公开课动物细胞融合与单克隆抗体.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,.,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,.,*,主讲：窦 辉,班别：高二（,22,）班,1,.,番茄,-,马铃薯（理想图）,2,.,有梦想，才会有创造！,3,.,人,鼠（想像图）,如何实现人、动物之间,细胞的融合呢？,4,.,A,细胞,B,细胞,人工诱导,1.1,动物,细胞融合的概念,杂交细胞,动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指,两个或多个细胞,融合形成一个,单核细胞,的过程。,5,.,诱导方法,物理法：,化学法：,生物法：,灭活的病毒（特有的方法）,原理：,与植物细胞融合的基本原理相同）,离心、电激、振动,聚乙二醇,(PEG),细胞膜的流动性,6,.,灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面,细胞膜被病毒颗粒穿通,细胞膜连接,细胞融合，形成杂交细胞,（细胞膜具有一定的流动性）,7,.,1.2,动物细胞融合过程,保留融合活性,为什么灭活的病毒能作诱导剂,？,灭活丧失感染性,8,.,1.3,动物,细胞融合技术的意义和应用,突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段,意义,：,应用：,制备单克隆抗体（最主要的应用）,9,.,从动物的,血清,中分离抗体,该法制备抗体的缺点：,如何解决这个问题呢？,抗体的传统生产方法,抗原,反复注射动物,产量,低,纯度,低,特异性,差,灵敏度,低,10,.,1975,年的实验室,一个美丽的发现,每个,B,淋巴细胞,只能分泌一种特异性抗体,怎样大量获得单一抗体,进行无性繁殖（克隆）,体外培养的细胞不能无限增殖,？,癌细胞,但是,既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞,11,.,一个,B,淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,骨髓瘤细胞能无限增殖,杂交瘤细胞,动物细胞培养技术,动物细胞融合技术,单克隆抗体,你的设想,既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞,12,.,BB,、,B,瘤,、,瘤瘤,（,B,、瘤）,（一选）,选择性培养基,：只有,杂交瘤细胞,才能存活,（二选）选能产生所需,专一抗体的,杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内培养,目的：,获得产生相应抗体的,B,细胞,13,.,2.2,单克隆抗体的应用,诊断试剂,最广泛应用,准确、高效、简易、快速,单克隆抗体最主要的优点：,特异性强,灵敏度高,并能大量制备,14,.,“生物导弹”单克隆抗体药物,单抗导向，药物为弹头,治疗疾病和运载药物,主要用于治疗,癌症治疗,，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成,“生物导弹”，,准确杀伤癌变细胞。,15,.,16,.,两个过程,动物细胞融合过程,单克隆抗体制备过程,三个“一”,一个诱导细胞融合的新方法,灭活病毒,一个新细胞杂交瘤细胞,一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势,本节小结,重点,17,.,【,例,1】,能使动物细胞融合的特有的诱导因子是（）,A.,离心,B.,灭活的病毒,C.,电刺激,D.,振动,【,例,2】,融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（,),A.,具有原来两个或多个细胞的遗传信息,B.,能无限增殖,C.,可形成新个体,D.,培养过程会贴壁,B,A,你掌握了吗？,18,.,【,例,3】,科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）,A.,经过免疫的,B,淋巴细胞,B.,不经过免疫的,T,淋巴细胞,C.,经过免疫的,T,淋巴细胞,D.,不经过免疫的,B,淋巴细胞,A,初试牛刀,19,.,【,例,4】,用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中,错误,的是（）,A,将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的,B,淋巴细胞,B,用纤维素酶处理,B,淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞,C,用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的,B,淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,D,筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体,B,初试牛刀,20,.,15,、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：（,1,）该方案能达到预期效果吗？,。原因是,_,。（,2,）图中为,过程，常用,作为诱导剂。该细胞继承了,_,，因此不仅能分泌,_,，还有,本领。,不能,没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生专一抗体的,B,淋巴细胞,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞的遗传物质,特异性抗体,大量增殖,制备单克隆抗体,（,3,）该方案的目的是,_,。,21,.,比较项目,细胞融合的原理,细胞融合的方法,诱导手段,用途,植物体,细胞杂交,动物细,胞融合,课后作业：,比较动、植物细胞杂交技术,22,.,谢谢,23,.,单克隆抗体,:,单个,B,细胞克隆产生的,化学性质单一,、,特异性强,的抗体,24,.,