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专题1 基因工程
基因工程的概念
基因工程是按照人们的意愿，将一种生物的基因导入另一种生物体内，创造出符合人们需要的生物新类型和生物产品，又叫做DNA重组技术。
操作环境：生物体外； 操作水平：分子水平；
操作对象：基因（或DNA）； 能定向改变生物的遗传特性。
（一）基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）
（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
（2）功能：识别双链DNA分子的特定的核苷酸序列，并在特定位点切割两个核苷酸之间的磷酸二酯键，因此具有专一性。
（3）限制酶切割的结果：黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针”——DNA连接酶
(1)两种DNA连接酶的比较：
①相同点：都能缝合双链DNA片段之间的磷酸二酯键。
②区别：
(1)E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能连接黏性末端；T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，能缝合两种末端，连平末端效率较低。
(2)与DNA聚合酶的比较:
异：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，需要模板；而DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，不需要模板。
同：都形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体（不管哪种载体都需要人工改造）
（1）具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶识别位点。
③具有标记基因，供鉴定和选择。
（2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的（不与蛋白质结合）、独立于细菌拟核DNA之外，具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
（3）其它载体： 噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
（4）限制酶、DNA连接酶和DNA聚合酶化学本质都是蛋白质；
质粒的化学本质为DNA。
(二)基因工程的基本操作程序
原核基因与真核基因：
1、 原核基因

2、 真核基因

第一步：目的基因的获取
1.目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因 。
2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反（逆）转录法和化学合成法。
补充：
Ⅰ、原核基因编码区不含内含子，可直接用于物种间的基因交流。
Ⅱ、真核基因含有内含子，而原核生物没有内含子的剪切拼接系统，因而不能直接在原核生物中表达。
Ⅲ、反转录法：以mRNA为模板，在逆转录酶的催化作用下，得到一条与该mRNA互补的DNA单链；然后经核酸酶（水解RNA的酶）的作用水解掉mRNA；然后以此条DNA链为模板，在DNA聚合酶的催化作用下，得到双链DNA（即cDNA）。
Ⅳ、用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录得到的多种cDNA，构建成的基因文库为部分基因文库，叫做cDNA文库。
Ⅴ、对于真核生物而言，反转录得到的cDNA不含内含子和非编码区，人工加上启动子和终止子后，可直接用于基因的交流。
3.PCR技术扩增目的基因
（1）原理：DNA双链复制
（2）过程：第一步（变性）：加热至90～95℃DNA解链（高温使氢键断裂）；第二步（复性）：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步（延伸）：加热至70～75℃，在热稳定DNA聚合酶催化作用下，从引物处起始互补链的合成。
（3）需要引物的原因：因为DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已存在的核苷酸片段的末端，所以需要引物作为子链延伸的起点。
（4）在生物体内进行DNA复制时：解旋方式为解旋酶催化；温度条件温和；也需要引物。
第二步：基因表达载体的构建（基因工程的核心）
组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因
（1）启动子：是一段DNA片段，位于基因首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA。
（2）终止子：也是一段DNA片段，位于基因的尾端，使转录停止下来。
（3）标记基因：为了鉴定受体细胞中是否已导入有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。
（4）若目的基因来自于基因组文库或直接从生物体中提取，本身已携带有启动子和终止子；若目的基因来自于cDNA文库，刚需另外加上启动子和终止子。
（5）要让标记基因发挥作用，得保证标记基因的完整，因此所用限制酶的切割位点需在标记基因以外的位置。
第三步：将目的基因导入受体细胞
常用的转化方法：
导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还有基因枪法（导入单子叶植物常用方法）和花粉管通道法（中国科学家独创）等。农杆菌转化法原理： ①农杆菌能感染双子叶植物和裸子植物. ② 农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上。因此，若将目的基因插入到T-DNA中，就可随T-DNA整合到植物细胞的染色体DNA中。
导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。受体细胞多是受精卵。
导入微生物细胞：最常用的原核细胞是大肠杆菌，转化方法是：用 Ca2+ 处理细胞，使其成为感受态细胞，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。
第四步：目的基因的检测和表达
1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。
2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用标记的目的基因作探针与mRNA杂交（DNA-RNA分子杂交）。
3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。
4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
注意：
不同生物的DNA能够连接在一起的原因：基因结构相同。
目的基因在受体细胞中表达出相应蛋白质的原因：共用一套遗传密码子。
（三）基因工程的应用
1、植物基因工程
用于杀虫的基因主要是Bt毒蛋白基因（来自于苏云金芽孢杆菌），Bt基因编码的蛋白质在害虫的肠道中被降解为较小的、有毒的多肽，多肽结合于肠上皮细胞的特异性受体上，导致细胞膜穿孔，细胞肿胀裂解，最后害虫死亡。
2、动物基因工程
（1）用外源生长激素基因提高动物的生长速率，要区别于植物的生长素。
（2）乳腺（或乳房）生物反应器：指通过分泌的乳汁来生产所需要药品的转基因雌性动物个体。在培育时，药用蛋白基因前须加上只在乳腺组织细胞中才启动转录过程（组织特异性）的启动子。现在又出现了膀胱生物反应器：由膀胱上皮细胞合成目的蛋白，并分泌到膀胱腔中，再随尿液排出体外；不分雌雄，皆可生产药用蛋白。
（3）用猪作为异种器官移植供体的优点：猪的内脏构造、大小、血管分布与人极为相似；缺点：存在免疫排斥反应，这是由于猪器官细胞表面的抗原蛋白（由抗原决定基因编码）刺激受体的免疫系统引起细胞免疫造成的。解决方法：在器官供体基因组导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或直接除去之。
（4）由基因治疗的概念可知，基因治疗不是修复或切除原有基因，而是导入正常基因以补偿功能的缺陷。因此，在细胞中正常基因和异常基因同时存在。由于正常基因只是导入了体细胞中以改善患者的功能，所以不能遗传给下一代。
（5）基因治疗包括体外基因治疗和体内基因治疗。基因治疗目前还处于临床实验阶段，没有大规模生产应用。
蛋白质工程的概念
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。
（1）基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质；
蛋白质工程生产满足人们生产和生活需要但非自然界已存在的蛋白质。
（2）由于基因控制蛋白质的合成，因此蛋白质工程改造蛋白质时，是通过改造基因实现的。而且改造过的基因可以遗传给下一代。
（3）目前蛋白质工程成功的例子不多，主要是因为蛋白质发挥功能依赖于正确的空间结构，而目前对大多数蛋白质的空间结构了解还很不够。

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专题2 细胞工程
（一）植物细胞工程
1.理论基础（原理）：细胞全能性
细胞具全能性的原因：细胞中含有该物种的全部遗传信息（或基因）。
全能性表达的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞；未分化或分化程度低的细胞＞分化程度高的细胞；细胞的分化程度不断提高，全能性逐渐减小。
2.植物组织培养技术
（1）过程：离体的植物器官、组织或细胞（外植体） ―（脱分化）→愈伤组织 ―(再分化)→胚状体或丛芽→试管苗 →植物体
Ⅰ、愈伤组织的特点：其细胞排列疏松而无规则 ，是一种高度液泡化的呈无定形状态的具分生能力的薄壁细胞
Ⅱ、培养基中的糖为蔗糖:一能作为碳源供能；二能维持较稳定的渗透压。
Ⅲ、当生长素和细胞分裂素比例不同时，产生的效果不同。
当生长素含量高于细胞分裂素时，诱导脱分化和根的形成；
当生长素含量低于细胞发裂素时，诱导再分化和芽的形成；
当二者比例适中时，愈伤组织只分裂不分化。
Ⅳ、诱导外植体脱分化时要避光；诱导再分化时给予光照。
（2）用途：微型繁殖、作物脱毒（选用分生区附近的细胞作为外植体）、制造人工种子（人工种皮起保护作用，人工胚乳提供营养、植物激素类似物等）、单倍体育种（用的是生殖细胞，生殖方式为有性生殖）、细胞产物的工厂化生产（只需培养到愈伤组织即可）。
（3）地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。
3.植物体细胞杂交技术
（1）过程：

（2）去壁方法：酶解法（用纤维素酶和果胶酶）。
（3）原生质体：细胞核+细胞质+细胞膜。
原生质层：液泡膜+细胞膜+两层膜之间的细胞质。
（4）由于融合是随机融合，因此要进行选择。考虑两个原生质体间的融合，有三种融合的原生质体。
（5）原生质体融合成功的标志：再生出细胞壁（有高尔基体和线粒体参与）。
（6）杂种细胞的基因型，染色体组数，染色体数目皆为亲代细胞的之和。
7）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。
（8）原理：细胞膜的流动性和细胞的全能性。
（9）缺点：目前还不能让杂种植物按意愿表现出所需要的全部性状。
（10）变异类型：染色体数目的变异。
（11）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。

（二）动物细胞工程
1. 动物细胞培养
（1）原理：细胞增殖。
（2）流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→分散成单个细胞（用胰蛋白酶或胶原蛋白酶）→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→细胞贴壁成单层→细胞增殖→铺满瓶壁→接触抑制→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理→分瓶继续传代培养→传代10～50代（遗传物质正常）→大部分细胞衰老死亡，少数存活（此时遗传物质可能会改变）→继续传代→其中少数细胞发生突变，获得不死性。
注意：Ⅰ、由于把细胞粘连在一起主要是细胞之间的蛋白质，所以用胰蛋白酶或胶原蛋白酶消化掉细胞间的蛋白质，可把细胞分散开来。
Ⅱ、传代中的“代”与细胞增殖代数中的“代”不同：
传代中的一代指把细胞放入培养瓶中培养直到再分瓶培养的这段时间。这段时间细胞会增殖多次。
Ⅲ、不死性细胞具有癌细胞的一些特性：黏着性降低；细胞膜表面的糖蛋白减少。
Ⅳ、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持遗传物质的正常。
Ⅴ、动物细胞培养只是让细胞进行生长和增殖，没有脱分化的过程。
（3）条件
①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
②营养：合成培养基成分：糖（葡萄糖）、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常（不是必须）需加入血清、血浆等天然成分。
③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃＋0.5℃；pH：7.2～7.4（因为胃蛋白酶的最适PH值约为2.0，所以分散细胞时不能用）。
④气体环境：95%空气＋5%CO2。O2细胞代谢所必需，CO2维持培养液的pH。

2.动物体细胞核移植技术和克隆动物
（1）分为胚胎细胞核移植（较容易）和体细胞核移植（较难）。
（2）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞比较大，容易操作；卵(母)细胞细胞质多，营养丰富；细胞质中含有使体细胞核表达出全能性所必需的因子。
（3）克隆：指共同的祖先经过无性繁殖得到一大群分子，细胞或个体，它们与祖先具有相同的遗传特性。如经过植物组织培养得到一大群植株；经过PCR扩增得到大量DNA片断等等。
（4）原理：动物细胞核的全能性。
（5）体细胞核移植的大致过程是： 教材P48页。
注意：
操作时，将体细胞与去核的卵母细胞直接融合。
用于核移植的供体细胞选传代10代以内的细胞。
得到的克隆动物与供体动物性状基本相同的原因：细胞质中含有受体卵母细胞的线粒体DNA；性状受环境的影响。
生殖方式为无性繁殖。
（4）体细胞核移植技术的应用：
①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；
②保护濒危物种，增大存活数量；
③转基因克隆动物用于生产珍贵的医用蛋白：将目的基因导入供体细胞中，再与去核卵母细胞融合，最终得到克隆动物，再用于生产医用蛋白；
④转基因克隆动物作为异种移植的供体（如无免疫排斥反应的转基因克隆猪）；
⑤用于组织器官的移植：取患者的健康细胞（作为供体细胞）进行核移植，得到早期胚胎，再从中提取出胚胎干细胞，诱导其分化形成所需器官。
（5）体细胞核移植技术存在的问题：
克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等，还存在安全性问题。
3.动物细胞融合
（1）动物细胞融合也称细胞杂交，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。
（2）诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二醇、电刺激等，但动物细胞融合还常用灭活的病毒。
（3）动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和性，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。
（4）动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：
比较项目
细胞融合的原理
细胞融合的方法
诱导手段
用法
植物体细胞杂交
细胞膜的流动性
去除细胞壁后诱导原生质体融合
离心、电刺激、振动，聚乙二醇等试剂诱导
克服了远缘杂交的不亲和性，获得杂种植株
动物细胞融合
细胞膜的流动性
使细胞分散后诱导细胞融合
除应用植物细胞杂交手段外，再加灭活的病毒诱导
制备单克隆抗体的技术之一

4.单克隆抗体
（1）抗体：一个B淋巴细胞（浆细胞）只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。
（2）单克隆抗体的制备过程：教材P54页第一段。
两次筛选的目的：
第一次筛选出杂交瘤细胞：用选择性培养基，里面的的试剂能抑制瘤细胞和瘤+瘤细胞的DNA复制，浆细胞和浆+浆细胞本身不能增殖，从而最终只有杂交瘤细胞能存活下来。
第二次筛选出产生所需抗体的杂交瘤细胞:进行克隆化培养和抗体检测。对杂交瘤细胞进行稀释，保证每份培养液中只有一个杂交瘤细胞，先让其增殖以增加细胞数目，再加入特定抗原，若出现了抗体与特定抗原的结合（即检测为阳性），说明该杂交瘤细胞产生的抗体是我们所需要的，从而把该杂交瘤细胞筛选出来。
（4）杂交瘤细胞的特点：既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。
（4）单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。
（5）单克隆抗体的作用：
① 作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，帮助医生确定病原体。具准确、高效、简易、快速的优点。
②制成“生物导弹”：由单克隆抗体（能与癌细胞进行特异性结合），放射性同位素，化学药物或细胞毒素组成；能将药物定向带到癌细胞的位置，在原位杀死癌细胞，不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。
专题3 胚胎工程
（一）体内受精和早期胚胎发育
1、精子的发生
场所：睾丸的曲细精管（场所是唯一的）
时间：从初情期开始，到生殖机能衰退
过程：1）精原细胞→多个初级精母细胞（通过数次有丝分裂）
2）1个初级精母细胞→2个次级精母细胞→4个精子细胞
3）精子细胞→精子（变形的五个方面：细胞核→精子头部的主要部分；高尔基体→精子头部的顶体；线粒体→精子尾基部的线粒体鞘；其他物质→原生质滴，最后脱落。）
2、卵子的发生
场所：卵巢和输卵管
时间：胎儿时期（完成了卵泡的形成和在卵巢内的储备）和初情期后。
过程：教材P63页图3-5。
补充：
Ⅰ、卵子的发生胎儿期已开始，只是被抑制在减Ⅰ前期，是初级卵母细胞，并且被卵泡细胞包围，形成卵泡，进入初情期后继续。
Ⅱ、减Ⅰ在排卵前后完成。有些动物在排卵前完成，因此从卵巢中排出来的已是次级卵母细胞，如猪、绵羊、牛等；有些动物在排卵后才完成，因此从卵巢中排出来的还是初级卵母细胞，如马等。
Ⅲ、排卵：指卵子从卵巢中排到输卵管中，由教材P62图3-4可知卵泡并没有整个排出。
Ⅳ、排出后，在输卵管中进一步成熟，当到达减Ⅱ中期时才具有受精能力，若受精了才会进一步完成减Ⅱ。
Ⅴ、卵子发生的场所不是唯一的，先在卵巢，后在输卵管中。
2、 受精作用
概念：精子和卵子结合成合子（受精卵）的过程。
受精场所：雌性动物的输卵管内
过程：受精前的准备阶段1：精子获能（获得受精的能力）
受精前的准备阶段2：卵子的准备
受精阶段：a.精子穿越放射冠和透明带：顶体反应，透明带反应
顶体反应：顶体膜与精子细胞膜在某些位点融合并出现穿孔，顶体内的酶释放出来。教材P65图3-7。
透明带反应：在精子触及卵细胞膜的瞬间，产生了阻止后来精子进入透明带的生理反应。这是防止多精入卵的第一道屏障。
b.进入卵细胞膜：卵细胞膜反应（防止多精入卵的第二道屏障）。
c. 雌雄原核形成（不能理解成卵子、精子原来的细胞核，是在原来核的基础上形成的新核，原核膜已破裂）和配子结合
是否受精的标志：在卵细胞膜和透明带的间隙能观察到两个极体
受精完成标志：雌雄原核融合
4、动物胚胎发育的基本过程
（1）场所：先在输卵管，后移至子宫内膜中。
（2）卵裂期特点：透明带内进行，营养物质由受情卵自已供给，细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，DNA总量不断增加，有机物总量减少，但胚胎的总体积并不增加，或略有减小。
（3）桑椹胚特点：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。是全能细胞。
（4）囊 胚特点：细胞开始出现分化。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为囊胚腔。
（5）原肠胚特点：有了三胚层（外胚层、中胚层和内胚层）的分化，具有原肠腔。
（二）体外受精和早期胚胎培养
(1)卵母细胞的采集和培养
超数排卵处理（主要方法）：用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。
其他方法：从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。
(2) 精子的采集和获能：获能方法有培养法（通过获能培养液）、化学诱导法（通过肝素或钙离子载体A23187）
(3) 受精：获能的精子和培养成熟的卵子在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。
(4)胚胎的早期培养：将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。培养液成分：两盐（无机盐和有机盐）、两素（维生素和激素）、两酸（氨基酸和核苷酸），以及血清等物质。当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植的时间不同。(牛、羊一般要培育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行移植，小鼠、家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人的体外受精胚胎可在4个细胞阶段移植。)
（三）胚胎工程的应用
1.胚胎移植
(1)胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。（供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种。）
地位：如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。
(2) 胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。
(3) 生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。
②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。
③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。
④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。
(4) 基本程序主要包括：教材P77
①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用孕激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。
②配种或人工授精。
③对胚胎的收集、检查、培养或保存。用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来(也叫冲卵)。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段。直接向受体移植或放入－196℃的液氮中保存。
④对胚胎进行移植：手术法和非手术法。
⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。
2.胚胎分割
(1)概念：是指采用机械方法将早期胚胎切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。
(2)意义：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，属于无性繁殖或克隆。
(3)材料：发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚。（桑椹胚至囊胚的发育过程中，细胞开始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割。）
(4)操作过程：对囊胚阶段的胚胎分割时，要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
3、胚胎干细胞
1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。
2、在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。
3、胚胎干细胞的主要用途是：
①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；
②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料，在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段；
③利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；
④通过ES细胞体外诱导分化，定向培育出人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。
专题4 生物技术的安全性和伦理问题
（一）转基因生物的安全性争论
(1)基因生物与食物安全：
反方观点：反对“实质性等同”、出现滞后效应、出现新的过敏原、营养成分改变
正方观点：有安全性评价、科学家负责的态度、无实例无证据
(2)转基因生物与生物安全：对生物多样性的影响
反方观点：扩散到种植区之外变成野生种类、成为入侵外来物种、重组出有害的病原体、成为超级杂草、有可能造成“基因污染”
正方观点：生命力有限、存在生殖隔离、花粉传播距离有限、花粉存活时间有限
(3)转基因生物与环境安全：对生态系统稳定性的影响
反方观点：打破物种界限、二次污染、重组出有害的病原微生物、毒蛋白等可能通过食物链进入人体
正方观点：不改变生物原有的分类地位、减少农药使用、保护农田土壤环境
（二）生物技术的伦理问题
(1)克隆人：两种不同观点，多数人持否定态度。
否定的理由：克隆人严重违反了人类伦理道德，是克隆技术的滥用；克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；克隆人是在人为的制造在心理上和社会地位上都不健全的人。
肯定的理由：技术性问题可以通过胚胎分级、基因诊断和染色体检查等方法解决。不成熟的技术也只有通过实践才能使之成熟。
中国政府的态度：禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆。四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。
(2)设计试管婴儿：区别两种不同观点，多数人持认可态度。
否定的理由：把试管婴儿当作人体零配件工厂，是对生命的不尊重；早期生命也有活下去的权利，抛弃或杀死多余胚胎，无异于“谋杀”。
肯定的理由：解决了不育问题，提供骨髓中造血干细胞救治患者最好、最快捷的方法，提供骨髓造血干细胞并不会对试管婴儿造成损伤。
(3)基因身份证：
否定的理由：个人基因资讯的泄漏造成基因歧视，势必造成遗传学失业大军、造成个人婚姻困难、人际关系疏远等严重后果。
肯定的理由：通过基因检测可以及早采取预防措施，适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。
（三）生物武器
(1)种类：致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌。
(2)散布方式：吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等。
(3)特点：致病力强、多数具传染性、传染途径多、污染面广、有潜伏期、不易被发现、危害时间长等。
(4)禁止生物武器公约及中国政府的态度
专题5 生态工程
生态工程的基本原理
生态工程建设目的：遵循自然界物质循环的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止环境污染，达到经济效益和生态效益的同步发展。（少消耗、多效益、可持续）
生态经济：主要是通过实行“循环经济”原则，使一个系统产生出的污染物，能够成为本系统或者另一个系统的生产原料，从而实现废弃物的资源化，而实现循环经济最重要的手段之一是生态工程。
生态工程原理
1）物质循环再生原理：物质能在生态系统中循环往复，分层分级利用
2）物种多样性原理：物种繁多复杂的生态系统具有较高的抵抗力稳定性
3）协调与平衡原理：生态系统的生物数量不能超过环境承载力（环境容纳量）的限度
4）整体性原理：生态系统建设要考虑自然、经济、社会的整体影响
5）系统学和工程学原理
系统的结构决定功能原理：要通过改善和优化系统结构改善功能
系统整体性原理：系统各组分间要有适当的比例关系，使得能量、物质、信息等的转换和流通顺利完成，并实现总体功能大于各部分之和的效果，即“1+1>2”

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