流式多因子检测技术.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,流式高通量多因子检测技术及应用,1,题纲,II,.,AimPlex,多因子检测技术的原理和特质,III.,需具备什么样的实验条件，才能开展,AimPlex,检测工作？,VI.,AimPlex,产品应用,I.,多因子检测技术在生物医药研究中的应用,2,流式多因子检测技术,在生物医药研究中的应用,3,细胞因子与疾病,免疫调节作用：,调节着每个细胞乃至组织活动；,直接参与了细胞间相互作用以及细胞外微环境的变化,参与疾病发生：,类风湿性关节炎；强直性脊柱炎,SLE,；银屑病；细胞因子风暴,以,Th,淋巴细胞为枢纽的细胞因子调节网,4,细胞因子与疾病治疗,5,多因子检测技术,6,Luminex,平台,CBA,Flowcytomix,流式基础上,AimPlex,流式多重定量技术,-,检测细胞表面蛋白或胞内蛋白,7,多因子检测与疾病研究,肿瘤生物学,免疫相关,代谢,心血管疾病,干细胞研究,神经生物学,肿瘤移植,细胞凋亡,更少样本,高通量,更短时间,8,多因子检测涵盖了很多研究领域,9,多因子检测产品广泛应用于疾病的研究,肿瘤,(,如肝癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、子宫颈癌等,),心血管疾病,(,如,高血压,、,动脉粥样硬化,),糖尿病、肥胖症,自闭症、老年痴呆症,自身免疫性疾病,(,系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、哮喘、,过敏反应等,),炎症感染,(,如结肠炎、克罗恩氏病、败血症等,),传染性疾病,(,如艾滋病、肝炎等,),其它,(,如多发性硬化症、营养不良、青光眼、阻塞性肺病、银,屑病等,),10,多因子检测应用领域,开发研究,大学,政府专业管理机构,医学中心,药物研发,生物技术企业,药物公司,临床研究,医院,医学中心,早期诊断,临床实验室,大学检测测试中心,实验室诊断,医院,专业检测机构,所有流式细胞仪客户,基础医学、生物学研究,基础免疫学研究,细胞生物学如信号传导、凋亡,癌症研究、传染病等,药物开发和疗效研究,11,什么是,AimPlex,多因子检测技术？,AimPlex,多因子检测技术利用不同尺寸、不同荧光强度的多个微球群实现多因子的检测,利用该技术，配合任何一台配备,488nm,激发光的流式细胞仪，即可实现,24,个指标的同步检测。,12,AimPlex,技术原理,流式细胞仪检测荧光，从而实现对蛋白抗原的检测；,结合抗原标准品的标准曲线，可实现对蛋白抗原的定量检测,。,一系列荧光强度不同的微球包被有特异性捕获抗体，与待,测样本孵育后，加入检测抗体，形成“三明治”复合物,13,4,5,1,2,3,不同大小，不同荧光强度的捕获微球，在,FCM FL4,检测,不同的目标蛋白,PE,荧光强度即为靶蛋白量,4,5,6,1,2,3,微球,14,FL2(Reporter Parameter),FL4(Differentiator Parameter),不同大小种类微球分布,15,AimPlex,检测过程,16,具有,488nm,激发光源,AimPlex,结果的提取和分析,流式细胞仪,：,几乎所有流式细胞仪都可以使用，只要,FCAP Array 3.0,软件可计算被测样本中待检物的浓度,17,标准曲线分析,FCAP array 3.0 Software,曲线自动生成,线性或对数形式显示,回归曲线拟合,18,Human Th1/Th2 Standard:Blank,样本检测举例,19,Human Th1/Th2 Standard:14 pg/ml,20,Human Th1/Th2 Standard:42 pg/ml,21,Human Th1/Th2 Standard,:,123 pg/ml,22,Human Th1/Th2 Standard:370 pg/ml,23,Human Th1/Th2 Standard:1,111 pg/ml,24,Human Th1/Th2 Standard:3,333 pg/ml,25,Human Th1/Th2 Standard:10,000 pg/ml,26,Human Th1/Th2 unknown 1,27,Human Th1/Th2 unknown 2,28,AimPlex,优势,高通量，多指标,同时检测一个标本多达,24个指标,需要标本量少,节省样品（,25 L,）、试剂、实验空间、仪器设备,选择灵活,研究人员可以根据实验需要，自由组合检测指标,耗时短,整个过程只需,3,个多小时,要求低,-,适用于所有含,488,激发光的流式细胞仪,宽范围，高灵敏,-,更宽检测范围，高灵敏度，高特异性，高重复性,29,更宽的检测范围,Lower concentration range standard curve for better calculation of samples with very low AFP concentration,药明康德客户需求：检测小鼠肝癌模型的,AFP,浓度,30,AimPlex and Luminex,产品对比,人外周血不同处理后分别用,Aimplex Th1/Th2/Th17(7,个指标）检测和,Luminex,试剂盒检测结果对比,31,AimPle,x,ELISA,AimPlex,ELISA,样本量,15uL,350-700ul,所需检测板,1,块,7,块,操作时间,4h,47h,检测范围,2-5000pg/mL,2-1500pg/ml,反应体系,同一,不同,价格,10800,元,18000,元,V,S,例子：,40,个样本,7,个指标：,IFN-gamma,IL-10,IL-17A,IL-2,IL-4,IL-6,TNF-alpha,32,可供测试的样品来源高度多样化,血清,血浆,脑脊液,条件培养基,各种细胞裂解液,各种组织裂解液,-,肺、支气管、子宫内膜组织、肝、脾、脑、宫颈等组织。,泪液,前列腺液,初乳、,羊水,各种,脓肿液,腹水、肝囊肿液,支气管肺泡灌洗液,骨裂解液、滑液等,龈沟液、,唾液、痰液,血凝块,普通常见样品,非常规样品,几乎所有液质,(,fluids,),的生物样本！,33,小鼠血凝块样本检测,Serum and blood clot lysate samples of mice treated with or without(Con)LPS were tested using AimPlex mouse cytokine assays.This experiment indicates that besides serum,blood clot(after lysed with AimPlex lysis buffer)can be used for measurements of many cytokines in blood and precious serum samples can be saved for other assays.,34,AimPlex,产品形式,单因子检测试剂盒,预混多因子检测试剂盒,种属,：人、小鼠、大鼠、灵长类，狗,低价定制,35,Th1/Th2/Th17 7-plex,kit,T,辅助细胞对免疫系统的建立和功能健全起重要作用。,AimPlex,人和鼠及,NH PTh 17,多重检测系列产品可同步定量检测由,Th1,，,Th2,，,Th17,和,Treg,细胞分泌的细胞因子，为,Th,细胞功能鉴定提供有效的检测工具。,IFNgamma,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-17A and TNFalpha,36,需具备什么样的实验条件，才能开展多因子检测工作？,37,AimPlex,易于在普通实验室开展,AimPlex Filter Plate Washer,38,AimPlex,不同应用领域试剂盒,应用分组名称,候选待检物,呼吸道炎症组,sCD30,sE-selectinsICAM-1,IL-4,IL-5,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12p70,IL-13,IL-17A,IFN-gamma,MCP-1,TNF-alpha,sVCAM-1,NGF,特应性皮炎组,sCD30,sICAM-1,IL-4,IL-5,IL-13,TNF-alpha,扩充的心血管组,Adiponectin,sCD40L,CRP,sE-selectin,sICAM-1,IL-1beta,IL-6,IL-8,MCP-1,MPO,PAI-1,sP-selectin,TNF-alpha,t-PA,sVCAM-1,糖尿病组,Adiponectin,CRP,sICAM-1,IFN-alpha,IFN-gamma,Iso-Insulin,IL-1beta,IL-6,IL-8,IL-10,Leptin,MCP-1,MIP-1alpha,MIP-1beta,NGF,PAI-1,Resistin,TNF-alpha,TNF-beta,t-PA,生长和分化组,G-CSF,IFN-alpha,IFN-gamma,IL-1beta,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12p70,IL-13,IL-23,MCP-1,NGF,TNF-alpha,免疫调控组,sCD30,sCD40L,IL-4,IL-6,IL-10,IL-12p70,IL-13,IL-23,IFN-alpha,IFN-gamma,TNF-alpha,炎症组,sCD30,sCD40L,CRP,sE-selectin,G-CSF,sICAM-1,IFN-alpha,IFN-gamma,IL-1beta,IL-4,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12p70,IL-13,IL-17A,IL-23,MCP-1,MIG,MIP-1alpha,MIP-1beta,sPECAM-1,sP-selectin,TNF-alpha,sTNF-R1,sVCAM-1,多发性硬化症组,sCD30,sICAM-1,IFN-gamma,IL-4,IL-8,IL-10,IL-12p70,IL-17A,MCP-1,MIP-1beta,TNF-alpha,TNF-beta,sVCAM-1,39,AimPlex,不同应用领域试剂盒,扩充的肥胖症组,Adiponectin,sCD40L,CRP,sICAM-1,IL-6,Leptin,MCP-1,MPO,NGF,OPG,PAI-1,Resistin,TNF-alpha,sTNF-R1,疼痛组,sICAM-1,IL-1beta,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12p70,IFN-gamma,MCP-1,MIP-1 alpha,MIP-1beta,NGF,TNF-alpha,sVCAM-1,先兆子痫组,Adiponectin,IFN-gamma,IL-4,IL6,IL-8,IL-10,IL-12p70,TNF-alpha,类风湿性关节炎组,sCD30,sE-selectin,sICAM-1,sICAM-3,IFN-alpha,IL-1beta,IL-2,IL-4,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12p70,IL-13,IL-17A,IL-23,MCP-1,MIP-1alpha,sP-selectin,TNF-alpha,sVCAM-1,脓毒症,/,败血性休克症组,Sepsis(CRP,sE-selectin,IL-1beta,IL-4,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12p70,MCP-1,MIP-1 alpha,MIP-1beta,PAI-1,TNF-alpha,sVCAM-1),Septic shock(IL-1beta,IL-4,IL-6,IL-8,IL-10,IL-13,IFN-gamma,G-CSF,MCP-1,PAI-1,TNF-alpha),系统性红斑狼疮组,sCD30,sCD40L,IFN-alpha,IL-6,IL-10,IL-12p70,IL-13,NGF,TNF-alpha,sVCAM-1,肿瘤坏死因子/肿瘤坏死因子受体组,sCD30,sCD40L,NGF,OPG,TNF-alpha,TNF-beta,sTNF-R1,移植组,CRP,ICAM and VCAM,sVCAM-1,sCD30,sICAM-1,IFN-alpha,IFN-gamma,IL-1beta,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,MCP-1,MIG,MIP-1 alpha,TNF-alpha,肿瘤生物学组,sCD30,sCD40L,IFN-gamma,IL-1beta,IL-2,IL-4,IL-6,IL-8,IL-10,IL-23,MCP-1,MIP-1 alpha,MIP-1beta,NGF,TNF-alpha,TNF-beta,sICAM-1,sICAM-3,sE-selectin,sP-selectin and sVCAM-1,40,