显微镜的使用和微生物测微技术.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,显微镜的使用和微生物测微技术,显微镜的使用和微生物测微技术,第1页,一、试验目标,1.,练习和掌握显微镜使用方法（低倍镜、高倍镜、油镜）。,2.,掌握使用测微尺测定微生物大小方法，熟悉微生物大小普通概念。,显微镜的使用和微生物测微技术,第2页,二、试验原理,（一）显微镜结构、光学原理和操作方法,1.,显微镜分机械系统和光学系统两个别,机械系统包含：镜筒、转换器、载物台、镜臂、镜座、粗准焦螺旋、细准焦螺旋。,光学系统包含：目镜、物镜、聚光器、光源、滤光片、虹彩光圈。,显微镜的使用和微生物测微技术,第3页,双目光学显微镜,二、试验原理,显微镜的使用和微生物测微技术,第4页,（二）显微镜光学原理,1.,成像原理,光路：光源虹彩光圈聚光镜通光孔标本（一定要透明）物镜镜筒目镜眼。,二、试验原理,显微镜的使用和微生物测微技术,第5页,(,三,),油镜工作原理,香柏油折光率（,1.51-1.52,）与玻璃 片折光率（,1.52,）相近似，所以在物镜（玻璃）与标本载片（玻璃）之间加入香柏油能够使光线不致因从一个介质（玻璃）进入到另一折光率不一样介质即空气（折光率为,1.0,）而引发个别散射，造成亮度不够而观察不清，这对透镜弯曲度较大，直径较小（经过光线亦较小）油镜头是尤其主要。,做法是在用油镜观察时要把油镜头（,100,）浸入香柏油中。,二、试验原理,显微镜的使用和微生物测微技术,第6页,1.,物测微尺,物测微尺是一厚玻片，中央有一圆形盖玻片，中央刻有,1mm,长标尺，等分为,100,格，每格,100m,，用以标定目测微尺，在不一样放大倍数下每格实际长度。,二、试验原理,(,四,),测微技术,显微镜的使用和微生物测微技术,第7页,二、试验原理,物测微尺,目测微尺,显微镜的使用和微生物测微技术,第8页,2.,目测微尺标定,将目测微尺装入目镜隔板上，使刻度朝下；把物测微尺放在载物台上使刻度朝上。用低倍镜找到目测微尺刻度，移动物测微尺和目测微尺，使二者第一条刻度线重合，顺着刻度找到另一条重合刻度线。计算在该放大倍数下目测微尺每个小格实际长度。,目测微尺每小格长度,(m)=,二、试验原理,显微镜的使用和微生物测微技术,第9页,用物测微尺标定目测微尺,二、试验原理,显微镜的使用和微生物测微技术,第10页,1.,材料,枯草芽孢染色涂片。,金黄色葡萄球菌涂片。,酵母菌染色涂片。,2.,用具：显微镜、二甲苯、香柏油、镜头纸、物测微尺、目测微尺。,三、试验材料和用具,显微镜的使用和微生物测微技术,第11页,（一）显微镜使用,1.,取镜和安放,右手握住镜臂，左手托住镜座。,把显微镜放在水平试验台上，略偏左（显微镜放在距试验台边缘,7,厘米左右处）。,四、试验方法,显微镜的使用和微生物测微技术,第12页,2.,低倍镜操作,置显微镜于固定桌上，接通电源，打开光源。,将标本片放在载物台上，是观察目标物处于圆孔正中央。,将粗准焦螺旋向下旋转，眼睛在测向注视物镜，预防物镜和载玻片相碰。,张开双眼向物镜里观察，假如见到目标物，但不十分清楚，可用细准焦螺旋，至目标物清楚为止。注意观察时两眼应同时睁开。使用单筒显微镜，应习惯用左眼观察，方便绘图。,四、试验方法,显微镜的使用和微生物测微技术,第13页,3.,高倍镜操作,使用高倍镜前，必须先用低倍镜观察，发觉目标物后将它移至视野正中处。,旋动转换器换高倍镜。假如高倍镜触及载玻片马上停顿旋动，这说明原来低倍镜并没有调准，目标物并没有真正找到，必须用低倍镜重新调整。假如高倍镜下观察目标物有点含糊，调整细准焦螺旋，直到视野清楚。调整细准焦螺旋时要注意旋转方向与载物台上升或下降关系，预防镜头与载玻片强力接触，损坏镜头或载玻片。,四、试验方法,显微镜的使用和微生物测微技术,第14页,4.,油镜操作,假如用高倍镜目标物未能看清，可用油镜。先用低倍镜和高倍镜检验标本片，将目标物移到视野正中。,在载玻片上滴一滴香柏油（或液体石蜡），将油镜移至正中使油镜头浸没在油中，刚好贴近载玻片。用细准焦螺旋微微向上调（切忌不用粗准焦螺旋）即可。,油镜观察完成，用油镜纸将镜头上油揩净，另用擦镜纸蘸少许二甲苯揩拭镜头，再用擦镜纸揩干。,四、试验方法,显微镜的使用和微生物测微技术,第15页,5.,显微镜使用注意事项,.,显微镜应置于平坦桌面上。,.,将标本片夹在显微镜载物台十字夹中，注意要正面向上。,.,先用低倍镜再用高倍镜观察寻找目标物，此时要控制视野不能太亮，注意区分镜头上灰尘和目标物。,.,在标本中央滴加一小滴香柏油，从镜筒侧面观察，将油镜（,100,）轻轻旋下，使它浸在香柏油内。切勿猛烈将镜头压在标本片上，预防损坏物镜！,四、试验方法,显微镜的使用和微生物测微技术,第16页,.,将眼睛移至目镜，一边观察一边慢慢旋动粗准焦螺旋，将载物台上提。当见到物象时，再用细准焦螺旋调至图像清楚。对于单目显微镜，使用油镜时要将聚光器尽可能上升，虹彩光圈放大。,.,注意在旋动粗准焦螺旋时，必须尤其小心。决不能在观察时将载物台很快提升，以免损伤螺旋。,.,假如用油镜时一再看不清目标物，可验看油中是否存在气泡。如存在气泡，可将镜头及标本片上油擦去，重新滴加。,四、试验方法,显微镜的使用和微生物测微技术,第17页,.,观察完成后，下降载物台，取下标本片，用洁净擦镜纸蘸少许二甲苯，轻揩去载玻片上香柏油后，马上用干擦镜纸揩干。,.,收存显微镜时，应将最短镜头对准透光孔，或将物镜长镜头转成“八”字式，使两个镜头同时搁在载物台上。切勿将长镜头对准透光孔，以免与聚光器相碰而损坏。镜台、镜身上占有水及污物，必须及时擦去。然后套上显微镜罩，对号放入显微镜箱中锁好。,四、试验方法,显微镜的使用和微生物测微技术,第18页,（二）微生物测微,1.,分别在低倍镜、高倍镜和油镜下进行目测微尺标定。,2.,菌体大小测量,将物测微尺取下，换上标本片，选择适当物镜测量目标物大小，分别找出菌体长和宽占目测微尺格数，再按照目测微尺,1,格长度算出菌体长度和宽度。用目测微尺测量微生物大小。即可算出标本（菌体）大小。,四、试验方法,显微镜的使用和微生物测微技术,第19页,1.,在低倍镜、高倍镜和油镜下观察标本片,2.,测量菌体大小,在高倍镜下测量酵母大小,(,测,10,20,个菌，求平均值,),。,在油镜下测枯草芽孢杆菌长与宽，测金黄色葡萄球菌直径,(,测量,10,20,个菌体求平均值,),。,在低倍镜下求出目测微尺每格长度后，再用同法求出在高倍镜下和油镜下,(,物测微尺上需加,1,滴香柏油,),目测微尺每格长度。,五、试验内容,显微镜的使用和微生物测微技术,第20页,1,.,绘出油镜下枯草芽孢染色涂片、金黄色葡萄球菌涂片，高倍镜下酵母菌染色涂片。,2.,微生物大小测量结果填入以下空白,在低倍镜下：目镜测微尺（）格镜台测微尺（）格 目镜测微尺每格（）,m,在高倍镜下：目镜测微尺（）格镜台测微尺（）格 目镜测微尺每格（）,m,六、试验汇报,显微镜的使用和微生物测微技术,第21页,在油镜下：目镜测微尺（）格镜台测微尺（）格 目镜测微尺每格（）,m,枯草杆菌在油镜下：长目镜测微尺（）格（）,m,宽目镜测微尺（）格（）,m,金黄色葡萄球菌在油镜下：,直径目镜测微尺（）格,=,（）,m,酵母菌在高倍镜下：长目镜测微尺（）格（）,m,宽目镜测微尺（）格（）,m,六、试验汇报,显微镜的使用和微生物测微技术,第22页,1.,使用油镜时为何要先用低倍镜和高倍镜检验？,2.,试述显微镜成像原理并作图表示之。,3.,油镜使用时为何一定要浸在香柏油里？,4.,在使用油镜时应怎样控制聚光器与光圈？,5.,为何目测微尺必须用物测微尺标定,?,七、思索题,显微镜的使用和微生物测微技术,第23页,