东方田鼠作为一种实验动物新资源的研究进展报告.pdf

实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineOct.2023,43(5)DOI:10.12300/j.issn.1674-5817.2023.114谢建芸，硕士，研究员。主要从事实验动物病原体检测和遗传质量检测方法研究、野生动物的实验动物化（包括野生动物实验室培育、种群保持、生物净化、标准化研究等）以及新型实验动物资源的应用研究。主持国家科技支撑计划1项、国家重点研发计划1项、上海市科委科研项目5项；参加国家科技支撑计划1项、国家自然科学基金（面上项目）1项、上海市科委科研项目13项。以通信作者身份发表论文10篇，以第一作者身份发表论文18篇，以其他参与作者发表论文46篇；参与实验动物学教程人类疾病动物模型复制方法学的编写工作；起草上海市地方标准1项、中国实验动物团体标准4项；获得发明专利授权1项；曾获上海市科技进步三等奖。东方田鼠作为一种实验动物新资源的研究进展报告谢建芸(上海实验动物研究中心,上海201203)摘要 东方田鼠是已知的唯一一种天然抗日本血吸虫病的哺乳动物。来源于血吸虫病疫区和非疫区以及实验室培育的东方田鼠对日本血吸虫有着相同的抗性。野生东方田鼠经过30多年的实验室培育，已经实现了实验动物化。同时，研究人员对东方田鼠的生长发育、生殖生理、血清生化、血液学指标、组织解剖等生物学性状进行了较详细的研究，并且进一步深入探讨了东方田鼠的抗血吸虫病特性及机制。上海实验动物研究中心培育的洞庭湖东方田鼠封闭种群（S：DTMF）在2021年经中国实验动物学会实验动物资源与评价工作委员会认定为中国实验动物资源。本综述着重总结近10年，特别是国家科技支撑计划项目实施中在东方田鼠生物学特性、标准化、基因组以及抗血吸虫病机制等方面的研究进展。关键词 东方田鼠；实验动物化；抗血吸虫病中图分类号 R-332；Q95-33 文献标志码 A 文章编号 1674-5817（2023）05-0482-10Research Progress Report on Microtus fortis as a New Resource of Laboratory AnimalXIE Jianyun(Shanghai Laboratory Animal Research Center,Shanghai 201203,China)Correspondence to:XIE Jianyun（ORCID：0000-0001-5283-761X），E-mail：ABSTRACT Microtus fortis(reed vole)is the only mammal known to have natural resistance to Schistosomiasis japonica.Originating from schistosomiasis endemic and non-endemic areas,as well as laboratory bred voles have the same resistance to Schistosoma japonicum.After more than 30 years of laboratory cultivation of wild reed vole,a series of progress have been made in laboratory animalization.A detailed study was conducted on biological traits including growth and development,reproductive physiology,serum biochemistry,hematological indicators and tissue anatomy.At the same time,the anti-schistosomiasis characteristics and anti-schistosomiasis mechanisms of Microtus fortis were studied.The closed Dongtinghu population of Microtus fortis(S:DTMF)cultivated by Shanghai Laboratory Animal Research Center was recognized as a Chinese laboratory animal resource by the Experimental Animal Resources and Evaluation Working Committee of the Chinese Association for Laboratory Animal Sciences 前沿综述 Frontier Reviews基金项目 国家重点研发计划项目“东方田鼠抗血吸虫病和大脑中动脉缺血模型的创建及关键技术研究”（2021YFF0702403）；国家科技支撑计划“东方田鼠种质资源库的建立及其抗血吸虫病机制的研究”（2015BAI09B04）第一作者 谢建芸（1968），女，硕士，研究员，研究方向：实验动物病原体检测，野生动物实验动物化。E-mail：。ORCID：0000-0001-5283-761Xin 2021.This review focuses on summarizing the research progress in the biological characteristics,standardization research,genome and anti-schistosomiasis mechanism of reed vole in the past decade,especially in the implementation of the key project in the National Science and Technology Pillar Program.Key words Microtus fortis;Laboratory animalization;Anti-schistosomiasis东方田鼠（reed vole，Microtus fortis），在分类学上属于啮齿目（Rodentia）仓鼠科（Cricetidae）田鼠亚科（Microcinae）田 鼠 属（Microtus）东 方 田 鼠 种（Microtus fortis）1-3。我国是东方田鼠的主要分布区。国内分类明确的东方田鼠有指名亚种（Microtus fortis fortis Bchner，1889）、长 江 亚 种（Microtus fortis calamorum Thomas，1902）和福建亚种（Microtus fortis fujianensis洪震藩，1981），但目前对东北地区的东方田鼠分类意见尚不一致1-5。东方田鼠是国内已知的唯一一种天然抗日本血吸虫病的哺乳动物，是特殊的日本血吸虫（Schistosoma japonicum）非适宜宿主。血吸虫尾蚴能感染东方田鼠，但在感染后10 d左右，血吸虫停止生长和发育，无一虫体能发育成熟6-8。为了研究东方田鼠特殊的抗日本血吸虫病机制，国内研究者们开始了持续30多年的东方田鼠实验动物化研究，并获得国家和地方科技部门的基金资助。因东方田鼠的地理分布及日本血吸虫的流行区域限制，东方田鼠实验动物化和抗血吸虫病及其他应用等方面的研究仅限于国内，国外尚没有相关领域的研究报道。1980年代开始，湖南省寄生虫病研究所和中国农业科学院上海家畜血吸虫病研究所（中国农业科学院上海兽医研究所前身）分别开展实验室饲养东方田鼠和其天然抗血吸虫病特性的研究，包括东方田鼠在国内的分布情况调查、实验室饲养特性探索9-13、人工感染血吸虫实验6-8、抗血吸虫病机制研究14-18等。1994年中国科学院长沙农业现代化研究所从湖南省洞庭湖区捕获40对左右的野生东方田鼠（长江亚种），进行实验室饲养繁殖10-11。上海实验动物研究中心分别在1998年和1999年开始对来自湖南洞庭湖（长江亚种）和宁夏青铜峡（指名亚种）的东方田鼠进行实验室饲养，建立了东方田鼠封闭种群9，13。经过20多年的培育，上海实验动物研究中心实验室内饲养的东方田鼠能全年繁殖，并用药物、生物净化等方法建立了净化的东方田鼠封闭种群19-20。何永康、倪丽菊、柴淑梅和 Shen等分别对东方田鼠的早期实验动物化研究、东方田鼠在医药生物学中的应用及抗日本血吸虫感染机制等进行了综述21-24。本文着重介绍近10年的东方田鼠研究进展，相关成果的主要产出机构包括笔者所在的上海实验动物研究中心，以及上海生物信息技术研究中心、中国农业科学院上海兽医研究所、中国科学院上海营养与健康研究所等。部分首次发表的数据来自国家科技支撑计划2015BAI09B04课题验收报告。1东方田鼠封闭群的生物学特性上海实验动物研究中心分别在1998年和1999年开始采用随机交配的方法建立了 2 个东方田鼠封闭种群9，13。柏熊等19-20分别在2006年和2011年用药物净化和生物净化、剖宫取胎、高等级小鼠和大鼠代乳等方法建立了净化的东方田鼠种群。目前，上海实验动物研究中心现有湖南洞庭湖东方田鼠种群规模为400只，宁夏青铜峡东方田鼠种群规模为280只，其中繁殖群分别为80对和60对，能满足日常实验的需求。上海实验动物研究中心建立的洞庭湖东方田鼠封闭种群（S：DTMF）在2021年经中国实验动物学会实验动物资源与评价工作委员会认定为中国实验动物资源。在种群培育过程中，研究人员对洞庭湖封闭种群东方田鼠的生长发育、生殖生理、血液生化、解剖学特性等详尽数据进行采集，与宁夏青铜峡种群进行比较，并将数据上传到国家实验动物共享资源数据库，同时对其进行了全基因组测序25，为东方田鼠的研究提供了基础资料，同时开展东方田鼠抗血吸虫病机制的相关研究。1.1生长发育东方田鼠刚出生时体重约为4 g，皮肤为肉红色，无被毛；2日龄时耳廓竖起，长出被毛；46日龄时长出下门齿，68日龄被毛基本长全，79日龄长出上门齿，912日龄睁眼，出生后14 d可以吃颗粒饲料，21 d离乳时体重可增至28 g左右。至98日龄，洞庭湖种群东方田鼠的体重可增至（66.703.01）g（）和（85.382.28）g（），青铜峡种群东方田鼠的体重可增至（68.253.35）g（）和（89.941.81）g（）13。实验室饲养的东方田鼠寿命约30个月。482实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineOct.2023,43(5)in 2021.This review focuses on summarizing the research progress in the biological characteristics,standardization research,genome and anti-schistosomiasis mechanism of reed vole in the past decade,especially in the implementation of the key project in the National Science and Technology Pillar Program.Key words Microtus fortis;Laboratory animalization;Anti-schistosomiasis东方田鼠（reed vole，Microtus fortis），在分类学上属于啮齿目（Rodentia）仓鼠科（Cricetidae）田鼠亚科（Microcinae）田 鼠 属（Microtus）东 方 田 鼠 种（Microtus fortis）1-3。我国是东方田鼠的主要分布区。国内分类明确的东方田鼠有指名亚种（Microtus fortis fortis Bchner，1889）、长 江 亚 种（Microtus fortis calamorum Thomas，1902）和福建亚种（Microtus fortis fujianensis洪震藩，1981），但目前对东北地区的东方田鼠分类意见尚不一致1-5。东方田鼠是国内已知的唯一一种天然抗日本血吸虫病的哺乳动物，是特殊的日本血吸虫（Schistosoma japonicum）非适宜宿主。血吸虫尾蚴能感染东方田鼠，但在感染后10 d左右，血吸虫停止生长和发育，无一虫体能发育成熟6-8。为了研究东方田鼠特殊的抗日本血吸虫病机制，国内研究者们开始了持续30多年的东方田鼠实验动物化研究，并获得国家和地方科技部门的基金资助。因东方田鼠的地理分布及日本血吸虫的流行区域限制，东方田鼠实验动物化和抗血吸虫病及其他应用等方面的研究仅限于国内，国外尚没有相关领域的研究报道。1980年代开始，湖南省寄生虫病研究所和中国农业科学院上海家畜血吸虫病研究所（中国农业科学院上海兽医研究所前身）分别开展实验室饲养东方田鼠和其天然抗血吸虫病特性的研究，包括东方田鼠在国内的分布情况调查、实验室饲养特性探索9-13、人工感染血吸虫实验6-8、抗血吸虫病机制研究14-18等。1994年中国科学院长沙农业现代化研究所从湖南省洞庭湖区捕获40对左右的野生东方田鼠（长江亚种），进行实验室饲养繁殖10-11。上海实验动物研究中心分别在1998年和1999年开始对来自湖南洞庭湖（长江亚种）和宁夏青铜峡（指名亚种）的东方田鼠进行实验室饲养，建立了东方田鼠封闭种群9，13。经过20多年的培育，上海实验动物研究中心实验室内饲养的东方田鼠能全年繁殖，并用药物、生物净化等方法建立了净化的东方田鼠封闭种群19-20。何永康、倪丽菊、柴淑梅和 Shen等分别对东方田鼠的早期实验动物化研究、东方田鼠在医药生物学中的应用及抗日本血吸虫感染机制等进行了综述21-24。本文着重介绍近10年的东方田鼠研究进展，相关成果的主要产出机构包括笔者所在的上海实验动物研究中心，以及上海生物信息技术研究中心、中国农业科学院上海兽医研究所、中国科学院上海营养与健康研究所等。部分首次发表的数据来自国家科技支撑计划2015BAI09B04课题验收报告。1东方田鼠封闭群的生物学特性上海实验动物研究中心分别在1998年和1999年开始采用随机交配的方法建立了 2 个东方田鼠封闭种群9，13。柏熊等19-20分别在2006年和2011年用药物净化和生物净化、剖宫取胎、高等级小鼠和大鼠代乳等方法建立了净化的东方田鼠种群。目前，上海实验动物研究中心现有湖南洞庭湖东方田鼠种群规模为400只，宁夏青铜峡东方田鼠种群规模为280只，其中繁殖群分别为80对和60对，能满足日常实验的需求。上海实验动物研究中心建立的洞庭湖东方田鼠封闭种群（S：DTMF）在2021年经中国实验动物学会实验动物资源与评价工作委员会认定为中国实验动物资源。在种群培育过程中，研究人员对洞庭湖封闭种群东方田鼠的生长发育、生殖生理、血液生化、解剖学特性等详尽数据进行采集，与宁夏青铜峡种群进行比较，并将数据上传到国家实验动物共享资源数据库，同时对其进行了全基因组测序25，为东方田鼠的研究提供了基础资料，同时开展东方田鼠抗血吸虫病机制的相关研究。1.1生长发育东方田鼠刚出生时体重约为4 g，皮肤为肉红色，无被毛；2日龄时耳廓竖起，长出被毛；46日龄时长出下门齿，68日龄被毛基本长全，79日龄长出上门齿，912日龄睁眼，出生后14 d可以吃颗粒饲料，21 d离乳时体重可增至28 g左右。至98日龄，洞庭湖种群东方田鼠的体重可增至（66.703.01）g（）和（85.382.28）g（），青铜峡种群东方田鼠的体重可增至（68.253.35）g（）和（89.941.81）g（）13。实验室饲养的东方田鼠寿命约30个月。483实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineOct.2023,43(5)1.2生殖生理洞庭湖种群东方田鼠雌性性成熟时间为3440 d；雄性性成熟时间比雌性晚，为4249 d。青铜峡种群东方田鼠雌性和雄性的性成熟时间分别为4250 d和4458 d。洞庭湖种群雌鼠的发情周期为（7.391.54）d；发情前期和发情间期较短，分别为（1.110.68）d和（1.110.83）d；发情期和发情后期分别为（2.941.63）d和（2.221.06）d。青铜峡种群雌鼠的发情周期比洞庭湖种群稍短，为（6.931.03）d；发情前期和发情间期与洞庭湖种群相似；发情期和发情后期比洞庭湖种群稍短，分别为（2.271.44）d和（1.401.03）d13。2个种群东方田鼠在实验室饲养的条件下全年均可繁殖。洞庭湖种群田鼠的受孕率为 63.83%（n=47），青铜峡种群田鼠的受孕率为48.39%（n=62）。洞庭湖种群田鼠的窝产仔数为28只，以46只居多，平均（4.701.15）只；青铜峡种群田鼠每胎窝产仔数为16只，以35只居多，平均（3.591.00）只。2个种群东方田鼠的妊娠期均为2021 d，哺乳期为21 d13。需要指出，实验动物的生殖生理涉及种质资源的保存，因此应该开展系统而全面的基础研究，并与其他啮齿类动物进行比较，如不同阶段的精子、卵子、合子、胚胎的冷冻复苏、超排、体外受精等，相关研究还有待进行。1.3解剖学特点东方田鼠的门齿发达，上、下门齿各有1对，无犬齿及前臼齿，臼齿上、下各3对，齿式为（1、0、0、3/1、0、0、3）2=16。脊柱由颈椎7块、胸椎13块、腰椎6块、荐椎4块、尾椎18块，共48块脊椎骨组成，椎式如下：C7T13L6S4Cy18。胃属于单室胃，呈长形袋状，以中央部分的峡部为界，可将其分为前胃和后胃，前胃胃壁薄，几乎透明，后胃不透明，富有肌肉和血管，在后胃的大弯部分分布有腺体。盲肠十分发达，盲肠长度为体长的1倍以上。8周龄东方田鼠 的 脾 脏 系 数 为（0.066%0.022%）（0.097%0.031%），见表 1，远远低于 BALB/c 小鼠的 0.33%0.47%26-27，也低于 SD 大鼠的 0.14%0.22%28-29。目前，尚缺乏有关东方田鼠的精细组织、解剖、功能和比较研究。1.4血液学指标在种群培育过程中，对8周龄的洞庭湖和青铜峡种群东方田鼠进行了血液、血清生化数据的采集，相关数值见表23。目前涉及血液生化的共享基础数据已经积累很多，但对于系统的血象图谱、免疫细胞分类、免疫球蛋白成分及构成等研究还是空白。2东方田鼠全基因组测序对东方田鼠的染色体核型分析表明，东方田鼠共有26对染色体，且以端着丝粒染色体居多数，性染色体1对，其核型公式为2n=52=8（m+sm）+42（t+st）+XY（m，t）30。Li等25用鸟枪法对雄性洞庭湖种群东方田鼠的基因组DNA进行从头测序，拼接后的基因组序列长度约 2.2 Gb，约为估计基因组长度（2.4 Gb）的 92%，GC含量为42.4%，与普通基因组相似；基因组重复含量占30.2%，低于大多数哺乳动物，高于田鼠属中另一个已测序种草原田鼠（M.ochrogaster）。整合多种注释方法得到了21 867个蛋白质编码基因。与其他哺乳动物相比，东方田鼠表现出相似的外显子长度、外显子数量和编码序列长度，但基因长度和内含子长度较短。通过同源基因家族分析构建的系统发育树表明，东方田鼠属于啮齿目，与草原田鼠最接近；东方田鼠与草原田鼠的分化时间约为8.6万年前（95%置信区间为4.215.5），约46.3万年前（95%置信区间为29.363.9）田鼠属的祖先和大鼠、小鼠的祖先分离25。与其他哺乳动物相比，东方田鼠有89个扩增基因家族和102个缺失基因家族，鉴定出532个阳性选择基因（positively selected genes，PSGs）。对PSGs 富集功能分析显示，东方田鼠的细胞形态调节和先天免疫进化等生物学过程快速进化，共有33个先天免疫基因被阳性选择，说明东方田鼠免疫系统进化迅速。通过将人类、小鼠、大鼠和兔的IMGT数据库参考序列与东方田 鼠 基 因 组 比 对，对 东 方 田 鼠 免 疫 球 蛋 白（immunoglobulin，IG）和 T 细胞受体（T cell receptor，TCR）基因进行了注释25。笔者推测，已经完成的东方田鼠参考基因组草图将极大地促进东方田鼠基因功能及东方田鼠-日本血吸虫相互作用机制的研究。东方田鼠IG和TCR库为筛选东方田鼠抗血吸虫特异性分子提供了宝贵的资源，将有助于研究东方田鼠抗日本血吸虫的特殊机制。3东方田鼠的标准化研究东方田鼠作为新的实验动物资源，其环境设施、遗传和病原体控制及监测方法、配合饲料营养标准等是保证东方田鼠正常繁殖、生长、质量的重要环节。484实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineOct.2023,43(5)研究人员对东方田鼠进行了病原学流行病调查，建立了相关病原体的检测方法（尚没有公开发表）；构建了东方田鼠微卫星富集文库，同时筛选了微卫星位点，设计了微卫星引物序列，优化了微卫星检测方法，建立了东方田鼠遗传检测方法及种群遗传控制方法31；还根据东方田鼠的食性，设计了适合东方田鼠的饲料配方（尚没有公开发表）。在此基础上，我国编制了东方田鼠系列标准，中国实验动物学会和上海市市场监表1 2个种群东方田鼠的体质量及脏器系数比较Table 1 Comparison of body mass and organ coefficient between the two populations of reed voles（sx ,%）项目Items体质量/gBody mass/g心脏/体质量Heart/body mass肺/体质量Lung/body mass肝/体质量Liver/body mass脾/体质量Spleen/body mass左肾/体质量Left kidney/body mass右肾/体质量Right kidney/body mass脑/体质量Brain/body mass左甲状腺/体质量Left thyroid gland/body mass右甲状腺/体质量Right thyroid gland/body mass左肾上腺/体质量Left adrenal gland/body mass右肾上腺/体质量Right adrenal gland/body mass左卵巢/体质量Left ovary/body mass右卵巢/体质量Right ovary/body mass左睾丸/体质量Left testicle/body mass右睾丸/体质量Right testicle/body mass胸腺/体质量Thymus/mass洞庭湖种群（n=40）Population of Dongtinghu53.5907.3600.4800.0680.5150.0713.8250.5140.0970.0310.4790.0690.4720.0651.4640.1620.0050.0020.0050.0020.0200.0070.0190.0070.0140.0080.0140.008/0.1210.04767.8369.235#0.4290.0520.4340.0623.8020.6430.0710.0140.4640.0580.4540.0581.1900.1450.0020.001#0.0020.001#0.0080.003#0.0080.003#/0.4840.1280.4740.1280.1940.067#青铜峡种群（n=40）Population of Qingtongxia45.9604.6700.4130.0370.4560.0723.1340.0040.0710.0290.4430.0370.4420.0381.7110.1910.0020.001*0.0020.001*0.0110.004*0.0110.004*0.0050.003*0.0050.003*/0.1200.04465.1309.690#0.4040.0620.4330.0633.1770.3430.0660.0220.4660.0430.4660.0491.2700.179#0.0020.0010.0010.0010.0070.0030.0070.003/0.3270.200*0.3330.200*0.1030.037注：本表为之前未公开发表数据，节选自国家科技支撑计划2015BAI09B04课题验收报告。*为两个种群之间有显著性差异，#为同种群内雌雄间有显著性差异，P0.05。Note：These are unpublished data,excerpted from the 2015BAI09B04 project acceptance report of the National Science and Technology Pillar Plan.*means a significant difference between the two populations,#represents a significant difference between males and females in the same population,P0.05.485实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineOct.2023,43(5)督管理局分别于2019年和2021年发布了东方田鼠相关团体标准和地方标准，包括上海市地方标准 DB31/T 12872021实验东方田鼠 病原学等级及监测32，实验动物团体标准T/CALAS 1012021实验动物 东方田鼠遗传质量控制33、T/CALAS 692019实验动物 东方田鼠配合饲料34、T/CALAS 702019实验动物 东方田鼠微生物学和寄生虫学等级及监测等35。总之，从遗传质量控制、病原体等级及检测方法、配合饲料营养成分等方面制定东方田鼠相关质量控制标准，完善了东方田鼠质量控制体系，为提升东方田鼠质量奠定了基础。4在抗血吸虫病机制研究中的应用以往对东方田鼠天然抗血吸虫病的机制研究发现：东方田鼠血清成分具有体外杀伤血吸虫童虫的效应36-39；东方田鼠体内存在天然的抗血吸虫童虫和成虫IgG抗体（尤其是IgG3）14，40-42；血清补体成分在对血吸虫童虫的杀伤效应中起了重要作用43-44；嗜酸性粒细胞、巨噬细胞是东方田鼠对血吸虫童虫抗体依赖细胞介导的细胞毒性作用（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）中 重 要 的 效 应 细胞36，45-46；感染血吸虫后23周，东方田鼠血清中的GM-CSF、M-CSF、MCP-1、VEGF、IL-3、IL-4、IL-10、IFN-等细胞因子及其相关基因显著高于感染后的C57BL/6小鼠18，47；一些参与营养代谢、免疫调节的miRNA在感染血吸虫的东方田鼠和小鼠肝脏、脾脏和肺中差异表达15；东方田鼠感染日本血吸虫10 d后，肺中甲状腺激素受体、甲状腺激素反应蛋白、类固醇11脱氢酶1以及肝中胰岛素样生长因子1等水平显著下调48。另有一些研究发现，血清白蛋白49-50、热休克蛋白-9051、核转运蛋白-252、肠道菌群53等可能与东方田鼠抗血吸虫病作用有关。总之，东方田鼠体内包括免疫防御系统（如抗体、补体、细胞因子、免疫细胞、miRNA）、高水平代谢产物、低水平激素表达及其难以被日本血吸虫消化的白蛋白等，均可能是不利于日本血吸虫生长发育的因素，表2 2个种群东方田鼠血液学指标测定结果比较Table 2 Comparison of hematological index measurement results between the two populations of reed voles（sx ）项目Items红细胞计数/（1012L-1）Red blood cell count血红蛋白/（gL-1）Hemoglobin白细胞计数/（109L-1）White blood cell count噬中性粒细胞百分比/%Percentage of phagocytic neutrophils淋巴细胞百分比/%Percentage of lymphocytes嗜酸性粒细胞百分比/%Percentage of eosinophils嗜碱性粒细胞百分比/%Percentage of basophils单核细胞百分比/%Percentage of monocytes血小板计数/（109L-1）Platelet count洞庭湖种群（n=40）Population of Dongtinghu9.411.12141.6316.544.781.7830.9710.7562.7611.284.554.1301.741.69820.94259.1410.430.84162.9511.24#8.772.77#18.4011.45#73.7512.63#6.624.78#0.030.081.191.10782.08183.05青铜峡种群（n=40）Population of Qingtongxia10.910.82154.5812.234.031.7620.587.97*73.928.734.893.0700.601.07*572.13213.17*11.180.86160.9512.305.081.79*#26.4714.56*#65.2114.486.934.85#01.391.65#594.16194.34*注：本表为之前未公开发表数据，节选自国家科技支撑计划2015BAI09B04课题验收报告。*为两个种群之间有显著性差异，#为同种群内雌雄间有显著性差异，P0.05。Note：These are unpublished data,excerpted from the 2015BAI09B04 project acceptance report of the National Science and Technology Pillar Plan.*means a significant difference between the two populations,#represents a significant difference between males and females in the same population,P0.05.486实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineOct.2023,43(5)然而这些推测尚缺乏足够的支持性实验数据。截至目前，有关东方田鼠抗血吸虫病机制的研究已有多篇综述进行总结21，23-24，下文重点总结目前我们的研究进展。对小鼠和东方田鼠感染血吸虫后的肝脏进行RNA测序和比较转录组分析，探讨东方田鼠和小鼠感染血吸 虫 后 不 同 时 间 的 差 异 表 达 基 因（differentially expressed genes，DEGs），发现东方田鼠肝脏DEGs富集主要在感染血吸虫后10 d，小鼠肝脏DEGs富集在感染血吸虫后28 d和42 d；富集的基因主要为免疫系统反应、炎性反应等相关基因，表明东方田鼠在感染第10天即发生了强烈的免疫反应，而小鼠在感染后28 d，血吸虫产生虫卵后才发生较强的免疫反应25。对东方田鼠上调基因功能注释发现，大多数富集途径与先天表3 2个种群东方田鼠生化指标测定结果Table 3 Comparison of biochemical index measurement results between the two populations of reed voles（sx ）项目Items天门冬氨酸转氨酶z/（UL-1）Aspartate aminotransferase谷丙转氨酶z/（UL-1）Alanine transaminase碱性磷酸酶z/（UL-1）Alkaline phosphatase乳酸脱氢酶z/（UL-1）Lactate dehydrogenase肌苷c/（molL-1）Inosine尿素c/（mmolL-1）Urea总胆固醇c/（mmolL-1）Total cholesterol血清总蛋白/（gL-1）Total serum protein白蛋白/（gL-1）Albumin甘油三酯/（mmolL-1）Triglyceride血糖c/（mmolL-1）Blood sugar高密度脂蛋白c/（mmolL-1）High density lipoprotein低密度脂蛋白c/（mmolL-1）Low density lipoprotein胆碱酯酶z/（UL-1）Cholinesterase尿比重Urine specific gravity洞庭湖种群田鼠（n=40）Population of Dongtinghu417.36233.64285.57180.13353.31149.881 036.62294.8311.673.519.392.082.670.6964.554.7340.822.761.621.092.250.701.690.410.650.297 631.091 338.151.010 1 0.007 7351.20226.26#217.40146.94#253.9064.11#764.40458.96#10.603.498.901.622.200.4964.403.8942.202.451.300.682.600.691.200.22#0.400.22#8 053.002 329.151.018 3 0.012 9青铜峡种群田鼠（n=40）Population of Qingtongxia226.0986.23*134.6949.60*392.5382.90373.64281.42*9.332.91*9.482.633.800.71*59.283.7438.652.991.811.132.390.862.000.230.850.48*8 626.182 049.571.021 70.014 5304.50133.46#155.9078.57*388.2081.57*536.30345.63*#11.503.33#8.702.453.200.76*61.004.9839.403.071.600.772.100.791.600.330.800.39*9 249.702 790.191.029 10.014 8注：本表为之前未公开发表数据，节选自国家科技支撑计划2015BAI09B04课题验收报告。*为两个种群之间有显著性差异，#为同种群内雌雄间有显著性差异，P0.05。Note：These are unpublished data,excerpted from the 2015BAI09B04 project acceptance report of the National Science and Technology Pillar Plan.*means a significant difference between the two populations,#represents a significant difference between males and females in the same population,P0.05.487实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineOct.2023,43(5)免疫有关，前3条途径是白细胞外渗信号、整合素信号和Fc受体介导的巨噬细胞和单核细胞吞噬作用。对免疫球蛋白进行分型，东方