检验方法验证.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2004-04-15,*,2004-04-15,1,检验方法验证,2004-04-15,2,检验方法验证的法规要求,新药申报质量标准的必备材料,药典和药品申报要求关注方法本身,GMP,更关注验证过程，包括仪器,法规、药典规定了验证的项目而不规定合格标准,变更的再验证：原料药合成方法变更，药品组份变更，分析规程变更,2004-04-15,3,化学分析方法验证的前提条件,仪器已经确认、校正并在有效期内,人员,可靠的对照品,可靠的实验试剂,确认受试溶液的稳定，在规定时间内无降解,2004-04-15,4,仪器确认,计量仪器：温度、质量、容量、分光光度计,分析仪器：色谱系统,计量仪器进行安装确认和校正,分析仪器：,IQ,，,OQ,，,PQ,、预防性维修和再确认,2004-04-15,5,仪器确认,安装确认,IQ,验收，登记,安装,操作规程、维护规程、培训,建立使用维修档案,2004-04-15,6,仪器确认,运行确认,OQ,分系统试验，空载及用标准样品检查各分系统是否达到预定要求,2004-04-15,7,HPLC,系统运行确认试验及限度,各仪器名称,仪器中各组件,功能,试验项目,限度,泵,流量控制阀,向系统输出流动相,流速准确度,5,流动相比例控制阀,控制各流动相的比例,流动相混合比例的准确度,10,自动进样器,进样体积控制阀,将定量体积的样品注入色谱柱,精密度,RSD,应,1.0%,柱温箱,温度控制器,保持色谱柱的温度,准确度,精密度,3.0,波动应在,1.0,内,UV,检测器,单色器,从连续光谱中分离出单色光,准确度,3nm,光电管,测定样品的吸收度,线性,相关系数不得小于,0.999,2004-04-15,8,仪器确认,性能确认（,PQ,）,考察仪器可靠性、运行参数稳定性及结果重现性,系统适用性试验，与具体分析方法相联系,2004-04-15,9,仪器确认,预防性维修和再确认,定期进行,OP,的某些关键项目,可和年度校验结合,发现不理想状况即使更换、修理元件,关键部件更换后需进行再确认,2004-04-15,10,分析方法验证,概述,准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围、粗放性和耐用性,引用法定方法：系统适用性试验,已在其他实验室验证过的方法：同批对照（,t,检验计算显著性差异）,其他,2004-04-15,11,分析方法验证,验证项目,类型,类型,I,类型,II,类型,III,类型,IV,定量测定,限度试验,准确度,要求,要求,*,*,精密度,要求,要求,-,要求,专属性,要求,要求,要求,*,要求,检测限,要求,*,定量限,要求,*,线性,要求,要求,*,范围,要求,要求,*,*,“,”,表示不作要求；,“,*,”,表示需根据实验特性决定是否作要求。,类型,I,：指用于测定原料药中主要成分或制剂中活性组分（包括防腐剂）的定量分析方法；,类型,II,：指用于测定原料药中杂质或制剂中降解产物的分析方法，包括定量分析和限度试验；,类型,III,：指用于测定性能特性（如溶解度、溶出度）的分析方法；,类型,IV,：鉴别试验。,2004-04-15,12,分析方法验证,准确度是指用该方法测定的结果与真实值接近的程度，一般用回收率表示,取范围内的三个浓度，每个浓度各测定三次,结果评价：与已知含量样品或经验证的方法结果对照,精密度指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度,重复性,ICH,要求进行,3,个浓度各,3,次或,100%,浓度,6,次,2004-04-15,13,分析方法验证,精密度指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度,重复性与中间精密度,重复性,ICH,要求进行,3,个浓度各,3,次或,100%,浓度,6,次,自样品制备开始,2004-04-15,14,分析方法验证,专属性：抗干扰的能力,重复性与中间精密度,重复性,ICH,要求进行,3,个浓度各,3,次或,100%,浓度,6,次,自样品制备开始,2004-04-15,15,分析方法验证,范围，指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间,含量测定，,80,120,；,杂质测定，,50,120,；,含量均匀度，测试浓度的,70,130,，根据某些剂型的特点（如气雾剂），此范围可适当放宽；,溶出度，标准规定范围的,20,百分归一化法测含量与杂质，则线性范围应为杂质规定限度的,20,至含量限度的,20,。,2004-04-15,16,分析方法验证,耐用性，指测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度。,典型的变动因素,被测溶液的稳定性，,样品制备方法，,流动相的组成和,pH,值,不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱、柱温、流速、进样器和检测器的温度等。,2004-04-15,17,分析方法验证步骤,验证方案的制订,待验证的方法，项目，合格标准,验证的实施,由指定人员实施,确定相关仪器、试剂、参照品,收集完整的验证过程记录和原始图谱,复核,验证报告,评价该方法是否通过验证,2004-04-15,18,微生物检验方法验证,验证的意义：药典仅规定了通用检验法,微生物限度检查,无菌检查,防腐剂抑菌效力测定方法,2004-04-15,19,微生物检验方法验证,核心：消除检品的抑菌性对结果的干扰,微生物学检验的影响因素,药品本身的抑菌性；,药品中防腐剂的抑菌性；,培养基的促菌生长能力；,培养条件（温度、湿度及需氧或厌氧）,过滤系统的材质；,挑战试验用微生物菌种的制备方法,2004-04-15,20,消除抑菌性的方法,化学中和法,中和作用,对微生物的损害作用,稀释法,薄膜过滤淋洗法,滤膜的性质,2004-04-15,21,验证方法生长比较法,试验方法：分三组进行，进行三次,检品组,接有试验菌株的中和检品组。加入抑菌中和剂，最后接入已知量的菌株,(,少于,100,个菌,),对照组,接有试验菌株的缓冲液试验组。用,0.1%,蛋白胨溶液代替检品,菌种活性检查组,不含检品或中和剂的空白对照组。不加抑菌中和剂，将试验菌株直接接种培养。,菌种：中国药典、,USP,、,EP,合格标准：,1),，,2),，,3),组相差不超过,30%,2004-04-15,22,需要验证及再验证的场合,新产品、新原料,变更原料合成方法后,更换检验方法后,滤膜,培养基,中和剂,淋洗液,