医学微生物学：09.球菌.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第 九 章,球 菌,coccus,指个体形状呈球形或椭圆形的一大类细菌,。,对人类有致病性的球菌。包括四个属,：,葡萄球菌属,：,G,球菌,链,球,菌属,：,G,球菌,肠,球,菌属,：,G,球菌,奈,瑟,菌属,：,G,球菌,脑膜炎,淋病奈瑟菌,。,化脓性球菌,（,pyogenic coccus,）,第一节 葡萄球菌属,（,staphylococcus,）,圆形,葡萄样排列,A,B,广泛分布,人体正常菌群,皮肤,鼻咽部。,医务人员带菌率,70%,交叉感染。,分类,：色素,凝固酶,金黄色葡萄球菌,;,凝固酶,阳,性葡萄球菌,（,S.aureus,）致病菌。,凝固酶阴性葡萄球菌,（,CNS,）,白色,柠檬色,。表皮葡萄球菌,;,腐生葡萄球菌。,三种葡萄球菌鉴别的主要性状,主要性状,金黄色葡萄球菌,表皮,/,腐生性葡,色素,金黄色,白色,/,柠檬色,血浆凝固酶,甘露醇发酵,溶血性,耐热核酸酶活性,磷壁酸核糖醇型,磷壁酸甘油型,蛋白,A,（,SPA,）,致病性,强,无或弱,一、金黄色葡萄球菌,（,S.aureus,）,（一）,生物学性状,1.形态与染色,球形,无鞭毛,无芽胞,1um,。,葡萄串状,革兰染色阳性,（,G,）,。,A,B,2,.,培养特性,易培养,:,兼性厌氧,肉汤或,普通平板,。,混浊,;菌落圆形,光滑,不透明凸起。,产,色素,:,金黄色,血平板,产生溶血环,。,金葡菌落,:,金黄色,透明,溶血,。,3.,生化反应,多数菌分解葡萄糖,麦芽糖和蔗糖。产酸不产气。,致病性球菌分解甘露醇。,过氧化氢酶阳性（与链球菌鉴别）。,含青霉素或溶菌酶培养基形成,L,型。,4.,抗原构造,(1),葡萄球菌A蛋白,：,细胞壁表面蛋白质，完全抗原,。,(,2,),荚膜多糖：,有利于细菌粘附,(,3,),多糖抗原：,存在于细胞壁，有群特异性。,SPA,capsule,teichoic acid,peptidoglycan,(1),staphylococcal protein A,SPA,：,细胞壁表面蛋白质,完全抗原,。,(,2,),荚膜多糖：,利于细菌粘附,。,(,3,),多糖抗原,:,群特异性。,5.,SPA,的,生物活性：,SPA与IgG,的,FC,端,结合,形成,免疫,复合物,：,抗吞噬,；,促,进,细胞分裂,；,引起超敏反应,；,损伤血小板,。,SPA,的,用,途,：,多种微生物抗原检测,肿瘤试验治疗,。,6,.,抵抗力,无芽胞菌,最强。,耐干燥,;,浓汁中存活,2-3,个月；,耐热,;,加热,60,1hr,或,8030,；,耐盐,;15%Nacl;,对青,庆,红,金霉素敏感,;,龙胆紫,超,敏感,。,易产生耐药性,耐,青,率达,90%,。,耐甲氧西林金葡菌,院内感染常见菌,。耐药机制,:,细胞壁成分改变,;,质粒传播,。,（二）,致病性与免疫性,金黄色葡萄球菌,毒力,强,侵入机体后,在宿主体内增殖,扩散,;,产生侵袭性酶和毒素,引起宿主疾病。,金黄色,葡萄球菌的致病物质,:,酶,；,毒素,；,细菌的表面结构蛋白,。,凝固酶（,coagulase,）,概念,:,含抗凝剂的血浆发生凝固的酶,。,游离凝固酶,（,free coagulas,）,结合凝固酶,（,bound coagulase,）,意义,:,葡萄球菌,致病性的重要指标,。,致病机理,:,抵抗细胞吞噬,;,保护病菌不受杀菌物质破坏,;,使感染局限化,;,形成血栓,。,纤维蛋白溶酶,:,葡激酶,纤,维蛋白原成为蛋白酶,溶解纤维蛋白。,耐热核酸酶,:,降解,DNA,和,RNA,致病性指标。,透明质酸酶,:,扩散因子,溶解细胞间质,促进致病菌扩散。,脂酶,:,分解,血浆和机体各部位表面的,脂肪,。,触酶,:,分解,H,2,O,2,。,毒素,葡萄球菌溶素,毒性休克综合征毒素,-1,杀白细胞素,肠毒素,表皮剥脱毒素,表面结构或蛋白,如粘附素,荚膜,胞壁肽聚糖和,SPA,等。,1.,葡萄球菌溶素（,staphylolysin,）,外毒素,细胞毒性,多种哺乳动物红细胞溶血,;,杀伤,WBC,PC,肝细胞,皮肤细胞,嵌入细胞膜疏水区导致细胞溶解。,2.,杀白细胞素（,leukocidin,）,靶细胞是,中性粒细胞和巨噬细胞,与细胞膜受体结合,膜通透性增高,胞浆颗粒排出死亡。,3.,毒性休克综合征毒素,-1,（,TSST-1,）,外毒素,引起发热,休克,;,增加对内毒素的敏感,性；,多器官,系统,功能紊乱,;,毒性休克综合征（TSS）,。,4.,表皮剥脱毒素,（,exfoliative toxin,）,表皮溶解毒素,质粒编码,皮肤弥漫性红斑,水泡,表皮大面积脱落,烫伤样综合症或剥脱性皮炎,。,5.,肠毒素,（,enterotoxin,）,耐热,蛋白质,耐,蛋白酶,。,食物中毒,刺激呕吐中枢,引起,呕吐,;,气雾剂吸入可致多器官损伤,休克死亡,生物武器。,肠毒素是,超抗原,（,superantigen,有丝分裂原作用,刺激淋巴细胞增殖,不经过递呈细胞处理,;,非特异激活,T,淋巴细胞,释放过量淋巴因子引起疾病。,所致疾病,化脓性感染和毒素性疾病,局部感染,:,皮肤软组织,:,毛囊炎,疖,痈,伤口化脓。,特点是病灶局限,浓汁粘稠,黄色。,全身感染,:,细菌沿血流和淋巴扩散,引发败血症,脓毒血症,;,肝,肾,肺,脾,脑脓肿。,脏器感染,:,肺炎,胸膜炎,中耳炎,脑膜炎,心包炎,心内膜炎。,毒素性疾病,外毒素引起的中毒性疾病,食物中毒,1-6hr,恶心,呕吐,腹泻。,假膜性肠炎,菌群失调。,烫伤样皮肤综合征,红斑,起皱,大庖,表皮脱落,病死率,20%,。,毒性休克综合征,TSS,突发高热,呕吐腹泻,低血压,休克,心肾衰竭,病死率高。,与艰难梭菌引起假膜性肠炎,持续腹泻。,免疫性,皮肤黏膜,有效阻挡金葡菌感染,天然免疫力,皮肤黏膜受伤,伤口。,患有慢性消耗性疾病,结核病,肿瘤,糖尿病患者,易,发生,感染。,感染后能获得一定的免疫力,不强,不持久,。,幼猫试验,标本,脓汁,血液,剩余食物,呕吐物,分离培养,血浆凝固酶,发酵甘露醇,耐热核酸酶,直接涂片镜检,革兰阳性葡萄球菌,生长现象,色素,溶血,生化反应,毒素检查,药敏实验,动物实验：对食物中毒患者,（三）,微生物学检查法,防,注意,消毒隔离,注意,个人卫生,防止,医源性感染,防止,耐药性产生,治,抗菌素,药敏试验,自身菌苗疗法,四,防治原则,二、凝固酶阴性葡萄球菌,C,oagulase negative staphylococcus,CNS,CNS已成为医源性感染常见重要病原菌,耐药菌株日益增多,;,当机体免疫功能低下或,细菌,进入非正常寄居部位,引,发,感染,各类感染中仅次于大肠埃希菌,居病原菌的第2位。,泌尿系感染,细菌性心内膜炎,败血症,术后及植入医用器械引起的感染,第二节 链球菌属,（,Streptococcus,）,概述,1.,概念,G,排列呈双或链状,排列的,球菌。,2.,分类,1,),溶血现象分类,接种,血琼脂培养基,按溶血现象分,3,类,:,甲,(,),型溶血；,乙,(,),型溶血；,丙,(,),型溶血三种溶血现象,溶血环现象,名称,类别,致病性,草绿色溶血环,溶血,甲型溶血性链球菌,条件致病菌,透明溶血环,溶血,乙型溶血性链球菌,致病力强,不产生溶血环,溶血,丙型链球菌不溶血,无致病性,乙型（,）,溶血性链球菌,2,）抗原结构分类,据链球菌细胞壁,C,多糖抗原结构不同,分为,20,个血清群,。,对人致病的菌株,90%,属,A,群。,A,群根据其,M,抗原不同,分成,100,多个,型。,3）生化反应分类,对一些不具有群特异性的链球菌（如肺炎链球菌和草绿色链球菌等）,需用生化反应,药物敏感和对氧的需要分类。,对氧的需要分类分为,：,需氧、,厌氧,微需氧链球菌,医学常见链球菌,链球菌 血清群 溶 血 诊断要点,引起常见疾病,化脓性链球菌,A,群,溶血,;,杆菌肽敏感,皮肤感染,咽炎,风湿,热,肾炎,无乳链球菌,B,群,溶血,;,杆菌肽不敏感,;,水解马尿酸盐,新生儿败血症,脑膜炎,牛链球菌,D,群,不溶血,;,不耐,6.5%Na,C,l,败血症,心内膜炎,肺炎链球菌,-,溶血,:,胆盐敏感,肺炎,脑膜,心内膜炎,草绿色链球菌,-,或不溶血,:,胆盐不敏感,龋齿,心内膜炎,一、,A,群（化脓性）链球菌,链球菌的代表种,致病性强,对人致病的链球菌,90%,属,A,群。,1.形态与染色,球形或椭圆形,链状排列,G,+,无芽胞,无鞭毛,有,透明质酸荚膜。,(,一,),生物学性状,2,.,培养特性,营养要求高,:,血平板或含血清培养基,；,液体培养,:,沉淀生,长；,血平板,小菌落,灰白色,表面光滑,不同菌株溶血不一,多数产透明溶血环（,溶血现象）,。,3.,生化反应,分解葡萄糖,产酸不产气。,不分解菊糖,不被胆汁溶解（,用于,鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌）,。,链球菌不产,过氧化氢,酶,与葡萄球菌,鉴别,。,4.,抗原结构,分,20,个群,A,群致病菌,（,溶血性链球菌或化脓性链球菌,）,根据蛋白抗原进一步分类,M,抗原,荚膜,细胞壁,蛋白质,多糖,肽聚糖,细胞膜,细胞质,1,）,多糖抗原,（,C抗原,）,群特异性抗原，细胞壁的多糖组分。,2,）,表面抗原或称蛋白质抗原,壁外的菌毛样结构含M蛋白,位于C抗原外层,具型特异性,有近,100,种血清型。,M,抗原与致病性有关。,3,）,P,抗原或称核蛋白抗原,:,无特异性。,5.,抵抗力,不耐热,:,60,灭活；,干燥尘埃中生存数月,；,常用消毒剂敏感,;,乙型链球菌对青霉素,红霉素,四环素,杆菌肽和磺胺药敏感,不产生耐药。,A,群链球菌有较强的侵袭力,产生多种外毒素和胞外酶。,1.致病物质,细胞,壁成分,粘附素,;,外毒素,;,侵袭酶,。,（二）,致病性与免疫性,1),细胞,壁成分,(1),粘附素,包括：,脂磷壁酸,LTA,与,细胞,膜有高度亲和力,与,M,蛋白构成菌毛样结构,在,呼吸道黏膜,细胞膜黏,定植。F蛋白,细胞壁成分,结合区暴露在菌体表面,是纤维粘连蛋白的受体。利于细菌定植和繁殖。,脂磷壁酸,(2),M,蛋白,（M protein）,A,群链球菌主要致病因子,抗吞噬和抗细胞内杀菌作用,;,与,心肌和肾小球基底膜共同抗原,。,(3),肽聚糖,A,群链球菌肽聚糖有致热,溶解血小板,提高血管通透性和诱发实验性关节炎等作用。,2）外毒素类,(1),致热外毒素,（,pyrogenic exotoxin,）,猩红热的主要毒性物质。致热外毒素抗原性强,有超抗原作用,;,家兔注射致热致死。,(,2,),链球菌溶素,（,streptolysin,）,链球菌溶素,O,:,含,SH,基蛋白,氧化失活,杀伤,白细胞,PC,神经细胞,巨噬细胞心肌细胞,抗原性强,产,SLO,抗体,400,。,链球菌溶素,S,:,小分子糖肽,无抗原性。,3）侵袭性酶,（,invasive enzyme,）,（1）透明质酸酶,:,分解透明质酸,利于,病菌扩散。,（2）链激酶,SK,:,激活,纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶,溶解血块或阻止血浆凝固,使,病菌扩散,。,（3）链道酶,SD,链球菌,DNA,酶,降解,DNA,使脓液稀薄,促进病菌扩散。,2,.,所致疾病,A,群链球菌引起的疾病约,占人类链球菌感染的,90%,淋巴管炎,淋巴结炎,蜂窝,组,织炎,咽炎,扁桃体炎,。,猩红热,毒素休克综合症,(3),超敏反应性,(1),化脓性感染,(2),中毒性疾病,风湿热,急性肾小球肾炎,A,B,A,B,3.,免疫性,产生,多种,抗体,对同型链球菌,的再感染有,免疫力,型间无交叉,易反复感染。,抗,M,蛋白抗体有保护作用,不同型,M,蛋白均可诱生,-,干扰素,增强吞噬,。,猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫,。,标本,:,直接涂片镜检,革兰阳性链球菌,分离培养,脓汁，血液，咽喉拭子,与金葡菌的鉴别,与肺炎链球菌的鉴别,典型链球菌形态,典型的链球菌菌落,必要时做,:,生化反应或药敏实验等,(,三,),微生物学检查法,血清学检查,SLO,检测,病人,血清中,ASO,。,1.,病人血清,1,滴,SLO,1,滴,;,2.,加入,SLO,乳胶试剂,;,3.,病人血清,ASO,剩余,与乳胶,SLO,反应,结果,:,效价,400,单位,阳性,意义,:,活动性风湿热,肾小球肾炎辅助诊断,。,飞沫传播,呼吸道感染,;,扁桃体炎,咽喉炎应及时彻底,治,疗,防止发生急性肾炎和风湿热。,治疗,首选青霉素,G,；,配合使用,长效青霉素,治疗或预防,。,(,四,),防治原则,二、其他链球菌,（一）甲型溶血性链球菌,:,也称草绿色链球菌,。,条件致病,菌：,1,.,龋齿,（,dental caries,）,:,常由变,异,链球菌引起,分解蔗糖产生葡聚糖,黏附菌群形成菌斑,发酵糖产酸,釉质脱钙。,2,.,亚急性细菌性心内膜炎,SBE,先心患者口腔手术。,（二）,B,族链球菌,无乳链球菌,寄居于阴道和直肠,鼻咽部,皮肤感染,心内膜炎,产后感染,新生儿败血症和脑膜炎。,（三）,D,族链球菌,（,条件致病,菌）,包括粪链球菌,牛链球菌和马链球菌。,正常寄居在皮肤,呼吸道,消化道和泌尿生殖道,。,偶,可,引起泌尿道感染,腹部化脓性感染,败血症和心内膜炎。,第三节 肺炎链球菌,S.pneumoniae,在自然界广泛分布,常寄居于正常人的鼻咽腔中,形成带菌状态,;,在机体抵抗力下降时引起疾病。,引起大叶性肺炎,占细菌性肺炎的,80%,。,1.,形态与染色,G,双球菌,矛头状,平面相对,尖面背,。,有厚荚膜,无芽胞,无鞭毛,。,一、生物学性状,2培养特性,营养要求高,:,血,琼脂培养基,菌落与甲链相似,脐状。,自溶,酶,液体培养基先浑浊后变清,;,生化反应,：,分解葡萄糖,乳糖,和,菊糖,;,胆汁,可,溶菌,。,抵抗力,:,较弱,热,紫外线,消毒剂,肥皂,。,3.抗原结构,(1),荚膜多糖抗原,型特异性,肺炎链球菌分,84,个,型。,(2),菌体,抗原,C,多糖,:,细胞壁中,可与宿主血清中,C,反应蛋白,反应,急性,炎症,时,含量,明显,增多,。,M,蛋白,:,型特异性,无致病性,抗体无保护。,致病物质,荚膜,:,侵袭力,最重要的致病物质,。,抗干燥,2,个月,;,抗吞噬,抗细胞内杀菌。,肺炎链球菌溶血素,O,:,与细胞膜胆固醇结合穿孔,溶解红细胞,;,发热,炎症,组织损伤。,脂磷壁酸,:,黏附肺上皮细胞或血管内皮细胞。,神经氨酸酶,:,协助菌细胞在鼻咽部和支气管黏膜细胞的定植,繁殖,扩散。,二,、致病性与免疫性,所致疾病,大叶性肺炎,;,急,高热,咳嗽,铁锈色痰液,呼吸急促,水泡音,X,胸片阴影,可继发胸膜炎,脓胸。,急性或慢性支气管炎,副鼻窦炎,中耳炎,儿童化脓性脑膜炎,败血症。,成人,1.2.3,型,儿童,14,型,;3,型毒力强,病死率高。,A,左肺下叶,B,右肺中叶 侧位片,A,支气管肺炎,B,间质性肺炎,A,B,免疫性,产生,荚膜多糖,型特异性,抗体,调理增强吞噬功能,建立同型牢固,免疫,。,1.,直接涂片镜检：,G,有荚膜的双球菌,2.,培养,“脐形”菌落,与甲链鉴别方法,胆汁溶菌试验,激活自溶酶。,荚膜肿胀试验，,Optochin,敏感试验,:20mm,以上,甲链,12mm,以下。,小白鼠毒力试验。,三,、微生物学检查法,1000,多价肺炎球菌荚膜多糖菌苗,预防,治疗,首选青霉素,四,、防治原则,儿童,老年人,预防肺炎,脑膜炎败血症,14,价或,23,价疫苗,包括,1,，,2,，,3,和,14,型,第四节 奈瑟菌属,Neisseria,脑膜炎奈瑟菌(,N.,gonorrhoeae,),淋病奈瑟菌（,N.,meningitidis,）,G,双球菌,无鞭毛,芽胞,有菌毛。,典型细胞内寄生。,人是唯一宿主。,一、脑膜炎奈瑟菌,N.meningitidis,1.形态与染色,G,双球菌,肾形或豆形,无鞭毛,芽胞,有菌毛,中粒细胞内。,2.分离培养,巧克力培养基,专性需氧菌,；,5%CO2,1mm,小菌落,露滴状,48hr,后自溶。,（,一,）,生物学性状,3.,抗原构造与分型,荚膜多糖群特异性抗原 分群,外膜蛋白型特异性抗原 分型,脂寡糖抗原,:,外膜糖脂成分,主要致病物质。,4.,抵抗力,四怕,:,热,寒冷,干燥,消毒剂,。,1.,致病物质,主要是内毒素,荚膜,:,有抵抗吞噬的作用；,菌毛,:,粘附于黏膜上皮细胞,利于定植；,IgG1,蛋白酶,:,水解,IgG1,便于黏附。,内毒素,:发热,微循环障碍,严重者可致内毒素休克,血栓,DIC,等。,（二）,致病性与免疫性,2.,所致疾病,传染源,:,病人和带菌者。,途径,:,呼吸道,飞沫或接触。,潜伏期,2-3d,鼻咽部繁殖入血,大量繁殖,产生毒性代谢产物,引起全身中毒,败血症,;,少数患儿突破血脑屏障进入,CNS,生长繁殖,引发流行性脑脊髓膜炎。,临床分型,:,普通型,;,暴发型,;,慢性败血症型。,典型症状,:,高热,;,出血斑,;,剧烈头痛,;,喷射性呕吐,;,颈项强直。,（三）,免疫性,隐性,显性感染,接种疫苗后,2,周产生可抗体。,调理作用,增强吞噬细胞功能；,s,IgA,阻止脑膜炎奈瑟菌对呼吸道黏膜的粘附,;,母体IgG,通过胎盘传给胎儿,6,个月内婴儿极少患流行性脑膜炎。,（二）,致病性与免疫性,1.,标本,3.,分离培养与鉴定,脑脊液,血液,出血点渗出液,鼻咽拭,子,;,保暖,保湿,立即送检,培养基预温,。,2.,直接涂片镜检,中性粒细胞内,外有革兰阴性双球菌,可作出初步诊断。,巧克力培养基,4.,快速诊断,对流免疫电泳,SPA,协同凝集试验,（三）,微生物学检查法,预防,：,儿童注射流脑荚膜多糖疫苗,;,2,价或,4,价混合多糖疫苗。,治疗,：青霉素,G,大剂量静脉给药。,（四）,防治原则,二、淋病奈瑟菌,N.gonorrhoeae,C,A,B,G,双球菌,似一对咖啡豆,。,有菌毛,有荚膜,。,专性需氧,巧克力血琼脂平板,2.,培养特性,1.,形态与染色,3.,抵抗力,弱,:,热,冷,干燥和消毒剂极敏感,;,1%,石炭酸,3min,或,1,:,4000,硝酸银,2,min,即死亡。自溶。,（,一,）,生物学性状,1.,致病物质,菌毛,:,粘附作用,;,抵抗吞噬。,外膜蛋白,:,利于粘附。,IgA,蛋白酶,:,能破坏黏膜表面,sIgA,。,内毒素,:,损害人体黏膜的重要因素。,（二）,致病性与免疫性,1.,淋病,人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主,属,性传播疾病STD,通过性接触引起泌尿道和生殖系统,化脓性,炎症,;,前列腺炎,附睾炎,盆腔炎不育症。反复感染。,2.,所致疾病,gonorrhea,A,B,2.,新生儿淋菌性结膜炎,/,新生儿脓漏眼,新生儿由产道感染有淋病性阴道炎或子宫颈炎的孕妇,经产道娩出被感染。,3.,淋病奈瑟菌性结膜炎及幼女阴道炎,通过毛巾,浴池间接感染。,1.,标本,2,.,直接涂片镜检,中性粒细胞内发现,G,双球菌,。,3,.,分离培养与鉴定,泌尿生殖道,感染,用无菌棉,棒,沾取,尿道,子宫颈口分泌物,注意保暖保湿,立即送检接种,。,巧克力色平板,5-10%,co,2,SPA,协同凝集实验,ELISA,检查标本中细菌,;,核酸杂交及PCR检测淋病奈瑟菌质粒DNA等。,（三）,微生物学检查法,4.,快速诊断,防,开展防治性病的知识教育,防止不正当的两性关系,治,新生儿,1%,硝酸银滴眼。,抗生素,:,参考体外药敏试验,。,对青霉素,头孢胺噻肟钠,环丙沙星,壮观霉素等多种抗生素敏感,近年报告耐药菌株增多。,（四）,防治原则,思考题,:,葡萄球菌的分类及意义。,链球菌的分类依据及意义。,金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌引起化脓性炎症的特点有何不同,为什么,?,如何预防和检测金葡菌引起的食物中毒,?,对脑膜炎奈氏菌应如何进行分离培养（为何需要床边接种）？快速诊断方法,?,淋球菌的致病性。,根据涂片染色镜检可作出微生物学初步诊断的病原性球菌有哪些,?,