1、上海市第二工业大学附属龚路中学2025-2026学年生物高三上期末监测试题 注意事项 1.考生要认真填写考场号和座位序号。 2.试题所有答案必须填涂或书写在答题卡上,在试卷上作答无效。第一部分必须用2B 铅笔作答;第二部分必须用黑色字迹的签字笔作答。 3.考试结束后,考生须将试卷和答题卡放在桌面上,待监考员收回。 一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。) 1.下列疾病中,不可能从患者传递给下一代的是( ) A.21-三体综合征 B.特纳氏综合征 C.艾滋病 D.多指 2.下列有关生物学实验的叙述,正确的是 A.低倍镜下看到洋葱根尖分生区细胞呈长方形,排列
2、疏松不规则 B.用显微镜观察洋葱根尖有丝分裂过程,需要保持细胞生物活性 C.加入斐林试剂并水浴加热才能检测试管内梨汁中是否含还原糖 D.叶绿体色素滤液细线浸入层析液,会导致滤纸条上色素带重叠 3.科研人员从肿瘤细胞中发现了蛋白S,为了研究其功能做了如下实验:将DNA模板和RNA聚合酶混合一段时间后加入原料,其中鸟嘌呤核糖核苷酸用32P标记,一起温育一段时间后加入肝素(可以与RNA聚合酶结合),然后再加入蛋白S,结果如下图所示。下列叙述不正确的是 A.对照组应加入不含蛋白S的缓冲液 B.曲线反映的是模板DNA的复制过程 C.加入肝素后没有新的mRNA合成 D.蛋白S能解除肝素
3、抑制转录的作用 4.某同学利用如图所示的装置探究酵母菌的呼吸方式,下列叙述错误的是( ) A.实验开始前,将温水化开的酵母菌悬液加入盛有葡萄糖液的广口瓶后需振荡混匀 B.实验选用的温水温度为30℃是因为该温度处于酵母菌发酵的适宜温度范围内 C.澄清石灰水变浑浊,说明酵母菌只进行需氧呼吸 D.拔掉塞子后如能闻到酒味,说明一定有酵母菌进行了厌氧呼吸 5.下列有关酶和ATP的叙述,正确的是( ) A.ATP脱去两个磷酸基团后,形成的物质是某些酶的基本组成单位之一 B.人成熟的红细胞无细胞核和众多的细胞器,所以不能合成ATP C.无氧呼吸的两个阶段都需要酶的参与,都有
4、ATP产生 D.同一生物体内各种酶的催化条件都相同,其催化效率受温度和pH的影响 6.人类利用微生物发酵制作果酒、果醋的历史源远流长。下列关于果酒、果醋制作原理的叙述正确的是( ) A.在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是野生型酵母菌 B.变酸的酒表面的菌膜是酵母菌在液面大量繁殖形成的 C.在缺氧、呈酸性的发酵液中,醋酸菌能大量生长繁殖 D.在酸性条件下,溴麝香草酚蓝水溶液与酒精反应呈现灰绿色 7.如图表示某二倍体动物细胞分裂的部分图像(数字代表染色体,字母代表染色体上的基因)。下列叙述正确的是( ) A.甲、乙、丙细胞所处时期均易发生基因突变 B.甲细胞
5、中1与2或1与4的片段交换均属于基因重组 C.乙细胞表明该动物发生了基因突变或基因重组 D.丙细胞中有两个染色体组,不能进行基因重组 8.(10分)下列有关生命现象及其生物学意义的叙述,不正确的是( ) A.明显缩短DNA 分子复制所需要的时间主要是依靠半保留复制方式 B.基因突变、基因重组和染色体变异都可为生物进化提供原材料 C.捕食者捕食个体数量多的物种,能避免生态系统中出现占绝对优势的物种 D.高等动物体内性激素的分泌存在负反馈调节,能使性激素的含量不至于过高 二、非选择题 9.(10分)阅读下列有关病毒的材料并回答题目。 Ⅰ.2019新型冠状病毒,即“2019
6、nCoV”,为有包膜病毒。颗粒呈圆形或椭圆形,直径50~200nm。颗粒表面有棒状突起,使病毒表面看起来形如花冠,故而得名。2019-nCoV基因组长度为1.8Kb,为单股正链RNA,其5’端为甲基化帽子,3’端有多聚腺苷酸(PolyA)结构,可直接作为翻译模板。截至2020年3月25日上午10时,世界范围确诊感染此病毒的人数已累计达到412461人。 (1)下列选项错误的是_____ A.细胞膜能控制物质进出,故该病毒只能侵染受损细胞,使人患病 B.由于没有核糖体,这种病毒无法合成蛋白质,其包膜组成一定不含蛋白质 C.病毒的遗传物质水解后可产生一分子核苷,一分子含氮碱基与一分子
7、磷酸 D.此病毒的单股正链RNA,只有转录形成对应的负链RNA才能附着在细胞的核糖体上 (2)这种病毒的遗传物质为_____,研究人员紧急研发了核酸检测试剂盒,以此来检测病毒,检测此病毒的核酸可使用_______法。研究人员发现,病毒的中间宿主为蝙蝠,某些情况下,病毒可在不同动物身体内翻译出基本相同的多肽链,这是因为_____。 (3)病毒入侵人体后,引起相关细胞分泌抗体,该抗体并不会与其他病症的抗原结合,这体现了________,此原理也可应用于该病的检测。若要用细胞工程的方法生产针对2019-nCoV上抗原的单克隆抗体,用到的技术有_________和_________。 (4)将
8、2019-nCoV不稳定的RNA转换成DNA后,技术人员常采用荧光定量PCR技术定量检测样本中病毒的核酸含量。其原理如图:在PCR反应体系中每加入一对引物的同时,加入一个与某条模板链互补的荧光探针,当_________催化子链延伸至探针处,会水解探针,使荧光监测系统接受到荧光信号,即每扩增一次,就有一个荧光分子生成。反应最终的荧光强度与PCR起始状态_________含量呈正相关。 Ⅱ.朊病毒是一种只含蛋白质而不含核酸的病原微生物。按图示1→2→3→4进行实验,验证朊病毒侵染因子是蛋白质,题中所用牛脑组织细胞为无任何标记的活体细胞。 (1)本实验采用的研究方法是______。 (
9、2)从理论上讲,经1→2→3→4实验离心后上清液中______(填“能大量”或“几乎不能”)检测到32P,沉淀物中___________(填“能大量”或“几乎不能”)检测到32P,出现上述结果的原因是:_________。 (3)如果添加试管5,从试管2中提取朊病毒后先加入试管5同时添加35S标记的(NH4)235SO4,连续培养一段时间后,再提取朊病毒加入试管3,培养适宜时间后离心,检测放射性应主要位于_______中,少量位于_______中,原因是:_____________。 (4)一般病毒的增殖同朊病毒之间的最主要区别是:一般的病毒侵染细胞是向宿主细胞提供________(物质)
10、利用宿主细胞的_______________等物质进行增殖。 10.(14分)2020年2月10日,总书记在北京调研指导新型冠状病毒肺炎疫情防控工作时强调,以更坚定的信心、更顽强的意志、更果断的措施,坚决打赢疫情防控的人民战争、总体战、阻击战。请回答下列问题: (1)新型冠状病毒侵入人体内,首先要突破保卫人体的第一道防线和第二道防线,这两道防线叫做__________免疫。 (2)病毒侵入人体后寄生在宿主细胞中,_________能识别被寄生的宿主细胞,并与之密切接触,使其裂解死亡,新型冠状病毒被释放出来后,与_______(填“细胞”或“体液”)免疫产生的________凝集,使
11、之失去侵染能力,最后被吞噬细胞吞噬消化。 (3)新型冠状病毒的检测可以采用实时荧光RT—PCR(逆转录聚合酶链式反应)的方法,RT—PCR的具体过程如图。过程I需要加入缓冲液、原料、_______酶和引物A等;过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增,理论上需要________个引物B。 (4)疫情发生后,多地紧急启动封城措施,限制人员进出,对感染者进行隔离治疗。从预防传染病的角度来说,这种措施属于__________。其他防控措施有:①隔离病人;②使用一次性口罩、手套和防护服;③接种疫苗;④用酒精、84消毒液等对室内外环境进行消毒等;其中属于切断传播途径的是____________。(填
12、序号) (5)研究人员在研究疫苗的同时,为了临床快速缓解患者症状,需要短时间内大量制备相关抗体,具体步骤为:将减毒新型冠状病毒多次注射到小鼠体内,取经新型冠状病毒免疫后小鼠的________,加入__________,使之与小鼠的骨髓瘤细胞进行融合以形成杂交瘤细胞,经培养、筛选,最后得到单克隆抗体,其特点是_______________。 11.(14分)果胶酶广泛用于食品工业、纺织品加工业和造纸工业等领域。请结合所学知识,同答下列问题: (1)果胶酶并不特指某一种酶,而是分解果胶的一类酶的总称,包括_______________(至少答出2种)等。 (2)下表是筛选产果胶酶微生物时所
13、用的一种培养基的配方: K2HPO4 MgSO4 NaNO3 FeSO4 果胶 刚果红 水 0.1g 0.5g 3g 0.001g 2g 1g 加至1L ①该培养基能够筛选到产果胶酶的微生物的原因是____。为了能够筛选出分解果胶的微生物菌落,该培养基还需要添加____。 ②该培养基中的刚果红可以与____形成红色复合物。我们可以通过菌落周围是否产生____来筛选产果胶酶的微生物。 (3)某果胶酶高产菌株产生的果胶酶为分子量不同的多种酶复合物,可以采取____法将这些酶在保持活性下进行有效分离。 (4)果胶酶应用于果汁生产时,主要解决的两大问题分别是:___
14、 12.类风湿性关节炎(RA)是一种自身免疫病,致残性强。研究表明,该病的病理改变与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)密切相关,而一种人鼠嵌合的抗TNF-α单克隆抗体能有效治疗RA。下图为该单克隆抗体制备过程示意图。 (1)图中的抗原A是______________,常用的促融剂是_______________。细胞融合完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有骨髓瘤细胞自身融合细胞、淋巴细胞自身融合细胞。体系中出现多种类型细胞的原因是________________。 (2)HAT培养基的作用是经选择性培养筛选出杂交瘤细胞,之后还需
15、要进行__________培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。最后获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是___________________。 (3)单克隆抗体的特点是__________________。单克隆抗体的制备涉及细胞工程中的动物细胞融合技术和____________技术。 (4)单克隆抗体主要的用途有:_______________________________(至少答两点)。 参考答案 一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。) 1、B 【解析】 可遗传变异包括基因突变、基因重组和染色体变异,基因重组包括自由组合型
16、和交叉互换型;染色体变异包括染色体数目改变和染色体结构变异,染色体结构变异包括染色体片段的缺失、重复、易位和倒位。 【详解】 A、21-三体综合征是常染色体遗传遗传病,可以遗传给下一代,A错误; B、特纳氏综合征是性染色体异常遗传病,患者无生殖能力,因此不能遗传给下一代,B正确; C、艾滋病是获得性免疫缺陷综合征,属于传染病,可能从患者传递给下一代,C错误; D、多指是单基因遗传病,可以遗传给下一代,D错误。 故选B。 2、C 【解析】 1、洋葱根尖分生区细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂,观察根尖细胞有丝分裂的实验步骤:取材→ 解离→漂洗→染色→制片→观察。 2、斐林
17、试剂与还原糖在水浴加热的条件下产生砖红色沉淀。 3、绿叶中色素的提取与分离的原理是:色素能够溶解到有机溶剂乙醇中,绿叶中的色素在层析液中的溶解度不同,溶解度大的扩散的快,溶解度小的扩散的慢,因此可以把绿叶中的色素分离。 【详解】 A.低倍镜下看到洋葱根尖分生区细胞呈正方形,排列紧密,A错误; B.观察洋葱根尖有丝分裂过程的实验过程中,解离步骤已经将细胞杀死,故观察过程中不需要保持细胞生物活性,B错误; C.用斐林试剂检测生物组织中还原糖存在时,需要在加入斐林试剂后并水浴加热才能检测到,C正确; D.叶绿体色素滤液细线浸入层析液,会导致滤纸条上无色素带出现,D错误。 故选C。 3
18、B 【解析】 根据对照实验的基本原则,无关变量应保持相同且适宜,实验组加入了蛋白质S即含有蛋白质S的缓冲液,对照组应加入不含有蛋白质S的缓冲液,A正确;据题意“将DNA模板和RNA聚合酶混合一段时间后加入原料,其中鸟嘌呤核糖核苷酸用32P标记”,结合题图开始一段时间内(1分钟之前)产物放射性增加,说明曲线反映的是模板DNA的转录过程。加入肝素后,产物中含32P的放射性强度不再增加,说明肝素能抑制转录过程,因此没有新的mRNA的合成,B错误,C正确;据图可知,加入肝素一段时间后再加入蛋白质S,产物放射性很高;未加入蛋白质S,产物反射性几乎不发生变化,说明蛋白质S能解除肝素抑制转录的作用,D
19、正确。 4、C 【解析】 酵母菌是兼性厌氧型生物,需氧呼吸以葡萄糖为底物,消耗O2产生CO2,厌氧呼吸以葡萄糖为底物,产生CO2和酒精。CO2可使澄清石灰水变浑浊。 【详解】 A、实验开始前,将温水化开的酵母菌悬液加入盛有葡萄糖液的广口瓶后需振荡混匀,增大酵母菌与葡萄糖的接触,使其快速繁殖,A正确; B、实验选用的温水温度为30℃是因为该温度处于酵母菌发酵的适宜温度范围(25-30℃)内,B正确; C、酵母菌是兼性厌氧型生物,需氧呼吸产生CO2,厌氧呼吸产生CO2和酒精,因此澄清石灰水变浑浊,不能说明酵母菌只进行需氧呼吸,C错误; D、酵母菌厌氧呼吸产生CO2和酒精,拔掉塞子后如
20、能闻到酒味,说明一定有酵母菌进行了厌氧呼吸,D正确。 故选C。 5、A 【解析】 1、ATP中文名称叫三磷酸腺苷,结构简式A-P~P~P,其中A代表腺苷,P代表磷酸基团,~代表高能磷酸键。ATP水解释放的能量,来自高能磷酸键的化学能,并用于生命活动。 2、酶是活细胞产生的一类具有催化作用的有机物,大部分有机物是蛋白质,少部分有机物是酶。 【详解】 A、ATP中文名称叫三磷酸腺苷,结构简式A-P~P~P,~代表高能磷酸键,其断裂后,形成的一磷酸腺苷(腺嘌呤核糖核苷酸)是某些酶(RNA)的基本组成单位之一,A正确; B、人成熟的红细胞无细胞核和众多的细胞器,但可通过无氧呼吸合成ATP
21、B错误; C、无氧呼吸的两个阶段均需要酶的参与,但只有第一阶段能产生少量ATP,C错误; D、同一生物体内各种酶的催化条件不同,其催化效率受温度和pH的影响,D错误。 故选A。 6、A 【解析】 酵母菌是兼性厌氧型生物,在有氧条件下进行有氧呼吸;无氧条件下进行酒精发酵。 【详解】 A、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是野生型酵母菌,起无氧呼吸可以产生酒精,A正确; B、变酸的酒表面的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖形成的,B错误; C、醋酸菌是需氧生物,C错误; D、在酸性条件下,重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色,D错误。 故选A。 7、D 【解析】 分析题图:甲细胞含
22、有同源染色体,且同源染色体正在分离,处于减数第一次分裂后期;乙细胞含有同源染色体,着丝点已经分裂,处于有丝分裂后期;丙细胞不含同源染色体,着丝点分裂,处于减数第二次分裂后期。 【详解】 A、甲、乙、丙细胞所处时期染色体均为高度螺旋化的染色体状态,不易发生基因突变,基因突变一般发生在间期DNA复制时,A错误; B、甲细胞中1与2为同源染色体,1与2之间发生片段的交换属于基因重组,而1与4为非同源染色体,1与4的片段交换属于染色体结构变异,B错误; C、乙细胞处于有丝分裂后期,基因重组只发生在减数分裂过程中,不发生在有丝分裂过程中,A和a所在的染色体为同源染色体,B和B所在的染色体也为同源
23、染色体,由于不知道该生物体细胞的基因型以及乙细胞中下面四条染色体上的基因,所以不能判断该细胞是否发生过基因突变,C错误; D、基因重组发生在减数第一次分裂前期和后期,丙细胞处于减数第二次分裂后期,不能进行基因重组,该细胞中有两个染色体组,D正确。 故选D。 8、A 【解析】 生命现象的正常高效进行与反馈调节、多种种间关系等有密切关系。 【详解】 A、半保留复制方式可以保证亲子代间遗传物质的连续性,DNA多起点复制缩短了复制所需要的时间,A错误; B、可遗传变异(基因突变、基因重组和染色体变异)可为生物提供进化的原材料,B正确; C、捕食者往往捕食个体数量多的物种,因此捕食者的捕
24、食对被捕食种群的发展起促进作用,能避免生态系统中出现占绝对优势的物种,C正确; D、当高等动物体内性激素含量偏高时,可通过负反馈调节使性激素水平降低,以保证性激素的含量不至于过高,D正确。 故选A。 解答此题需熟悉常见的生命活动活动及其调节过程和机制,并能结合选项分析作答。 二、非选择题 9、ABCD RNA 分子杂交 (几乎)所有生物共用一套密码子 抗体具有特异性 动物细胞培养 动物细胞融合 Taq酶 模板DNA 同位素标记法 几乎不能 几乎不能 朊病毒不含核酸只含蛋白质,蛋白质中磷含量极低,故试管2中提取
25、的朊病毒几乎不含32P 沉淀物 上清液 被35S标记的朊病毒(蛋白质),大部分进入牛脑组织细胞中,只有少量的朊病毒可能没侵入牛脑组织细胞 核酸 核苷酸和氨基酸 【解析】 1、病毒不具有独立代谢能力,只能寄生在活细胞中。据遗传物质不同,可分为DNA病毒和RNA病毒。2019-nCoV的核酸为单股正链RNA,其5’端为甲基化帽子,3’端有多聚腺苷酸(PolyA)结构,可直接作为翻译模板。 2、朊病毒不能独立生活,在活细胞内才能增殖,所以要标记朊病毒需先培养带标记的宿主细胞—牛脑组织细胞,再让朊病毒侵染带标记的牛脑组织细胞,完成对朊病毒的标记。因为朊病毒没有
26、核酸,只有蛋白质,蛋白质中磷含量极低,故离心后上清液和沉淀物中都几乎不含32P;用35S标记的朊病毒侵入牛脑组织细胞,由于少量朊病毒不能侵染成功,所以放射性物质主要位于沉淀物中,上清液中含少量放射性物质。朊病毒是一类非正常的病毒,它不含有通常病毒所含有的核酸。 【详解】 Ⅰ(1)A、细胞膜控制物质进出细胞的作用是相对的,2019-nCoV表面的刺突糖蛋白能与人体细胞表面ACE2 受体蛋白特异性结合,从而侵染细胞,2019-nCoV并不是只能侵染受损细胞,A错误; B、病毒没有核糖体,利用宿主细胞的核糖体合成蛋白质,2019-nCoV的包膜成分中含有蛋白质,其刺突糖蛋白能识别人体细胞膜上的
27、受体,B错误; C、2019-nCoV的核酸为单股正链RNA,即遗传物质为RNA,初步水解可形成四种核糖核苷酸,彻底水解可形成核糖、磷酸和四种含氮碱基,C错误; D、由题意可知,此病毒的单股正链RNA,可直接作为翻译模板,所以可直接附着在宿主细胞的核糖体上进行翻译,不需要转录形成对应的负链RNA,D错误。 故选ABCD。 (2)这种病毒只含RNA,故遗传物质为RNA。利用试剂盒检测病毒所利用的是分子杂交技术,其原理为碱基互补配对原则;因为(几乎)所有生物共用一套密码子,所以病毒可在不同动物身体内翻译出基本相同的多肽链。 (3)抗体具有特异性,一种抗体只能和一种抗原发生特异性结合。单克
28、隆抗体的制备过程中,需要将经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,经过动物细胞培养并筛选后获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,并将该杂交瘤细胞进行体内或体外培养获得单克隆抗体,所以该过程用到的技术有动物细胞培养和动物细胞融合。 (4)PCR技术中延伸DNA子链的酶为Taq酶。题干中提出“加入一个与某条模板链互补的荧光探针”,并且“每扩增一次,就有一个荧光分子生成”,因此反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关。 Ⅱ(1)由图可知,本实验采用了同位素标记法。 (2)由于朊病毒不含核酸只含蛋白质,蛋白质中磷含量极低,故试管2中提取的朊病毒几乎不含32P。因此,从理论上讲,
29、离心后上清液中几乎不能检测到32P,沉淀物中几乎不能检测到32P。 (3)经试管5中牛脑组织细胞培养出的朊病毒(蛋白质)被35S标记,提取后加入试管3中,35S随朊病毒侵入到牛脑组织细胞中,因此放射性物质主要位于沉淀物中。同时会有少量的朊病毒不能成功侵入牛脑组织细胞,离心后位于上清液中,因此上清液中含少量放射性物质。 (4)一般病毒同朊病毒之间的最主要区别是:一般病毒侵入细胞是向宿主细胞提供核酸,利用宿主细胞的核苷酸和氨基酸合成自身的核酸和蛋白质。 本题以“2019-nCoV”为载体,主要考查病毒的特点、基因表达和PCR技术等相关知识以及结合实验图解,考查朊病毒侵染牛脑组织细胞实验,目的
30、是考查学生对基础知识的理解与掌握,能够结合背景材料分析问题,得出结论。 10、非特异性 效应T细胞 体液 抗体 逆转录 2n-1 控制传染源 ②④ B淋巴细胞(浆细胞或效应B细胞) 聚乙二醇(或灭活的病毒) 特异性强、灵敏度高并可大量制备 【解析】 1、体液免疫过程为:(1)感应阶段:除少数抗原可以直接刺激B细胞外,大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理,并暴露出其抗原决定簇;吞噬细胞将抗原呈递给T细胞,再由T细胞呈递给B细胞;(2)反应阶段:B细胞接受抗原刺激后,开始进行一系列的增殖、分化,形成记忆细胞和浆细胞;(3)效应阶段:
31、浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合,发挥免疫效应。 2、细胞免疫过程为:(1)感应阶段:吞噬细胞摄取和处理抗原,并暴露出其抗原决定簇,然后将抗原呈递给T细胞;(2)反应阶段:T细胞接受抗原刺激后增殖、分化形成记忆细胞和效应T细胞,同时T细胞能合成并分泌淋巴因子,增强免疫功能。(3)效应阶段:效应T细胞发挥效应。 【详解】 (1)人体的第一道防线和第二道防线是生来就有,对多种病原体都有防御功能,属于非特异性免疫。 (2)病毒侵入人体后寄生在宿主细胞中,效应T细胞能识别被寄生的宿主细胞,并与之密切接触,使其裂解死亡,新型冠状病毒被释放出来后,与体液免疫产生的抗体凝集,使之失去侵染能力,最
32、后被吞噬细胞吞噬消化。 (3)过程I是逆转录过程,需要加入缓冲液、原料、逆转录酶和引物A等;过程Ⅱ拟对单链cDNA进行循环的扩增,由图示可知,第一轮需要1个引物B,第二轮需要2个引物B,第三轮需要4个引物B,故第n轮理论上需要2n-1个引物B。 (4)疫情发生后,启动封城措施,限制人员进出,对感染者进行隔离治疗,这种措施属于控制传染源。 ①隔离病人属于控制传染源,①错误; ②使用一次性口罩、手套和防护服属于切断传播途径,②正确; ③接种疫苗属于保护易感人群,③错误; ④用酒精、84消毒液等对室内外环境进行消毒等属于切断传播途径,④正确。 故选②④。 (5)制备单克隆抗体的具体步
33、骤为:将减毒新型冠状病毒多次注射到小鼠体内,取经新型冠状病毒免疫后小鼠的B淋巴细胞(浆细胞或效应B细胞),加入聚乙二醇(或灭活的病毒),使之与小鼠的骨髓瘤细胞进行融合以形成杂交瘤细胞,经培养、筛选,最后得到单克隆抗体。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高并可大量制备的特点。 本题结合新冠病毒考查免疫调节、单克隆抗体的制备等相关知识点,掌握相关知识结合题意答题。 11、多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶 该培养基以果胶为唯一碳源,只有能够分解利用果胶的微生物才能生长 琼脂 果胶 透明圈 凝胶色谱 果肉出汁率低、耗时长;榨取的果汁浑浊、黏度高 【
34、解析】 1、果胶酶包括半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶等,既能分解果胶,瓦解植物的细胞壁及胞间层使榨汁容易,又能使果胶水解为半乳糖醛酸,果汁澄清,提高质量和稳定性。 2、刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形成,出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 3、凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程长,移动的速度慢,相对分子质量较大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道,路程短,移动的速度快。 4、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是
35、掩盖不同种蛋白质间的电荷差别,使蛋白质完全变性,则SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速率完全取决于分子大小。 【详解】 (1)果胶酶并不特指某一种酶,而是分解果胶的一类酶的总称,包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶等。 (2)①从所给配方,可以看出该培养基以果胶为唯一碳源,是典型的选择培养基,在该培养基中,只有能够分解利用果胶的微生物才能生长,从而起到选择的作用;筛选菌落需要用固体培养基,故培养基还需要添加琼脂。 ②从题中所给配方,结合所学知识:刚果红可以与多糖物质形成红色复合物;而果胶也是一种多糖,可以推知在该培养基中,刚果红可以与果胶形成红色复合物。当果胶被果胶酶分解后,刚果红
36、—果胶复合物就无法形成,培养基中会出现以果胶分解菌为中心的透明圈,我们可以据此来筛选产果胶酶的微生物。 (3)将不同蛋白质按照不同分子量进行分离,高中阶段所学的方法主要有凝胶色谱法和SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法,但后者中的SDS会使蛋白质变性,只有前者才能保持蛋白质的活性。 (4)果胶酶应用于果汁生产时,要解决的两个主要问题是:一是果出汁率低、耗时长,二是榨取的果汗浑浊、黏度高。 本题以提取果胶酶为载体,主要考查果胶酶的分类、作用以及蛋白质分离的方法等主要知识点,意在强化学生对相关知识点理解与运用,属于考纲中理解和应用层次的考查。 12、肿瘤坏死因子-α(或TNF-α) 聚乙二醇
37、PEG) 细胞融合是随机的,且融合率达不到100% 克隆化培养 每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 特异性强、灵敏度高、可大量制备 动物细胞培养 作为诊断试剂、用于治疗疾病、用于运载药物 【解析】 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞,杂交瘤细胞既能产生抗体,又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。 题
38、图分析,单抗制备过程为:将特定的抗原注射小鼠→筛选出产生抗体的B淋巴细胞→诱导细胞融合→用HAT培养基筛选出杂交瘤细胞→筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞→大规模培养获得单克隆抗体。单克隆抗体典型优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。 动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础,是单克隆抗体技术的基础。单克隆抗体最广泛的用途是作为诊断试剂,也可用于治疗疾病、用于运载药物,主要是用于癌症治疗、也有少量是是用于其他治疗的。 【详解】 (1)要制备抗TNF-a单克隆抗体需要给小鼠注射肿瘤坏死因子a(TNF-a),即图中的抗原A。常用物理或化学方法促融,最常用的化学促融剂是聚乙二醇(PEG),细胞融
39、合完成后,由于细胞融合是随机的,且融合率达不到100%,所以细胞融合完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有骨髓瘤细胞自身融合细胞、淋巴细胞自身融合细胞。 (2)HAT培养基的作用是选择性培养筛选出杂交瘤细胞,在抗体检测之前需要进行克隆化培养,以增加杂交瘤细胞数量。经多次筛选,就可获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。 (3)单克隆抗体典型优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础,单克隆抗体技术是动物细胞工程的应用之一。故单克隆抗体的制备涉及细胞工程中的动物细胞融合技术和动物细胞培养技术。 (4)单克隆抗体最广泛的用途是作为诊断试剂,也可用于治疗疾病、用于运载药物,主要是用于癌症治疗、也有少量是是用于其他治疗的。 熟知单克隆抗体制备流程中各阶段的原理和要点是解答本题的关键!熟知单克隆抗体的优点及其应用是解答本题的另一关键!






