实验---影响酶促反应的因素.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,蛋白质,*,影响酶促反应的因素,课堂目标,1,掌握,影响酶作用的几个因素及 实验的原理,2,以严谨的科学态度进行实验操作，准确记录。并对结果进行讨论分析，完成实验报告,2025/5/10 周六,蛋白质,1,实验原理,酶促反应在低温时，反应速度较慢甚至停止。随着温度升高，反应速度逐渐加快。当达到最适温度时，酶促反应速度达最大值。人体内大多数酶的最适温度在,37,左右。如温度过高，反应速度反而下降，甚至停止。这主要由于酶蛋白因高温变性失活之故。,酶活性与溶液,pH,有关，,pH,既影响酶蛋白本身构象，也影响底物解离程度，从而改变酶与底物结合和催化作用。故每种酶都有其最适,pH,的作用环境。过酸过碱均可引起酶蛋白变性而降低或失去活性。唾液淀粉酶的最适,pH,为,6.8,。氯离子对该酶活性有激动作用，铜离子则有抑制作用。,2025/5/10 周六,蛋白质,2,本实验利用碘与淀粉及其水解产物,(,大分子糊精、麦芽糖,),的颜色反应，来比较唾液淀粉酶在不同条件下催化淀粉水解的速度，从而判断温度、,pH,、激动剂和抑制剂对酶活性的影响。,淀粉,糊精,麦芽糖,与,碘,呈,蓝色,与,碘,呈,紫色,至,红色,与,碘,不呈色,2025/5/10 周六,蛋白质,3,试剂,1,1,淀粉溶液,2,新鲜配制的稀释唾液,3,不同,pH,缓冲液,(1)pH6.8,缓冲液,(2)pH5.0,缓冲液,(3)pH8.0,缓冲液,4,0.9,NaCI,溶液,(,即生理盐水,),5,1,CuSO,4,溶液,6,碘液,2025/5/10 周六,蛋白质,4,操作,1,温度,对酶活性的影响,(1),取试管三支，编号，按下表加入试剂,(2),混匀后，三支试管分别置于冰浴、沸水浴、恒温水浴,(37),中预温,5,分钟。再向各管加入稀唾液,5,滴，继续在原水浴中放置,10,分钟。,(3),取出各管，各滴加碘液,1,滴,(,切忌摇动,),，观察颜色并记录。,管号,试剂（滴）,1,2,3,pH6.8,缓冲液,15,15,15,1,淀粉溶液,55,5,2025/5/10 周六,蛋白质,5,2,pH,对酶活性的影响,(1),取试管三支，编号，按下表加入试剂,(2),将各管摇匀，同时置,37,水浴中恒温,10,分钟,(3),取出各管，各滴加碘液,1,滴,(,切忌摇动,),，观察颜色并记录。,管号,试剂,(,滴,),1,2,3,pH5.0,缓冲液,15,pH6.8,缓冲液,15,pH8.0,缓冲液,15,1,淀粉溶液,5,5,5,稀唾液,5,5,5,2025/5/10 周六,蛋白质,6,3,激动剂、抑制剂,对酶活性的影响,(1),取试管三支，编号，按下表加入试剂,(2),将各管摇匀，同时置,37,水浴中恒温,10,分钟,(3),取出各管各滴加碘液,l,滴,(,切忌摇动,),，观察颜色并记录。,管 号,试剂,(,滴,),1,2,3,蒸馏水,10,0.9,NaCl,溶液,10,1,CuSO,4,溶液,10,pH6.8,缓冲液,15,15,15,1,淀粉溶液,5,5,5,稀唾液,5,5,5,2025/5/10 周六,蛋白质,7,实验报告,1,结合本次实验，说说影响酶作用的几个因素,2,根据实验结果，正确填写下列各表，并作简单分析,(1),温度,影响,试管号,实验条件,加碘液,后,颜色,结果分析,1,冰,浴,2,沸水浴,3,恒温水浴,2025/5/10 周六,蛋白质,8,(2),pH,影响,(3),激动剂,与,抑制剂,影响,试管号,实验条件,加,碘液,后,颜色,结果分析,1,pH5.0,2,pH6.8,3,pH8.0,试管号,实验条件,加碘液,后,颜色,结果分析,1,蒸馏 水,2,0.9,NaCL,溶液,3,l,CuS04,溶液,2025/5/10 周六,蛋白质,9,思考題,加入碘液观察结果以前，切忌摇动。你不妨试试在观察后把不起蓝色反应的试管摇动几下，或再滴加碘液，很可能会变为蓝色。这是什么缘故,?,2025/5/10 周六,蛋白质,10,