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PT 凝血酶原时间

一、 名称: PT凝血酶原时间。

二、 原理: 在受检血浆中加入过量的因子 III( 人胎盘的浸出液) 和 Ca2+, 使凝血酶
原转变为凝血酶, 后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白, 血浆凝固所需要的时间即为
PT。它是外源性凝血系统常见筛选试验之一。

三、 试剂: Thromborel S 试剂, 为人胎盘浸出液和 Ca2+的混合试剂, 试剂说明书中包
含本试剂用在不同型号、 不同方法学的仪器上的国际敏感度指数( ISI) 。试剂溶解 时分别按包装用 10ML 或 4.0ML 的蒸馏水复溶。

四、 仪器品牌: 日本进口SYSMEX公司的CA550、 CA1500、 CA7000型全自动血凝仪。

五、 操作步骤: SYSMEX 的 CA 系列血凝仪采用的是散射光比浊, 百分比检测, 监测
样品凝集开始到凝集完全的散射光强度的变化, 50%凝集时所对应的时间即为凝血 酶原时间。
1、 将 PT 的试剂按照说明溶解好以后, 放到确定的位置上。
2、 将样本离心准备好以后, 放到样本架上, 样本架放到自动进样器上。
3、 在屏幕上进入 WORK LIST 菜单, 设好 ID 号, 及要检测的项目, 一切准备好便可 按 START 开始。

六、 参考值: PT 9-13 秒

七、 临床意义: PT 延长: 先天性见于因子 II、 V、 VII、 X 缺乏和无( 或) 低纤维蛋白原血症; 获 得性见于弥散性血管内凝血、 原发性纤溶症、 维生素 K 缺乏症、 肝脏疾病; 血循 环中有抗凝物质, 如肝素、 FDP、 以及抗因子 II、 V、 VII、 X 的抗体存在等情况。 PT 缩短: 见于因子 V 增多症、 口服避孕药、 高凝状态和血栓性疾病等。 口服抗凝剂的监测: 凝血酶原时间是监测口服抗凝剂的常见指标, 中国人 INR 在1.5~2.5 用药较为安全和有效。

八、 标本制备: 9 份静脉血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸橼酸钠抗凝, 立即混匀, 3000r/min×15min, 血浆可在 15-25℃保存 4 小时, 在-20℃至少能够保存 24 小时。

九、 注意事项: 试剂溶解后, 可在 15℃放置 8 小时, 2-8℃可保存 5 天。复溶要充分,
溶解后的试剂最好不要在低温冷冻保存。

十、 编写者: VASTEC公司血栓止血临床应有技术专员 陈中超

十一、 参考文献: [1] SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL
[2] 曾照芳, 翟笺才, 临床检验仪器学, 北京: 人民卫生出版社,
[3] 姚泰, 生理学( 第六版) , 北京 人民卫生出版社,
[4] 赵桂芝, 临床检验学, 成都: 四川科学技术出版社, 1997
[5] 陆永绥, 李清华, 张伟明, 临床检验自动化仪器分析标准操作规程, 浙江: 浙江大学出版社,

十二、 科室主任:

APTT 部分凝血活酶时间

一、 名称: APTT部分凝血活酶时间。

二、 原理: 在 37℃下, 以鞣花酸为激活剂活化凝血因子 XII 和 XI, 以脑磷脂( 部分凝血活酶) 代替血小板提供凝血的催化表面, 在 Ca2+的参与下, 观察贫血小板血浆凝固所需要的时间。APTT 测定是内源性凝血系统较为敏感、 简便和常见的筛选试验。

三、 试剂: Actin 试剂( 鞣花酸做为激活剂, 磷脂为兔脑粉) , 及 CaCl2 试剂, 试剂为 液体不需复溶。2-8℃可保存到效期。

四、 仪器品牌: 日本进口SYSMEX公司的CA550、 CA1500、 CA7000型全自动血凝仪。

五、 操作步骤: SYSMEX 的 CA血凝仪采用的是散射光比浊, 百分比检测, 监测 样品凝集开始到凝集完全的散射光强度的变化, 50%凝集时所对应的时间即为凝血酶原时间。
a) 将 APTT 的试剂和 CaCl2 放到确定的位置上。
b) 将样本离心准备好以后, 放到样本架上, 样本架放到自动进样器上。
c) 在屏幕上进入 WORK LIST 菜单, 设好 ID 号, 及要检测的项目, 一切准备好便可 按 START 开始。

六、 参考值: APTT 20-40 秒

七、 临床意义: a)APTT 延长:
1、 因子 VIII、 IX 和 XI 血浆中水平减低, 如血友病 A、 B 及凝血因子 XI 缺乏症; 因
子 VIII 减少还见于部分血管性血友病患者;
2、 严重的凝血酶原、 因子 V、 因子 X 和纤维蛋白原缺乏, 如肝脏疾病、 阻塞性黄疸、 新生儿出血症、 肠道灭菌综合症、 吸收不良综合征、 口服抗凝剂、 应用肝素以及纤 维蛋白原缺乏血症等;
3、 纤溶活性增强, 如继发性、 原发性纤溶亢进及循环血液中有纤维蛋白( 原) 降解产 物( FDP) ;
4、 血循环中有抗凝物质, 如抗因子 VIII 或 IX 抗体, 狼疮抗凝物质等。
b)APTT 缩短:
1、 高凝状态, 如弥散性血管内凝血的高凝期、 促凝物质进入血流以及凝血因子的活性
增高等;
2、 血栓性疾病, 如心肌梗死、 不稳定性心绞痛、 脑血管病变、 糖尿病伴血管病变、 肺 梗死、 深静脉血栓形成、 妊娠高血压综合征和肾病综合征以及严重的灼伤等。

八、 标本制备: 9 份静脉血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸橼酸钠抗凝, 立即混匀, 3000r/min×15min, 血浆可在 15-25℃保存 4 小时, 在-20℃至少能够保存 24 小时。

九、 注意事项: APTT 试剂为液体试剂无需复溶, 需要在 2-8℃下保存, 切勿冻存。

十、 编写者: VASTEC公司血栓止血临床应有技术专员 陈中超

十一、 参考文献: [1] SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL
[2] 曾照芳, 翟笺才, 临床检验仪器学, 北京: 人民卫生出版社,
[3] 姚泰, 生理学( 第六版) , 北京: 人民卫生出版社,
[4] 陆永绥, 李清华, 张伟明, 临床检验自动化仪器分析标准操作规程, 浙江 浙江大学出版社,

十二、 科室主任:

FBG 纤维蛋白原测定

一、 名称: FBG纤维蛋白测定。

二、 原理: 采用 Clauss 凝固法原理, 根据纤维蛋白原与凝血酶作用最终形成纤维蛋白
的原理。以国际标准品为参比血浆制作标准曲线, 用过量的凝血酶来测定血浆凝固 时间, 所得凝固时间与血浆中纤维蛋白原浓度呈负相关, 从而得到纤维蛋白原的含 量。

三、 试剂: Thrombin 试剂( 凝血酶冻干品) , 1ml 的蒸馏水复溶。Owen’s Buffer 缓冲液, 注意试剂是否结晶会影响结果。

四、 仪器品牌: 日本进口SYSMEX公司的CA550、 CA1500、 CA7000型全自动血凝仪。

五、 操作步骤: SYSMEX 的 CA 系列血凝仪采用的是散色光比浊, 百分比检测, 监测
样品凝集完全的散射光强度的变化, 50%凝集时所对应的时间即为凝血酶时间。
1.将 FBG 试剂按照说明溶解好以后, 放到确定的位置上。
2.将样本离心准备好后, 放到样本架上, 样本架放到自动进样器上。
3.在屏幕上进入 WORK LIST 菜单, 设好 ID 号, 以及要检测的项目, 一切准备好后 可按 START 开始。

六、 参考值: FBG: 2-4g/l

七、 临床意义: FBG 含量增高: 见于糖尿病及其酸中毒, 动脉粥样硬化, 急性传染病, 急性肾炎 尿毒症, 骨髓瘤, 休克, 外科术后及轻, 度肝炎等。
FBG 含量减低: 见于 DIC, 原发性纤溶症, 重症肝炎, 肝硬化等。

八、 标本制备: 9 份静脉血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸橼酸钠抗凝, 立即混匀, 3000r/min×15min, 血浆可在 15-25℃保存4小时, 在-20℃至少能够保存 24 小时。

九、 注意事项: 试剂溶解后, 可在 15℃放置 10 小时, 2-8℃可放 7 天。复溶要充分, 复溶好的试剂可冷冻分装保存

十、 编写者: VASTEC公司血栓止血临床应有技术专员 陈中超

十一、 参考文献:
[1] SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL
[2] 曾照芳, 翟笺才, 临床检验仪器学, 北京: 人民卫生出版社,
[3] 姚泰, 生理学( 第六版) , 北京: 人民卫生出版社,
[4] 赵桂芝, 临床检验学, 成都: 四川科学技术出版社, 1997
[5] 陆永绥, 李清华, 张伟明, 临床检验自动化仪器分析标准操作规程, 浙江: 浙江大学出版社,

十二、 科室主任:

TT 凝血酶时间

一、 名称: TT凝血酶时间。

二、 原理: 待测血浆加入标定的凝血酶溶液, 纤维蛋白原转变为纤维蛋白, 测定凝固所
需的时间, 即为待测血浆凝血酶时间。

三、 试剂: Test Thrombin 试剂( 凝血酶冻干品。) 。试剂溶解时用 TT 特有的缓冲液
以 5ml 复溶。

四、 仪器品牌: 日本进口SYSMEX公司的CA550、 CA1500、 CA7000型全自动血凝仪。

五、 操作步骤: SYSMEX 的 CA 系列血凝仪采用的是散色光比浊, 百分比检测, 监测样品凝集完全的散射光强度的变化, 30%凝集时所对应的时间即为凝血酶时间。
1. 将 TT 试剂按照说明溶解好以后, 放到确定的位置上。
2. 将样本离心准备好后, 放到样本架上, 样本架放到自动进样器上。
3. 在屏幕上进入 WORK LIST 菜单, 设好 ID 号, 以及要检测的项目, 一切准备好后可按 START 开始。

六、 参考值: TT 14-21 秒

七、 临床意义: TT 延长: 见于肝素增多或类肝素物质存在, SLE, 肝病, 肾病, 低( 无) 纤维蛋白 原血症, 异常纤维蛋白原血症, FDP 增多等疾病。

八、 标本制备: 9 份静脉血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸橼酸钠抗凝, 立即混匀, 3000r/min×15min, 血浆可在 15-25℃保存 4 小时, 在-20℃至少能够保存 24 小时。

九、 注意事项: 试剂溶解后, 可在 15℃放置 10 小时, 2-8℃可放 7 天。复溶要充分, 复溶好的试剂可冷冻分装保存。

十、 编写者: VASTEC公司血栓止血临床应有技术专员 陈中超

十一、 参考文献:
[1] SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL
[2] 曾照芳, 翟笺才, 临床检验仪器学, 北京: 人民卫生出版社,
[3] 姚泰, 生理学( 第六版) , 北京: 人民卫生出版社,
[4] 赵桂芝, 临床检验学, 成都: 四川科学技术出版社, 1997
[5] 陆永绥, 李清华, 张伟明, 临床检验自动化仪器分析标准操作规程, 浙江: 浙江大学出版社,

十二、 科室主任:

抗凝血酶 III 检测( ATIII)

一、 名称: 抗凝血酶III测定。

二、 原理: ATIII 是血液凝固的一种主要抑制剂, 其功能分析依赖于血浆中有肝素存在
的情况下降低凝血酶活性的能力。样本中的 ATIII 在肝素的存在下与未激活的凝血酶形成凝血酶抗凝血酶复合物。剩余的凝血酶与试剂中的底物结合, 在 405nm 波长下检 测吸光度的变化。以国际标准品为参比血浆作浓度与吸光度的曲线。所测样本的吸光 度将会根据曲线得到样本的浓度。

三、 试剂:
Thrombin Reagent 6 X15ml ( 凝血酶试剂 用 15ml 的缓冲液复溶)
Substrate Reagent 6X3 ml ( 底物 用 3ml 的去离子水复溶)
uffer Solution 1X100ml ( 缓冲液 液体用于复溶凝血酶试剂)

四、 仪器品牌: 日本进口SYSMEX公司的CA550、 CA1500、 CA7000型全自动血凝仪。

五、 操作步骤: SYSMEX 的 CA 系列血凝仪采用的是发色底物法来检测 ATIII。

1. 将 AT III 试剂盒中所有试剂按照说明溶解好以后, 放到确定的位置上。
4. 将样本离心准备好后, 放到样本架上, 样本架放到自动进样器上。
5. 在屏幕上进入 WORK LIST 菜单, 设好 ID 号, 以及要检测的项目, 一切准备好 后可按 START 开始。

六、 参考值: ATIII 75—125%

七、 临床意义: 定量测定血浆中抗凝血酶Ⅲ( ATIII) 的活性, 能用于诊断ATIII合成减少或消耗增加性疾病, 和监测替代治疗效果。ATIII 缺乏主要见于肝脏疾病、 弥散性血管内凝血、 败血症、 肺栓塞、 肾病综合症、 中风及深静脉血栓等。

八、 标本制备: 9 份静脉血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸橼酸钠抗凝, 立即混匀, 3000r/min×15min, 在 60 分钟以内分离血浆, 分离血浆时用塑料吸头、 且用塑料试管储存血浆。分析血浆标本在 2 小时内完成; 另外, 冰冻保存, 融化使用等。

九、 注意事项: 凝血酶试剂溶解后, 使用时在 15℃--25℃-孵育 30 分钟。凝血酶试剂复溶后在原始瓶中可冰冻 5 次, 底物可冰冻 10 次。缓冲液 2-8℃可保存 6 个月。2-8℃凝血酶稳定 4 周。底物稳定 6 周。-20℃凝血酶可稳定 3 个月, 底物 6 个月。

十、 编写者: VASTEC公司血栓止血临床应有技术专员 陈中超

十一、 参考文献:
1. [1] SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL
2. [2] 曾照芳, 翟笺才, 临床检验仪器学, 北京: 人民卫生出版社,
3. [3] 姚泰, 生理学( 第六版) , 北京: 人民卫生出版社,
4. [4] 赵桂芝, 临床检验学, 成都: 四川科学技术出版社, 1997
5. [5] 陆永绥, 李清华, 张伟明, 临床检验自动化仪器分析标准操作规程, 浙江: 浙江大学出版社

十二、 科室主任: