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骨髓铁染色、幼稚红细胞百分率和网织红细胞百分率对贫血的诊断价值
作者：丁飞, 刘昌明, 冯远奇 作者单位：遵义医院 检验科, 贵州 遵义 563002
【摘要】 目的： 探讨骨髓铁染色、幼稚红细胞百分率和网织红细胞百分率对贫血的诊断价值。方法: 对1 688例贫血病例,分别作骨髓铁染色、幼稚红细胞百分率和网织红细胞百分率检查。结果: 缺铁性贫血患者骨髓铁染色内外铁降低,幼稚红细胞百分率30%～40%，网织红细胞百分率0.5%～5.0%;巨幼细胞性贫血患者幼稚红细胞百分率40%～50%;缺铁伴轻度巨幼细胞性贫血患者骨髓铁染色内外铁降低,幼稚红细胞百分率40%～50%，网织红细胞百分率0.5%～5.0%；溶血性贫血患者幼稚红细胞百分率>50%，网织红细胞>10%;再生障碍性贫血患者网织红细胞百分率<0.5%;慢性疾病性贫血患者骨髓铁染色外铁正常或增加,内铁降低,幼稚红细胞百分率<30%。结论: 骨髓铁染色、幼稚红细胞百分率和网织红细胞百分率对贫血诊断具有重要价值。
【关键词】 贫血； 骨髓检查； 贫血，缺铁性； 红细胞异常； 红细胞计数； 网织红细胞计数
Application Values of Bone Marrow Iron Stain，and Percentage Determination　of Erythrocyte Blast and Reticulated Corpuscle in Anemia Diagnosis
　DING Fei, LIU Changming, FENG Yuanqi
　Deparrtment of Laboratory, Zunyi Hospital,Zunyi 563002,Guizhou,China
　　［Abstract］Objective: To explore application values of bone marrow ironstain (BMIS)，and percentages of erythrocytoblast (EP) and reticulated corpuscles (PRC) determination in anemia diagnosis. Methods: Clinical examination methods such as BMIS, EP, and PRC were carried out to 1688 simple anemia patients including 624 cases of iron deficiency anemia (IDA), 382 cases of megaloblastic anemia (MA), 180 cases of IDA accompanied by mild MA, 128 cases of hemolytic anemia (HA), 115 cases of aregeneratory animia (AA), and 259 cases of anemia caused by chronic diseases (ACD). Results: In IDA cases, intra and extracell iron was decreased, EP range was 30%～40%，and PRC range 0.5%～5.0%; In MA cases, EP range was 40%～50%; In IDA plus MA cases, intra and extracell iron was decreased, EP range was 40%～50% and PRC range 0.5%～5.0%; In HA cases, EP >50%，and PRC >10%; In AA cases, PRC <0.5%; In ACD cases, Intracellular iron decreased and exocellular iron increased, and EP <30%. Conclusions: BMIS, EP, and PRC determination have certain values in clinical diagnosis of anemia.
　　［Key words］ anemia; bone marrow examination; anemia, irondeficiency; erythrocytes, abnormal; erythrocyte count; reticulocyte count
贫血不是一个独立的疾病,而是多种原因引起的循环血液中红细胞、血红蛋白和血细胞比容低于参考值下限的一种症状。临床上常见的贫血有缺铁性贫血(IDA)、巨幼细胞性贫血(MA)或缺铁伴轻度巨幼细胞性贫血(IDA+MA)、溶血性贫血(HA)、再生障碍性贫血(AA)和慢性疾病性贫血（ACD）等，它们之间的鉴别诊断是临床长期存在的难题。骨髓铁染色是评估铁缺乏最适用的方法，储存铁（主要位于骨髓组织，又称外铁）和幼红细胞铁（又称细胞内铁）可通过染色识别，临床上常被用作鉴别贫血类型。网织红细胞（reticulocyte，RET）是反映骨髓造血功能的重要指标，对于贫血的诊断和鉴别诊断及疗效观察有重要的参考价值[1]。本研究对1 688例贫血患者进行骨髓铁染色、幼稚红细胞百分率和网织红细胞百分率联合检测，现总结分析如下。
　　1 材料与方法
　　1．1 一般资料
　　2003年5月～2009年5月贫血初诊病例1 688例,男582例，女1 106例，年龄2岁～79岁其中缺铁性贫血624例,巨幼细胞性贫血382例, 缺铁伴轻度巨幼细胞性贫血180例，溶血性贫血128例, 再生障碍性病贫血115例, 慢性疾病性贫血259例。贫血诊断参照文献[2]。
　　1．2 试剂
　　20％酸性亚铁氰化钾染液，临用时浓盐酸与20％亚铁氰化钾液（20 g亚铁氰化钾溶于100 ml蒸馏水）按1∶5比例混合。1%蕃红染液：1 g蕃红溶于100 ml蒸馏水，按文献[3]配成10 g/L新亚甲蓝生理盐水溶液。瑞氏-姬姆萨复合染液：瑞氏粉1 g，姬姆萨粉0.5 g，甘油20 ml，甲醇500 ml，混匀即可；缓冲液为pH6.4～6.8的磷酸盐缓冲液。
　　1．3 方法
　　每位患者作骨髓片各2张瑞氏-姬姆萨复合染色，晾干，选择片膜体尾交界处，油镜下计数200个有核细胞，观察细胞形态并计算幼稚红细胞百分率。取患者的EDTA抗凝血标本20 μl分别加入到1滴煌焦油蓝生理盐水饱和溶液中混匀，室温染色20 min，推片法制片、晾干，选择片膜体尾交界处，油镜下计数1 000个细胞，计数网织红细胞百分率。骨髓片滴加20%酸性亚铁氰化钾染30 min，流水冲洗5 min，晾干后以1%蕃红复染1 min、晾干，观察骨髓外铁（巨噬细胞或骨髓小粒内铁颗粒、小珠或小块）；细胞内铁以计数100个中、晚幼红细胞，算出铁粒幼红细胞百分率。
　　2 结果
不同类型贫血患者骨髓铁染色、幼稚红细胞百分率和网织红细胞百分率，结果见表1。表1 不同类型贫血的骨髓铁染色、幼稚红细胞百分率和网织红细胞百分率（略）注：括号内为检测病例与贫血病例。
　　3 讨论
我国贫血的发病率高达15.2%,其中很大部分为IDA［4］，骨髓检查幼红细胞胞体常较小，胞质量少，边缘不整齐，嗜喊性色调较强，细胞核小而致密。MA骨髓象细胞形态学特点为胞体增大，核染色质疏松呈颗粒状，晚巨幼红细胞核型多不规则，可呈花瓣乃至分叶状，胞核的发育明显落后于胞质，易见HowellJolly's小体，并出现巨幼红细胞（>10%）。HA的骨髓象表现是幼稚红细胞多（本组结果＞５０％），可见异形红细胞［5］。AA是因理化、生物及某些不明原因使骨髓中多能造血干细胞或造血微环境受损、机体免疫缺陷与紊乱而导致骨髓造血组织减少造血功能衰竭，骨髓象粒、红两系均减少，红细胞系以中、晚幼红红细胞为主，细胞形态染色大致正常。ACD多是由慢性炎症、肿瘤等慢性疾病导致体内铁代谢障碍、骨髓失代偿、红细胞寿命缩短而引起，30%～50%的患者表现为小细胞低色素性贫血［6，7］。它常伴随慢性感染、炎症和恶性肿瘤等。
本研究中，幼稚红细胞百分率在不同种类贫血中差异明显， IDA为30%～40%(620/624)，是由于红系轻度增生所致；MA和IDA+MA时，幼稚红细胞常介于40%～50%(368/382)，是由于红系明显增生所致; HA时幼稚红细胞百分率常大于50%(104/128)，是由于红系极度增生的缘故; AA幼稚红细胞百分率不定；ACD幼稚红细胞百分率<30%(241/259) ,可能是骨髓对贫血代偿不足或红细胞寿命缩短所致。 网织红细胞在不同种类贫血中存在一定差异：IDA为0.5%～5.0%(618/624)，可能是部分失血病例红系代偿致网织红细胞轻度增高；HA的网织红细胞计数>10%(111/128)，是由于骨髓造血功能旺盛，大量网织红细胞进入血液循环所致；AA网织红细胞计数<0.5%(106/115)，是由于骨髓造血功能低下所致。 骨髓涂片铁染色在几类贫血中也有差异：IDA和IDA合并MA时，细胞内、外铁均减少(382/382)，幼稚红细胞中铁小粒减少且着色浅淡，是骨髓可染铁明显减少或消失所致；ACD时，细胞内铁<19%(250/259)，外铁不同程度增加(243/259)，是由于铁的释放及利用障碍，其原因一种解释是机体的“营养免疫形式”，由于细菌及肿瘤细胞均需要铁营养，低铁被考虑为机体对待细菌或肿瘤组织生长的反应；另一解释是当炎症或感染时，巨噬细胞被激活，巨噬细胞过度摄取铁，血清铁低而贮存铁增加。在其他种类贫血中细胞外铁和内铁正常或增高。
　骨髓铁染色结果提示，IDA时，细胞的内、外铁均减低；ACD时内铁减低，外铁正常或增高，可将IDA与ACD鉴别。骨髓幼稚红细胞百分率：ACD<30%、HA>50%、其它贫血为30%～50%；幼稚红细胞百分率>50%时应考虑ＨＡ，需作进一步溶血检查；AA时网织红细胞计数<0.5% ，再结合相关资料可初步诊断ＡＡ。临床参考血常规检查结果、骨髓细胞形态识别和患者相关资料，能初步鉴别常见贫血类型，若再结合网织红细胞百分率、幼稚红细胞百分率和骨髓铁染色等指标综合分析，可对不易诊断的贫血作出诊断。
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