关于HIV核酸检测的效果(文献汇总).docx

关于核酸检测的一些研究

声明：看到最近贴吧有不少咨询核酸的恐友，我特地抽空查阅了一些文献（仅为其中的一部分），从更客观的角度进行评判核酸检测的价值。以下都是一些血液中心和疾控中心的临床检测研究。根据样本量的大小，研究大致可以划分为个案分析和大样本的统计。希望综合这两方面的研究，给出一个客观的认识。而不是仅仅从主观方面进行判断。因此，我想实际的数据是具有说服力的。

1.关于个案的研究

王海，蒋文雅，顾松叶（舟山疾控中心）对１例艾滋病病毒（ＨＩＶ）抗体确证试验疑似阳性样本进行随访检测分析，探讨最新《全国艾滋病检测技术规范》（２００９年修订版）在实际工作中可能存在的问题及今后的解决思路。方法对蛋白印迹试验（ＷＢ）条带为ｇｐ１６０、ｇｐ１２０、ｐ２４的患者进行跟踪随访，按常规检测程序进行 ＨＩＶ 抗体筛查和确证试验，采集的血液标本同时补充检测 ＨＩＶ 核酸。结果５次 ＷＢ试验带型均为ｇｐ１６０、ｇｐ１２０、ｐ２４，４次病毒核酸随访检测均未检出 ＨＩＶ核糖核酸（ＲＮＡ）和脱氧核糖核酸（ＤＮＡ），最终判断为无 ＨＩＶ 感染。结论对刚符合阳性判定标准的样本应予高度警惕，切勿急于出具确证阳性报告，应补充检测病毒核酸，并继续随访检测，观察条带是否有进展１例疑似 ＨＩＶ抗体阳性样本的检测分析
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潘彤 杨文玲 姚娜 李凤园 谢月娜 李娜 王全慧 李艳( 天津市血液中心，天津 300110)分析1例 HIV ＲNA 阳性标本追踪检测情况，并对该标本进行基因型分析。应用常规ELISA 以及核酸定性、定量测定方法，通过基因测序分析基因型。献血者 2012 年 11 月 13 日首次献血标本检测结果为血清学阴性但核酸检测阳性，随后我们对该献血者进行了 2 次跟踪检测，间隔 1 周。2012 年 11 月 19日的血液标本 HIV-P24 抗原以及 HIV 抗体检测均为阴性，而核酸定性检测 2 种试剂仍为阳性，此时的核酸定量结果显示病毒载量与首次献血时相比已经增加。2012 年 11 月 26 日再次抽取血液标本，抗-HIV 酶免 4 代试剂检测结果均为阳性，而核酸定量结果又是 1 个数量级的增长，同时该血液标本 HIV-P24 抗原的检测结果为阳性，CDC 反馈的确证试验也为阳性。基因型分析为 CＲF01-AE 基因型。结论：初步确定该献血者为艾滋病感染窗口期。应用核酸检测有效阻断了此例艾滋病感染窗口期的血液传播HIV ＲNA 阳性标本追踪检测 1 例
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刘建礼 朱 红 陈晓光 张 齐 刘福奎 （1.北京国际旅行卫生保健中心，北京 100013；2.山东国际旅行卫生保健中心，青岛 266001；3.烟台国际旅行卫生保健中心，烟台 264001）2007 年 4 月，烟台国际旅行卫生保健中心采用 ELISA 法对出入境人员进行艾滋病感染初筛时，发现 1份 HIV 抗体检测结果为强阳性血清。 随即将阳性血清送山东国际旅行卫生保健中心采用 ELISA 法复检,结果仍为强阳性；采用免疫印迹法（WB）进行确认，结果出现 gp160、p24 双条带。 然而在对受检者进行流行病学调查时，其强烈否认有高危性行为，怀疑检测结果的可靠性。 随后，阳性血清被送往北京国际旅行卫生保健中心艾滋病确证中心实 验 室 采 用 免 疫 印 迹 法 进 行 疑 难 确 证 ，结 果 同 样 出 现 gp160、p24 双 条 带 。 进 一 步 用 核 酸 定 量 检 测 （NASBA）进 行HIV 载量检测，结果为阴性。 因此，建议作为 HIV 抗体阴性不确定进行随访。 后经 1 年的多次随访检测，最终排除了其 HIV 感染。 上述情况表明，对 WB 检测结果仅出现 gp160 和 p24 条带的样本直接判定为阳性具有一定的风险，必须结合核酸检测等辅助检测方法和流行病学调查结果综合考虑 ，艾滋病实验室在出 具检测结果报告时，一定要慎重免疫印迹法检测HIV抗体出现假阳性的结果
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2.关于大样本数据的统计分析
杨成勇 , 刘翌(北京出入境检验检疫局)应用病毒核酸载量法 NASBA 和 HIV-1 RNA 的巢式逆转录 PCR(nested RT -PCR)法与 HIV 抗体蛋白印迹(WB)方法 , 对经过初筛的 44 例 HIV-1 抗体阳性标本进行了对照检测研究 。发现了 2 例(gp160、p24)和 1 例(gp160、gp120、p66、p24)的特殊阳性样本, 经 NASBA 法和该 RT-PCR法核酸检测为阴性;WB 确认的 4 例 gp160 阳性带 、1 例 p24、p17 阳性带和 13 例 p24 阳性带 , 经 NASBA 法和该 RT-PCR法核酸检测也为阴性;而 WB 确认的其余全部带型的抗体阳性标本经过NASBA 法和该 RT-PCR 法检测均为阳性。 该研究表明对只有 gp160、p24 和 gp160、gp120 、p66、p24 的特殊阳性标本和以p24为主的抗体不确定标本需要用 RT-PCR 或 NASBA 方法进行核酸检测, 以进一步确认 HIV -1 抗体蛋白印迹确认与核酸检测复核对比研究
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段星，冯霞，王继宝，杨锦，李艳玲，叶润华，杨跃诚，姚士堂，高志云，颜浩，段松，蒋岩（德宏州疾病预防控制中心，中国疾病预防控制中心 性病艾滋病预防控制中心）探讨艾滋病病毒（ＨＩＶ）核酸检测用于 ＨＩＶ 感染者／艾滋病（ＡＩＤＳ）病人（简 称 ＨＩＶ／ＡＩＤＳ病 人）诊断的可行性，为制定新的检测策略提供依据。２００９年１０月至２０１３年１０月，对云南省德宏州疾病预防控制中心蛋白免疫印迹（ＷＢ）试验确证结果为不确定、背景资料齐全、初次血浆留样大于１０００μＬ 的样本进行核酸检测，并与抗体随访检测结果进行比较。４９例 ＷＢ不确定的样本，有２２例检出 ＨＩＶ 核酸。其中成功随访１８例，随访过程中１７例 ＨＩＶ 抗体阳转，１例带型有进展但不满足诊断标准。被访者 ＷＢ条带在２周随访时均出现明显变化。核酸阴性的２７例，７例成功随访，ＷＢ条带无进展或阴性。结论：有条件开展 ＨＩＶ 核酸检测的地区，对ＨＩＶ 抗体不确定者宜采用核酸检测尽早诊断；无核酸检测条件的地区，对 ＨＩＶ 抗体不确定人群的随访间隔宜缩短至２周ＨＩＶ抗体检测结果不确定时应用核酸诊断的可行性研究
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张龙穆，冯秋霞，杨忠思和许雷分析开展核酸检测后青岛地区献血者 ＨＩＶ 检测情况，探讨减少一遍 ＥＬＩＳＡ 检测及实施献血者归队的可行性。对２０１２年９月１３日～２０１３年６月１日期间的献血者标本，应用两种 ＥＬＩＳＡ 试剂检测 ＨＩＶ 抗原／抗体，并用 Ｒｏｃｈｅ　Ｃｏｂａｓ　Ｓ２０１血液筛查系统进行核酸检 测，将 ＨＩＶ 抗 原／抗 体 反 应 性 标 本 送 至 市 疾 控 中 心 ＨＩＶ 确 认 实 验 室 进 行ＨＩＶ 确认。结果　ＥＬＩＳＡ 方法共检出 ＨＩＶ 抗原／抗体反应性标本９０例，确认试验阳性１３例，确认试验阴性７７例，假阳性率８５．５６％（７７／９０），确认阳性 者 全 部 为 ＥＬＩＳＡ 双 试 剂 反 应 性 标 本。ＨＩＶ 抗 原／抗 体 非 反 应 性 标 本 经 ＮＡＴ 检 测 无 一 例ＨＩＶ　ＲＮＡ 反应性；ＨＩＶ 抗原／抗体反应性标本９０例，经 ＮＡＴ 检测 ＨＩＶ　ＲＮＡ 反应性标本１３例，全部为 ＥＬＩＳＡ 双试剂反应性标本。结论　ＮＡＴ 与 ＨＩＶ 确认试验有很好的符合性，开展 ＮＡＴ 检测可以减少１遍 ＨＩＶ　ＥＬＩＳＡ 检测核酸检测对 ＨＩＶ筛查的影响
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栾燕和刘显智 (辽宁省血液中心)　应用核酸扩增检测 (NAT)技术 对人类 免疫缺 陷病毒 (HIV)酶联免疫吸附测定 (ELISA)合格的献血者血液标本进行核酸检测 , 探讨 NAT技术对缩短 ELISA检测 HIV感染 “窗 口期 ”的作用。 方法 对献血 者血液 标本进行 HIV抗原抗体 、乙型肝炎病毒表面抗原 、丙型肝炎病毒抗体 、梅毒螺旋体抗体 2遍 ELISA检测 , 将 检测结果 合格的血液 标本进行核酸检测 。 结果 在 177229例 ELISA检测合格的献血者标本中发现 HBV DNA阳性献血者24例 , HIV-1 RNA阳性献血者 1例 , 未发现 HCVRNA阳性献血者 。 对 HIV-1RNA阳性献血者追踪调查并在献血后的 d4、d11、d16、d37采样检测 , d4病毒载量由献血时的4.61×102 copy/ml上升至5.10×104copy/ml, P24抗原和抗体仍为阴性;d11P24抗原检测阳性 , HIV抗体检测仍 为阴性。 d16 HIV抗体检测结果阳性, 免疫印 迹法 (Westernblot, WB)确 证试验结 果为HIV抗体不确定 ;d37 WB确证试验结果为 HIV-1抗体阳性 。 结论 HIV-1RNA阳性献血者 , 经追踪调查及对不同时间采集的标本采用 各种方法学检测 , 证实该献血 者为 HIV感 染早期 ELISA法漏检的“窗口期”献血者。 因此 , NAT检测技术比 ELISA检测能更进一步地缩短 HIV检测的 “窗口期 ”核酸检测技术 (NAT)在献血者人类免疫缺陷病毒筛查中的应用
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余　谨，毕　昊，陆华新，王先广，赵　磊，沈　钢（湖北省武汉市血液中心）应用核酸检测（ＮＡＴ）技术筛查经两 遍 酶 联 免 疫 吸 附（ＥＬＩＳＡ）法 检 测 各 项 指 标 均 为 阴 性 的 无 偿 献 血 者 的 标本。将 ＥＬＩＳＡ 法检测的阴性标本采用六混样用两种试剂进行平行核酸检测，在检测出阳性标本后，也用两种试剂对其拆分进行单管核酸检测。４８７９例 ＥＬＩＳＡ 法检测呈阴性的标本中，核酸检测出１例 ＨＩＶ 阳性样本，６例 ＨＢＶ 阳性样本。结论：开展核酸检测可以提高临床用血质量，为临床安全用血提供强力有保障。

陈红 王亚彬 倪龙凤 刘春兰 苏娟( 九江市中心血站 检验科)分析核酸与 ELISA 检测联合应用于血液筛查的结果。方法 使用 ELISA 检测对 34 580 份标本进行检测，阴性标本全自动核酸检测系统进行核酸检测。结果 33364 份常规检测阴性的标本中，共检出核酸有反应性的标本 63 份，经鉴别试验，检出 42 份 HBV-DNA 阳性标本，未检出 HCV-ＲNA 阳性和 HIV-ＲNA 阳性标本，检出阳性率达 0. 13% 。结论 ELISA 检测存在一定程度的漏检，核酸检测及规范化管理显得十分重要核酸与 ELISA 检测联合应用于血液筛查的结果分析
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刘春华 孙国清 薛秀娟 刘佳 王哲 （河南省疾病预防控制中心； 郑州大学基础医学院）比分析常规抗体检测与核酸检测对判断 HIV 阳性者的优势和价值，探讨抗体检测与核酸检测在ＨＩＶ诊断中的优势分析。方法：对明确临床诊断的 HIV 阳性者进行回顾性分析,通过两独立样本T检验的方法比较抗体检测与核酸检测两种检查方法的诊断符合情况。结果：在 96 例 HIV 阳性者中,有 63 例属于艾滋病的早期感染者,抗体检测与核酸检测诊断的准确率分别为 89.52%，96.50%，经T检验，P值为 0.009，两组有显著性差异；在 33 例的中晚期艾滋病患者中，抗体检测与核酸检测诊断的准确率分别为 97.16%，90.59%，经T检验，P值为 0.004，两组差异有统计学意义。结论：抗体检测与核酸检测在诊断 HIV 阳性者是最常用的检查方法,在艾滋病患者的早期，核酸检测的灵敏度会更高些。而到了艾滋病患者的中晚期后抗体检测的灵敏度和准确率比核酸检测要高。因此,不同的疾病阶段两种检测的灵敏度和准确率不尽相同抗体检测与核酸检测在ＨＩＶ诊断中的优势分析
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韩梅, 冯连贵 蒋岩, 潘品良, 赵金扣, 凌华, 丁贤斌, 张 敏 (1 .重庆市疾病预防控制中心;2 .中国疾病预防控制中心国家艾滋病参比实验室;.3.比尔及梅琳达 ·盖茨基金会北京代表处) 　本 次调查 共采 集样本 2165 例 ,结果发现 , 现场快速检 测有 340 例呈阳性(至 少 1 种 快速试 剂检测为阳性), 1825 例呈阴性。 将快速检测的 所有样本使 用 4代酶联检测试剂复查 , 发现 357 例 呈阳性 , 经蛋白印迹实验确认检测 , 发现311 例阳性 , 37 例不确定 , 9 例阴性 , 对 37 例不 确定者进行了病 毒载 量检 测 , 其中 4 例 为阳 性。为节 省检测成本, 只将4代酶联检测试剂为阴性的所有样本收集起来进行集合核酸的检测, 发现10例核酸阳性, 提示为急性期感染(AHI)样本。 WB不确定者 3 个月后的回访率低 , 发现抗体阳转1例。 上述结果可以看出 , 当现有抗体检 测试剂用于MSM人群时 , 即使是较为先进的 4 代酶联检测试剂 , 也出现 了 3 .26%的漏检率 , 低于此前报 道的 100 %敏感 性和 100%特异性 的临 床评估结果。

吕蓉　王伦善　盛琪琪　赵阳　蒋菲菲　李敏和刘忠（2012）对酶联免疫检测 HIV抗体呈反应性标本进行蛋白印迹 ( W B法 )确认和 TM A-化学发光法对照检测 ,以探讨其应用特点。方法　将本中心检验科 ELIS A法检测结果呈 HIV 抗体反应性的 117份标本 ,重新进行 ELISA法检测 ,结果为 S /CO> 0. 8的标本做蛋白印迹 ( W B法 )确认试验。同时 ,对 117份标本采 用 TM A-化学发光法检测核酸作为对照试验。血清学检测参加国家 CDC及澳大利亚 ( CITIC)室间质评 ;核酸检测参加卫生部临检中心和澳大利亚 ( CITIC)室间质评。 结果 　 ELIS A初筛试验: 117份标本中 , S /CO> 1的为 37份 ; 0. 8 < S /CO < 1的为 11份 , S /CO < 0. 8的为 69份 ;抗体确认试验: HIV抗体确认阳性 7份 ,不确定 4份 , HIV抗体确认阴性 106份 ;核酸检测试验: 117份标本中 11份检出 HIV RN A阳性 ,106份标本为 HIV RN A阴性。 结论　 ELISA方法检测 HIV 抗体存在一定的假阳性 ; HIV蛋白印迹确认试验存在一些不确定结果 ,对于只有 gp160 /120、 P17、 P24的抗体不确定标本 ,可以采用核酸检测方法辅助确认无偿献血者HIV-1抗体蛋白印迹确认与核酸检测结果分析
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江华洲（中国疾病控制中心，博士论文）集合核酸方法使用现行检测策略判断为HIV抗体阴性和不确定的样品,进行集合核酸检测,对核酸阳性者进行随访、收集系列阳转样品,研究MSM人群HIV RNA阳性到抗体阳转的平均窗口期,用于估算新发感染率。并与血清学方法估算的新发感染率进行比较。研究结果一、MSM人群早期感染检测1.抗体及核酸检测结果11023份样品经第三代ELISA筛查,307份为初筛阳性,经WB检测282份为阳性,25份为WB不确定,WB阴性为0份。对10716份HIV抗体阴性样品,分别进行集合核酸和第四代ELISA检测,结果：(1)集合核酸检测,发现核酸阳性样品28份；(2)第四代ELISA检测,10616份为阴性,100份为阳性,经WB检测,结果显示：0份阳性,40份不确定,60份阴性。WB不确定的40份样品中,经核酸检测阳性的有15份；WB阴性的60份阴性样品中,核酸检测阳性的为0份。28份窗口期感染样品的病毒载量值范围为3.84～6.84Log10Copies/mL,其中病毒载量万级的样品有7份,占总样品数的25%,其中包括病毒载量值十万级样品有9份,占总样品数32.14%;病毒载量值在百万级以上的样品有10份,占总样品数35.71%。2.早期感染检测策略第三代ELISA检测为阴性的样品中,经核酸检测证实有28例窗口期感染者,漏检28例。经第四代ELISA检测,证实遗漏13例窗口期感染者。HIV急性期感染率为2.54%o(95%CI=1.60‰-3.48‰),现行“第三代ELISA检测+WB”策略与本研究的新策略的敏感性、特异性、阳性预测值等,分别为：(1)“现行策略(第三代ELISA+WB)"的敏感性为90.97%,检测阳性率为2.56%(95%CI=2.26%-2.86%);(2)现行策略检测为阴性的样品,进一步用第四代ELISA检测,其敏感性为95.81%,特异性为100%,阳性预测值为100%,检测阳性率为2.70%(95%CI=2.39%-3.01%)；(3)现行策略检测为阴性的样品,进一步用集合核酸检测检测,其敏感性为100%,特异性为100%,阳性预测值为100%,检测阳性率为2.81%(95%CI=2.50%-3.13%)男男性行为人群H{V一1早期感染检测策略及新发感染率研究
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参考文献