淋巴瘤概述.ppt

单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,淋巴瘤诊断基础,南昌大学医学院,熊小亮,淋巴瘤的概念,Malignant Lymphomas,Concept,:,Lymphomas are malignant tumor which origin from,lymph node,and,other lymphoid tissue.,1,、原发于淋巴结,内,或淋巴结,外,淋 巴组织的恶性肿瘤,2,、,免疫系统免疫细胞,的恶性肿瘤,即淋巴细胞及其前体的肿瘤,常有免疫功能异常,如血清,Ig,升高,3.,某一阶段淋巴细胞的,单克隆增生,T,细胞和,B,细胞的分化被阻断,.,4.,肿瘤细胞的起源,绝大多数为,B,细胞,少数为,T,细胞,NK,细胞,“,恶性淋巴瘤的诊断和鉴别诊断，是临床病理诊断中,最困难,的领域。”,刘彤华,1,、淋巴结结构破坏，良恶性都可出现,2,、核分裂不是区分良恶标志,3,、出现多数不成熟细胞（母细胞）非恶性肯,定标志,4,、淋巴组织切片质量要求高（,40-50%,不合格）,淋巴组织的分布,中枢（未成熟）淋巴组织,骨髓（,B,细胞）,胸腺（,T,细胞）,外周（成熟）淋巴组织,淋巴结,脾脏,扁桃体,皮肤、粘膜淋巴组织,一、淋巴结基本结构,初级滤泡,皮质,输入管,髓索,髓窦,动脉,静脉,输出管,边缘窦,副皮质区,次级滤泡,生发中心,淋巴结,滤泡间区,小梁,正常的淋巴结直径约,1 mm,T,区：副皮质区,+,滤泡间区,B,区：淋巴滤泡 。,淋巴结的结构,小梁,被膜,髓质,皮质,网状纤维,浅皮质,滤泡,边缘窦,静脉,滤泡间,副皮质,淋巴窦,中间窦,髓窦,PVC,动脉,血管,实质,支架,髓索,皮质,1.,皮质是淋巴结的,B,细胞区,2.,包含初级滤泡（由小淋巴细胞聚集形成的圆形小体）和次级滤泡（伴有生发中心）,3.,初级滤泡和次级滤泡均富含滤泡树突状细胞,该细胞具有淡染的“裸”核，核膜薄呈淡紫色，含单个小核仁，偶见双核。,B,细 胞 增 生,结构,：滤泡形成、套区明显,细胞,：滤泡母细胞,生发中心母细胞,生发中心细胞,有吞噬功能的巨噬细胞,小淋巴细胞,淋巴细胞的形态,小淋巴细胞,-,圆形。胞浆少。核小，圆形，深染。,B,细胞转化,-,小,：圆形。胞浆少，淡粉染。核有裂，染色质粗颗粒状（,CC,）。,中,：圆形。胞浆明显，淡染（单核样,B,）。核圆形，染色质块状。核膜厚；中位核仁（,FB,）。,大,：圆形。胞浆丰富，粉染。核圆形，膜厚。核染色质稀疏，仁明显，,2-3,个，位于核膜下（,CB,）。体积更大，核膜清楚，单个大的红核仁（,IB,）。,初级滤泡：,B1,细胞,CD20,次级滤泡,生发中心细胞,1,、中心母细胞,2,、中心细胞,3,、巨噬细胞,4,、,FDC,5,、,T,细胞,4,1,2,3,5,抗原,套区帽,明区,暗区,暗区位于滤泡下极，而明区位于滤泡上极，覆盖于该区外周的套区较厚（帽区）且直接面对抗原入侵的方向（被膜下窦）。,暗区由较多的中心母细胞（大无裂细胞）和可染小体巨噬细胞构成。极性特征可通过,Ki-67,免疫染色显示（暗区中阳性细胞较多）。,暗区,明区,CD21,套区：,B1,细胞,位置：副皮质区,结构：结节状、散在,细胞：小,T,淋巴细胞,T,细 胞 增 生,小淋巴细胞,-,圆形。胞浆少。核小，圆形，深染。,T,细胞转化,-,小：,不规则形。胞浆少透明。核深染有折叠。,中,：多形性。胞浆多，淡染，透明状。核多形性，扭曲折叠，染色质细。,大,：丰富胞浆，嗜双色形。核大淡染，染色质细，稀疏。有核仁。,淋巴细胞的形态,滤泡间区,副皮质区,副皮质区,曲核细胞,CD3,髓索,髓窦,纤维支架,结外淋巴样组织,1,、结外淋巴样组织（包括,Waldeyer,扁桃体环、,peyer,集合淋巴小结、获得性粘膜,-,相关淋巴样组织及其它部位），其构成方式与淋巴结非常相似，除外：,（,1,）无淋巴窦（因此无髓索）,（,2,）无纤维包膜或纤维小梁,（,3,）无皮质,-,髓质划分,2,、,B,细胞滤泡由富含,T,细胞的滤泡间区分隔开，滤泡可表现清楚或模糊。,3,、显著的边缘带,4,、在,Waldeyer,环和,peyer,结中，上皮内淋巴细胞浸润（为,T,细胞）。,5,、表面上皮下浆细胞浸润,边缘带,二、淋巴细胞的分化,T,淋巴细胞的转化,原始,Tc,淋巴样前体,c,造血干,c,前体,Tc,双阴,Tc,单阳,Tc,双阳,Tc,T,免疫母,c,处女,Tc,效应,Tc,记忆,Tc,辅助,Tc,其它,Tc,抑制,Tc,NK,细胞的转化,原始,NKc,造血干,c,前体,NKc,成熟,NKc,成熟,NKc,属于异质性细胞群体,有与,Tc,和髓样,c,相似的免疫表型,三、,2001,年,WHO,淋巴瘤分类,共同语言,1,、国际性间的共同语言,2,、临床和病理之间的共同语言,WHO,淋巴瘤分类,2001,非霍奇金淋巴瘤（,NHL,）,Non-Hodgkins lymphoma,NHL,霍奇金淋巴瘤（HL,）,Hodgkins disease,HD,Hodgkins lymphoma,，,HL,霍奇金淋巴瘤（,HL,）,结节性淋巴细胞为主,HL,经典型霍奇金淋巴瘤,1,、淋巴细胞为主型（,LP,）,2,、结节硬化型（,NS,）,3,、混合细胞型（,MC,）,4,、淋巴细胞消减型（,LD,）,HD,三大进展,1,、,R-S,细胞与,EB-V,关系密切,2,、,R-S,细胞来源初步认定,-B,细胞,3,、新的改进分类推出,非霍奇金淋巴瘤（,NHL,）,B,细胞淋巴瘤,T/NK,细胞淋巴瘤,B,细胞淋巴瘤,1,、,前驱,B,淋巴母细胞白血病,/,淋巴瘤（,ALL/LBL,）,2,、,B-,慢性淋巴细胞白血病,/,小淋巴细胞淋巴瘤,(CLL/SLL,）,3,、,B-,前淋巴细胞白血病（,B-PLL,）,4,、淋巴浆细胞淋巴瘤（,LPL,）,5,、脾边缘区,B,细胞淋巴瘤，,+/-,绒毛状淋巴细（,SMZL,）,6,、毛细胞白血病（,HCL,）,7,、,浆细胞骨髓瘤,/,浆细胞瘤（,PCM/PCL,）,8,、,MALT,型节外边缘区,B,细胞淋巴瘤,（,MALT-MZL,）,9,、淋巴结边缘区,B,细胞淋巴瘤，,+/-,单核细胞样,B,细胞（,MZL,）,10,、,滤泡淋巴瘤,（,FL,）,11,、套细胞淋巴瘤（,MCL,）,12,、,弥漫性大细胞淋巴瘤,（,DLBCL,）,13,、,伯基特淋巴瘤,（,BL,）,T/NK,细胞淋巴瘤,1,、前驱,T,淋巴母细胞白血病,/,淋巴瘤（,T-ALL/T-LBL,）,2,、母细胞性,NK,细胞淋巴瘤,3,、慢性前淋巴细胞白血病,/,淋巴瘤（,T-CLL/T-PLL,）,4,、颗粒淋巴细胞白血病（,T-LGL,）,5,、侵袭性,NK,细胞白血病（,ANKCL,）,6,、成人,T,细胞淋巴瘤,/,白血病（,ATCL/L,）,7,、,结外,NK/T,细胞淋巴瘤，鼻型（,NK/TCL,）,8,、肠病型,T,细胞淋巴瘤（,ITCL,）,9,、肝脾,T,细胞淋巴瘤,10,、皮下脂膜炎样,T,细胞淋巴瘤,11,、,菌样霉菌病,/,赛塞里,(Sezary),综合征,(MF/SS),12,、间变性大细胞淋巴瘤,(ALCL),T,和非,T,非,B,细胞,原发性皮肤型,13,、,周围,T,细胞淋巴瘤,(PTL),14,、,血管免疫母细胞,T,细胞淋巴瘤,(AITCL),15,、,间变性大细胞淋巴瘤,(ALCL),T,和非,T,非,B,细胞,原发性全身型,WHO,淋巴瘤分类 的特点,1,、独立疾病,2,、病理特点、免疫表型、遗传学特征、临床表现,3,、包括：,NHL,、,HL,、淋巴细胞性白血病,4,、细胞起源,:B,T/NK,5,、分化阶段,:,前驱 和 成熟,(,周围,),以及分化程度,6,、发病机制,/,相关因素,独立疾病,(1),传统上人们将淋巴瘤看作是一个或两个疾病,每一个独立的淋巴瘤都有其独自的定义，具有独特的病理、免疫、遗传和临床特征,病理特点、免疫表型、遗传学特征、临床特点（,2,）,形态学,是分类的基础，,足以对大多数淋巴瘤做出诊断；,免疫表型和遗传学特征,是确定每一淋巴瘤的重要指标，,是达成共识的客观依据，,在淋巴瘤诊断中并非必不可少,有助于提高诊断的可重复性，,具有鉴别诊断和预后判断的辅助作用，,临床特点,是确定某些淋巴瘤的重要指标，如结内或结外（皮肤、中枢神经、胃肠、纵膈、鼻腔）,NHL,、淋巴细胞性白血病（,3,）,淋巴细胞性白血病和淋巴瘤为同一种疾病不同时相，将它们分开纯粹是人为的,WHO,分类特点（,4细胞起源,:B,细胞,T,细胞和,NK,（自然杀伤）细胞。,分化阶段：前驱和成熟,(,周围,),细胞以及分化程度,WHO,分类特点（,5,）,疾病,发病机制及相关因素,成人,T,细胞白血病,/,淋巴瘤,-,HTLV-I,感染,鼻型,T/NK,细胞淋巴瘤,-EBV,感染、遗传易感性,间变型大细胞淋巴瘤,-NPM/ALK,基因异位融合,原发渗漏性淋巴瘤,-HHV-8/KSHV,套细胞淋巴瘤,-Cyclin D1,、,胃,MALT,淋巴瘤,-,幽门螺杆菌或遗传因素,伯基特淋巴瘤,-C-myc,基因异位和,EBV,滤泡性淋巴瘤,-Bcl-2,四、淋巴结基本结构及相对应得淋巴瘤,初级滤泡：,套细胞淋巴瘤,次级滤泡,生发中心、套区（帽带）、边缘带,边缘带,边缘带,结内边缘带淋巴瘤,结外粘膜相关淋巴组织淋巴瘤,脾脏边缘带细胞淋巴瘤,生发中心细胞,1,、中心母细胞,2,、中心细胞,3,、巨噬细胞,4,、,FDC,5,、,T,细胞,4,1,2,3,5,生发中心细胞,滤泡性淋巴瘤,弥漫大,B,细胞淋巴瘤,伯基特淋巴瘤,霍奇金淋巴瘤,套细胞和小淋巴细胞,小淋巴细胞性淋巴瘤,/,慢性淋巴细胞性白血病,套细胞淋巴瘤,免疫母细胞,免疫母细胞瘤,（弥漫大,B,细胞淋巴瘤）,髓索和髓窦,浆细胞,髓索内多见,浆细胞瘤,五、,TB,细胞免疫表型,Pre pre B cell,Pre B cell,Immature B cell,Mature B cell,Activated B cell,Plasma cell,Precursor cells;,antigen independent,Virgin B cells;,antigen independent,Germinal center,antigen dependent,TdT,CD20,CD22,CD19,PAX5,CD79a,CD10,Bcl-6,CD138,Cytoplasmic CD22,Plasmacytoma,Prothymocyte,Subcapsular thymocyte,Cortical thymocyte,Medullary thymocyte,Peripheral T cell,Precursor cells,Mature T cells,Cytoplasmic,Surface,CD4,CD8,CD1,CD4,CD8,CD3,CD2,CD7,TdT,正常免疫结构,(,包括结外,),B cells(CD20+),T cells(CD3+);,小部分,CD20+cells,CD20,B,淋巴细胞免疫及基因标记,常备,：,CD20,，,CD79a,，,CD45RA,重要,：,Bcl-2,，,，,，,Ki-67,IgH,常备,：,CD3,，,CD45RO,重要,：,CD56,，,CD8,，,CD4,，,TiA-1,，,Gram B,TCR,，,T,淋巴细胞免疫,及基因标记,免疫组化在,ML,中作用,1,、确定,来源,，提示,分化程度,2,、特例少数可帮助定良、恶,1,）,轻链限制性表达,：,B,细胞如果是单克隆性增生，就可用,Ig,轻链（,，）染色来证实。,2,）,Bcl-2,蛋白,：,FL,中,90,以上高表达，而反应性增生不表达。,ALK,与,T,细胞淋巴瘤,至今未发现正常淋巴细胞表达,ALK,ALK,阳性主要见于间变性大细胞淋巴瘤,也可见于少数特殊类型的弥漫性大,B,细胞淋巴瘤,TIA-1,淋巴瘤分类重要标记物,前淋巴母细胞性淋巴瘤：,TdT,小,B,细胞淋巴瘤：,CD5,CD23,套区细胞淋巴瘤：,Cyclin D1,滤泡性淋巴瘤：,CD10,（或,bcl-6,）,Burkitt,s,淋巴瘤：,Ki67,（,100%,阳性）,血管免疫母细胞,T,细胞淋巴瘤：滤泡树突状细胞标记物（滤泡外网架）,间变性大细胞性淋巴瘤：,CD30,ALK,结外,NK/T,细胞淋巴瘤：,CD56,ML,中分子生物学应用,1,、确定淋巴组织增生的克隆性,2,、淋巴样增生组织的细胞来源,3,、检出某些淋巴瘤特殊的染色体异位。,如,t(14,18),染色体异位，在,FL,中检出率高,应用,PCR,进行基因重排检测,B,淋巴细胞从原始的胚系构型到分化成熟，其免疫球蛋白重链,(IgH),基因不断通过重排组合，即基因结构中的不同区域由原来的分散状态重新组合成具有表达活性的结构形式（,V,D,J,）。由于,V,、,D,、,J,各基因片段是多拷贝，其重排的自由度很大。而,B-NHL,的瘤细胞来自某一分化阶段的单克隆性淋巴细胞，其基因编码一致。,M P N 1 2,124bp,V,H,/J,H,引物行,IgH,基因扩增电泳图。,M,：标志分子量，,N,：阴性对照，,P,：淋巴浆细胞样,B,细胞淋巴瘤，,1,为疑难病例一，,2,为疑难病例二，其中,1,见,124bp,的阳性条带。,淋巴瘤诊断金标准,高质量切片,+,有经验的具批评眼光的病理医师,+,充分合作，不轻信的临床医师,形态改变,是最重要的指标,谢谢大家,