免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,免疫组化在肿瘤病理诊疗中应用,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第1页,免疫组织（或细胞）化学技术是免疫学与组织化学两种技术结合，它基本原理是应用抗原与抗体特异性结合，再用显色剂显色到达标识细胞某种抗原物质定性与定位检测技术，是一个方法简单，且有效肿瘤标识技术。,当前在免疫组化技术围绕着提升敏感性与特异性不停改进和发展，但它仍有其不足应用于蛋白水平，敏感性与特异性不足，故应与其它组织化学、电镜及分子生物学技术相结合。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第2页,一、免疫组化在诊疗中应用标准,1预防假阳性与假阴性，预防操作中污染，规范操作，设阳性与阴性对照。,2选取2种以上同类抗体：当前肿瘤均为相关抗原，特异性不足，各种同类抗体可提升阳性率。,3正确评价免疫组化结果：其结果受抗体、特异性与质量、操作、标本固定等各种原因影响。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第3页,4合理选择抗体：既要符合设计要求，价廉物美，分1、2、3线抗体。,5待检标本抗原保留要好：要求快速、新鲜、充份固定，适当固定剂，福尔马林液固定标本要修复抗原。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第4页,二、免疫组化在肿瘤诊疗中应用,（一）上皮性肿瘤标识,1角蛋白（Keratin）：,一个中间丝蛋白，分（1）表皮角蛋白（Epidermal keratin，EK）鳞状上皮或高分化鳞癌标识；（2）细胞角蛋白（cytokeratin，CK）低分子角蛋白，对腺癌、移行细胞部及低分化鳞癌标识。普通用广谱型角蛋白抗体为好，惯用。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第5页,2上皮膜抗原,（Epithelial membrane antigen，EMA）：这亦是惯用上皮细胞标识抗体，细胞膜阳性，用Zankers、Bouin或B5固定液中固定为好。其在低分化和未分化上皮中表示好，但亦可在间变性大细胞淋巴瘤、恶性横纹肌样瘤中表示。,3桥粒蛋白,（Desmoplakin）：主要标识上皮桥粒，Desmo仅表示于复层上皮。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用第6页,4癌胚抗原,（Carcinoembrgonic antigen，CEA）：是从结肠癌中分离而得一个球蛋白，定位于细胞膜上，对肠、胃、肺、胰、肝、乳腺等腺癌标识阳性，但个别非上皮肿瘤也可阳性。,5甲胎蛋白,（Alpha Fetoprotein，AFP）：由胎肝细胞提取一个酸性糖蛋白，细胞浆和膜上表示，它对肝细胞癌、卵黄囊癌特异性标识。睾丸,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第7页,（二）间叶源性肿瘤免疫组化标识,间叶组织包含纤维结缔组织、脂肪、肌肉、血管、骨、软骨及外周神经等，间叶组织肿瘤往往由多向分化原始间叶细胞产生，存在共性，标识抗体特异性不足，有交叉反应。,1波纹蛋白,（Vimentin，Vim）：是一个细胞中间丝蛋白抗体，在多数软组织肿瘤均可表示，但纤维细胞较显著，在一些上皮性肿瘤也有阳性反应。惯用作间叶源与上皮源肿瘤第一线判别抗体,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第8页,2结蛋白,（Desmin，Des）：平滑肌、横纹肌均可阳性。,3肌动蛋白,（Actin）：平滑肌、血管内皮、肌上皮细胞标识，HHF35特异。,4肌球蛋白,（Myotlobin），肌红蛋白（myosin）：对横纹肌标识很好。,5第因子，CD34,：对血管内皮细胞肿瘤标识较特异。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第9页,6S-100蛋白：,是一个周围神经雪旺氏细胞特异标识抗体，后发觉对脂细胞、朗格罕氏细胞、肌上皮细胞、黑色素细胞及其肿瘤均可阳性。,7酸性或碱性磷酸酶：,对骨与软骨肿瘤标识好。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第10页,（三）双向分化肿瘤标识,即有上皮与间叶两种细胞分化肿瘤标识，如滑膜肉瘤、间皮肉瘤、脑膜瘤、癌肉瘤、上皮样肉瘤等，普通采取CK、EMA标识上皮，Vim等标识间叶细胞。另外有一个恶性纤维组织细胞瘤，由纤维细胞、肌纤维母细胞和组织细胞混合组成恶性肿瘤，故应用Vim和组织细胞标识来诊疗。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第11页,（四）神经细胞、胶质细胞及神经内分泌肿瘤标识,1神经原特异性烯醇化酶（Neuron Specific Enolase，NSE）：神经原肿瘤标识2胶质纤维酸性蛋白（Glial Fibrillaly Acidic protein，GFAP）：脑胶质细胞特异性标识抗体。CD34+F8血管,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第12页,3神经内分泌肿瘤标识：包含类癌、胰岛、垂体瘤、甲状腺髓样癌、皮肤Merkel细胞癌、原始神经外胚层瘤（PNET）等，当前应用NSE、嗜铬蛋白颗粒A（CgA）及触突素（Syn）三种抗体同时或两种一起用，因NSE不够特异。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第13页,（五）淋巴网状组织肿瘤（淋巴瘤）标识,1B细胞标识抗体：,CD20（L26），Ig重链（IgG、M、A、E）、轻链（、）、CD79a。,2T细胞标识抗体：,CD45RO（UCHL-1），CD3很好。CD56,3组织细胞标识抗体：,Mac387、CD14、抗溶菌酶（lysozyme）、抗糜蛋白酶（-1 Antichymotrypsin）等。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第14页,4霍奇金淋巴瘤,（Hodgkins lymphoma，HL）R-S细胞（Reed-Sternberg cell）标识抗体：CD15、CD30,5白细胞共同抗原,（leucocyte common Antigen，LCA）：它对淋巴网状细胞均为膜阳性，作第一线抗体为好。,注：（1）国际上将百余种标识抗体统称为CD（Cluster Designation）系列。,（2淋巴细胞标识与R-S细胞多数为膜阳性，而Ig与组织细胞标识为胞浆阳性。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第15页,（六）肿瘤细胞增殖活性与细胞凋亡标识抗体,瘤细胞增殖指数反应细胞增殖活性，是瘤细胞新生（恶性）情况客观指标，与凋亡指数呈反比关系。惯用抗体有：,1增殖细胞核抗原,（proliferative neuclear Antigen，PCNA），核阳性。,2Ki-67，Brdu抗体,：原要求新鲜组织，新近有Ki-67石蜡切片标识抗体问世。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第16页,3细胞凋亡（Apoptosis）标识抗体,：开始发觉细胞凋亡发生于正常细胞受基因调控性自然性死亡。后发觉肿瘤细胞亦可发生，而且一些药品放、化疗亦可诱发细胞凋亡，故成了研究肿瘤发生、发展、治疗热点。其标识抗体有：,（1）凋亡抑制基因蛋白抗体：Bcl-2、Bcl-XL、mtp53。,（2）促凋亡基因蛋白抗体：Fas/FasL系统，wtp53、Bax、Bcl-xs、Fas等。Tunel标识。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第17页,（七）癌基因与抗癌基因，促转移与转移抑制基因蛋白抗体标识。,当前应用很多，因方法比分子生物学技术简单，不过这种结果不能直接反应肿瘤基因活性，只能间接反应肿瘤基因代谢活性，要注意正确评价它价值。,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第18页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第19页免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第20页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第21页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第22页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第23页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第24页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第25页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第26页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第27页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第28页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第29页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第30页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第31页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第32页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第33页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第34页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第35页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第36页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第37页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第38页,免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用,第39页,