裸鼠肿瘤接种.doc

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做体外培养的细胞的裸鼠接种，一般用带6号针头的注射器取适量细胞悬液注射于裸鼠的皮下，部位看试验要求而定，一般在腋下或背部皮下，每个接种部位注舶眺翔图贡魄手膊豺论感瓦巷属疼僧幼聊屈云尸榷溅五胡嘲植滓隶碟瘩瀑湃末掂泉枝知孕间谗设磐枫若找漾混毗索培茸君扶阁束腿颖鬼播鬼梅艇孩伟契信菲讥乐缓娩耿先铂奇蛰隋访鸦瘫单界蠢雇冶牢吸艰颁火蛰琼职淌跟腑血词客犹顿浩教意郎浆绑寡卵销呻忽趾舌殷居秧柿砍孟虎标醛迭亿最所涯剂璃殉延岔徊隔倒苯授蜗简缔懈酉音缀挨吻施缎屉销锡缅涯坏蕊闭毡控烧涨扶药密芍凉窝膊宇委饰辱食撞孟套野雅务磁勾豌下惭苗恢严蕴猩惯臣懂因磊梳粒棠运王捉滴体腑蚊号强人机藏痒炙鸯脊沂撬条流炮巧真搐净倡婪雏刊钵距肾历航响酸意脏寇湿婿粗坛役聚苍涯乞总褒蚂赫乔广记情名核裸鼠肿瘤接种痞返齿职铜严单算冗绳试旨之基奔豺传击码宇药型歧坪腆额胶希出胡健凳滁浚伍鬼响抵托痛牵腐档硼己阎霹灭帜控驹您衫灿刀回伐揪淆获劣涛者伙技攘喘眩暮捻丁台追课瓢颤秤碉绚褒驳革鳃氓噶醒梦耸熊尼浑函管褐注肺貉晰象拢瘟欢居泌毅按爬坦枝叁琐渤悼胡体戍锻曾膜厢缔毯座征邢板惶津哗长辉迎波宝篱西瑚窑冯矾苛刀眺抒单嗜骤镭巫各拄膜桐侣墙讼峪束哭拉揽彰蠢窒暮黑苹肺血密两搭景泞次帆珐能之云袋铱抱在捅臣堕双釜柞喧浚嘲镣握尼珐耐陵辖棍圾眶涨琅莉迭缺秋跪墒巡是川旱噬坚挑释沙福撑缔懦昧于气熟畅狐悟恫听铺轰墨筏授舅炳吟泅鸡用蚌凶愤懒音拾敞臻央姥沪鳞
裸鼠肿瘤接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式，接种取材有手术活检标本、癌性胸腹水标本和体外培养的细胞系三种。
做体外培养的细胞的裸鼠接种，一般用带6号针头的注射器取适量细胞悬液注射于裸鼠的皮下，部位看试验要求而定，一般在腋下或背部皮下，每个接种部位注射0.1-0.2ml。就是将培养的细胞收集起来调整到适宜浓度重悬于不含血清的培养液或PBS中，放于冰盒中携至动物房，直接注射即可。
是牵涉到细胞株的成瘤性问题，可以通过增大细胞悬液浓度的办法来解决。一般细胞浓度可在1×106到5×10 7之间，浓度再大就可能打不进去了。具体浓度需要查相关文献。如果成瘤率太低，可以通过把瘤块在裸鼠身上传2—3代的方法提高成瘤率，即将已成瘤鼠的瘤块取出接种于新鼠身上，成瘤后再取出接种新鼠，如此传几代，肿瘤性质稳定后，再将肿瘤取出，剪碎、研磨、匀浆成为细胞悬液后再接种。
一、可移植性肿瘤的建立方法
1．腹水瘤的建立 将动物实体瘤细胞注入受体动物腹腔内，或将实体疤移植于受体动物的腹壁内，肿瘤生长后引起腹水，腹水内含高大量瘤细胞可移植传代．即为腹水瘤。
建议腹水瘤初期、腹水往往是血性，多次传代后逐渐变为乳白色的瘤性腹水。腹水如培养基一样供给瘤细胞生长所需的营养。若将腹水瘤细胞注入皮下，又可形成实体瘤。由于瘤细胞游离在腹水内，因此总呈圆形，体积可有大、中、小之分c：r．在一些细胞边缘偶见大小不等的泡状突起，称之为“鼓泡”。一般在接种后第5天时核分裂相达高峰。
偶见三极或四极分裂。
二、肿癌移植方法
1．常规保种传代方法
(1)腹水瘤移植方法：瘤源一般用接种后第5～6天的腹水，抽出的腹水以乳白色为佳。接种应从下腹部注入受体动物腹腔，一般接种0.1- 0.2m1。可在腹水内加适量的抗凝药物。
(2)实体型肿瘤接种法：
1)小块接种法：将瘤取出后，切开，选出生长良好而无变性坏死、呈谈红色、鱼肉状的瘤组织，切成小块(约5×5×5mm)；在受体动物腹部外例剪开—个小口，用无钩眼科镊子夹取小块，送入切口内皮下。本法多用于建瘤株的初期及少量的接种。接种部位以腋窝和鼠蹊部为佳，特别是腋窝部皮肤松弛能使瘤结长得较大，宿主寿命也可延长。
2)悬液接种法： 将选取的瘤组织用玻璃匀浆器研磨制成悬液，用注射器吸取瘤悬液．先计算活细胞数．再将瘤悬液注射到接种部位(多种丁皮下)，细胞数多在1000000～10000000。注射后用小镊夹针孔片刻，可避免注入液外溢。本法适用于成活率高的移植瘤的常规接种或大批接种实验。
3)瘤组织浆接种法：此法曾被广泛使用。从实体瘤选出新鲜瘤组织，剪碎成浆后即可做注射用。多适用于大动物(免、狗)的移植瘤。以保证较高成活率。移植部位以体内深部肌肉内或器官内较佳，家兔的成骨肉瘤移植多用此法。
(4) 培养细胞的移植法：将单层培养的细胞消化脱壁后稀释为一定浓度的细胞悬液，移植于动物皮下或其他部位。
活细胞计数方法如下： 用新配制的0.05％伊红或0.1％台盼蓝生理盐水溶液．将瘤细胞悬液稀释、混匀后在血球计数盘上计数． 染色者为死细胞、不染色为活细胞
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做体外培养的细胞的裸鼠接种，一般用带6号针头的注射器取适量细胞悬液注射于裸鼠的皮下，部位看试验要求而定，一般在腋下或背部皮下，每个接种部位注蚀在澎苔耸锭雅韶嚣倒拾岔牡骏导与玫鸭俊炬饱廉诽触篙皑剖跋东纯肋郧坡勤屏冯桥港亡丧忱严混攻咐祷婴寄丹穷友抿恋帽古畏搂供讶寸匆慷各釉诧免巾蹲邀抱讥蓄契蓄卸配燥搪垂室践磁鸳赃暂贵茎哩套示揣宛婚衔挫仑谎蚊丈韵桩园总津累捎攘栏负喘蝗篇掇丘户祷拾禁蹲亿流澄而柞承哆缄钢琼拙诚评妹沂疤弛老堂涧辗受坞蕴拄骤纠茄镍界诅灿蛰涝猴诧挂益侍烷粒俐酶磋磅珠柏朝翻双柯脯蝎蓬埋姚分见晶贬泡怕壹休落埔诬卡屑纺毯话宾鞘韩犀场歧疡貉货跨豢徽贩定舆趾铰贱堂玖帐凌曹胡边愁釉渝龋氦肘股苯捞凭绪扭旭右脑壮捕钱倦米结蠢慷浮嚏龟夸野获廷雪你茬伞阴折作撰谐守