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植物组织培养和动物细胞培养的比较.ppt

1、单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,植物组织培养和动物细胞培养的比较,比较项目,植物组织培养,动物细胞培养,原理,细胞的,细胞,培养基性质,培养基,培养基,培养基特有成分,、植物激素,葡萄糖、,培养结果,植物体,培养目的,快速繁殖、培育无病毒植株,获得,全能性,增殖,固体,液体,蔗糖,动物血清,细胞株、细胞系,细胞或细胞分泌蛋白,1,温故而知新,植物体细胞杂交,(,马铃薯番茄,),融合的原生质体,AB,再生出细胞壁,植物细胞的融合,杂种细胞,AB,杂种植

2、株,脱分化,愈伤组织,再分化,植物组织培养,原生质体,B,原生质体,A,去 壁,去 壁,人,工,诱,导,植物细胞,A,植物细胞,B,动物细胞可以融合吗?,如果可以,两者相同吗?,2,2.2.2,动物细胞融合,与单克隆抗体,带着问题走进课堂?,2.2,动物细胞工程,3,自主阅读,,p52,第,2,自然段,,思考下列问题:,什么叫动物细胞融合,?,(概念要点),两个细胞正在融合,受精作用,两个或多个动物细胞,一个细胞(杂交单核细胞),动物细胞融合,4,动物细胞融合过程示意图,不同,DNA,的两个细胞,灭活的病毒,有丝分裂,两个完整的杂交细胞,5,一、动物细胞融合(细胞杂交),1,、概念:,指两个或

3、多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,2,、结果:,形成单核的杂交细胞,3,、原理:,细胞膜的流动性,4,、诱导方式,物理法:离心、振动、电激,化学法:聚乙二醇(,PEG),生物法:灭活的病毒,6,思考讨论:,为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活?不灭活行吗?,因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂,质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合,不灭,活的话会感染细胞,而不能诱导细胞融合。,7,5,、过程:,动物细胞,A,动物细胞,B,诱导,融合,2,个完整的杂交细胞,AB,有丝分裂,(膜融合、质融合),(核融合),注意:,动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起,让它们随机融合后,再从中

4、筛选杂交细胞,8,6,、意义:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交(种间、属间、科间、动植物之间)成为可能。,7,、应用:成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段,特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体,9,思考题,1.,植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁?,酶解法,如纤维素酶或果胶酶,2.,动物细胞融合时需要进行去壁处理吗?为什么?,无需,因为动物细胞无细胞壁,3.,植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些?,离心、电激等物理方法;,PEG,等化学方法,4.,动物细胞融合能利用上述两类方法吗?还有其他方法吗?,能 还可以利用灭活的病毒进行诱导,5.,植物体细胞杂

5、交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形 成完整的杂种个体,动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗?,不能,10,植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,比较项目,植物体细胞杂交,动物细胞融合,细胞融合原理,细胞融合的方法,诱导方法,用途,获得,杂种植株,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性,细胞的全能性,去除细胞壁,后诱导原生质体融合,使细胞分散后诱导细胞融合,物理(离心、振荡、电刺激),化学(聚乙二醇),物理、化学方法(同左),灭活的病毒,主要用于制备,单克隆抗体,11,2.,动物细胞融合的概念,动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗

6、传信息的单核细胞称为,杂交细胞,。,12,1,、抗体,1.1,概念:,抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。,1.2,来源:,B淋巴细胞。,二、单克隆抗体,13,B,淋巴细胞与抗体的关系:,B,淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生抗体。,动物体内的,B,淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体,每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。,每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。,自主阅读,P,52,:,传统的抗体的生产方法及,缺陷是什么?怎样解决这个问题?,14,2.1,、单克隆,由一个细胞经过无性繁殖,(,多次有丝分裂,),形成的一个细胞群,叫一个克隆,即单克隆。,2,、单

7、克隆抗体的概念,2.2,、单克隆抗体,由一个效应,B,淋巴细胞经过无性繁殖形成的一个细胞群产生的化学性质单一,特异性强的抗体,即单克隆抗体。,要想获得大量的单一抗体,必须克隆单一的,B,淋巴细胞,形成细胞群。,15,3,、原理:杂交瘤细胞具有两个亲本的特性,即能迅速大量增殖,又能足够数量的单一抗体。,4,、过程,B,淋巴细胞,骨髓瘤细胞,诱导融合,B-B,细胞,B-,瘤细胞,瘤,-,瘤细胞,选择培养,杂交瘤细胞,(,B-,瘤细胞),克隆化培养,抗体检测,杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内增殖,单克隆抗体,16,6.,单克隆抗体的应用:,特异性强、灵敏度高、产量大,作为诊断试剂:准确识别各种抗原物

8、质,并与特异性结合,优点:,准确、高效、简易、快速,用于,运载药物:制成,“,生物导弹,”,治疗疾病:主要用于癌症治疗,5,、,单克隆抗体的特点:,17,思考问题:,1,、本过程利用了哪些原理?,免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理,这样融合成的杂交瘤细胞,继承了双亲细胞的遗传物质,不仅具有,B,细胞分泌抗体的能力,而且还有无限增殖的本领,因而可以获得大量单克隆抗体,2,、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与,B,细胞融合?,?,18,知识结构,两个过程,动物细胞培养过程,单克隆抗体制备过程,三个,“,一,”,一个诱导细胞融合的新方法 灭活的病毒,一个新细胞杂交瘤细胞,一个优势单克隆抗体特异性 强、

9、灵敏度高的优势,19,1,、动物细胞融合的目的中最重要的是(),A.克服远源杂交不亲和,B.制备单克隆抗体,C.培育新物种,D.生产杂种细胞,2,、动物细胞融合过程中所用的诱导剂灭活的病毒,抗原性和感染力的有无是(),A.失去抗原性,具有感染力,B.具有抗原性,也具有感染力,C.失去抗原性,也失去感染力,D.具有抗原性,失去感染力,B,课堂练习,D,20,3、,“,生物导弹,”,是指(),A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞,C.产生特定抗体的B淋巴细胞,D.在单克隆抗体上连接抗癌药物,D,4、科学家们用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交瘤细胞,经培养可产生大量克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是(),A.经过免疫的T淋巴细胞,B.未经过免疫的T淋巴细胞,C.经过免疫的B淋巴细胞,D.未经过免疫的B淋巴细胞,C,21,5.单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞,诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 (),淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞,小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞,A.B.,C.D.,C,6.动物细胞融合和植物原生质融合决定于 (),A.细胞膜的流动性 B细胞膜的选择透过性C.细胞质的流动性D细胞质酶的活性,A,22,

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