月饼菌落总数的测定方案论文.doc

毕业设计

题目： 月饼菌落总数的测定方案

专 业 动物检疫与防疫
班 级
姓 名
指导教师

目 录

一.《毕业设计审阅意见表》…………………………………………………………1
二.《毕业设计答辩意见表》…………………………………………………………2
三．毕业设计任务书………………………………………………………………3
四、开题报告……………………………………………………………………4
五. 设计方案……………………………………………………………………5
六. 作品（产品）………………………………………………………………6
（一）实验地点………………………………………………………………………6
（二）实验时间………………………………………………………………………6
（三）测定方法………………………………………………………………………6
1.月饼的微生物指标……………………………………………………………………6
2．菌落总数的测定方法…………………………………………………………………6
3．检验程序………………………………………………………………………7
4．培养…………………………………………………………………………………8
5．菌落计数………………………………………………………………………8
6．菌落总数的报告………………………………………………………………………9
7．菌落总数测定的注意事项……………………………………………………………9
七．成果报告书……………………………………………………………………10
八. 致谢语…………………………………………………………………………11

11

毕业设计审阅意见表
设计题目
月饼菌落总数的测定
学生姓名

专业班级

指导老师

序号
评审项目
指 标
分值
评分
1
工作态度
态度端正，按照要求按时完成各阶段工作任务。
5

2
设计实施
设计的技术原理选择、理论依据选择和设计步骤安排合理。
5

完整地记录设计项目启动、设计任务规划、技术资料查阅、系统或者结构分析、技术参数确定、设计方案拟定、设计方案修订、设计方案成型等基本过程及其过程性结论。
8

参考资料的引用、参考方案的来源等标识规范准确。
8

技术参数计算所采用的数学模型正确，计算准确，技术参数参照正确的技术标准。
8

设计数据详实、充分、明确、合理。
8

3
作品质量
设计说明书条理清晰，结构严谨；文笔流畅，语言通顺。
8

设计作品撰写规范,图表、计算公式和需提供的技术文件符合行业或企业标准的规范与要求。
10

设计要素完备，能清晰表达设计内容，完整回答课题所要解决的问题。
10

具有可操作性和可执行性，能有效解决课题设计中所要解决的实际问题，达到设计任务要求。
6

4
工 作 量
完成了设计任务书要求，设计说明书对整个设计过程表达清楚。
8

5
格式
设计说明书正文字体字号使用正确，图表标注规范。
6

设计说明书排版、打印、装订符合要求。
6

6
创 新
设计方案有特色、有创新或创意，有重大改进或独特见解，有较强的应用价值。充分应用了本专业领域中新知识、新技术、新工艺、新材料、新方法、新设备。
4

是否同意参加答辩（填写同意或者不同意）:

总分
100

审阅意见：

指导教师（签名）： 年 月 日

毕业设计答辩评审表
设计题目
月饼菌落总数的测定
学生姓名

专业班级
动检12306
指导老师

答辩内容摘要（请起草后誊写）：
答辩小组评语及成绩：

组长签名：
成绩： 年 月 日

毕业设计成绩评定
指导教师审阅评分
答辩评分
综合评分

毕 业 设 计 等 级 （按优、良、中、及格、不及格）

系部签章：

年 月 日

毕业设计任务书
题 目
月饼菌落总数的测定
学生姓名

专业班级

指导教师

题目类型
方案设计类
题目来源
校选题
课题目标：通过测定月饼的菌落总数，为广大消费者提供食品保质期依据，放心，安全消费。菌落总数的实验数据直接影响到食品的保质期，菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。能够熟练的掌握菌落总数的测定方法，并能独立的设计出有效的测定方案。
课题任务：
微生物卫生指标是确定食品保质期的一个重要技术内容，作为食品企业行实验室工作人员，应该用认真严谨的工作态度和科学的实验数据为企业确定食品保质期提供依据。
其次技术要求：1.月饼保质期的影响因素
2.月饼菌落总数测定方法
3.月饼保质期的评价
4.月饼菌落总数测定的注意事项
实施步骤和方法：
1．通过题目之后，尽快进行研究思路。整理材料，挖掘月饼销售过程中的各项问题，积极探索并提出解决问题的方法和途径。最终得到最优方案。
2．方案提出后，根据最优方案解决问题，让所有上市月饼过程得到监控，。
3. 编写设计说明，撰写毕业论文。
4．进行毕业答辩。
时间安排：
1．2014年11月18日：接受任务，明确设计内容和设计要求，收集资料，明确设计目标和方向。
2．2014年11月20日：在指导老师的指导下拟定并完善设计提纲及调研计划，利用课余期间从事调研与资料收集。发现问题，展开设计。
3．2014年11月30日：把正文和相关资料按规定顺序装订成册，交给指导老师。 并上传大学城空间。 
4.2015年2月8日-2月25日：编写设计说明书、完成整理
5.2015年3月1日-3月28日：撰写毕业设计
6．2015年 6月8日左右毕业答辩
成果表现形式：
月饼菌落总数的测定策划方案

备注：

毕业设计开题报告
学生姓名

专业班级

学号

题 目

课题设计时间

课题的意义

主要内容

方法、手段以及步骤

阶段进度计划

指导教师意见

指导教师签名：
2015年 3 月 29 日
注：1、开题报告正文用A4纸打印，各级标题用4号宋体字加黑，正文用小4号宋体字，20磅行
2、所有签名必须手写，不得打印

毕业设计方案
题 目
月饼菌落总数的测定
学生姓名

专业班级

指导教师

设计思路：
通过查找文献、书籍等了解到月饼的各个指标，再根据菌落总数测定的实验步骤，用严谨的态度来检测月饼菌落总数，实验结果比照国家标准GB/T4789-2014 ，确认其是否影响消费者健康，并反复实验确保实验结果无误。
技术线路：
1.查找文献、书籍和国家标准
2.月饼菌落总数的测定方法及注意事项
3.月饼保质期的影响因素和皮蛋的感官检测
4.多与老师沟通，并解决在实验中出现的各种问题
工具设备要求：
无菌室、恒温培养箱（36℃1℃）、高压灭菌锅、恒温水浴箱（46℃1℃）、1ml移液管（具0.01ml刻度）、10ml移液管（具0.1ml刻度）、150ml锥形瓶、250ml锥形瓶、培养皿（直径90mm）、洗耳球、钥匙、玻璃棒、试管
技术规范：
1.一定要在无菌环境下操作
2.参照国家标准GB/T9694-2014
3.认真严谨的工作态度，科学的实验
4.参考《动物性食品卫生检验》、《食品微生物学能力验证结果分析》、
《菌落总数检验结果的影响因素与控制措施的探讨》等书籍

备注：

毕业设计作品
毕业设计作品（产品）可以表现为物化产品、软件、文化艺术作品、策划方案等；

毕业设计作品
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在 一定程度上标志着月饼质量的优劣。本人实习期间一直在湖南台杰食品有限公司从事微生物检验工作，重点掌握了月饼的微生物指标。下面就月饼菌落总数测定方法检验程序以及注意事项做下面的探讨：
实验地点
湖南台杰食品有限公司
实验时间
2015.01.12——2015.05.24
测定方法
一．月饼的微生物指标（图1）
项目

指标
菌落总数/(cfu/g)
， ≤
1500
大肠菌群/MPN/100g)
≤
30
霉菌计数/(cfu/g)
≤
100
致病菌（沙门氏菌，金黄色葡萄球菌）

不得检出
二．菌落总数的测定方法
2.1实验设备和材料
无菌室、恒温培养箱（36℃1℃）、高压灭菌锅、恒温水浴箱（46℃1℃）、1ml移液管（具0.01ml刻度）、10ml移液管（具0.1ml刻度）、150ml锥形瓶、250ml锥形瓶、培养皿（直径90mm）、洗耳球、钥匙、玻璃棒、试管。
2.2准备事项
2.2.1 平板计数琼脂（PCA）培养基的配制：称取4.8g平板计数营养琼脂（PCA）溶于200ml蒸馏水装入250ml锥形瓶中，塞好塞子，121℃高压灭菌15min后放入恒温水浴箱中保温备用。
2.2.2 无菌生理盐水稀释液的配置：称取4.25g氯化钠溶于500ml蒸馏水中，分装入150ml锥形瓶和试管内，锥形瓶装入45ml盐水，试管装入9ml盐水，盖好瓶塞，121℃高压灭菌15min后放入无菌室备用。
2.2.3 将移液管，钥匙，培养皿、玻璃棒分类用报纸包好放入高压灭菌锅内121℃灭菌15min，干燥后放入无菌室备用
三．检验程序
菌落总数的检测程序见图

检样
5g样品+45g稀释液，均质

10倍系列稀释

选择2个适宜的稀释度的样品匀液，
各取1ml分别加入无菌培养皿内

每皿中加入15ml~20ml
平板计数琼脂培养基，混匀

培 养

计数各平板菌落

计算菌落总数

报告

3.1操作步骤
3.2样品的稀释
3.3称取5g样品置盛有45ml无菌生理盐水的锥形瓶内，用无菌玻璃棒搅拌均匀制成1：10样品匀液。
3.4用无菌移液管移取1：10样品匀液1ml，沿管壁缓慢注入盛有9ml稀释液的无菌试管中（注意移液管吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用一支无菌试管反复吹打使其混合均匀，制成1：100的样品匀液。
3.5选择1：10和1：100的样品匀液，各移取1ml样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时移取1ml空白稀释液加入两个平皿内做空白对照。
3.6及时将15ml~20ml冷却至46℃的平板计数琼脂培养基倾注平皿，并转动平皿，使其混合均匀。
四．培养
待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃1℃培养482h。
五．菌落计数
5.1若所有稀释度在平板上的菌落数均<30CFU,计算1：10稀释倍数的两个平板菌落数的平均值，若平均值为0，则结果是<10CFU.
5.2若只有一个稀释度在平板上的菌落数在30~300CFU范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将品均值乘以相应稀释倍数，作为g（ml）样品中菌落总数结果。
5.3若有两个连续稀释度的平板菌落数在30~300CFU范围内时，按公式1计算
公式1：

N——样品中菌落数
——平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；
——第一稀释度（低倍稀释度）平板个数；
——第二稀释度（高倍稀释度）平板个数；
d——稀释因子（第一稀释度）
5.4若所有稀释度的平板上的菌落数均>300CFU,则对稀释度最高的计数，其他平板可计量为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。
六．菌落总数的报告
6.1 菌落总数<100CFU时，按“四舍五入”原则修约，已整数报告。
6.2 菌落数≥100CFU时，第三位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，后面用0代替位数；也可用10的指数来标示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。
6.3 若所有平板上为菌落蔓延无法计数，则报告菌落蔓延。
6.4 若空白对照上有菌落生长，则实验结果无效。
6.5 称重取样已CFU/g报告。
6.6 每次实验同时做多个样品时空白对照只需≥2个平皿即可。
七．菌落总数测定的注意事项
培养基倾注的温度与厚度是实验正确与否的关键。（倾注的温度：一般35~45摄氏度，温度过高会造成以受损伤的菌细胞死亡。厚度：直径9cm的平皿一般要求15~20ml培养基，若培养基太薄，在培养过程中可能因水分蒸发而影响细菌的生长）。
为防止细菌增殖及产生片状菌落，在加入样液后，应在15min内倾注培养基。检样与培养基混匀时，可先向一个方向旋转，然后再向一个反方向旋转。旋转中应防止混合物溅到皿边的上方。
培养基凝固后，应尽快将平皿翻转培养，保持琼脂表面干燥，尽量避免菌落蔓延生长，影响计数。

毕业设计成果报告书
题 目
月饼菌落总数的测定
学生姓名

专业班级

指导教师

毕业设计过程：
1. 查找相关资料，收集相关选题的文献，
2.通过与指导老师多次指导实验下，反复实验，记录实验结果
3. 在严谨的实验操作写得出结论
毕业设计收获：
1. 通过实验明白了要有严谨的实验态度，操作要严格按照实验室规章制度；
2. 无论做什么事，态度一定要端正
3.通过这次毕业设计的制作，发现自己专业知识与实践能力的不足。但能在实践过程中，虚心的向老师与专业技术人员的请教让我不断进步；
4.严格按照国家标准制定测定方案

作品（产品）特点：
1. 在此次的实验过程中，通过对月饼菌落总数的测定，让我们用事实说话，为广大消费者提供安全健康的消费理念。
2. 通过反复实验成果证明月饼最佳赏味期为60天。

备注：

致谢
在本次论文设计过程中，沈萍老师对该论文从选题，构思到最后定稿的各个环节给予细心指引与教导,使我得以最终完成毕业论文设计。在学习中,老师严谨的治学态度、丰富渊博的知识、敏锐的学术思维、精益求精的工作态度以及侮人不倦的师者风范是我终生学习的楷模，导师们的高深精湛的造诣与严谨求实的治学精神，将永远激励着我。这两年多中还得到众多老师的关心支持和帮助。在此，谨向老师们致以衷心的感谢和崇高的敬意！
最后，我要向百忙之中抽时间对本文进行审阅，评议和参与本人论文答辩的各位老师表示感谢。