1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,完整版课件,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,二级,三级,四级,五级,完整版课件,*,项目六 无菌和无菌操作技术,1,完整版课件,无菌:没有活的微生物存在的状态。,无菌操作技术:用于防止微生物进入无菌范围导致污染的操作技术。,2,完整版课件,一、无菌的环境,二、无菌的器具、培养基,三、无菌操作技术,四、基本规则,3,完整版课件,一、无菌的环境,1,、无菌室,2,、超净工作台,3,、生物安全柜,4,、火焰周围,4,完整版课件,1,、无菌室,原则无菌室的规定:,房间设置(外面有缓冲室)、空
2、气过滤、墙面、墙角、微生物操作有关设备、紫外灯等。,无菌室布局,5,完整版课件,如条件有限,可在微生物试验室内专辟一种小房间作为无菌室。可以用板材和玻璃建造,面积4-5 平方米即可。,板材和玻璃隔出的无菌室,6,完整版课件,2,、超净工作台,超净工作台是一种提供,局部无尘无菌,工作环境的垂直,单向流,型空气净化设备。,超净工作台,7,完整版课件,3,、生物安全柜,生物安全柜外形与超净台类似,也提供,局部无尘无菌,工作环境。但它设置了风槽,气流不会吹向使用者,可以有效,保护使用者,。,生物安全柜,8,完整版课件,4,、火焰周围,一般使用酒精灯、煤气灯,其火焰周围是无菌区域(直径10cm左右)。,
3、这并不是运用高温杀死细菌,而是运用向上的单向气流形成一种无菌区域。,火焰周围是无菌区域,9,完整版课件,二、无菌的器具、培养基,1,、玻璃、金属等器具,干热灭菌法,2,、玻璃、金属、含水物品,高压蒸汽灭菌法,3,、金属、玻璃器具,火焰灭菌法,4,、液体或水溶性物质,过滤除菌法,10,完整版课件,1,、玻璃、金属等器具,-,干热灭菌法,设备:,电烘箱,用途:用于玻璃器皿、金属器具等耐热物品的烤干和灭菌。,条件:,160-165,,灭菌,1-2,小时,。,11,完整版课件,2,、玻璃、金属、含水物品等,-,高压蒸汽灭菌法,设备:,高压蒸汽灭菌锅,用途:培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物的
4、灭菌。,条件:,121,水蒸气,15,分钟,培养基一般使用高压蒸汽灭菌法,12,完整版课件,3、某些金属、玻璃器具-火焰灭菌法,即在,火焰,外焰上灼烧进行灭菌。,用途:接种环、接种针;涂布器;试管管口、锥形瓶瓶口等的灭菌。,13,完整版课件,4,、液体或水溶性物质,-,过滤除菌法,器具:,细菌过滤器,用途:不耐高温的液体、水溶性物质的除菌。,细菌过滤器,14,完整版课件,三、无菌操作技术,我们通过一定的技术来保证目的微生物、培养基不被环境微生物污染,这些技术就是无菌操作技术。,包括手部清洁消毒,用接种针、接种环、吸量管、涂布棒等工具进行多种操作等等。,15,完整版课件,1,、手部清洁消毒,洗手
5、手部有可见灰尘时、饭前、便后,用,水和肥皂,洗手;,Handrub,(揉手):手部较清洁时,,75%,乙醇或者醇基消毒剂,揉手。,16,完整版课件,动作:手掌,-,手背,-,指缝,-,手指,-,拇指,-,指尖,-,手腕,17,完整版课件,2,、培养皿操作,培养皿开合:单手打开和盖上皿盖,,包括,持皿法,和,皿加法,两种。,此操作用于制作培养基平板、接种等。,持皿法,18,完整版课件,皿加法,19,完整版课件,3,、接种环操作,包括灼烧接种环、接种、划线等。,20,完整版课件,灼烧接种环,先斜放外焰灼烧接种环,然后垂直放置后继续灼烧,再斜烧金属杆。,目前红外接种环灭菌器使用也比较广泛。,红外
6、接种环灭菌器,21,完整版课件,用接种环进行接种,22,完整版课件,用接种环进行划线,23,完整版课件,4,、涂布棒操作,灼烧灭菌,:,可以沾酒精然后灼烧,灼烧范围要包括其杆部。,24,完整版课件,涂布:,将菌液滴在培养基表面中央。右手拿涂布棒将菌液沿一条直线来回推进,然后沿一垂直线来回推进,平板边缘处可变化方向再涂几次。,涂布,25,完整版课件,5,、试管操作,单试管操作,(注意左右手的使用),26,完整版课件,双试管操作,27,完整版课件,四、基本规则,不得留长指甲,头发需扎好;,无菌操作中不要大声笑、说话、打喷嚏、打闹。,28,完整版课件,手不要在无菌物上方越过;,要理解拿无菌物的位置,不触碰其之外的位置;,不要将无菌物移出无菌范围。,29,完整版课件,感谢亲观看此幻灯片,此课件部分内容来源于网络,,如有侵权请及时联络我们删除,谢谢配合!,