同时处理含目的基因的DNA片段与载体｡
（2）若要通过反转录得到胰岛素基因，可从人体的___________细胞中提取mRNA｡提取mRNA时，在提取液中一般要加入RNA酶抑制剂，其目的是______________________｡若要在体外得到大量胰岛素基因，可采用______________________技术，该技术过程中设计引物时______________________（填“需要”或“不需要”）知道胰岛素基因的全部序列｡
（3）将重组质粒转化大肠杆菌时，大肠杆菌本身___________（填“含有”或“不含有”）质粒｡一般情况下不能用未经处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是______________________。
12．基因定点整合可替换特定基因，该技术可用于单基因遗传病的治疗。苯丙酮尿症是由PKU基因突变引起的，将正常PKU基因定点整合到PKU基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体DNA上，替换突变基因，可用来研究该病的基因治疗过程。定点整合的过程是：从染色体DNA上突变PKU基因两侧各选择一段DNA序列HB1和HB2，根据其碱基序列分别合成HB1和HB2，再将两者分别与基因、连接，中间插入正常PKU基因和标记基因，构建出如图所示的重组载体。重组载体和染色体DNA中的HB1和HB2序列发生交换，导致两者之间区域发生互换，如图所示。

（1）构建重组载体时，常用的工具酶有________。该实验用小鼠胚胎干细胞作为PKU基因的受体细胞以培育出转基因小鼠，除了胚胎干细胞能大量增殖外，还因为胚胎干细胞_________。
（2）为获得小鼠的胚胎干细胞，可将小鼠囊胚中的_________取出，并用_________处理使其分散成单个细胞进行培养，培养过程中大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长，这种现象称为___________。
（3）用图中重组载体转化胚胎干细胞时，会出现PKU基因错误整合。错误整合时，载体的两个中至少会有一个与一起整合到染色体DNA上。已知含有的细胞具有G418的抗性，、的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。转化后的胚胎干细胞依次在含有G418及同时含有G418和DHPG的培养液中进行培养，在双重选择下存活下来的是__________的胚胎干细胞，理由是_________。
（4）将筛选得到的胚胎干细胞培育成小鼠，从个体生物学水平检测，若小鼠__________，说明PKU基因成功表达。
参考答案

一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)
1、D
【解析】
该题是一道关于呼吸作用实验分析题，呼吸作用的实质是氧化分解有机物，释放能量。有氧呼吸的总反应式：C6H12O6+6O2+6H2O 6CO2+12H2O+能量（大量）；无氧呼吸的总反应式：C6H12O6 2C2H5OH+2CO2+能量（少量）。
【详解】
A、实验中加水淹没子叶抽气，在水面上覆盖适量石蜡油，创设无氧环境，A正确；
B、A管放入的是煮熟的蚕豆子叶，高温处理子叶细胞酶已失活，不能进行呼吸作用，所以A管子叶37℃保温后不变色，B正确；
C、保温后B管子叶细胞进行无氧呼吸，产生的 [H] 能使亚甲基蓝还原，B管子叶蓝色变浅，C正确；
D、取出子叶放在滤纸上，创设有氧环境，通过子叶有氧呼吸将还原的亚甲基蓝氧化，使滤纸上B管子叶蓝色变深，D错误。
故选D。
本实验将实验过程和实验结果全部呈现出来，要求学生分析A、B两试管中的子叶颜色发生变化及不变色的原因。另外，题干中有“亚甲基蓝氧化态为蓝色，还原态后为无色”的信息提示，能起到引导学生辨别答题方向的作用。
2、D
【解析】
由图可知，天花病毒属于在人与人之间传播的病毒。而猴痘病毒既可以在人与人之间传播，也可以在啮齿类动物之间传播，还可以在人和啮齿类动物之间传播。
【详解】
A、接种牛痘能使机体产生并保留相应的记忆细胞和抗体，B细胞的产生与接种疫苗无关，A错误；
B、由于天花疫苗除可以对抗天花病毒，还能抵抗与天花病毒亲缘关系较近的一些痘病毒，如猴痘病毒等，所以终止天花疫苗的接种使人类对猴痘病毒的免疫力相对降低，B错误；
C、猴痘病毒可在人—人、人—畜、畜—畜之间传播，C错误；
D、人体内的B细胞与记忆细胞在相应抗原的刺激下都可以分化为浆细胞，D正确。
故选D。
本题主要考查免疫的相关知识，意在考查考生对免疫过程的识记和理解能力，以及应用所学知识解决问题的能力。
3、D
【解析】
1、细胞中的一组非同源染色体，它们在形态和功能上各不相同，但是携带着控制一种生物生长发育、遗传和变异的全部信息，这样的一组染色体，叫做一个染色体组。2、染色体变异包括染色体结构变异和染色体数目变异。染色体结构变异包括染色体片段的缺失、重复、易位和倒位，染色体结构变异会使排列在染色体上的基因的数目和排列顺序发生改变，而导致生物性状的改变，染色体结构变异大多数对生物是不利的，有的甚至会导致生物死亡；染色体数目变异分为个别染色体的增减和细胞内染色体数目以染色体组的形式成倍地增减。
【详解
A、不同物种的染色体组中可能含有相同的染色体，如二倍体西瓜与四倍体西瓜染色体组内的染色体相同，A正确；
B、同种生物的细胞处于有丝分裂后期时染色体组数最多，是体细胞染色体组数目的两倍，B正确；
C、减数分裂过程中的染色体结构变异可导致异常配子的产生，C正确；
D、细胞内染色体数目以染色体组形式成倍增加后，导致细胞内含有偶数个染色体组，不会导致个体不育，D错误。
故选D。
4、C
【解析】
a点时反应物浓度是反应速率的限制因素，a点时反应速率随着反应物浓度增大而增大，A正确；b点时的限制因素是酶的浓度，再增加酶的浓度，反应速率加快，B正确；底物浓度为a时，适当提高温度，超过最适温度，酶的活性降低，反应速率减慢，C错误；底物浓度为b时，适当提髙PH值，酶的活性降低，反应速率减慢，D正确。故选：C。
5、D
【解析】
线粒体是进行有氧呼吸的主要场所，根据线粒体自噬可以抑制炎症小体的激活从而抑制肝癌的发生回答问题。
【详解】
A、真核细胞普遍存在线粒体，因此线粒体外膜蛋白FUNDCl在真核细胞中普遍存在，A正确；
B、FUNDCl能够介导衰老、受损的线粒体通过自噬方式清除，因此当FUNDCl缺失会引起受损线粒体在肝脏细胞中的积累，B正确；
C、线粒体自噬过程需要溶酶体中的水解酶发挥作用，并且需要线粒体提供能量，C正确；
D、当敲除小鼠细胞内的FUNDCl基因后，则线粒体无法自噬，则不能抑制小鼠肝癌的发生，D错误。
故选D。
6、B
【解析】
1.洋葱根尖成熟区表皮细胞、蛙的红细胞、酵母菌细胞和人体浆细胞都是真核细胞，乳酸菌细胞是原核细胞，真核细胞具有细胞膜、核膜和细胞器膜，而原核细胞只有细胞膜。
2.人体浆细胞能分泌大量的抗体，因此其细胞中内质网和高尔基体多，膜面积大。
【详解】
磷脂单分子层的表面积与原细胞表面积之比最大的细胞特征是细胞相对比较小，而且细胞中生物膜结构丰富。题干所列的几种细胞中，人体浆细胞主要产生抗体，细胞中有丰富的内质网和高尔基体，符合此特点。乳酸菌细胞仅具有细胞膜，细胞内没有膜结构，是几种细胞中磷脂单分子层的表面积与原细胞表面积之比最小的细胞，A、C、D不合题意，B符合题意。
本题考查生物膜系统、原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同，要求考生识记原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同，明确原核细胞的生物膜只有细胞膜；识记细胞结构和功能，明确浆细胞具有较强的分泌功能，细胞中的膜结构多，膜面积大。
7、D
【解析】
基因表达是指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程，基因表达产物通常是蛋白质。基因表达包括转录和翻译。转录过程由RNA聚合酶进行，以DNA为模板，产物为RNA。RNA聚合酶沿着一段DNA移动，留下新合成的RNA链。翻译过程是以信使RNA（mRNA）为模板，指导合成蛋白质的过程。促红细胞生成素（EPO）又称红细胞刺激因子、促红素，是一种人体内源性糖蛋白激素，可刺激红细胞生成。
【详解】
A、过程①为转录，过程②为翻译，均不需要在低氧环境中进行，A错误；
B、正常氧气条件下，HIF会迅速分解；当细胞缺氧时．HIF会与促红细胞生成素(EPO)基因的低氧应答元件（非编码蛋白质序列）结合，因此HII-的含量与细胞巾的氧气含量呈负相关，B错误；
C、EPO为促红细胞生成素细胞，在正常氧气环境中EPO基因表达，在低氧环境下EPO基因表达加快，以适应低氧的环境，C错误；
D、EPO含量增加会促进红细胞运输氧气，细胞逐渐提高甚至恢复正常氧气的状态，而在正常氧气条件下，HIF分解因此EPO含量增加会促进HIF含量下降，D正确。
故选D。
8、D
【解析】演替过程中物种的丰富度提高，种群数量增长一般都符合“S”型增长模型，A错误；演替过程中，生态系统的物质循环加快，抵抗力稳定性逐渐提高，恢复力稳定性逐渐降低，B错误；设当食物比例A∶B为1∶1时，C的能量为x，需要的A为x÷10%＋x÷10%÷10%＝55x。设当食物比例A∶B为2∶1时，C的能量为y，需要的A为y÷10%＋y÷10%÷10%＝40y。由于两种情况下，生产者的数量是一定的，所以55x＝40y，则y＝1.375x，则该生态系统能承载C的数量约是原来的1.375倍，C错误；蚜虫、跳蝻属于个体小、活动能力小的动物，所以调查蚜虫、跳蝻的种群密度可以采用样方法；在对蚜虫和跳蝻进行生物防治的过程中存在着蚜虫、跳蝻与其天敌之间的信息传递，D正确。

二、非选择题
9、核移植 胚胎细胞核移植 体细胞核移植 体细胞核移植 动物体细胞分化程度高 动物细胞培养 胚胎移植 遗传物质（或DNA，或基因）
【解析】
动物体细胞核移植过程：动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，使用电脉冲等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。
克隆分治疗性克隆和生殖性克隆。治疗性克隆指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植；生殖性克隆指将克隆技术用于生育目的，即用于产生人类个体。
【详解】
（1）用动物体细胞克隆动物，实际上是通过核移植来实现的，该技术分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，故其中体细胞核移植难度更大。
（2）据分析可知，体细胞克隆猴的诞生还需要动物细胞培养技术和胚胎移植技术的支持。
（3）核移植过程遗传物质没有发生改变，体细胞克隆猴的重要意义在于，能够在一年内产生大批遗传物质相同、可以模拟人类疾病的模型猴，将为人类疾病机理研究、干预、诊治带来光明前景。
本题考查克隆动物核移植相关过程和知识点，掌握相关知识结合题意答题。
10、根吸收无机盐、细胞分裂、DNA复制等 气孔 [H]和ATP 即使在低CO2浓度下，C4植物叶肉细胞中高效的PEPC酶能够利用极低浓度的CO2，且花环状的结构使得多个叶肉细胞中的CO2富集到一个维管束鞘细胞中，使得维管束鞘细胞CO2浓度高，在竞争Rubisco酶中有优势，抑制光呼吸 利用基因工程技术在水稻、小麦中引入C4途径的相关基因；改造Rubisco酶的基因进而改变Rubisco酶结构，使得只特异性结合CO2
【解析】
植物的光合作用原理是在叶绿体里利用光能把二氧化碳和水合成有机物并放出氧气，同时把光能转变成化学能储存在制造的有机物里，光合作用又分为光反应和暗反应，光反应的物质变化有水的光解和ATP的合成，暗反应的物质变化为二氧化碳的固定和三碳化合物的还原，影响光合作用的环境因素有温度、二氧化碳浓度及光照强度，据此解答。
【详解】
（1）ATP是细胞生命活动的直接能源物质，故ATP可用于多种生命活动，如根吸收无机盐、细胞分裂、DNA复制等。
（2）植物细胞吸收二氧化碳是从气孔进入细胞。如果蒸腾作用过强，植物失水过多，气孔大量关闭，导致CO2供应减少，此时暗反应受阻。有光照，光反应继续产生[H]和ATP，此时光呼吸可以消耗光反应阶段生成的多余的[H]和ATP，同时光呼吸的最终产物还可以作为暗反应阶段的原料，这是有重要正面意义的。
（3）此问需要结合两个内容，一是C4途径的特点，二是光呼吸的分子机制。首先，C4的特点是为Rubisco酶提供高浓度CO2。这个实现的条件有两点，①PEP羧化酶固定CO2能力强；②固定的这些CO2被花环状结构富集与维管束鞘细胞中。第二，高浓度的CO2能够竞争Rubisco酶，避免O2与Rubisco酶结合进而避免光呼吸的产生；所以C4植物光呼吸比C3植物小很多。
（4）通过基因工程原理，在基因水平上提高水稻、小麦光合作用的研究思路：一、利用基因工程技术在水稻、小麦中引入C4途径的相关基因；二改造Rubisco酶的基因进而改变Rubisco酶结构，使得只特异性结合CO2。
本题考查光合作用和光呼吸的相关知识，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲理解层次的考查。
11、磷酸二酯 识别序列和切割位点 胰岛B 防止mRNA（RNA）被降解 PCR 不需要 不含有 未经处理的大肠杆菌吸收外源DNA的能力较弱
【解析】
1、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
2、PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。PCR技术的原理是DNA复制，需要的条件有：模板DNA（目的基因所在的DNA片段）、原料（四种脱氧核苷酸）、一对引物（单链的脱氧核苷酸序列）、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。
【详解】
（1）根据限制酶的作用可知，限制酶切割DNA分子时，断裂的是磷酸二酯键｡由于同种限制酶切割得到的目的基因或质粒的两端黏性末端相同，会出现自体相连的现象，所以为了保证目的基因与载体的正确连接，通常用两种识别序列和切割位点不同的限制酶同时处理含目的基因的DNA片段与载体｡
（2）由于胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达，所以若要通过反转录得到胰岛素基因，可从人体的胰岛B细胞中提取mRNA｡提取mRNA时，在提取液中一般要加入RNA酶抑制剂，其目的是防止mRNA（RNA）被降解。可采用PCR技术在体外扩增目的基因。在利用PCR技术扩增目的基因时，只需要一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物，而不需要知道胰岛素基因的全部序列｡
（3）质粒上的抗性基因一般用作标记基因，为了便于筛选导入了重组质粒的大肠杆菌，在将重组质粒转化大肠杆菌时，所选的大肠杆菌本身一般不含有质粒｡若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱，常用Ca2+处理使之成为易于吸收外源DNA的感受态细胞。
本题考查基因工程的有关知识，意在考查考生对知识点的识记、理解和掌握程度，要求考生具有扎实的基础知识和一定的判断能力，能构建一定的知识网络。
12、限制酶和DNA连接酶 具有全能性 内细胞团细胞 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 贴壁生长 正确互换整合 正确互换整合后的染色体上只有只有，无、，具有G418抗性，故能在含有G418和DHPG的培养液中生长，错误互换整合后的细胞中染色体DNA上含有和至少1个，而、的产物都能把DHPG转化成有毒物质，故在含有G418和DHPG的培养液中错误整合的细胞死亡 尿液中霉臭味显著降低
【解析】
DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。构建重组载体时，首先需用限制性核酸内切酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组载体。胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团），因此获取的胚胎干细胞应取自囊胚的内细胞团。结合题图可知，正常互换后的染色体DNA上只有，而无、；错误整合时，载体的两个中至少会有一个与一起整合到染色体DNA上，故由于正确互换后的细胞染色体上有，无、，故对G418有抗性，可在含G418的培养液中正常生活，而错误互换后的染色体DNA上由于含有至少1个，而、的产物都能使细胞死亡，故错误互换的细胞不能生存，据此分析。
【详解】
（1）构建重组载体时，常用的工具酶有限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶。实验用小鼠胚胎干细胞作为PKU基因的受体细胞，除了胚胎干细胞能大量增殖外，还因为胚胎干细胞具有全能性。
（2）为获得小鼠的胚胎干细胞，可将小鼠囊胚中的内细胞团细胞取出，并用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使其分散成单个细胞进行培养，培养过程中大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长，这种现象称为贴壁生长。
（3）已知含有的细胞具有G418的抗性，、的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡，据分析可知，正确互换后的染色体上只有只有，无、，错误互换后的细胞中染色体DNA上含有和至少1个，因此，转化后的胚胎干细胞依次在含有G418及同时含有G418和DHPG的培养液中进行培养，在双重选择下存活下来的是正常互换整合的胚胎干细胞，原因是：正确互换后的染色体上只有只有，无、，具有G418抗性，故能在含有G418及同时含有G418和DHPG的培养液中生长，错误互换后的细胞中染色体DNA上含有和至少1个，而、的产物都能把DHPG转化成有毒物质，因此在含有G418和DHPG的培养液中死亡。
（4）苯丙酮尿症是由于苯丙氨酸代谢途径中的酶缺陷，使得苯丙氨酸不能转变成为酪氨酸，导致苯丙氨酸及其酮酸蓄积，并从尿中大量排出，主要表现为智力低下，尿液中有霉臭味，将筛选得到的胚胎干细胞培育成小鼠，若PKU基因成功表达，则从个体生物学水平检测，小鼠尿液中霉臭味显著降低。
本题考查了基因工程和胚胎工程等相关知识，要求学生能够识记胚胎干细胞的来源，明确基因表达载体构建过程及目的基因的表达和检测，本题难点在于序列交换后细胞的筛选。