寄生虫粪便检查法.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,资料仅供参考,不当之处，请联系改正。,一、目的要求,掌握粪便中寄生虫虫卵检查的饱和盐水漂浮法；,应用显微镜观察粪便中虫卵的形态结构。,二、方法概述,用以检查蠕虫卵、原虫的包囊、滋养体和卵囊。方法简便，连续作,3,次涂片，可提高检出率。,1,、蠕虫卵检查,2,、原虫检查,1,）活滋养体检查,2,）包囊的碘液染色检查,3,）卵囊检测,4,）隐孢子虫卵囊染色检查：,改良抗酸染色法,（一）直接涂片法,（二）浮聚法,原理,：利用比重较大的液体，使原虫包囊或蠕虫卵上浮，集中于液体表面。常用的方法有三种：,1,、饱和盐水浮聚法,2,、硫酸锌离心浮聚法,3,、蔗糖离心浮聚法,虫卵比重与漂浮液比重,虫卵种类,比重,漂浮液的种类,比重,贾第虫包囊,1.040-1.060,饱和盐水,1.17,1.19,猪蛔虫卵,1.045,硫酸锌溶液,1.14,钩虫卵,1.085,1.09,氯化钙溶液,1.05,毛圆线虫卵,1.115,1.13,氯化钙溶液,1.25,猪后圆线虫卵,1.200,硫代硫酸钠,1.37,1.39,肝片吸虫卵,1.200,饱和硫酸镁,1.26,姜片吸虫卵,1.200,饱和硝酸钠,1.2,1.49,华枝睾虫卵,1.200,甘油,1.226,复腔吸虫卵,1.200,饱和蔗糖溶液,1.28,饱和盐水漂浮法操作示意图,自粪便不同处挑取如蚕豆大小的粪块，置于盛有少量饱和盐水的漂浮管中,2.,将粪便捣碎，与盐水搅匀，再加饱和盐水,3.,将满时，改用滴管，加至略高于管口但不超出为止,4.,取洁净载玻片一张盖在管口上，静止,30,分钟左右,5.,如图垂直向上提起载玻片,6.,敏捷地翻转，覆以盖片镜检,（三）沉淀法,原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底，有助于提高检出率。但比重较小的钩虫卵和某些原虫包囊则效果较差。,1,、自然沉淀法,2,、离心沉淀法,（四）漂浮,-,沉淀法,该法的原理是利用粪便中各种虫卵及粪渣中其它成份比重的差别，将不同比重的虫卵分别集中进行检查，即先按漂浮法检查比重较小的虫卵，然后将管中上层液倒掉，取沉淀物检查不能上浮而沉在下面的比重较大的卵，所以，该法可用于检查比重大小各异的寄生虫卵。,（五）拭子检查法,适用于在肛周、皮肤产卵（蛲虫），或常在肛门附近发现虫卵（带绦虫）的虫卵检查法。,1,、棉签拭子法,2,、透明胶纸法,漏斗幼虫分离法,(,贝尔曼法,),。取粪便,15-20g,，放在漏斗内的金属筛上，漏斗下接一短橡皮管，管下再接一个小试管。加入,40,到淹没粪球为止，静置,1-3,小时。此时大部分幼虫游走于水中，并沉淀于试管底部。取试管底部沉渣制成涂片镜检。,平皿法。取被检粪球,3-4,个，放于平皿中，加适量,40,温水，浸泡,10-15min,后，除去粪球，留下的液体在低倍显微镜下检查。,（六）粪便内蠕虫幼虫检查法,1,、幼虫分离法：网尾线虫、类圆线虫,2,、粪便内虫卵培养法：圆形线虫目,3,、毛蚴孵化法：,结肠小袋纤毛虫,Balantidium coli,十二指肠贾第虫,Giardia duodenalis,球虫,隐孢子虫,肝片形吸虫虫卵,日本血吸虫虫卵,蛭形巨吻棘头虫,膜壳绦虫虫卵,犬复孔绦虫卵,猪带绦虫虫卵,细粒棘球绦虫虫卵,莫尼茨绦虫虫卵,犬鞭虫卵,钩虫卵,犬弓首蛔虫卵,鸽毛细线虫卵，球虫卵囊,肉鸽蛔虫卵,猪蛔虫卵,测微尺的使用,通常的镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将,lmm,等分为,100,格，每格长,l0m,，是专门用来校正目镜测微尺的。,通常的目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把,5mm,长度刻成,50,等分、把,10 mm,长度刻成,100,等分或将,1mm,长度刻成,100,等分。,测微尺的使用,漏斗架,2,个,/,组；漏筛,6,个,/,组；小烧杯（,50ml,）,12,个,/,组；,500ml,烧杯,2,个,/,组；,100mL,烧杯,1,个,/,组；青霉素瓶,6,个,/,组；离心管,6,个,/,组；滴管,1,个,/,人；饱和盐水,1,瓶,/,组；甘油水,1,瓶,/,组；,100mL,量筒,1,个,/,组；小方瓷盘,1,个,/,组；擦镜纸,1,平皿,/,组；小棉块,1,份,/,组；载玻片、盖玻片,1,份,/,组；离心机、小天平各,1,台；镊子,2,个,/,组；显微镜；试管架,1,个,/,组；动物粪便,1,份,/,班；,50mL,烧杯两个用于配平。,一）、实验用品,三、试验内容,1.,每,2,人操作,1,份饱和盐水漂浮法,静置滤液,30,分钟；,2.,直接涂片法（每,2,人操作,1,份）；,3.,离心沉淀法（每,2,人操作,1,份）；,4.,继续“,1”,未完的操作。,二）实验安排,六、注意事项,1.,高倍镜下观察必须加盖玻片,2.,采用直接涂片法时，不要涂得太多，必须分散开，均匀,3.,观察寄生虫卵前，需校对目镜每格的长度；先在低倍镜下观察，发现后换为高倍镜,4.,使用离心机前，需配平离心管,七、作业：,绘制粪便样品镜检看到的虫卵,八、思考题：,粪便中虫卵、卵囊的检查需要注意那些问题？,