真菌多样性研究现状综述.doc

内生真菌多样性研究现实状况综述
魏洁
摘要: 伴随研究发觉, 内生真菌在自然界作用被越来越关键。本文章关键分析了内生真菌生物多样性现实状况、 内生真菌多样性检测技术和方法及其影响原因分析。从植物内生真菌物种多样性与产生生物活性物质多样性等方面总结多年最新研究进展, 提出了现阶段植物内生真菌及活性物质研究存在问题及其未来发展方向。
关键词: 内生真菌; 多样性; 研究技术; 影响原因; 展望

Research of endophytic fungi diversity
Abstract: With the findings of the study, endophytic fungi are an increasingly important role in nature. This article mainly analyzes the status quo of endophytic fungi biodiversity, the detection techniques and methods of endophytic fungi diversity and its influencing factors. From the latest Endophytic fungal species diversity and produce biologically active substances diversity summarizes research progress in recent years, we dish the stage of plant endophytic fungi and active substances research problems and their future development direction.
Keywords: endophytic fungi; diversity; research techniques; influencing factors; prospect
1.引言
真菌是吸收异养型真核生物, 种类繁多植物内生真菌是一大类还未被充足认识真菌。伴随近二十年来研究发觉内生真菌含相关键生态学意义和经济意义, 其物种多样性也是非常丰富。内生真菌（内生菌）(Fungal endophyte) [1]是指一类在其部分或全部生活史中存活于健康植物组织内部, 而不使宿主植物表现出显著感染症状微生物。在植物体特殊环境中, 内生真菌与寄主之间协同进化, 在生活演变过程中形成一个互利共生关系。内生真菌能够促进植物生长发育[2], 提升宿主植物抗逆性[3]。多年来,因为内生真菌次生代谢物在病虫害生物防治、 医药工业上用途和范围逐步增大,所以相关内生真菌研究逐步受到重视[4]。内生真菌因为其物种丰富,数量庞大,而且与其它生物之间含有紧密生态关系,使其成为天然活性物质丰富起源,所以引发大家广泛关注,成为现在中国外研究热点之一.
2研究现实状况
多年来对内生菌研究逐步进入了一个新阶段, 内生真菌研究日益受到了全球性广泛关注, 在其侵入机制每年有数百篇论文报道新发觉内生菌。从内生真菌寻求活性成份日益成为研究热点。
2.1 植物内生真菌生物多样性
植物内生真菌多数属于双核菌门子囊菌亚门中核菌纲( Pyrenomyetes )、 盘菌纲(Discomycetes) 和腔菌纲(Loculoascomycetes) 及其无性态多个真菌,关键分布于植物叶鞘、 种子、 花、 茎、 叶片和根等细胞间,多数情况下,在叶鞘和种子中分布量最多,而叶片和根含量极微[5]。经过研究, 内生真菌从部分关键经济林木如针叶类多种冷杉、 云杉、 红杉、 紫杉、 松柏等以及阔叶栎树、 桦树、 桤木、 桉树等植物树皮、 枝叶内相继被分离和判定。在多个草本植物、 栽培作物、 果树、 苔鲜和蕨类植物中也发觉了内生真菌。研究还发觉, 从不一样植物体内分离内生真菌数量不一样, 少则几十种, 多则达成几百种。内生真菌大多数是广泛分布, 但也有不少内生真菌含有某种程度上寄主专化性, 如按每种植物大约只有4- 5 种真菌是寄主专化性, 按地球现在已知25 万种植物计算, 内生真菌总数能够超出10万种, 还不包含苔藓、 蕨类中内生真菌[6]。但截止现在所发觉内生真菌数量并不多, 大约有数百种。所以内生真菌仍有很大研究发展空间, 会是人类未来关键资源宝库。
2.2 内生真菌在药用植物概况
自大家从分离一些抗癌药用植物内生真菌能产生与寄主植物相同或相同抗癌活性物质后,寻求能够高效生产抗癌药品内生真菌便成为研究关键目标之一,也为抗癌药品研究开发和生产开辟了新路径。
现已经发觉含有药用价值内生真菌关键包含: 产长春新碱内生真菌、 产鬼臼毒素内生真菌、 产异香豆素内生真菌、 产球毛壳素内生真菌、 产白灰制菌素A 内生真菌等[5]。
2.2内生真菌在农作物研究概况
对农作物内生真菌研究晚于药用植物中, 但也逐步成为了研究热点。现在农用内生真菌研究关键集中在内生真菌对农作物本身影响和从植物内生真菌次生代谢产物中发觉含有农用生物活性新化合物两个方面.研究发觉内生真菌对农作物营养生长含有一定促进作用, 提升了植株物质代谢。含有抗性作用内生菌提升了植株抗逆性, 如有抗虫作用内生真菌提升农作物抗虫性。
3内生真菌多样性检测技术
内生真菌生物多样性检测技术包含:分离技术, 判定技术, 活性检测技术
3.1 内生真菌分离培养
内生真菌培养是菌株判定及其活性物质研究基础。因为环境等原因不一样, 内生真菌生长和次级代谢产物数量, 种类都会受到影响。所以在分离工程种, 因充足考虑到培养基组成成份, 气候条件, 温度控制等方面原因。就中国而言, 内生真菌分离研究近几年来也有较多结果报道, 怎样佳等[7]植物内生真菌分离方法研究, 及陈立军等[8]油菜内生真菌分离判定等。
培养基是分离过程中必不可少组成部分。伴随研究发展, 培养基种类越来越繁多。现在培养基关键分固体培养基、 半固体培养基、 液体培养基。培养基选择直接关系到接种真菌生长发育。现阶段试验班室最常见选择培养基有牛肉膏蛋白胨培养基等。
无菌技术也是分离培养过程中关键技术之一, 只要是确保研究结果正确性及科学性。近几年无菌技术发展快速, 关键是无菌室设备不停提升。灭菌技术关键有高温灭菌、 辐射灭菌、 过滤除菌、 高渗除菌。
3.2内生真菌判定
真菌分类也和其它生物一样繁乱复杂。曾应用过真菌分类系统就有De Bary系统、 Gaumann系统、 Martin系统、 Whittaker系统、 Ainsworth系统、 Alcxopnlos系统等多个,各系统设置基础出发点和依据各有特色, 难以统一。怎样建立一个符合客观实际自然分类系统, 是关系到大家对真菌正确定识、 归类定秩、 判定、 命名以及指导开发利用、 控制感染等一系列问题。现阶段关键是经过形态观察法进行判定, 即依据菌落形态特征, 孢子形态结构和产孢方法进行判定[9]。观察菌落大小、 形态、 颜色、 光泽、 透明度、 质地、 隆起、 边缘特征以及运动性, 依据菌株菌丝体和孢子形态特征, 对照真菌判定手册进行初步判定。假如单纯依靠形态学、 生理生化、 抗原结构等特征实际上这些也正是传统真菌分类学指标则常会得出似是而非结果, 因为丝状真菌个体多态性相当显著图。这也是丝状真菌分类混乱和复杂关键所在。多年来多门新兴学科和技术发展,尤其是分子生物学技术兴起为真菌分类学发展提供了很好机遇。部分已经或立即用于真菌分类研究分子生物学技术指标日渐显示出关键分类学潜能[10]。但多年关键还是经过形态观察法进行判定。
3.3 内生真菌抗菌活性判定
真菌抗菌活性判定是对真菌种别进行深一步判别, 是对其次级产物抑菌活性进行研究, 意在筛选出能产生抗菌活性物质内生真菌。现在, 抗菌活性判定研究取得了可惜结果: 何佳等[8]微量稀释法筛选金钱松内生真菌抗菌活性研究、 赵江林等[11]TLC-生物自显影-MTT法检测滇重楼内生真菌中抗菌活性成份研究等。
4 内生真菌影响原因
植物与内生真菌关系为互惠共生,首先植物为内生真菌提供光合产物和矿物质,其次内生真菌代谢物能刺激植物生长发育,提升寄主植物对生物胁迫和非生物胁迫抵御能力。所以, 影响植物生长发育原因均能对内生真菌产生一定作用。
因为内生真菌在植物或动物体内, 所以影响内生真菌原因与植物生长环境有着亲密关系。不过因为对影响内生真菌影响原因研究尚少, 所以成为未来研究内生真菌另一个研究关键。
5存在问题与展望
现在, 短短几年快速发展使内生真菌及其代谢产物研究即使取得了较丰硕结果,但其中也发觉不少问题。关键表现在[5]: （1）内生真菌含有丰富多样性, 就算在相同生境下相同植株中得种类仍存在一定微小差异, 所以利用不一样培养基有没有法将全部生活在植株中内生菌分离出来; （2）有些分离出来真菌在人工培养基上培养时不产孢子, 造成这些无法经过传统形态学方法进行判定。; （3）内生真菌次生代谢产物数量极少, 加大了新化合物分离难度, 轻易出现漏失现象, 即使分离到新化合物, 又往往因为量太少, 不足以完成结构判定和活性测定全部程序[14]。这些原因造成内生真菌研究发展存在一定不足, 还需要深入系统深入探讨。
但现在内生真菌研究仍在初级阶段, 所以, 内生真菌分子检测和判定、 植物内生真菌多样性、 植物内生真菌与寄主植物间专一性机理和分布等生态学问题、 植物内生真菌在寄主中种群组成和相互关系、 植物内生真菌产生与寄主相同或相同生物活性物质遗传机制,以及对植物内生真菌有工业生产、 医药价值代谢产物开发与利用会成为以后一段时间内生真菌只要研究方向[13]。
现阶段对内生真菌生长发育影响原因研究仍较少, 此成为未来研究内生真菌另一个研究关键。

参考文件
[1]梁 宇, 高玉葆. 内生真菌对植物生长发育及抗逆性影响. 植物学通报, , 17(1): 52−59.
[2] Arnold AE, Lewis LC. Evolution of fungal endophytes and their roles against insects. In Ecological and evolutionary advances in insect-fungus associations. Edited by F. Vegan and M. Blackwell. Oxford: Oxford University Press, , pp.74−96.
[3] Herre EA, Mejía LC, Kyllo DA, et al. Ecological implications of anti-pathogen effects of tropical fungal endophytes and mycorrhizae. Ecology, , 88(3): 550−558
[4] 官　珊, 钟国华,孙之潭,胡美英.植物内生真菌研究进展. 仲恺农业技术学院报,18 (1) :61～66 ,
[5] 陈法军, 黄永青, 叶万辉. 内生真菌及其意义.物多样性研究进展.
[6] 何 佳, 刘笑洁, 赵启美, 陈 钧. 植物内生真菌分离方法研究. , 30（15）: 180-180.
[7]陈立军, 孙广宇, 张􀀁 荣, 郭井泉.油菜内生真菌分离判定. 石河子大学学报( 自然科学版).,7,22, 66-68
[8]何佳, 陈钧, 赵启美, 祁红兵．微量稀释法筛选金钱松内生真菌抗菌活性研究．食品科学. ,4
[9] 赵江林, 徐利剑, 黄永富, 周立刚. TLC-生物自显影-MTT法检测滇重楼内生真菌中抗菌活性成份. 天然产物研究与开发, 01
[10]胡谷平,佘志刚,吴耀文.南海海洋红树林内生真菌胞外多糖研究[J].中山大学学报(自然科学版),,41(1):121-122.