项目四-金黄色葡萄球菌检测-革兰氏染色ppt课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,检样,25g(ml)+225ml7,5,氯化钠肉汤,BHI,肉汤,血平板，,Baird-parker,平板,涂片染色,观察溶血,血浆凝固酶试验,报 告,36,1 24hr,36,1 24hr,36,1 24hr,呈金黄色，有时也为白色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，有溶血环。,Why?,血平板鉴定-菌落形态特征,灰色到黑玉色，圆形，光滑突起，湿润，边缘常为淡色（米黄色或灰色），周围为一混浊带，在其外缘常有一透明圈。,Why?,Baird-parker,鉴定-菌落形态特征,革兰氏阳性菌，球形，组成葡萄状，无芽胞，无荚膜，直径约为,0.5 m,1 m,鉴定-革兰氏染色镜检,试管法,鉴定-血浆凝固酶试验,血浆凝固酶试验：挑取、,Baird-Parker,平板或血平板上可疑菌落,1,个或以上，分别接种到,5 mL BHI,和营养琼脂小斜面，,36,1,培养,18 h,24 h,。吸取1：4兔血浆0.5ml放入灭菌试管中，再加入培养后的的BHI肉汤0.5ml，振荡均匀，放在36,1,水浴锅，每半小时观察一次，至少观察6小时。,阳性反应,阴性反应,不凝固,少量、零散凝固,明显的块状凝固,巨大块凝固,完全凝固，倒置不流动,项目四 金黄色葡萄球菌检验革兰氏染色,一、革兰氏染色步骤,涂片,热固定,初染,媒染,脱色,复染,革兰氏染色阴性,革兰氏染色阳性,菌体呈红色者为,G,番红复染,番红复染,菌体仍呈深紫色者为,G,+,乙醇,(,或丙酮,),脱色,细菌涂片,草酸铵结晶紫初染,卢哥氏碘液媒染,二、革兰氏染色原理,G,菌细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障,，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留,结晶紫,-,碘复合物在细胞膜上。呈紫色。,G,菌肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结,构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结,晶紫,-,碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。,项目,革兰阳性菌,革兰阴性菌,项目,革兰阳,性菌,革兰阴,性菌,强度,厚度,肽聚糖层数,肽聚糖含量,糖类含量,坚韧,20-80nm,15-51,层,占细胞壁干,重的,50%-80%,约,45%,较疏松,10-15nm,1-3,层,占细胞壁干,重的,10%-20%,15%-20%,脂类含量,磷壁酸,外膜,脂蛋白,脂多糖,1%-4%,+,-,-,-,11%-22%,-,+,+,+,G+,和,G,细胞壁化学组成及结构比较,1、,G+,细菌的细胞壁。厚而致密，由肽聚糖和磷壁酸组成，以金黄色葡萄球菌为代表。,2、,G-,细菌的细胞壁。分两层，外层为脂蛋白和脂多糖层，内层为肽聚糖层，以大肠杆菌为代表。,三、常用的染色方法,1,、染色的基本原理,主要是通过细胞及细胞物质对燃料的毛细现象、渗,透、吸附等物理因素，以及各种化学反应进行的。,2,、染料种类,染料按其组成成分可以分为天然染料和人工染料,染料按其电离后染料离子所带电荷的性质分为酸性染料、碱性染料、中性（复合）染料和单纯染料四大类,3,、染色方法,（,1,）单染色法 用一种染料使微生物染色，如美蓝、孔雀绿、碱性番红、结晶紫和中性红等。,（,2,）复染色法 又称鉴别染色法 是用两种或两种以上染料进行染色，有协助鉴别微生物的作用。最常用的鉴别染色法为革兰氏染色法。,（,3,）特殊染色法 针对一些特殊情况而进行染色的方法。,后面内容直接删除就行,资料可以编辑修改使用,资料可以编辑修改使用,主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等,公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！,致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、,PPT,设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求,感谢您的观看和下载,The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field,