1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,课题研究背景,设计性试验,梅毒(syphilis)是由梅毒螺旋体感染人体而发生常见性传输疾病,已经问世数百年了,当前在世界范围都有分布,是十分主要性传输疾病;能够分为取得性梅毒、先天梅毒和妊娠梅毒等。,梅毒病西医治疗方法梅毒治疗现在主要以西药为主,自从青霉素用于治疗梅毒有奇效之后,中药基本不在作为主要医疗伎俩,只是起辅助作用,。,然而对青霉素过敏者屡见不鲜,那么,对青霉素过敏梅毒患者又该怎样治疗呢?,查阅
2、了相关文件资料,,我们发觉,对于青霉素过敏梅毒患者代替治疗药品当前只有以下三种:红霉素、四环素、多西环素。,因而我们决定对这三种药品进行试验和讨论。,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第1页,梅毒介绍,设计性试验,梅毒(syphilis),由梅毒螺旋体引发一个慢性传染性疾病,,当螺旋体进入人体后,快速播散至全身各器官,产生各种症状与体征,也可呈潜伏状态,还可经过胎盘传给下一代,故危害极大。,病原体,梅毒螺旋体,(TreponemaPallidun)是梅毒病原体,因其透明,不易着色,故又称苍白螺旋体。梅毒是一个广泛流行性病,在中国发病率又有所回升。梅毒螺旋体只感染人类,分取得性梅毒与胎传梅
3、毒。,梅毒螺旋体,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第2页,梅毒惯用治疗药品,设计性试验,(一)青霉素类,为首选高效抗梅毒药品,血清浓度到达0.03g/ml即可杀死梅毒螺旋体,且应该连续2周以上,惯用有苄星青霉素、普鲁卡因青霉素和水剂青霉素。,(二)头孢曲松钠,有治疗梅毒报道,取得了良好近期疗效,但在剂量、疗程和远期疗效尚无确切经验。,(三)四环素类和红霉素类,疗效较青霉素为差,通常作为青霉素过敏者替换治疗药品。四环素类惯用有四环素、多西环素和米诺环素,孕妇及儿童禁用。红霉素类惯用有红霉素、阿奇霉素,孕妇慎用阿奇霉素。,青霉素,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第3页,设计性试验,
4、1.早期梅毒(包含一期、二期梅毒和早期潜伏梅毒),四环素500mg,4次/d,口服,疗程15d;或,多西环素100mg,2次/d,口服,疗程15d;或,红霉素500mg,4次/d,口服,疗程15d。,2.晚期梅毒(包含三期皮肤、黏膜或骨骼梅毒,晚期潜,伏梅毒,不能确定病期潜伏梅毒及二期复发梅毒),四环素500mg,4次/d,口服,疗程30d;或,多西环素100mg,2次/d,口服,疗程30d;或,红霉素500mg,4次/d,口服,疗程30d。,青霉素过敏者惯用药品及治疗方案,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第4页,设计性试验,青霉素过敏者惯用药品及治疗方案,3.心血管梅毒:,应住院治疗
5、如有心力衰竭,应在控制心力衰竭后开始抗梅毒治疗。,治疗方法,同晚期梅毒。,4.神经梅毒,治疗方法,同晚期梅毒,。,5.妊娠梅毒,用红霉素500mg,口服,4次/d,早期梅毒疗程15d,二期复发及晚期,梅毒疗程30d。妊娠初3个月与妊娠末3个月各治疗一个疗程,但所生,婴儿应用青霉素补治。,孕妇禁用四环素和多西环素。,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第5页,设计性试验,试验内容,1.提取青霉素过敏梅毒患者一期梅毒和二期梅毒标本。,2.,对梅毒螺旋体进行体外培养,得到Nichols株。,3.经过加入青霉素、红霉素、四环素与多西环素来改变其生长环境,然,后检测梅毒螺旋体数量。,4.经过试验结
6、果分析哪一个药品对于治疗梅毒效果最正确,并得出最适,药品剂量。,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第6页,设计性试验,试验目标,1.掌握梅毒螺旋体人工培养技术。,2.经过试验操作掌握梅毒螺旋体染色方法及微生物学检验法。,3.经过试验得出最有效代替青霉素治疗梅毒药品。,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第7页,设计性试验,试验方法及路线,一、梅毒螺旋体提取,1.到医院征得院方同意后,对青霉素过敏梅毒患者进行标本采集:,期梅毒-,因为一期梅毒临床表现为硬下疳、腹股沟,或近卫淋巴结肿大,因而可取患者,硬下疳渗,、,出液;,期梅毒-,此时患者临床表现为多形性皮肤损害及浅,表淋巴结肿大,因而
7、可采集,梅毒疹渗出液或,局部淋巴结抽出液,。,2.采集样本后妥善保管,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第8页,设计性试验,试验方法及路线,1.,留下足够标本妥善保管,以备后面试验使用,只取一部分进行此次,试验,。,将一期标本与二期标本分别接种在两只家兔睾丸中或眼前房内,繁殖,约需30小时才能分裂一次,能保持毒力。,2.待梅毒螺旋体繁殖到原来16倍以后(约150个小时),分组进行实,验。,二、梅毒螺旋体人工培养,三、分组,1.将一期与二期培养物分别平均分为32组,共64组。,2.一期中取每8组为一个小组,共四组(即红霉素组,四环素组,多西,环素组与青霉素对照组)。二期同上。,3.将红霉素
8、组、四环素组、多西环素组、青霉素组设置8个剂量梯度进,行试验。(详见表格),青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第9页,设计性试验,试验方法及路线,1.方法一:直接显微镜检验,将上述检材置于玻片上用暗视野显微镜检验,如见有展现运动活泼,沿其长轴滚动、屈伸、旋转、前后移行等螺旋体即有诊疗意义。,也可做镀银染色、荧光抗体染色或Giemsa染色。,四、分时间段检验梅毒螺旋体数量,2.,方法二:,核酸检测,用PCR技术直接检测临床标本中梅毒螺旋体特异性DNA片段,用于检测引物和探针是编码外膜蛋白47kD基因,其扩增产物经斑点印迹,或电泳Southern 印迹法判定。,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较
9、专家讲座,第10页,设计性试验,试验方法及路线,3.抗体检测,(1),非密螺旋体抗原试验,多用牛心肌心脂质作为抗原,测定病人血清中反应素。将抗原包被到载体颗粒上,如:胆固醇(VDRL、USR)、活性炭(RPR)、甲苯胺红(TRUST)。均为初筛试验。,早期梅毒病灶出现后1-2周时,阳性率为5383,二期梅毒阳性率可达100。,1)性病研究所试验室(VDRL)玻片试验,所用抗原(0.03心拟脂、0.21卵磷脂、0.9胆固醇,用无水乙醇配制)03ml加入装有0.3ml缓冲盐水小瓶内(1015ml容积),加塞混匀。再加2.4ml缓冲盐水即为抗原悬液。,待检血清经5630min灭活,滴加于玻片漆圈内加
10、等量抗原液,摇转玻片5min充分混匀反应后观察结果。有大片絮状凝聚物为(3+),中等凝聚物为(2+),细小凝聚物为(+),液体混浊为()。,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第11页,设计性试验,试验方法及路线,2)快速血浆反应素环状卡片试验(RPR),用活性炭颗粒吸附VDRL抗原。与反应素结合形成黑色凝集块,可肉眼观察结果。,取待检血清加于环状卡圆圈内,加VDRL抗原致敏活性炭1滴,旋转摇匀8min,观察结果。在白色底板出现显著黑色凝集颗粒为阳性,试验结果用肉眼很轻易判断,不需显微镜,也易于推广。,3)不加热血清反应素试验(USR),注意:以上试验常有假阳性反应:结核、麻风、疟疾、类风
11、湿性关节炎、老年人、妊娠、吸毒者等。,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第12页,设计性试验,试验方法及路线,(2)密螺旋体抗原试验 (确证试验),用密螺旋体抗原检测病人血清中特异性抗体,因为梅毒螺旋体、雅司螺旋体等抗原性相同,故血清学试验不能区分这些密螺旋体及其所致疾病。,1)荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS),先用吸收剂去除病人血清非特异性抗原,提升特异性,稀释成不一样稀释度,加于预先涂有梅毒螺旋体抗原玻片上,置湿盒内,37孵育30min,洗片后再用荧光素标识羊抗人丙球蛋白抗体,在荧光显微镜下观察。阳性者可见发荧光梅毒螺旋体。FTA-ABS试验具高度特异性和敏感性,在第一期梅
12、毒头几天就可测出特异性抗体。,2)梅毒螺旋体血凝试验(treponemal pallidum hemaggulation assay,TPHA),用抗原致敏红细胞作间接血凝试验是检测抗体最简易方法,所用抗原是用梅毒螺旋体(Nichols株)提取物去致敏经醛化处理绵羊红细胞,病人血清先与非致病性Reiter细胞。血清若含有抗体则与这些细胞反应形成平铺孔底凝集;用非致敏红细胞作对照,以除外非特异性凝集。,梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA),青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第13页,设计性试验,试验结果统计表,剂量1,剂量2,剂量3,剂量4,剂量5,剂量6,剂量7,剂量8,一期,红霉素,四环
13、素,多西环素,青霉素,二期,红霉素,四环素,多西环素,青霉素,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第14页,设计性试验,预期结果及展望,1.经过对比红霉素、四环素、多西环素与青霉素环境下梅毒螺旋体存,在数量得出最有效药品。(,可能可能发觉其中某种药品治疗梅毒,效果与青霉素相当或者甚至超出青霉素,),2.再观察这种药品不一样剂量梯度中哪一个剂量药效最好。,3.得出结论:此药品为最适合代替青霉素来治疗青霉素过敏梅毒患者。,展望:,在查阅资料过程中发觉假如有条件话,对青霉素过敏梅毒患者最好是进行脱敏以后再进行青霉素治疗,因为青霉素效果比红霉素、四环素与多西环素效果要强。不过,对于没有这种条件患者,依然采取代替药品。,另:本试验还可继续延伸,可将选出最优药品进行更细剂量梯度进行试验,最终选出最适剂量。,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第15页,Thank you.,青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较专家讲座,第16页,






