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多酚类物质清除自由基活性研究
一、实验目的
1. 了解多酚物质的提取方法
2. 掌握清除DPPH的测定方法
二、 实验原理
DPPH是一种带一个质子并有特征吸收带的自由基，抗氧化剂清除DPPH是由于抗氧化剂能接受DPPH提供的质子（H），使DPPH被还原。DPPH是一中稳定的自由基，与抗氧化剂发生反应，提供H被还原，颜色发生变化，由深紫色变为淡黄色。
三、试剂
DPPH 、95%乙醇
四、 实验步骤
1、 多酚类物质的提取：取葡萄籽30g烘干、粉碎，过40目筛。置于300mL60%乙醇中提取1.5h，过滤去残渣，滤液真空浓缩至10mL即为多酚粗提液（待测液）。
2、 多酚物质清除DPPH实验：
i. 在10mL比色管中依次加入4.0mL257.7mg/LDPPH溶液和1.0mL95%乙醇，混匀反应稳定后，以95%乙醇液为参比，在518nm处测吸光值，记为A0。
ii. 在10mL比色管中依次加入4mL95%的乙醇溶液和1.0mL待测试样溶液，混匀反应稳定后，以95%乙醇液为参比，在518nm处测吸光值，记为Ar。
iii. 在10mL比色管中依次加入4.0mL257.7mg/LDPPH溶液和1.0mL待测试样溶液，混匀反应稳定后，以95%乙醇液为参比，在518nm处测吸光值，记为As。
自由基清除率公式，见式
r(%)=[1-(As-Ar)/ A0]
式中:A0--DPPH与溶剂混合液的吸光度；
Ar--样液与溶剂混合液的吸光度；
As--DPPH与样液反应后的吸光度。
如下表：

A0
Ar
As1
As2
As3
95%乙醇
1
4
4
4
4
DPPH
4
0
0
0.5
0.75
待测液
0
1
1
0.5
0.25
ABS

分别计算不同浓度多酚提取液对DPPH的清除率，并用柱状图表示。

思考题：

多酚抗氧化的原理？