3.2--体外受精和早期胚胎发育.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,3.2,体外受精和早期胚胎培养,学习目标,简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤,简述哺乳动物胚胎的早期培养方法,认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义,学习重点,（,1,）体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义,（,2,）哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤,学习难点,（,1,）卵母细胞的采集和培养,（,2,）精子的采集和获能,一、试管动物技术,概念,通过,人工操作,使卵子和精子在,体外,条件下成熟,和受精，并通过培养发育为,早期胚胎,后，再经,过,移植,产生后代的技术,精子,卵子,受精卵,早期胚胎,子宫,移植,个体,过程,:,人工操作,体外受精,1982,年世界首例试管牛犊问世,实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是,和,的培养。,体外受精,早期胚胎,主要包括,、,和,等几个主要步骤。,概念：,采取雌性动物的,和雄性动物的,，使其在,受精。,二、体外受精,卵母细胞,精子,体外,卵母细胞的采集,精子的获取,受精,a.,如何使雌性动物排出更多的卵子？,b.,对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊如何采集卵子？,c.,对于大家畜或大型动物如何采集卵子？,d.,采集的卵子是否马上可以受精？,阅读,P69,、,70,思考以下问题1.,卵母细胞的采集和培养,采用的主要方法是给供体注射,，使其排出更多的卵子，之后从,中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。,促性腺激素,输卵管,a.,如何使雌性动物排出更多的卵子？,超数排卵处理,b.,对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊如何采集卵子？,对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。,1.,卵母细胞的采集和培养,大家畜或大型动物，如牛，卵细胞的采集：,从屠宰场已屠宰母畜的,中采集卵母细胞，也可以借助,、,或,等工具，直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。,卵巢,超声波,(B,超,),探测仪,内窥镜,腹腔镜,1.,卵母细胞的采集和培养,c.,对于大家畜或大型动物如何采集卵子？,d.,采集的卵子是否马上可以受精？,经超数排卵处理获得卵子可,直接,与获能的精子在体外受精；但从已屠宰母畜的卵巢或活体采卵采集的卵母细胞，都要在体外经,后，才能与,精子结合完成受精。,人工培养成熟,获能,M,中期,2,、精子细胞的采集和获能,（,2,）体外精子获能的方法：,培养法,:,化学诱导法,:,如：啮齿动物、家兔和猪等,如：牛、羊等家畜,放入人工配制的获能液中,放在一定浓度的肝素或钙离子载体,A23187,溶液中,b.,体外受精需要哪些前处理？,卵巢,卵母细胞,新鲜或解冻的精液,卵母细胞培养,精子离心处理,M,期卵母细胞,M,期卵母细胞,精子获能处理,获能精子,体外受精,受精卵培养,3,、受精,获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在,或,中完成受精过程。,获能溶液,专用的受精溶液,为什么要经过离心处理？,精液包含精子和精清（精浆）两部分，经离心处理后，可以除去精清以利于精子获能,精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入,发育培养液,中继续培养，以,检查受精状况和受精卵的发育能力,。,培养液成分：,有机盐、,无机盐,、维生素、激素、,氨基酸,、核苷酸、,血清,等,三、胚胎的早期培养,“两盐”、“两酸”、“两素”、血清和水,糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、,血清、血浆,等,三、胚胎的早期培养,发育培养液成分较一般动物细胞培养液复杂,动物细胞培养液：,动物胚胎培养液成分：,有机盐、无机盐,、维生素、激素、,氨基酸,、核苷酸、,血清,等,培养发育到,适宜阶段,时，可将其取出向受体移植或冷冻保存,三、胚胎的早期培养,不同动物胚胎移植时间不同,牛、羊：,小鼠、家兔：,试管婴儿：,桑椹胚或囊胚阶段,注：胚胎发育的主要场所是母体（在体内发育）,可在更早的阶段移植,816,个细胞阶段,采集良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,良种牛体外受精胚胎,胚胎移植,受体牛,良种犊牛,成熟期牛,屠宰加工厂,市场,采集卵巢中的卵母细胞,“试管牛”工厂化生产的技术流程图,（早期胚胎培养）,早期胚胎,胚胎移植,C,代孕母体,D,新个体,（与,B,遗传物质相同）,克隆动物的培育,过程,A,雌性动物卵母细胞,去核,细胞质,取核,B,动物体细胞,核移植,显微注射,重组细胞,有性生殖,核移植,遵循,体外受精,试管动物,克隆动物,发育起点,生殖方式,产生过程,遗传物质,遗传规律,比较试管动物和克隆动物,来自双亲,受精卵,重组细胞,无性生殖,主要来自核供体,不遵循,二者都要经过早期胚胎培养和胚胎移植,胚胎移植,采集卵母细胞,体外培养,采集精子,体外获能,体外受精,早期胚胎培养,受体牛,小,结,（,时期,：）,1,）超数排卵,（试剂）,2,）活体取卵,（仪器）,3,）从屠宰的卵巢取卵,培养法,化学法,获能液或专用受精溶液,（培养条件、目的阶段）,成熟的卵子获能的精子,MII,中期,1,）假阴道法,2,）手握法,3,）电刺激法,1,、下列动物可用培养法进行精子体外获能处理的是（）,A,、牛,B,、羊,C,、驴,D,、家兔,D,巩固练习,2,、不同动物胚胎移植的时间不同，但一般不会在下列哪个时期移植（）,A,、卵裂期,B,、桑椹胚期,C,、囊胚期,D,、原肠胚期,D,3,、下列关于试管动物技术的叙述正确的是：,A,、应用该技术繁育后代的过程属于无,性繁殖类型,B,、应用该技术繁育后代的过程属于有,性繁殖类型,C,、试管动物技术是利用体细胞繁育后,代的技术,D,、试管动物技术培育动物过程全部在,体外进行,B,5,、动物试管技术是指通过人工操作使精子和卵子在,_,条件下成熟和,_,，并通,过培养发育为,_,后，再经,_,产生,后代的技术。,体外,受精,胚胎,移植,6,、哺乳动物的体外受精主要包,_,_,_,、,_,和,_,三个阶段。,卵细胞的采集,精子的获取,受精,4,、收集精子的方法有,、,和,等。,电刺激法,假阴道法,手握法,