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高级兽医微生物学试卷及答案.doc

1、高级兽医微生物学试卷及答案 名词解释 转座子:能在细菌基因组上从一个位点移至另一个位点的DNA序列。除携带与转位有关的基因外,还携带耐药性基因,抗金属基因、毒素基因及其他结构基因等。因此当Tn插入某一基因时,一方面可引起插入基因失活产生基因突变,另一方面可因带入耐药性基因而使细菌获得耐药性。 插入序列:是最小的转位因子,长度不超过2kb,不携带任何已知与插入功能无关的基因区域,往往是插入后与插入点附近的序列共同起作用,可能是原细胞正常代谢的调节开关之一。 质粒的不相容性: 两个复制和维持机制密切相关的质粒不能在一个宿主细胞中长期共存的现象。 鉴别培养基:利用各种细菌分解糖类和蛋白质

2、的能力及其代谢产物的不同,在培养基中加入特定的底物,观察细菌在生长时分解底物的特征,鉴别不同细菌。 毒力岛:毒力岛最早是用来描述泌尿道致病性大肠杆菌的两个相对分子质量很大的、编码许多毒力相关基因的、不稳定的染色体DNA片段。它的基因产物许多是分泌性蛋白和细胞表面蛋白等一些毒力岛编码细菌的分泌系统、信息传导系统和调节 M细胞:M细胞存在于淋巴滤泡上皮之间,与肠上皮细胞紧密排列在一起,形成上皮屏障,并与其口袋中的各种淋巴细胞紧密接触,肠腔中的大部分病原体是由M细胞转运的,表明M细胞的主要功能是摄取并转运抗原(尤其是颗粒性抗原)至其下的免疫细胞系统。 微生物:存在于自然界形体微小,数量繁多,

3、肉眼看不见,必须借助于光学显微镜或电子显微镜放大数百倍甚至上万倍,才能观察的一群微小低等生物体。 病原微生物:对人类和动物、植物具有致病性的微生物称病原微生物。 原生质体:革兰阳性菌由于其细胞壁主要由肽聚糖构成,细菌变成细菌L型后,细胞壁完全缺失,细菌原生质仅被一层细胞膜包裹,称为原生质体  菌落:单个细菌经一定时间培养后形成的一个肉眼可见的细菌集团。 质粒:是细菌染色体以外具有遗传功能的闭合环型DNA,其编码的产物与细菌性状有关,如R、F和毒力质粒。 荚膜:某些细菌能分泌黏液状物质包围于细胞

4、壁外,形成一层和菌体界限分明、不易着色的透明圈。主要由多糖组成,少数细菌为多肽。其主要的功能是抗吞噬作用,并具有抗原性。 芽胞:某些细菌在一定条件下,在菌体内形成一个圆形或卵圆形的小体。见于革兰阳性菌,如需氧芽胞菌和厌氧芽胞杆菌。是细菌在不利环境下的休眠体,对外界环境抵抗力强。 菌毛:是存在于细菌表面,有蛋白质组成的纤细,短而直的毛状结构,只有用电子显微镜才能观察,多见于革兰阴性菌。 细菌生长曲线:在培养基中以培养的时间为横坐标,以细菌增长对数为纵坐标得出的曲线。 空斑:把单层动物细胞上覆盖一薄层琼脂进行培养,如某一

5、细胞感染有病毒,则增殖后的病毒粒子只能扩散至邻近的细胞,最终形成一个与噬菌斑类似的空斑。再染色,可区分活细胞和死细胞。 SPF动物:是指不存在某些特定的具有病原性或潜在病原性的微生物及其抗体或寄生虫的动物(或禽胚胎)。 病毒:是超显微的,无细胞结构,专性活细胞内寄生,在活细胞外具一般化学大分子特征,一旦进入宿主细胞又具有生命特征。 毒力:同一病原体不同菌株间的致病能力有所差异。病原微生物致病力的强弱程度用毒力表示 内毒素:是革兰阴性菌细胞壁中的脂多糖成分,只有菌体裂解后才释放出来。 外毒素:是细菌在生长繁殖过程中

6、合成并分泌到菌体外的毒性成分。主要由革兰阳性菌产生。 免疫:免疫机体免疫系统识别“自己”与“非己”抗原物质的过程,对自己抗原物质形成天然免疫耐受,而对“非己”抗原物质产生排己作用的一种生理功能。 抗原:能刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答(免疫原性),并能与相应的免疫应答产物抗体或效应T细胞在体内或体外发生特异性结合(反应原性)的物质。 抗体:抗体机体免疫系统接受抗原刺激后,由浆细胞合成分泌的一类能与相应抗原特异性结合的球蛋白。抗体按其重链抗原性的不同可分为IgG,IgM,IgA,IgD和IgE。 免疫活性细胞 :能接受抗原刺激而

7、发生分化、增殖形成免疫效应物质并能进行特性免疫反应的细胞。 免疫应答:机体免疫系统受抗原性异物刺激后所发生的一系列复杂变化和产生免疫效应的生理过程。 生物制品:是以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为原料,应用传统技术或现代生物技术制成,用于人类疾病的预防、治疗和诊断的药品。 人工主动免疫:将疫苗或类毒素接种于人体,使机体产生获得性免疫力的一种防治微生物感染的措施,主要用于预防。 包涵体 :病毒、衣原体在感染细胞的核内或胞浆内增殖后形成的斑块状结构,由病毒颗粒和未装配的病毒成分或衣原体的原体和始体等组成。如疱疹病毒、沙眼衣原体可在感染细胞内形成包涵体。

8、 CAMP试验 : B群链球菌产生的CAMP因子,可促进金黄色葡萄球菌的溶血活性,在两菌交界处出现箭头状溶血现象 病毒复制:病毒增殖只在活细胞内进行,是以病毒基因为模板,在酶的作用下,分别合成其基因及蛋白质,再组装成完整的病毒颗粒,这种方式称为复制。 串珠试验:在有微量青霉素存在时,炭疽杆菌可形成L型菌,菌体呈“串珠状”,类似“串珠状菌链”;而类炭疽杆菌由于对青霉素不敏感,则不具有此特性。 病毒粒子:具有感染性结构完整的病毒颗粒。 朊病毒:是一类具有侵染性并能在寄主细胞内复制的小分子,无免疫性疏水蛋白质。 菌落:某个细菌

9、在适合生长的培养基表面或内部,在合适条件下,分裂繁殖出数量巨大的菌体,形成一个肉眼可见的有一定形态的群体。 荚膜:某些细菌在其生活中可在细胞壁的外周形成一层包围整个菌体、边界清楚地粘液样物质 黏液层:有些细菌分泌一层很疏松、与周围边界不明显、易与菌体脱离的黏液样物质,称为黏液层 鞭毛:多数弧菌、螺菌、许多杆菌、个别球菌的菌体表面长有一至数十根弯曲的丝状物,称为鞭毛 培养基:是人工配制的含有细菌生长繁殖必需的营养物质 杀菌作用:是指某些物质或因素具有在一定条件下杀死微生物的作用。 抑菌作用: 是指某些物质或因素具有抑制微生物生长、繁殖的作用。 抗菌作用:某些药物具有的抑制或杀灭微

10、生物的作用,统称为抗菌作用 灭菌:消灭物体上所有微生物的方法,包括杀灭细菌芽胞、霉菌孢子在内的全部病原微生物和非病原微生物 消毒:杀灭物体上病原微生物的方法,仅要求达到消除传染性的目的,而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死 防腐:阻止或抑制物品上微生物生长繁殖的方法,微生物不一定死亡 无菌操作:采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其他物体的方法的进行的操作称为无菌操作 抗生素:某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀死另一些微生物的物质称为抗生素 植物杀菌素:某些植物中存在有杀菌物质,这种杀菌物质一般称为植物杀菌素 细菌素:是某些细菌产生的一种具有杀菌作用的蛋白质

11、只能作用于与它同种不同菌种的细菌以及与它亲缘关系相近的细菌 噬菌体:噬菌体是寄生于细菌、真菌、螺旋体、放线菌等的一类病毒,也称细菌病毒 感染:是指病原微生物在宿主体内持续存在或增殖 病原菌:是指那些导致机体发病的细菌,是一群高度特化了的微生物,为了自身的生存,已适应而且必须在宿主生物体内持续存在或增殖,有时可造成宿主发病 半数致死量:是指能使接种的实验动物在感染后一定时限内死亡一半所需的微生物量或毒素量 半数感染量:某些病原微生物只能感染实验动物、鸡胚或细胞,但不引致死亡。是指能使接种的实验动物在感染后一定时限内感染一半所需的微生物量或毒素量 侵袭力:病原菌在机体内定殖,突破机体的

12、防御屏障,内化作用,繁殖和扩散,这种能力称为侵袭力 细菌的遗传:是指亲代细菌与子代细菌的相似性,它使细菌的性状保持相对稳定,是细菌存在的依据 质粒:质粒是细菌染色体外的遗传物质,多为环状双螺旋DNA分子。 转化:供体菌裂解游离的DNA片段被受体直接摄取,使受体菌获得新的遗传性状的过程称为转化 转导:以温和噬菌体为媒介,把供体菌的DNA小片段携带到受体菌中,通过交换与整合,使受体菌获得供体菌的部分遗传性状称为转导 接合:是两个完整的细菌细胞通过性菌毛直接接触,由供体细菌将质粒DNA转移给受体细菌 的过程 病毒(粒)子:一个形态和结构上完整的病毒颗粒称为病毒(粒)子 核衣壳:由核酸

13、组成的芯髓被衣壳包裹,衣壳与芯髓在一起组成核衣壳 原代细胞:动物组织经胰蛋白酶等消化、分散,获得单个细胞,再生长于培养皿中。 二倍体细胞株:将长成的原代细胞消化分散成单个细胞,继续培养传代,其细胞染色体数与原代细胞一样,仍为二倍体。 传代细胞系:与原代细胞与二倍体细胞株不同,这类细胞在体外可无限制分裂,亦可无限制传代。 细胞病变:细菌感染导致的 细胞损伤称之为细胞病变 空斑:病毒样本接种吸附于单层细胞,经一段时间培养,进行染色,原先感染病毒的细胞及病毒扩散的周围细胞会形成一个近似圆形的斑点,类似固体培养基上的菌落形态,称之为空斑。 包涵体:是某些病毒感染细胞产生的特征性的形

14、态变化,可通过固定染色而后在光学显微镜下检测。 隐蔽期:在病毒感染细胞之后的一个短时间内,病毒完全消失,甚至在细胞内也找不到传染性的病毒颗粒,直至感染数小时后子代病毒出现为止,这阶段称为隐蔽期。 血凝作用:某些病毒能凝集红细胞,称为病毒的血凝作用。 血凝抑制作用:病毒的特异抗体可抑制其血凝作用,称为血凝抑制作用。 螺旋体:是一类菌体细长,柔软、弯曲呈螺旋状、能活泼运动的原核单细胞微生物 钩端螺旋体:菌体纤细、螺旋致密,一端或两端弯曲呈钩状的螺旋体 支原体: 支原体是一类无细胞壁的细菌,具多形性,可通过细菌滤器 立克次氏体:立克次氏体是一类专性细胞内寄生的小型革兰阴性原核单细胞微生

15、物 衣原体:是一类形态相似,能通过滤器、营严格细胞内寄生,有独特生活周期的革兰氏阴性的原核生物 真菌:真菌是一大类真核微生物,不含叶绿素,无根、茎、叶、营腐生或寄生生活;仅少数 类群为单细胞,其余为多细胞;大多数呈分支或部分支的死状体;能进行有性和无性繁殖。 菌丝:是单条管状细丝,为大多数真菌的结构单位 孢子:孢子是生物所产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞,能直接发育成新个体 问答题 细菌室必须符合的条件 1. 安装严密的门窗,以防止外部污浊的空气和昆虫进入室内污染环境, 或微生物逸出。室内禁用电扇(根据需要可安装空调)。 2. 必须安装供空气消毒的紫外线灯,置

16、于离工作台面1米的高度,开始工作前照射20分钟。 3. 备有洗手和标本处理水源及消毒剂水盆。 4. 常备消毒剂,对菌液污染的台面和地面进行消毒处理。 5. 室内台面用后要用消毒剂进行消毒,地面每周至少消毒1次。 6. 接收样本的器具和已消毒器具要分别放置于指定地点,特别是无菌和有菌器具要分开管理。用过的试管、平皿必须及时高压灭菌处理。 7. 不能或不便高压灭菌的样本和废弃物品必须焚化处理 8. 配备必要的消防设备 为建立正确快速的分离和鉴定细菌的方法,临床细菌室的要求。 1. 选择国际公认的分离及鉴定参考方法和试剂作为实验室的常规试验 2. 在分离和鉴定的各步骤设立完整的室内

17、质量监控体系 3.建立临床菌库 微生物基因组序列测定的意义? 1、研究病原微生物的致病机制及其与宿主的相互关系 2、建立更灵敏特异的分子诊断技术 3、开发抗微生物新药和新疫苗 4、为遗传疾病机制提供参考 5、为开发和利用微生物资源提供更为有效的手段 如何正确采集和处理标本 (一)注意事项 ⒈ 采取血液、脑脊髓液或穿刺液时应严格无菌操作,避免杂菌污染。 粪便、肛拭子、鼻咽拭子应放置与灭菌容器内尽可能避免标本外细菌混入。 ⒉ 应在使用抗菌素前采集标本。 ⒊ 盛标本的容器不得用消毒剂或酸碱类消毒处理。 ⒋ 尽快送检,或根据分离病原的不同保存于适当的温度条件下,如

18、冷冻等。 (二)采集、包装和送检过程中要注意安全 (三)选择适宜的培养基是分离出病原菌的重要环节 脉冲场凝胶电泳原理? 1.分子量超过40kb的现状双链DNA,在恒场强水平琼脂糖凝胶中以相同的速率迁移而难以分离。即,大于40kb的DNA的迁移率几乎与分子大小无关。 2.DNA分子在交替变换方向的电场中作出反应所需的时间取决于其分子量大小。较小的分子重新定向较快,故在凝胶中移动也较快,不同大小的分子因而被分离。 细菌染色体基因的排列特征 1.部分基因在染色体上单独存在, 转录成一个mRAN, 翻译成一个蛋白. 2.多数情况下, 编码相关功能蛋白的一小串基因位于一个操纵子之后, 从

19、一个启动子开始, 转录成多基因的mRNA, 再翻译成蛋白多聚体. 3.启动子的方向决定转录正链或负链. 在细菌染色体中,两条单链作为有意义链的概率相等. 4.亲缘关系相近的细菌, 其基因在染色体上的排列顺序非常相似. 慎重使用抗菌药应注意那几点? 1.尽可能少用抗菌剤, 重在改进饲养管理方式2.兽医师亲自诊断后再开处方 3.正确诊断, 非用不可,酌量使用4.根据抗菌活性、投与途径、组织分布等选择最佳药物 5.医疗上重要的抗菌剤, 无其他治疗办法的情况下使用6.因多种抗菌药并用疗法会增加耐性菌产生的机会应注意防止残留7.遵守兽医师职业道德 临床微生物室的任务和职责 一、建立正

20、确、快速的检验方法 ㈠建立正确快速的分离和鉴定方法 为达到这一目的,临床细菌室应作到以下几点: 1.选择国际公认的分离及鉴定参考方法和试剂作为实验室的常规试验 2. 在分离和鉴定的各步骤设立完整的室内质量监控体系 3 建立临床菌库 ㈡ 建立正确的药敏试验方法 选择正确的方法 药敏结果的审核和药敏规则的标准化 二、与临床建立密切联系 建立带有评论和注释的细菌学报告 制定标本采集指南和规则 参与治疗方案的制定 获取临床资料 注意与临床人员沟通, 尤其是推广新试验、新技术时 三、 不断提高细菌学基础理论水平 毒力岛研究方法及其意义 研

21、究方法: 有毒株与无毒株之间的消减杂交 基因图谱多态性分析 直接测序分析, 岛探针技术 菌内表达技术, 荧光标记表达技术 意义: 标明菌的进化 有助于进一步了解病原菌的致病机理 预测可能出现的新病原菌 正常菌群的生理意义 1.生物拮抗2.营养作用3.免疫作用4.排毒,抗肿瘤和抗衰老作用 对付耐药菌有哪些方法? 1.恢复微生态环境2.利用噬菌体3.应用疫苗4.应用抗生素5.改造药物 什么是细菌内毒素?其基本特性是什么? 内毒素特指革兰氏阴性菌外膜中的脂多糖(LPS)成分

22、细菌在死亡后破裂或人工裂解后释放。革兰氏阳性菌细胞壁中的脂磷酸(LTA)具LPS活性,不致热。 特性:内毒素耐热:100℃,1h不破坏;不能被甲醛脱毒成类毒素;抗原性弱,抗体无中和内毒素作用。 如何认真区分污染菌 ⒈观察菌落是否在划线上⒉每次培养需要做无菌对照⒊ 结合拟培养的细菌生长特点去对照判断(菌落的形状、大小、色泽、边缘、透明度、湿润度、溶血现象等)⒋注意观察培养时间,如布鲁氏菌、支原体、钩体、结核分枝杆菌的生长缓慢。⒌涂片染色检查,观察是否与目的菌一样。 细菌耐药机理 1.细菌酶使药物失活   (1)β-内酰胺酶降解(PC耐性:β-Lactamase,分A,B,C,D四类

23、 A. G-菌水解酶 TEM-1 B. 金属结合酶 锌-巯基 C. E.coli.绿脓杆菌β-内酰胺酶 D. 苯唑西林水解酶   (2)氨基甙类钝化酶:乙酰转移酶;核苷酸转移酶;磷酸转移酶 (3)氯霉素胞内乙酰转移酶对药物修饰(CP耐性:乙酰化) (4)红霉素酯化酶 (5)溶血性链球菌,E.coli的灭活酶 (灭活大环酯类,林可霉素和链阳性菌素) 2.降低細胞膜对药物的通透性  (1)孔蛋白减少(β-Lactam类耐性)沙门氏菌多重耐药  (2)孔蛋白变异(IPM耐性

24、 3.药物作用靶位的构造改变或产生新靶位  (1)PBP构造改变(β-Lactam类耐性)  (2)DNA旋转酶结构改变(氟喹诺酮类耐性)  (3)核糖体RNA结构改变(大环内酯耐性) 4.药物主动排出泵 (TC耐性、氟喹诺酮类耐性) 5. 增加药物的拮抗物的产量 与医学相关的微生物有哪些? 与医学相关的微生物有:病毒、细菌、真菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体。 微生物学的先驱有那些?他们的主要成绩是什么? 先驱有吕文虎克、巴斯德、科赫 吕文虎克:十七世纪,荷兰人吕文虎克用自制的、能放大160~200倍的显微镜第一次看到了微生物 巴斯德是微生物的奠基

25、人: (1) 发现并证实发酵是由微生物引起的; (2) 彻底否定了“自然发生”学说;著名的曲颈瓶试验无可辩驳地证实,空气内确实含有微生物,是它们引起有机质的腐败。 (3) 免疫学——预防接种 首次制成狂犬疫苗 (4) 其他贡献 巴斯德消毒法:60~65℃作短时间加热处理,杀死有害微生物 微生物的另一位奠基人是一位德国医生柯赫 (1)微生物学基本操作技术方面的贡献:①细菌纯培养方法的建立 ②设计了各种培养基,实现了在实验室内对各种微生物的培养 (2)对病原细菌的研究作出了突出的贡献:具体证实了炭疽杆菌是炭疽病的病原菌;②发现了肺结核病的病原菌(1905年获诺贝尔奖)③证明某种微生物

26、是否为某种疾病病原体的基本原则——著名的柯赫原则 Lister建立消毒技术 微生物学有哪些特性? 体积小面积大 吸收多转化快 生长旺繁殖快 适应强易变异 分布广种类多 1、个体微小、结构简单,大小通常用μm(微米)或nm(纳米)表示;大多数是单细胞结构 2、吸收多、转化快 胃口大:消耗自身重量2000倍食物的时间:大肠杆菌:1小时 食谱广 :纤维素、木质素、几丁质、角蛋白、石油、甲醇、甲烷、天然气、塑料、酚类、氰化物、各种有机物均可被微生物作为粮食 3、种类繁多,分布广泛:已发现的微生物达20万种以上,新种不断发现,极端环境、土壤、空气、水、动植物体表及某些器官。 4、 群

27、居混杂、相生相克,共生、协同、竞争,维持着生态平衡 5、 生长繁殖快:大肠杆菌,20min/代,24h可繁殖72代 6、适应能力强、易变异:抗(逆)性强: 抗热:有的细菌能在265个大气压,250 ℃的条件下生长; 抗寒:有些微生物可以在―12℃ ~ ―30℃的低温生长; 抗酸碱:细菌能耐受并生长的pH范围:pH 0.5 ~ 13; 耐渗透压:蜜饯、腌制品,饱和盐水(NaCl, 32%)中都有微生物生长; 抗压力:有些细菌可在1400个大气压下生长; 当环境不良时,它们出现形态、生理、毒力的变异,如芽孢菌产生芽孢、霉菌形成孢子,病原菌产生抗药性 7、生物遗传性状典型、实验技术体系完善

28、细菌的基本结构和特殊结构有哪些,有何作用? 细菌都具有细胞壁、细胞膜、细胞质、核体等基本结构。 有些细菌在一定条件下还具有特殊结构细菌的特殊结构包括荚膜、S层、鞭毛、菌毛、芽胞等。 细菌群体生长繁殖分几个时期?各个时期有何特点? 细菌群体的生长繁殖有4个时期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期。 迟缓期:是细菌初到新环境的适应期。此时菌体增大、代谢活跃、合成所需酶系统。RNA含量明显增多,DNA无变化,此时细菌数并不增加。l-4h。 对数期:细菌迅速分裂繁殖,活菌数以恒定的几何级数增长,生长曲线近斜线。该期病原菌致病力最强,其形态染色及生理均较典型,对抗菌药物等的作用较为敏感。6-1

29、0h。 稳定期:因营养消耗、代谢产物蓄积等,此时新繁殖的活菌与死菌平衡,活菌数最多。该期形态染色不特异。产生毒素等代谢产物。一般持续时间8h。 衰亡期:细菌死亡速度加大,繁殖速度变小。如不移植到新培养基,最终可全部死亡。此期菌体变形或自溶,染色不典型,难以鉴定。 试述基因水平的柯赫法则。 (1)应在治病菌株中检出某些基因或其产物,而无毒力菌株中没有 (2)如有毒力菌株的某个基因被破坏,则菌株的毒力应减弱或消除。或者将此基因克隆到无毒菌株内,后者成为有毒力菌株。 (3)将细菌接种动物时,这个基因应在感染的过程中表达 (4)在接种动物检测到这个基因产物的抗体,或产生

30、免疫保护,该法也适用于细菌以外的微生物,如病毒。 试述细菌毒力减弱的方法。 1)长时间在体外连续培养传代 病原菌在体外人工培养基上连续多次传代后,毒力一般都能逐渐减弱乃至失去毒力。 2)在高于最适生长温度条件下培养 例如炭疽工型和Ⅱ号疫苗,均是将炭疽杆菌强毒株在42—43℃培养传代育成。 3)在含有特殊化学物质的培养基中培养 如广为采用的结核病卡介苗(BCG),系将牛型结核杆菌在含有胆汁的马铃薯培养基上每.15天传1代,持续传代13年后育成。 4)在特殊气体条件下培养 如无荚膜炭疽芽孢苗是半强毒菌株在含50%动物血清的培养基上,在50%C02的条件下选育的。 5)通过非易感

31、动物 如猪丹毒弱毒苗(GC42)系将强致病菌和株通过豚鼠370代后,又通过鸡42代选育而成。 6)通过基因工程的方法 去除毒力基因或用点突变的方法使毒力基因失活,可获得无毒力菌株或弱毒菌株。但对多基因调控的毒力因子较难奏效。 病毒的基本特征有哪些? 病毒的基本特征:①病毒一般以病毒颗粒(viral particle)或病毒子(virion)的形式存在,具有一定的形态、结构以及传染性。病毒粒子极其微小,测定其大小的单位通常用纳米(nm),在电镜下才能观察。 ②病毒的形态:多形性。各种病毒颗粒形态不一,但都具有蛋白质的衣壳及其包裹的核酸芯髓,衣壳与芯髓共同构成核衣壳。有的病毒核衣壳外还

32、有嚢膜及纤突。衣壳由壳粒组成,呈20面体对称或螺旋状对称,少数为复合对称。 ③结构:完整的病毒主要由核酸和蛋白质组成。每种病毒只含一种核酸,或是DNA,或是RNA;每种核酸有双股与单股、线状与环状、分节段与不分节段之分。病毒的蛋白质也有结构蛋白和非结构蛋白之分。脂质与糖是构成是嚢膜与纤突的组分,可被氯仿或乙醚等脂溶剂破坏。 ③寄生生活没有核糖体和酶系统,不能独立进行代谢活动,必须在易感活细胞内寄生,利用宿主细胞的代谢系统,以核酸复制的方式增殖,有严格的细胞内寄生性。 ④不能进行二分裂,通过特有的复制方法进行繁殖。 ⑤病毒对抗生素不敏感、干扰素能抑制其增殖 ⑥病毒无细胞结构 试述病毒

33、的结构、化学组成与功能  结构  化学组成 功能  病毒基因组 DNA或RNA   编码病毒蛋白、控制病毒性状、决定病毒复制及增值侵害  病毒衣壳  蛋白质 维持病毒的形态结构、保护病毒核酸、黏附作用,介导病毒的感染和决定病毒对细胞的嗜性、良好的抗原性,诱发机体的体液免疫和细胞免疫 病毒包膜 脂质、蛋白质、糖类  病毒的主要抗原,与致病性和免疫性密切相关 试述病毒分离培养的方法。 ①实验动物:病毒必须在活细胞中方能进行生命活动,因此早期对病毒生物学特性的研究主要通过动物接种(小鼠、大鼠、家兔、家禽等。)以培养病毒。目前动物接种仅限于研究病毒或毒株的致病性或为

34、确切诊断某种病毒为病原体。 ②鸡胚接种个别病毒(如流感病毒)必须在鸡胚中进行分离培养。受精鸡胚的羊膜腔和尿囊腔均可用以分离流感病毒。③组织细胞:静置、旋转。其中细胞培养是培养病毒最常见的技术。 病毒的复制周期包括哪些步骤? ① 吸附:吸附敏感的宿主细胞是病毒复制的第一步。此过程包含静电吸附和特异性受体吸附两个阶段。病毒的配体位点与细胞表面的特异受体的结合 ② 穿入与脱壳:动物病毒穿入宿主细胞并脱壳的过程可分为:在胞浆膜穿入并脱壳、在内吞小体脱壳、在核膜脱壳 ③ 生物合成:病毒的生物合成发生在隐蔽期,非常活跃,包括mRNA的转录、蛋白质或RNA的合成等 ④ 组装与释放:无囊膜病毒:简

35、单的20面体病毒产生的壳粒可自我组装形成衣壳,进而包装核酸形成核衣壳。大多数无囊膜的病毒蓄积在胞浆或核内,当细胞完全裂解时,释放出病毒颗粒。 有囊膜病毒:有囊摸的病毒以出芽的方式成熟,有细胞膜出芽及胞吐两种形式。 试述新城疫病毒主要生物学特性及检测方法。 鸡新城疫病毒(NDV)是副黏病毒科(Paramyxoviridae)腮腺炎病毒属(Rubulavirus )。它引起一种急性发热性、高度接触性的传染病,常呈败血性经过。出现以呼吸困难、下痢、神经机能紊乱、黏膜和浆膜出血等症状和病变。 一、生物学特性 病毒粒子呈球形,具有囊膜,其大小差别从120~300nm,通常为180nm左右。病毒

36、核酸为单链负股、不分节的RNA。二、抵抗力 NDV在鸡舍内可生存7d,鸡粪内50℃可存活5个半月,鸡肉尸内的病毒在15℃时可存活98d,骨髓内的病毒可存活134d。对低温的抵抗力强,4℃可存活数天,对乙醚、氯仿敏感。 三、抗原性 NDV只有一个血清型,但毒株的毒力有着较大的差异。 四、培养特性 大多数病毒株可以在多种细胞上生长,如鸡胚、成鸡、猴肾、猪肾、地鼠肾细胞组织培养上生长,并且引起细胞的病变,使感染的细胞形成蚀斑 五、致病性 NDV对鸡有很强的致病力,使鸡发生新城疫。来航鸡及其它杂种鸡比本地鸡的易感性强,死亡率也高。各种年龄的鸡均易感,但幼雏易感性最高。对水禽致病力低,一般

37、不能自然感染。观赏鸟类如孔雀、鸽、鹦鹉等都能自然感染发病。有的国家因进口观赏鸟类,引进了本病毒,致使疾病广泛传播,造成经济损失。 六、 微生物学诊断 (一)病毒的分离 1.鸡胚分离法。 2.细胞培养分离法 将经过处理的检样材料接种于鸡肾单层细胞或鸡胚成纤维单层细胞上,经过35~37℃孵育2d,观察单层细胞上出现的蚀斑 (二)血清学试验 1. 红细胞凝集抑制试验(HI) 应用已知鸡新城疫病毒来检测病鸡体内的抗体。病程5~6d以上者,血液有抗体产生,病程10d以上者,其抗体效价可达1:1280或更高,所以应用已知病毒来测定可疑血清的方法更有实际意义。 七、免疫与治疗 严格按照免疫

38、程序接种。雏鸡10~12日龄首免,用Ⅳ系苗点眼和滴鼻;25~30日龄二免,用Ⅳ系苗饮水免疫;60~70日龄三免,用Ⅰ系苗或油乳剂灭活苗0.5ml皮下注射,以后每隔半年加强免疫1次。 试述流感病毒的主要生物学特性及检测方法。 主要特性:病毒颗粒多形性,多球形,直径80-120nm,有囊膜及纤突,甲、乙型病毒纤突上有两种糖蛋白(棒状的凝血素蛋白H、蘑菇状的神经氨酸酶蛋白N)。基因组为8节段线状负股单股RNA。 ① 病毒颗粒多形性,多球形,直径80-120nm ② 核酸类型为单股负股RNA,分八个节段(丙型为七个节段),每一段RNA为一个基因,复制时发生节段之间的基因重组而导致变异,出现新

39、的亚型。 ③ 病毒结构由内向外分三层,内层是核心,中层为内膜蛋白,外层为脂质双层包膜,其间插有血凝素和神经氨酸酶两种刺突。 ④ 抵抗力较弱,对干燥、紫外线、酸及一般化学消毒剂敏感,高温易失活,但低温下可生存数周。 ⑤ 病毒分离采取鸡胚羊膜腔或尿囊腔接种;通过血凝试验和血凝抑制试验鉴定病毒是否生长及型别。 如禽流感病毒(AIV):禽流感的高致病力毒株对鸡有致病性,旧称“真性鸡瘟”,现名高致病性禽流感(HPAI),是OIE规定的通报疫病。高致病力毒株主要有H5N1和H7N7亚型的某些毒株。禽流感病毒能 感染人,某些毒株甚至可不经过猪体混合再传染的过程,直接感染人。未裂解的H无传染性,只有

40、在靶器官呼吸道及肠道组织的相应的蛋白酶作用下,日裂解为H1和H2,暴露融合肽段,通过融合进入宿主细胞。高致病力毒株与低致病力毒株的H裂解位点的氨基酸序列有差异。传播:大量病毒可通过粪排出,在环境中长期存活,尤其是在低温的水中。病毒通过野禽传播,特别是野鸭,即使在迁徙及越冬时也是如此。鸟也可带毒造成鸡群禽流感的流行。 试述口蹄疫病毒主要生物学特性及检测方法。 口蹄疫是全球性最重要的动物疫病,常在牛群、猪群大范围流行。多种偶蹄动物都易感。感染率很高,致死率较低。人类偶能感染,表现发热、食欲差及口、手、脚产生水泡。 致病机理 ①症状:病畜口、鼻、蹄等部位出现水泡为主要症状,且可能跛行。怀孕母

41、牛可能流产,而后导致繁殖力降低。猪则以跛蹄为最主要的症状。羊症状通常比牛温和。 ②感染:反刍类动物感染的主要途径是呼吸道,也可通过采食或接触污染物感染。经呼吸道感染时,最初在咽复制,而后传播到其他组织。 ③病毒排出:患畜通过分泌物、奶、飞沫大量排出病毒。某些康复动物的咽部长时间存在。牛在感染后可长达两年,绵羊可达6个月。 ④传播:病毒可长距离经气雾传播,吹风(低温、高湿、阴暗)有利于其传播。 ⑤免疫:康复牛对同型病毒感染的免疫力可维持1年或稍长。 诊断 ①申报:被列为必须申报的疾病,诊断只能在指定的实验室进行。 ②送检:样品包括水泡液、剥落水泡痂、抗凝血或血清等。死亡动物则可

42、采淋巴结、扁桃体。样品应冰冻保存,或置于pH 7.6的甘油缓冲液中。 ③检测方法:OIE推荐使用商品化及标准化的ELISA试剂盒用于诊断,数小时出结果。也用细胞培养分离病毒,分离的病毒通过LLISA或者中和试验加以鉴定。 预防与控制 ①控制:由于病毒高度的传染力,控制措施必须非常周全和严格。无病地区严禁从疫区调运牲畜。 ②消灭:一旦发病,应立即封锁现场,焚毁或深埋病畜。疫区周边的畜群应接种疫苗,建立免疫防护带。 ③疫苗:弱毒疫苗可能散毒,不安全。推荐使用浓缩的灭活疫苗 试述猪瘟病毒的特点及检测方法。 猪瘟病毒(CSFV) 是世界范围内最重要的猪病病毒。亚洲、非洲、中南定洲仍然

43、不断发生猪瘟。美、加、澳及欧洲若干国家已消灭本病。 ①.症状:典型的猪瘟为急性感染,伴有高热、厌食、萎顿及结膜炎。潜伏期2-4d病猪白佃胞严重减少。仔猪可无症状而死亡,成年猪往往因细菌继发感染在1周内死亡。死亡率可高达100%。 亚急性型及慢性型的潜伏期及病程均延长,其病毒毒力减弱。此种毒株感染怀孕母者导致死胎、流产、木乃伊胎或死产,所产仔猪不死者产生免疫耐性,表现为颤抖、矮小并终身非毒,多在数月内死亡。 ②.致病机理:感染:病毒的最主要的入侵途径是通过采食,扁桃体是最先定居的器官,而后在内皮细胞、淋巴器官及骨髓增殖,导致出血症及白血细胞与血小板减少。 病变:脾梗塞是特征性病变,常可见

44、脑炎。肠黏膜的坏死性溃疡可见于亚急性或慢性病例。 ③.诊断病料:在国家认可的实验室进行诊断。病料可取胰、淋巴结、扁桃体、脾及血液。 方法:用荧光抗体法、免疫组化法、ELISA法可快速检出病毒抗原。 试述脂多糖的组成和功能。 答:为革兰阴性细菌所特有,位于外膜的最表面,厚8-10nm,由类脂A,核心多糖和侧链多糖三部分组成。具有控制细胞的透性,提高Mg2+浓度,决定细胞壁抗原多样性等作用,因而可用于传染病的诊断和病原的地理定位,其中的类脂A更是G-病原致病物质内毒素的物质基础。 试述细菌特殊结构的概念和功能。 仅在部分细菌中才有的或在特殊环境条件下才行成的构造称为特殊构造。主要是糖被

45、鞭毛,菌毛,性菌毛和芽孢等。 功能: 1、 荚膜①抵抗干燥②加强致病力,免受吞噬;③堆积某些代谢废物;④贮存物。⑤细菌间的信息识别作用 ⑥作为透性屏障和离子交换系统,以保护细菌免收重金属离子的毒害。 2、 鞭毛:①鉴定价值,鞭毛是细菌的运动器官,细菌能否运动可用于鉴定。②致病作用: 鞭毛运动能增强细菌对宿主的侵害,因运动往往有化学趋向性,可避开有害环境或向高浓度环境的方向移动。③抗原性:鞭毛具有特殊H抗原,可用于血清学检查。 3、 菌毛 普通菌毛是细菌的粘附器官,细菌藉菌毛的粘附作用使细菌牢固粘附在细胞上,并在细胞表面定居,导致感染 4、 性菌毛 具有向雌性菌株传递遗传物质的作用

46、有的还是RNA噬菌体的特异性吸附受体。 5、 芽孢 其功能是:①芽胞的抵抗力很强;②芽胞在适宜条件可以发育成相应的细菌;③鉴定细菌的依据之一。 试述革兰氏染色的意义和原理。 其重要的临床意义在于:1.鉴别细菌 2.选择药物 3.与致病性有关:革兰氏阳性菌能产生外毒素,革兰氏阴性菌能产生内毒素,两者的致病作用不同。 原理如下:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使

47、其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄 而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。 细菌新陈代谢的特点是什么? 1、 细菌生长和繁殖地速度极快、超过动物细胞的10~100倍; 2、 细菌利用各种化合物作为能源的能力远远强于动物细胞 3、 细菌对营养的需求比动物细胞更为多种多样,因为他们有多种代谢旁路 4、 细菌可利用超常流水线式生产地方式生成大分子物质 5、 细菌能产生诸如肽聚糖磷壁酸等特殊物质 细菌群体生长分期和

48、各个期的特点是什么? 答:迟缓期:菌体增大,代谢活跃,合成并积累所需酶系统。 对数期:细菌此时生长迅速,以恒定速度进行分裂繁殖,活菌数以几何级数增长,达到顶峰,生长曲线接近一条斜的直线。 稳定期:此时营养的消耗、代谢产物的蓄积等,细菌繁殖速度下降,死亡数逐步上升,新繁殖的活菌数与死菌数大致平衡。 衰亡期:细菌开好似大量死忙,死菌数超过活菌数。 按功能细菌培养基分几类? 普通培养基:琼脂蛋白胨肉水nacl 鉴别培养基:用于培养和区分不同种类细菌的培养基,如:伊红— 美兰和麦康凯琼脂。 选择培养基:在培养基中加入某种化学物质,如:SS平板。 厌氧培养

49、基:是为培养厌氧菌而设计的,方法是在培养基中加入还原剂如巯基乙酸钠等 试述主要的细菌生化反应及用途。 答:氧化酶试验:在有分子氧或细胞色素存在时,可氧化对二苯二胺出现紫色反应。试验用于检验细胞是否有氧化酶的存在。 触酶试验:触酶又名接触酶或过氧化氢酶,滴加过氧化氢能立即出现气泡,因过氧化氢被催化分解为水和氧气。乳杆菌等许多厌氧菌为阴性 氧化发酵试验(O/F试验):不同细菌对不同糖的分解能力及代谢产物不同,有的能产酸并产气,有的则不能。而且这种分解能力因是否有氧的存在而异,在有氧条件下称为氧化,无氧条件下称为发酵。试验时往往将同一细菌接种相同的糖培养基一式两管,一管用液体石蜡等封口,进行

50、发酵,另一管置有氧条件下。培养后观察产酸产气情况。O/F试验一般多用葡萄糖进行 VP试验:大肠杆菌和产气肠杆菌均能发酵葡萄糖,产酸产气,两者不能区别。但产气肠杆菌能使丙酮酸脱羧,生成中性的乙酰甲基甲醇,后者在碱性溶液中被空气中的分子氧所氧化,生成二乙酰与培养基中含胍基的化合物发生反应,生成红色化合物,是为阳性。大肠杆菌不能生成乙酰甲基甲醇,故为阴性 甲基红试验:在VP试验中,产气肠杆菌分解葡萄糖,产生2分子酸性的丙酮酸转变为1分子中性的乙酰甲基甲醇,故最终的酸类较少,培养基PH>5.4,以甲基红作为指示剂时,溶液呈橘黄色,是为阴性。大肠杆菌分解葡萄糖时,丙酮酸不转变为乙酰甲基甲醇,故培养液

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