免疫学实验供临床医学本科用市公开课一等奖省优质课赛课一等奖课件.pptx

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,教材,高等医学院校基础医学试验教学系列教材,免疫学试验,科学出版社，6月,主编,朱道银，吴玉章,第1页,临床医学本科试验内容及安排,第2页,非临床医学本科试验内容及安排,第3页,一、免疫学试验注意事项,1.学生进试验室必须穿白大褂，不得穿拖鞋。,2.学生在试验过程中应恪守试验操作规程和试验室秩序，按要求完成试验。,3.学生应爱护试验设备、器材等公物，厉行节约；若损坏试验用具，要及时汇报。,4.需回收玻璃器材如载玻片等,，,放于指定陶瓷缸内；废弃使用具仍,-,入垃圾桶内。,5.试验结束，清理好桌面，由班干部安排值日学生做清洁；做完清洁，关好水电、门窗，由带教老师检验认可后，值日学生方可离去。,第4页,二、免疫实验课目,1.验证所学理论知识。,2.训练基本操作技能，培养独立工作能力。,三、要求,1.严肃认真。,2.多想、多看、多做。,3.当堂完成实验报告。,第5页,四、,Ag-Ab,反应相关知识,血清学反应即体外进行,Ag-Ab,反应。,因为机体绝大部分抗体存在于血清中，故,称之为血清学反应。,1.Ag-Ab,反应基本标准,（,1,）用已知抗体检测未知抗原；,（,2,）用已知抗原检测未知抗体。,第6页,2.Ag-Ab,反应特点：,（1）特异性,（2）可逆性,（3）可见性,第7页,3.,影响,Ag-Ab,反应原因,（1）电解质：0.85%,NaCl,（2）酸碱度：,pH68,（3）温度：,37,第8页,4.Ag-Ab,反应类型：,（1）凝集反应,（2）沉淀反应,（3）补体结合反应,（4）中和反应,（5）免疫标识技术,4大经典免疫试验,第9页,试验一 凝集反应,第10页,一、目标要求,1.掌握血清学反应概念、特点。,2.熟悉凝集反应概念、惯用凝集反应试验方法及结果判定。,3.了解凝集反应原理、类型及其用途。,第11页,二、试验内容,1.直接凝集试验,(,玻片法,),ABO,血型判定,(,每人做,),2.间接凝集试验,类风湿因子检测,(,小组做,),第12页,三、凝集反应相关知识,（一）概念颗粒性抗原,(细菌、细胞等,),与对应抗体结合，在一定条件下，出现肉眼可见,凝集物,，称为凝集反应,。,颗粒性,Ag,又称凝集原,对应,Ab,又称凝集素,第13页,颗粒性抗原：,光镜下可见，肉眼观呈浑浊悬液，如细菌、,RBC,等。,可溶性抗原：,光镜下无形态，肉眼观呈澄清透明，如蛋白质、多糖抗原等。,第14页,（二）凝集反应类型,1.,直接凝集反应,2.,间接凝集反应,第15页,1.,直接凝集,玻片法,已知,Ab,测,Ag，,为定性试验；,用途：判定菌种、菌种分型、血型判定。,试管法（如肥达氏反应）,已知,Ag,测,Ab，,为半定量试验；,用途：辅助诊疗肠热症等。,第16页,2,.,间接凝集反应,RBC,间接血凝试验,用途：一些病毒感染和变态反应患者血清中相抗体量。,乳胶间接乳胶凝集试验,用途：检测类风湿因子等。,第17页,间接凝集抑制试验,妊娠试验,（已知）,（已知）,（已知）,（已知）,第18页,反向间接凝集试验,一些传染病和原发性肝癌早期诊疗。,第19页,四、试验操作内容,（一）玻片法,ABO,血型判定（每人做）,用已知血型,Ab,测未知血型,Ag；,为定性试验。,ABO,血型系统,血型 红细胞表面血型,Ag,血清中血型,Ab,A,型,A,抗,B,B,型,B,抗,A,AB,型,A、B,O,型 抗,A,、抗,B,第20页,1.,材料,已知,Ab：,标准血清 抗,A,、抗,B,待测,Ag：,红细胞血型抗原,第21页,2.,操作步骤,(1),无菌操作采血(无名指尖),于,NS,试管,形成约,25%红细胞,(RBC),悬液；,(2),准备1张载波片,；,(3),加血清,(Ab),各1滴,；,(4),加,RBC,各1滴；,(5),摇摆混匀,；,(6),结果判断(10-15分钟后)。,第22页,3.,结果判断,凝集者：出现红色颗粒状或块状凝集物；,不凝集者：呈红色均匀混浊。,(1),若抗,A,凝集，抗,B,不凝集,A,型血,(2),若抗,A,不凝集，抗,B,凝集,B,型血,(3),若抗,A,、抗,B,均凝集,AB,型血,(4),若抗,A,、抗,B,均不凝集,O,型血,在白背景上观察,凝集,不凝集,第23页,4.,注意事项,(1),适度,RBC,悬液浓度，约2-5%,；,(2),抗,A,和抗,B,不能混用；,(3),在白色背景上观察效果很好。,第24页,（二）间接乳胶凝集试验,类风湿因子检测,类风湿关节炎患者血清中存在：,变性,IgG Ag,抗变性,IgG,抗体,(,类风湿因子,)Ab,临床上用检测类风湿因子以辅助诊疗类风湿关节炎。,第25页,1.,材料,已知,Ag：,致敏乳胶,(,乳胶颗粒表面有,变性,IgG,),待测,Ab：,待检血清中,类风湿因子,待测,Ab,已知,Ag,第26页,2.,检测步骤：,(1),取黑底纸片三片；,(2),加待测血清、阳性和阴性对照血清各1滴；,(3),各加1滴致敏乳胶,用牙签混匀；,(4),5分钟后观察结果，以黑背景观察为佳。,阳性者现象：呈乳白色细沙状（乳胶凝集）；,阴性者现象：呈乳白色均匀混浊。,第27页,完成试验汇报,试验一 凝集反应,一、直接凝集反应（玻片法）,ABO,血型判定,1.材料,2.操作步骤,3.结果判断,（自己血型）,4.试验讨论,二、间接凝集反应类风湿因子测定,1.材料,2.操作步骤,3.结果判断,（自己血型）,4.试验讨论,第28页,思索题,1.试述血清学反应、凝集反应概念。,2.简述凝集反应类型、用途及实例。,3.,怎样判断,ABO,血型检测结果？,第29页,