生化常规中的胆碱酯酶临床意义.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,胆碱酯酶,胆碱酯酶构成,胆碱酯酶（cholinesterase）是一类糖蛋白，以多种同工酶形式存在于体内。一般可分为真性胆碱酯酶和假性胆碱脂酶。,体内胆碱酯酶两部分构成,一种是乙酰胆碱酯酶（Acetylcholinesterase，ACHE），旧称特异性胆碱酯酶、真胆碱酯酶等，ACHE 可见于红细胞、中枢神经系统的灰质内，它重要功能是支配肌肉细胞的交感神经节的运动神经终板，ACHE 还存在肺脏和脾脏内，不过其不存在于人体血浆内。此酶的功能是仅水解胆碱脂类，并不水解芳基或烷基酯类。乙酰胆碱乙酰水解酶在神经末梢完毕乙酰胆碱的释放，调整神经冲动经突触到末梢器官传送。,一种为丁酰胆碱酯酶（Butyryl Cholineseerase,Bu CHE），旧称非特异性胆碱酯酶、拟胆碱酯酶、苯甲酰胆碱酯酶、胆碱酯酶或 S-型胆碱酯酶。它可见于血浆、肝脏、肠黏膜、胰脏、脾脏和中枢神经系统的白质内。此酶不仅裂解胆碱脂类，并且还包括苯甲酰胆碱、丁酰胆碱、芳基和烷基脂累。,丁酰胆碱酯酶在机体中的作用,丁酰胆碱酯酶在肝脏合成后立即释放到血浆中，故血清胆碱酯酶浓度一般可以反应出肝脏的合成速率，可以精确的反应肝脏的合成和储备功能。在肝脏受损时，它能反应肝实质细胞损害的程度。胆碱酯酶的半衰期只有 12 天，血清胆碱酯酶的减少往往先于血清白蛋白，能在初期反应肝功能的变化。,胆碱酯酶机体作用,胆碱酯酶蛋白分子表面的活性中心有两个能与乙酰胆碱结合的部位，即带负电荷的阴离子部位和酯解部位。酯解部位具有一种由丝氨酸的羟基构成的酸性作用点和一种由组氨酸咪唑环构成的碱性作用点，两者通过氢键结合，增强了丝氨酸羟基的亲核活性，使之易于与乙酰胆碱结合。,检查原理,措施学使用丁酰硫代胆碱作为胆碱酯酶的特定底物。胆碱酯酶催化丁酰硫代胆碱底物的水解，形成丁酸和硫代胆碱。硫代胆碱使铁氰化物（）还原成铁氰化物（）。吸光度的减少与样本中胆碱酯酶的活性成正比。,检测措施,血清胆碱酯酶活性检测采用 DTNB 比色法的优化改良检测法:将患者外周静脉血，4 低温离心处理，以离心半径 12 cm，3 000 r/min 离心 10 min 处理后取血清进行检测，采用 DTNB 溶液作为显色液，将测定试剂混合摇匀，放置 20 min 后采用 436 nm比色，获取检测值。设置吸取峰值为 436 nm，检测比色测光密度值，检测值越高则表达血清胆碱酯酶的活性越高。,血清胆碱酯酶活性检测采用 DTNB 比色法的优化改良检测法:将患者外周静脉血，4 低温离心处理，以离心半径 12 cm，3 000 r/min 离心 10 min 处理后取血清进行检测，采用 DTNB 溶液作为显色液，将测定试剂混合摇匀，放置 20 min 后采用 436 nm比色，获取检测值。设置吸取峰值为 436 nm，检测比色测光密度值，检测值越高则表达血清胆碱酯酶的活性越高。,DTNB 比色法以硫代乙酰胆碱为基质,以DTNB为显色剂,以毒扁豆碱或硫酸奎尼丁为酶反应终点克制剂以及以谷胱甘肽为酶活性原则物,测定 RBC-ACh E。该法操作简朴,精密度较高,适合于一般试验室使用，但目前常使用铁氰化钾还原反应为显色剂。,检查措施局限性,血红蛋白,50g/L,结合胆红素,60mg/dL,非结合胆红素,60mg/dL,维生素,C30mg/dL,甘油三酯,3265mg/dL,符合上述条件时对检测加过无干扰,样本类型及稳定性,血清CHE相对稳定，4下可稳定数周，-20如下时可稳定数年,胆碱酯酶性质,1,酶多态性,2,专一性,检测意义,正常人血清胆碱酯酶用比色法测得含量为130310单位/升。由于血清胆碱酯酶由肝脏合成，故此酶活性减少常常反应肝脏受损。,1、急性病毒性肝炎：患者血清胆碱酯酶减少与病情严重程度有关，与黄疸程度不一定平行，若活力持续减少，常提醒预后不良。,2、慢性肝炎：慢性迁延型肝炎患者此酶活力变化不大，慢性活动型肝炎患者此酶活力与急性肝炎患者相似。,3、肝硬化：若处在代偿期，血清胆碱酯酶多为正常，若处在失代偿期，则此酶活力明显下降。,4、亚急性重型肝炎患者尤其是肝昏迷病人，血清胆碱酯酶明显减少3，且多呈持久性减少5、肝外胆道梗阻性黄疸患者，血清胆碱酯酶正常，若伴有胆汁性肝硬化则此酶活力下降。,临床诊断,在临床中,测定血清胆碱酯酶活性是协助诊断有机磷中毒和评估肝实质细胞损害的重要手段.脂肪肝患者除有三酰甘油明显增高及胆固醇和apo-B明显升高外,血清胆碱酯酶也明显升高,有推断:高脂血症时脂肪酸合成和转换增长,导致肝中酰基coA积累,继而产生酰基胆碱等,因此胆碱酯酶活性升高也许系过多底物诱导肝合成酶增长的成果,脂肪肝患者CHE平均水平较正常对照组比较明显升高,是脂肪肝患者又一突出的生化指标.此外,血清胆碱酯酶活性增高还重要见于肾脏疾病,肥胖,脂肪肝,甲状腺功能亢进症等,也可见于精神分裂症,溶血性贫血,巨幼细胞性贫血等.血清胆碱酯酶水平可以作为判断病情程度和预后的一项临床指标.,有机磷农药有哪些？,我国常用的有机磷农药包括敌敌畏、对硫磷、乐果、敌百虫马拉硫磷、甲氟磷（dimefox）、丙胺氟磷（mipafox）和八甲磷(schradan)、对氨基甲酸酯杀虫剂等。,有机磷中毒机理,有机磷可通过多种方式进入人体，导致神经系统损伤。有机磷进入人体后，会迅速集中到神经突触周围，并且会特异性的克制乙酰胆碱酯酶，形成中毒酶并在神经突触附近大量蓄积，使神经中枢持续性兴奋，并最终导致患者先兴奋后衰竭而死亡。,有机磷中毒分级,有机磷中毒诊断常用原则,轻度:以毒蕈碱样症状为主，体现为恶心、呕吐、腹痛、腹泻、尿频大小便失禁、多汗、流泪、流涎、心率减慢、瞳孔缩小、气道分泌物增长、支气管痉挛等，严重者可出现肺水肿。,中度:毒蕈碱样症状加重，出现烟碱样症状，体现为颜面、眼睑、舌、四肢和全身横纹肌发生肌纤维颤动，甚至强直性痉挛。,重度:除毒蕈碱样、烟碱样症状外，还合并脑水肿、肺水肿、呼吸衰竭、抽搐、昏迷等。,有机磷中毒治疗,治疗措施 经临床、病史及试验室诊断明确有机磷中毒后，所有有机磷中毒患者均按照常规治疗方案实行治疗，详细措施如下:所有患者均建立常规心电监护，检测血液指标，及时清洗胃内残留毒物，导泻，若检测成果提醒血清有机磷含量过高，则及时实行血液灌流治疗。同步予以患者胆碱酯酶复活剂，根据患者病情发展状况予以静脉注射阿托品。,重型中毒患者:首剂 5 20 mg，静脉滴注阿托品，每隔30 分钟应用 1 次，必要时可增长每次注入量;达阿托品化后可逐渐减为 2 5 mg，每 1 2 小时 1 次直到患者中毒症状基本消失，血清检测显示有机磷中毒程度有所改善，则可停止注射阿托品。治疗过程中亲密观测患者生命体征，若出现呼吸衰竭、心搏骤停、电解质失衡等症状应予以对症急救处理。,阿托品,阿托品（Atropine），又称阿托平。是一种用来治疗神经毒气或杀虫剂中毒（Pesticide poisoning）的药物，也用在某些心跳过缓，与手术时减少唾液分泌用，一般会以静脉注射或肌肉注射给药，眼药水剂型使用于治疗葡萄膜炎（英语：uveritis）与初期弱视。腺体分泌减少，瞳孔扩大和调整麻痹，心率加紧，膀胱和胃肠道平滑肌的兴奋性减少，胃液分泌克制，中毒剂量则出现中枢症状。对乙酰胆碱和拟胆碱能药（包括抗胆碱酯酶药）具有拮抗作用。大剂量阿托品加紧心率、小剂量减慢心率。对眼的作用包括瞳孔扩大、眼压升高和调整麻痹（滴眼时就可产生）。,使汗腺、涎腺、鼻腔和支气管分泌减少，正常的骨骼肌张力减少。大剂量可解除小血管痉挛。可解除迷走神经对心脏的克制作用，使心率加紧。有抗休克作用，大剂量时可解除血管痉挛，扩张外周与内脏血管，使局部血流灌注量增长。可兴奋呼吸中枢，对抗体内蓄积的乙酰胆碱而解除有机磷农药中毒。口服后迅速吸取，也可从黏膜、眼睛、完整皮肤吸取阿托品是副交感神经克制剂，可作眼科的扩瞳剂；可缓减干草热、伤风鼻阻和肠痉挛；可用于治疗小儿夜尿症，有时用于舒减输尿管和胆道痉挛；还可用于治疗有机磷引起的中毒，作为抗胆碱药，阿托品的多方面药理作用,不利于其临床应用。现已陆续合成了某些具有专一作用的代用品，例如作为扩瞳剂的后马托品。阿托品毒性较大，剂量过大时可引起视觉模糊、分泌闭止、血管扩张、高热、兴奋、激动和谵妄。它是吗啡、毛果芸香碱、毒扁豆碱等的拮抗剂。,（1)急救感染中毒性休克：成人每次12mg，小儿0.030.05mg/kg，静注，每1530分钟1次，23次后如状况不见好转可逐渐增长用量，至状况好转后即减量或停药。2)治疗锑剂引起的阿-斯综合征：发现严重心律紊乱时，立即静注12mg(用5%25%葡萄糖液1020ml稀释），同步肌注或皮下注射1mg，1530分钟后再静注1mg。如病人无发作，可根据心律及心率状况改为每34小时皮下注射或肌注1mg，48小时后如不再发作，可逐渐减量，最终停药。,临床用途,（3)治有机磷农药中毒：与解磷定等合用时：对中度中毒，每次皮下注射0.51mg，隔3060分钟1次；对严重中毒，每次静注12mg，隔1530分钟一次，至病情稳定后，逐渐减量并改用皮注。单独使用时：对轻度中毒，每次皮下注射0.51mg，隔30120分钟1次；对中度中毒，每次皮下注射12mg，隔1530分钟1次；对重度中毒，即刻静注25mg，后来每次12mg，隔1530分钟1次，根据病情逐渐减量和延长间隔时间。,（4）缓和内脏绞痛：包括胃肠痉挛引起的疼痛、肾绞痛、胆绞痛、胃及十二指肠溃疡，每次皮下注射0.5mg。在治疗胆绞痛，肾绞痛时应与吗啡或哌替啶联。,5)用于眼科：可使瞳孔放大，调整功能麻痹，用于角膜炎、虹膜睫状体炎。用1%3%眼药水滴眼或眼膏涂眼。滴时按住内眦部，以免流入鼻腔吸取中毒。,THANKS,