实验五-延胡索对小白鼠的镇痛作用.ppt

单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,中兽医教研室,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,理论验证性实验,讲解教师：王长林,指导教师：王长林 赵建平 李艳玲,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,大纲要求：,【,教学目标,】,通过实验使学生加深对延胡索功效的认识，加深对中药材功能的理解和记忆,并验证延胡索镇痛的药理作用。,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,实验考核,】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,实验考勤,实验态度,操作过程,实验报告,实验分析,实验关键技术,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,延胡索（第九节理血药,2,）,【,基源,】,本品为罂粟科植物延胡索,Corydalis yanhusuo W.T.Wang,的干燥块茎。,【,相关理论,】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,延胡索,【,产地分布,】,主产于浙江、江苏、湖北、湖南、辽宁、山东等地。,【,相关理论实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,延胡索,【,性状,】,本品呈不规则的扁球形，直径,0.5,1.5cm,。表面黄色或黄褐色，有不规则网状皱纹。顶端有略凹陷的茎痕，底部常有疙瘩状凸起。质硬而脆，断面黄色，角质样，有蜡样光泽。气微，味苦。,【,相关理论,】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,延胡索,【,炮制,】,延胡索,除去杂质，洗净，干燥，切厚片或用时捣碎。,醋延胡索,取净延胡索，照醋炙法（参照兽药典附录）炒干，或照醋煮法（参照兽药典附录）煮至醋吸尽，切厚片或用时捣碎。,【,相关理论,】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,延胡索,醋延胡索,炙,醋炙：引药归肝经，,加强镇痛效果。,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,延胡索,【,性味归经,】,辛、苦，温。归肝、脾经。,【,功能,】,活血散瘀，行气止痛。,【,主治,】“,诸痛,”,气滞血瘀，跌打损伤，产后瘀阻，风湿痹痛。,【,相关理论,】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,延胡索,【,化学成分,】,本品主要含生物碱，其主要成分为,延胡索甲素,、,延胡索乙索、延胡索丙素,(,原阿片碱,),、延胡索丁素等。,尚含淀粉、挥发油、树脂、去氢紫堇碱等。,【,相关理论,】,延胡索素,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,延胡索乙素,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,延胡索,【,现代研究,】,（,1,）有明显的镇痛作用。,（,2,）有镇静、催眠作用。,（,3,）减少胃液分泌。,（,4,）扩张冠状血管。,【,相关理论,】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,实验原理,】,热板法,延胡索能活血行气止痛，是止痛的良药。热板法是筛选镇痛药的经典方法：小鼠的足部受热板刺激而产生疼痛时，就发生舔足,的特殊反应。以接触热板到舔后足所需的时间作为痛阈值，以此为观测指标。,舔足,t,30,550.5,第一组：延胡索液,第二组：哌替啶注射液,第三组：生理盐水,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,舔足,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,实验原理,】,热板法,延胡索能活血行气止痛，是止痛的良药。热板法是筛选镇痛药的经典方法：小鼠的足部受热板刺激而产生疼痛时，就发生,舔足,的特殊反应。以接触热板到舔后足所需的时间作为痛阈值，以此为观测指标。,550.5,第二组：哌替啶注射液,第三组：生理盐水,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,舔足,杜冷丁,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,实验原理,】,热板法,延胡索能活血行气止痛，是止痛的良药。热板法是筛选镇痛药的经典方法：小鼠的足部受热板刺激而产生疼痛时，就发生,舔足,的特殊反应。以接触热板到舔后足所需的时间作为痛阈值，以此为观测指标。,舔足,t,30,550.5,第一组：延胡索液,第二组：哌替啶注射液,第三组：生理盐水,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,舔足,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,实验组织,】,班级进行分组，每组名学生；,每组用,15,只预选合格实验动物；,每组有一名专业教师或实验教师（兼职教师）进行指导。,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,实验动物 小白鼠（合格,15/,组）。,1,【,实验准备,】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用雌性,为什么？,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,实验器材,鼠笼、水浴锅、烧杯（,500ml,）、天平、注射器、秒表、钳子、镊子、棉棒等。,2,【,实验准备,】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,实验药品,哌替啶注射液,lmg,ml,延胡索水煎醇沉液,4g,ml,。,生理盐水,苦味酸（标记用）,3,【,实验准备,】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,课程组织过程,】,教师演示关键步骤和技术。,学生在教师的指导下亲自操作各种按摩手法。,结果统计和讨论以及分析总结。,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,方法与步骤,】,要求：,浓度：,2温度：室温（,0,）,醇沉,（一）延胡索的煎制,水煎醇沉（提前准备）,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,水煎,醇沉：水煎剂经浓缩到一定浓度,（,12g/ml,）后，加入,23,倍量,95%,乙醇（使含乙醇量达到,6070%,），边加边搅拌，即有,沉淀析出，置冰箱内,24,小时使,沉淀完全。过滤，滤液回收乙醇,后以蒸馏水溶解。过滤后稀释成,规定浓度即可，必要时可以重复,此乙醇沉淀,23,次。,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,方法与步骤,】,调节水浴锅，使温度恒定在,550.5,，每次取小鼠,1,只，放入烧杯内。记录自放入烧杯至出现,舔后足,所需时间,(s),，作为该鼠的痛阈值。,（二）预选实验动物,结合给药前第一次痛阈值测定,550.5,t,30,第,1,次,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,方法与步骤,】,t,30,为合格动物,预选合格小鼠,15,只,/,每实验小组。,（三）预选实验动物,结合给药前痛阈值测定,t,30,550.5,第,1,次,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,方法与步骤,】,分,3,组,每组,5,只。,（四）实验动物分组（,15,只）,第,2,次测定给药前痛阈值,t,30,550.5,第,2,次,第一组：实验组,a,第二组：阳性对照组,b,第三组：阴性对照组,c,再次测定痛阈值，计算平均数，作为该鼠给药前的痛阈值,a1_ a15;b1_ b15;c1-c15.,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,方法与步骤,】,（五）用药,第一组：实验组,a,第二组：阳性对照组,b,第三组：阴性对照组,c,第一组：延胡索液,0.2ml,10,g,第二组：哌替啶注射液,0.2ml,10g,第三组：生理盐水,0.2ml,10g,腹腔注射,0.2ml,10,g,体重,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,腹腔注射（,ip,）左手固定小鼠，使腹部在上，头部下倾，右手持注射器，取,45,角刺入一侧下腹部向头端刺入腹腔（图）。进针部位不宜太高，刺入不能太深，以免伤及内脏。,注射量一般为,0.1,0.2 ml/10g,体重。,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,方法与步骤,】,（五）测定给药后小鼠痛阈值,给药后的,15,、,30,、,60,、,90min,测定各鼠痛阈值。,若小鼠在热板上,60s,仍无痛觉反应，应取出，按,60s,计。,a,b,c,15,30,60,90,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床实验教学,【,方法与步骤,】,（五）数据记录,给药前,给药后,组别,第,1,次,第,2,次,平均,15,30,45,60,90,延胡索注射液,a1a5,哌替啶注射液,b1b5,生理盐水,c1c5,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,方法与步骤,】,（六）数据处理（,1,）组内处理,分组,动物数,给药前平均值（,s,）,给药后痛阈值（,s,）,痛阈提高百分率,%,15,30,60,90,15,30,60,90,延胡索液,5哌替啶,5,生理盐水,5,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,方法与步骤,】,（六）数据处理（,2,）班级,12,小组数据汇总,分组,动物数,给药前平均值（,s,）,给药后痛阈值（,s,）,痛阈提高百分率,%,15,30,60,90,15,30,60,90,延胡索液,60,哌替啶,60,生理盐水,60,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,方法与步骤,】,（六）数据处理（,2,）,痛阈提高百分率,用药后平均痛阈值,用药前平均痛阈值,用药前平均痛阈值,100%,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,方法与步骤,】,数据参考,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,注意事项,】,室温以,15,20,为宜，过低则小鼠反应迟钝，过高则过于敏感，而引起跳跃，影响实验的准确性。,正常小鼠一般放入烧杯后,10,15s,内出现不安，举前肢，舔后足，踢后肢，跳跃等现象。这些动作均不作为疼痛指标，只有,舔后足,才作为疼痛的指标。,一般不选用雄性小鼠，因雄性小鼠阴囊可触及烧杯底部，易呈现敏感反应，影响实验结果。,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,开始演示,】,t,30,550.5,教师演示,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,学生操作,【,指导操作,】,捉小鼠,称重,选择实验动物（给药前第一次痛阈值测定）,实验动物分组（第,2,次痛阈值测定）,测定给药后,15,、,30,、,60,、,90,的痛阈值,数据记录,数据处理,实验动物处理,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,【,实验总结,】,数据收集,发现问题,布置作业,实验报告,实验考核,【,问题讨论,】,试述延胡索镇痛的有效成分及机理。,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件,Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床,实验教学,本次实验结束！,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,