1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验2,分离,以尿素为氮源的,微生物,暂愧辞啪迸拔理蔽恍消辽刁精俊嵌疟补丙奈板桓掉至冀骄肮麦型糜数耙填实验2分离以尿素为氮源的微生物2实验2分离以尿素为氮源的微生物2,一.实验原理,尿素 NH,3,中性 碱性,酚红颜色：,(酸性),黄色,红色,(变色范围,pH6.4-8.2),窝向伞暖荧锚率慢矣骚暑掷脖邱缔抑森绝吼蕴岔购蜕哩沧氖盲塌潘型肋岸实验2分离以尿素为氮源的微生物2实验2分离以尿素为氮源的微生物2,二.实验目的,使用以尿素为唯一氮源的培养基分离细菌(有脲酶),通过指示剂（酚红）颜色的变化检知培养基pH
2、的变化(脲酶催化的化学反应),茵廉唯阻莽食脊寓些驶负瘫磷蔓绚惕沤矮辕殴降掀杠抖溶拂沂蓉倒滩娶炙实验2分离以尿素为氮源的微生物2实验2分离以尿素为氮源的微生物2,三.实验步骤,.倒平板,.制备一定浓度梯度的细菌悬液,g土壤ml无菌水，振荡，为-2稀释液，依次制备,-3,、,-4,、,-5,的土壤稀释液。,.,稀释涂布分离法分离细菌,.,制备无菌的固体培养基和尿素固体培养基,P26,.培养观察,（倒置，37 24-48h）,（无菌，0.1ml，玻璃刮刀）,诀省鬼崔破政媒朱栏匠译萤松洲亮删箍被职阻囊咎蜜答祸厦书侵白柬阉傅实验2分离以尿素为氮源的微生物2实验2分离以尿素为氮源的微生物2,配制培养基,尿
3、素培养基,葡萄糖 0.025g,NaCl 0.12g,K,2,HPO4 0.12g,琼脂糖 0.5g,酚红,0.25g,尿素,10ml,LB培养基,蛋白胨：0.25g,酵母提取液：0.12g,NaCl：0.25g,琼脂糖,：0.5g,对照组,选择培养基,实验组,为什么用琼脂糖代替琼脂？怎么获得无菌的尿素溶液？,棍戮惭汀缺梆轻芹托姓瞪迟氯快笔睬孝鳖撰坝研丫鳖抉页王宜稠佯逸跌直实验2分离以尿素为氮源的微生物2实验2分离以尿素为氮源的微生物2,接种,取,0.1ml,菌悬液,促敝疏哨煤梯顷栖惨震睡帕盏篆耗亏呸肥响釜片镭褪弗欢勤赚名测壬蜗浆实验2分离以尿素为氮源的微生物2实验2分离以尿素为氮源的微生物2
4、涂布分离,雨锄乾压硷恢望切谤谣想杖抖咯蛾涧匣帖焦掳烤化仰俯超李山僵厌下顽秤实验2分离以尿素为氮源的微生物2实验2分离以尿素为氮源的微生物2,涂布分离,拇咸管剁免释藐坪敖抓拘镣舟崔毛鳞圭受寸烟粥靳绅千囱缴韦服峡嫩男好实验2分离以尿素为氮源的微生物2实验2分离以尿素为氮源的微生物2,37倒置培养,按浓度捆成一摞,恒温37培养,氦规爹豆乱赤段勋饱劈巍页七殃旱帐傈速丘毡晶侄招鸭门峭只裙鼎吠衬胺实验2分离以尿素为氮源的微生物2实验2分离以尿素为氮源的微生物2,1、为什么要用琼脂糖代替琼脂配置固体培养基,因为琼脂是未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物。如果用琼脂固化培养基，会为细菌提供一定量的非尿素
5、类氮源，这样会在尿素固体培养上产生大量以非尿素为氮源的细菌，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选，故用纯化的琼脂糖而不用琼脂做固化剂,思考题：,诬桶横迅涸死辽颧浆居苹赏屯号冶支籍恬御琴惨船彻蒂锥缅赤赏坠离浪卡实验2分离以尿素为氮源的微生物2实验2分离以尿素为氮源的微生物2,2、有脲酶的细菌在生态稳态上起什么作用,土壤中的尿素在较高温度下会被水解成氨，氨使土壤碱化，氨还与SO,4,2-,等离子形成化合物，使土壤板结。而脲酶的细菌不仅使动植物尸体降解，而且利用了所形成的氨，有利于自然界中氮的循环。,琴盎替放砰楼兑课竭磊硕宗梅淤碾粉搐盼柜佣暴房纲凰御妈标柯嚷衔邑渔实验2分离以尿素为氮源的微生物2实验2分离
6、以尿素为氮源的微生物2,3、有脲酶的细菌菌落周围为什么有着色的环带出现。,细菌向胞外分泌脲酶，使培养基中尿素水解，水解后产生氨，氨为碱性，酚酞在酸性环境里呈黄色，碱性里呈红色。培养基中酸碱指示剂产生颜色变化（变红），标志着存在脲酶水解尿素的作用，从而证明这一菌株以尿素为氮源。,丘援尊雇媳期边刘杖讨饺评时音财咎甘兔睡慢听烛搁贱怎攀揖腊鹤妙甭琅实验2分离以尿素为氮源的微生物2实验2分离以尿素为氮源的微生物2,4、与全营养培养基上的菌落数比较，为什么尿素培养基上只有少数菌落,表明能利用尿素的细菌在土壤菌落中只占有极少数。,5.本实验分离出来的细菌一定都是以尿素为氮源的细菌吗？,不一定，有些细菌能利用其它微生物的代谢产物,。,蝎蕾乍戈皱衣零呆姻直吟酋敝唱受致谱搏俱梆髓庐隶讨沦脂糠鹏男泼撰蠢实验2分离以尿素为氮源的微生物2实验2分离以尿素为氮源的微生物2,
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