GBZ∕T 315-2018（代替WS∕T 38-1996） 血中铬的测定 石墨炉原子吸收光谱法.pdf

CS 13.100 C 52 中华人民共和国国家职业卫生标准 GBZ/T 3152018 代替 WS/T 381996 血中铬的测定 石墨炉原子吸收光谱法 Determination of chromium in blood Graphite furnace atomic absorption spectrometric method 2018 - 08 - 16 发布 2019 - 01 - 01 实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会 发布 GBZ/T 3152018 前 言 根据中华人民共和国职业病防治法制定本标准。 本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。 本标准代替WS/T 381996血中铬的石墨炉原子吸收光谱测定方法。 与WS/T 381996相比，主要修改如下： 仪器操作条件改为仪器操作参考条件； 对标准配制及样品处理方法进行了改进； 增加了基体改进剂的使用。 本标准起草单位：江苏省疾病预防控制中心、中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所、广东省职业病防治院、无锡市疾病预防控制中心、南京市职业病防治院。 本标准主要起草人：仲立新、朱宝立、张恒东、姜冬、闫慧芳、张敬、张爱华、董明、刘文卫、孟元华、邢艳、周同舟。 本标准所代替标准的历次版本发布情况： WS/T 381996。 GBZ/T 3152018 1 血中铬的测定 石墨炉原子吸收光谱法 1 范围 本标准规定了测定血中铬的石墨炉原子吸收光谱法。 本标准适用于职业接触人员血中铬的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GBZ/T 295 职业卫生生物监测方法 总则 WS/T 97 尿中肌酐的分光光度测定法 WS/T 98 尿中肌酐的反相高效液相色谱测定方法 3 原理 血液样品用基体改进剂稀释后，在357.9 nm波长下，用石墨炉原子吸收光谱法测定。 4 仪器 4.1 容量瓶，10 mL、100 mL、500 mL、1000 mL。 4.2 移液器，50 L、200 L、1000 L。 4.3 天平，感量为 0.1mg。 4.4 具盖塑料离心管，1.5 mL。 4.5 采血用品，采血针、消毒棉签、肝素锂（钠）真空采血管等。 4.6 原子吸收光谱仪，配石墨炉原子化器、塞曼校正装置，附铬空心阴极灯。 5 试剂 5.1 实验用水，去离子水或石英玻璃亚沸蒸馏水。 5.2 硝酸，高纯。 5.3 Triton X-100，色谱纯。 5.4 六水合硝酸镁，优级纯。 5.5 基体改进剂：称取 0.865 g 六水合硝酸镁溶于适量水中，分别加入 1.0 mLTriton X-100，2.0 mL硝酸，定容至 1000 mL。 GBZ/T 3152018 2 5.6 牛血，肝素抗凝，-20保存，用时放至室温摇匀。也可采用低本底人血等。 5.7 铬标准储备液：准确称取基准物质重铬酸钾（110 ，烘 2 h）1.4315 g（精确至 0.0001 g），用少量水溶解后全量转移到 500 mL 容量瓶中，加 5.0 mL 硝酸，用水定容至刻度，混匀。此溶液每毫升含 1.0 mg 铬。或购置经国家认证并授予标准物质证书的铬单元素标准储备液。 5.8 铬标准中间液(Cr)=5.0 g/mL：用基体改进剂将铬单元素标准储备液稀释成浓度为 5.0 g/mL 的标准中间液。 5.9 铬标准系列溶液： 分别吸取铬标准中间液 （5.0 g/mL） 0.0 L、 30.0 L、 50.0 L、 100.0 L、200.0 L、400.0 L、800.0 L 于 10 mL 容量瓶中，用基体改进剂稀释至刻度，混匀。各容量瓶中每升分别含铬 0.0 g、15.0 g、25.0 g、50.0 g、100.0 g、200.0 g、400.0 g。临用现配。 6 样品的采集、运输和保存 按GBZ/T295 要求采集铬接触工人静脉血2.0 mL以上，立即摇匀，冷藏运输。样品4 条件下可保存两周，-20 条件下可保存两个月。 7 分析步骤 7.1 仪器操作参考条件 参照下列仪器条件，将具塞曼校正装置的原子吸收光谱仪调试至最佳状态。 a) 波长：357.9 nm； b) 狭缝：0.7 nm； c) 进样体积：10 L； d) 石墨炉条件： 干燥：室温110 ，20 s ；110 130 ，30 s ； 灰化：1300 ，20 s ； 原子化：2300 ，5 s（停气）； 清除：2500 ，5 s 。 7.2 样品预处理 将血样放至室温，充分摇匀，吸取血样0.10 mL于1.5 mL具盖塑料离心管中，加入0.90 mL基体改进剂，充分混匀，待测；同时用0.10 mL水代替血样，按样品同样处理，作为试剂空白。 7.3 工作曲线的配制和测定 取7只1.5 mL具盖塑料离心管，分别吸取0.1 mL0.0g/L400.0 g/L标准系列溶液、0.1 mL牛血、0.8 mL基体改进剂于离心管中，混匀，参照仪器操作参考条件进样测定。具体操作见表1。根据各管吸光度与标准系列1管吸光度差值，与铬浓度（g/L）计算回归方程。 GBZ/T 3152018 3 表 1 血铬工作曲线标准系列溶液配制 试管编号 1 2 3 4 5 6 7 铬标准系列溶液/mL 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 牛血/mL 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 基体改进剂/mL 0.80 0.80 0.80 0.80 0.80 0.80 0.80 铬浓度/(g/L) 牛血本底值 牛血本底值+15 牛血本底值+25 牛血本底值+50 牛血本底值+100 牛血本底值+200 牛血本底值+400 7.4 测定 用测定标准系列溶液的操作条件测定试剂空白、 样品空白和样品溶液， 测得的样品和样品空白吸光度值减去试剂空白吸光度值后，由回归方程计算样品中铬的浓度（g/L）。 8 计算 血样中铬的浓度，按式（1）进行计算： 1cc . (1) 式中： c 血样中铬的浓度，单位为微克每升（g/L）； c1 由回归方程计算所得血样中铬的浓度，单位为微克每升（g/L）。 9 说明 9.1 方法检出限为 0.47 g/L，定量下限为 1.56 g/L；方法测定范围为 1.56 g/L400.0 g/L，在此范围内相关系数0.9990；方法批内精密度范围为 0.6 %6.6 %（血铬浓度为 4.1 g/L306.1 g/L，n6）；方法批间精密度范围为 1.0 %6.7 %（血铬浓度为 4.1 g/L302.4 g/L，n6）；血样加标回收率为 94.5 %104.1 %（血铬本底浓度为 3.2 g/L101.2 g/L，加标浓度为 25.0 g/L300.0 g/L，n6）。 9.2 本法用于血铬测定，血样最小取样量为 50.0 L。 9.3 实验所用器皿均需以硝酸溶液（1+4）浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗干净。 9.4 本法用于血铬测定时，不应使用氘灯校正装置的石墨炉原子吸收光谱仪进行分析，否则会导致方法检出限、定量下限均较高。 9.5 1000.0 g/mL 的 Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cu2+、Zn2+，500.0 g/mL 的 Fe3+，100.0 g/mL 的 Li+、Si+、Ba2+、Be2+、Al3+、Ni2+、Mn2+、Pb2+等离子不干扰测定。 _